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文檔簡介
1、消毒與滅菌微生物控制的意義 防止疾病的發(fā)生和傳播 防止食品和物品等的微生物污染 防止微生物對原材料的破壞(腐敗和變質(zhì))2滅菌(sterilization)殺滅所有的微生物,包括細(xì)菌的芽孢;消毒(disinfection)殺滅病原微生物;防腐(antiseptic) 抑制微生物的生長繁殖;化療(Chemotherapy):化療是指利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)如磺胺、抗生素等對生物體內(nèi)部被微生物感染的組織進(jìn)行治療,以殺死組織內(nèi)的病原微生物,但對機(jī)體本身無毒害作用的治療措施。 無菌(asepsis) 不含活菌 無菌技術(shù)(aseptic technique) 在進(jìn)行外科手術(shù)或分離轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)時(shí)防止其它微生
2、物污染實(shí)驗(yàn)材料或?qū)嶒?yàn)材料污染環(huán)境的操作方法。 3 消毒、滅菌的方法一般可分為: 熱力滅菌法 輻射殺菌法 物理學(xué)方法 濾過除菌法 超聲波殺菌法 干燥和低溫抑菌法等 化學(xué)方法 消毒 防腐 4(一) 熱力滅菌法分類:干熱滅菌法 濕熱滅菌法1 干熱滅菌法 A 焚燒: B 燒灼: C 干烤: D 紅外線滅菌:一 物理消毒滅菌法5 焚燒動物尸體,廢棄物。燒灼金屬制品(鑷子,接種環(huán)等)。干烤滅菌(1)160/2h烤箱(oven)(2)適用于耐高溫物品。(3)溫度下降至90100時(shí)方可開啟箱門,否則干烤物品會驟冷,破碎或可燃物燃燒。 62.濕熱滅菌法 A 巴氏消毒法: 63/30min,72/15-30s,
3、82/3s B 煮沸消毒法: 100,30min 難以殺滅芽胞 C 流通蒸氣消毒法: 100,15-30min 難以殺滅芽胞 D 間歇蒸汽滅菌法: 100,15-30min,37過夜培養(yǎng)(3次) E 高壓蒸氣滅菌法: (1)含糖培養(yǎng)基: 113(8Ib/in2 ), 2030min (2) 一般耐高溫物品(如培養(yǎng)基):121.3 ,103.46kPa(15 Ib/in2 ),1530min7高壓蒸汽滅菌Hirayama 高壓滅菌鍋全自動高壓蒸汽滅菌鍋8濕熱與干熱滅菌效果的比較熱型 溫度()時(shí)間 布層內(nèi)的溫度()滅菌效果 (h) 20層 40層 100層濕熱 90-105.3 3 101 101
4、 101.5 完 全干熱 130-140 4 86 72 70.5 不 完 全 9濕熱比干熱滅菌好的原因:1 細(xì)菌蛋白質(zhì)在有水的情況下易于 凝固變性2 濕熱穿透力強(qiáng)3 濕熱蒸氣有潛熱存在,水蒸氣凝固 成水釋放潛熱,迅速提高被滅菌物 體的溫度10濕熱對一般營養(yǎng)體和孢子的殺滅條件:多數(shù)細(xì)菌和真菌的營養(yǎng)細(xì)胞:在60左右處理5-10分鐘;酵母菌和霉菌的孢子:用80以上溫度處理;細(xì)菌的芽胞:121處理15分鐘以上;11影響熱力滅菌法的因素1、溫度與作用時(shí)間2、微生物因素3、滅菌對象的性質(zhì)12(二)光線與射線的消毒作用1 日光與紫外線機(jī)理:細(xì)胞DNA吸收能量,形成胸腺嘧啶二聚體,干擾DNA復(fù)制和蛋白質(zhì)合成
5、。 特點(diǎn):穿透力弱,只適用于物體表面和空氣;產(chǎn)生對人有害的臭氧2 電離輻射:包括X射線和射線 機(jī)制:干擾DNA的合成;破壞細(xì)胞膜; 產(chǎn)生過氧化氫等 特點(diǎn):穿透力強(qiáng),不升高溫度13(四)超聲波的消毒作用 可裂解細(xì)菌,尤其對G+更敏感 主要用于粉碎細(xì)胞,提取細(xì)胞組分或制備抗原等 (五)滲透壓 高滲引起細(xì)胞脫水產(chǎn)生質(zhì)壁分離。 常用鹽腌,糖漬來保存食品。(三)濾過除菌法 a.適用于不耐熱、不能用化學(xué)方法處理的液體和氣體:抗生素、維生素、酶、血清、病毒溶液、毒素溶液、細(xì)胞培養(yǎng)液b.不能除去病毒和支原體c.常用膜濾器:0.220.45m14 二化學(xué)消毒滅菌法機(jī)制:1、使微生物蛋白質(zhì)凝固變性,發(fā)生沉淀.如酒
6、精等.2、破壞菌體的酶系統(tǒng),影響菌體代謝.如過氧化氫等.3、降低微生物表面張力,增加細(xì)胞膜的通透性,使細(xì)胞發(fā)生破裂或溶解.如來蘇兒等酚類物質(zhì). 15消毒劑的主要種類、濃度及用途1 酚類:作用:菌體蛋白凝固;損傷細(xì)胞膜; 滅活酶類濃度:石炭酸為3%- 5%、來蘇兒為2% 用途:地面、器具表面和皮膚的消毒2 醇類 :作用機(jī)制:使菌體蛋白變性與凝固; 干擾細(xì)菌代謝濃度:乙醇70%-75%用途:用于皮膚的消毒和體溫計(jì)等的 浸泡16 3 重金屬鹽類: 使細(xì)菌發(fā)生變性和沉淀;酶活性喪失 (1)2%紅汞:皮膚、粘膜和小創(chuàng)傷 (2)0.05-0.01%升汞:非金屬器皿 4 氧化劑: 氧化作用;使蛋白質(zhì)變性 (
7、1)0.1%高錳酸鉀:皮膚、尿道、水果 (2)3%過氧化氫:創(chuàng)傷、皮膚粘膜 (3)2%-2.5%碘酒:皮膚消毒 (4)0.2ppm-0.5ppm氯:飲水和游泳池 (5)10%-20%漂白粉:地面、廁所等 175 表面活性劑: 損傷細(xì)胞膜;滅活氧化酶等酶的活性;蛋白質(zhì)沉淀(1)0.05%-0.1%新潔爾滅:皮膚粘膜、手術(shù)器械(2) 0.05%-0.1%杜滅芬:傷口沖洗,金屬器械、塑料、橡皮類6 烷化劑: 使菌體蛋白和核酸的烷基化(1)10%甲醛:物品表面、空氣(2)2%戊二醛: 精密儀器、內(nèi)窺鏡等 缺點(diǎn):有一定的毒性18消毒劑的應(yīng)用 1 病人的排泄物:等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%來蘇兒、
8、攪拌均勻,作用2小時(shí) 2 皮膚:2.5%碘酒、70%酒精、2%紅汞 3 粘膜:1%硝酸銀、3%過氧化氫、0.1% 高錳酸鉀等 4 飲水: 氯氣、漂白粉 5 廁所:生石灰 6 空氣:甲醛熏蒸 7 手:2%來蘇兒、2%碘酊、70%酒精 19 影響消毒劑滅菌的因素消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間微生物的種類與數(shù)量溫度酸堿度有機(jī)物20 三、化學(xué)療劑(一)抗代謝物有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似,以至可以和特定的酶結(jié)合,從而阻礙了酶的功能,干擾了代謝的正常進(jìn)行,這些物質(zhì)稱為抗代謝物(Antimetabolite)。葉酸對抗物(磺胺)、嘌呤對抗物(6-巰基嘌呤)、苯丙氨酸對抗物(對氟苯丙氨酸)、
9、尿嘧啶對抗物(5-氟尿嘧啶)胸腺嘧啶對抗物(5-溴胸腺嘧啶)等等21 二氫蝶啶 +對氨基苯甲酸 二氫葉酸 四氫葉酸 輔酶F磺胺藥 核酸合成二氫葉酸合成酶二氫葉酸還原酶細(xì)菌需要利用對氨基苯甲酸合成生長所需的葉酸:22(二)抗生素(Antibiotic)是由某些生物合成或半合成的一類次級代謝產(chǎn)物或衍生物,它們在很低濃度時(shí)就能抑制或影響它種生物的生命活動,如殺死微生物或抑制其生長。最小抑菌濃度(MIC):表示抗生素的抗菌活性,單位是g/ml,MIC可以在液體試管或固體平板上測定抗菌譜:抗生素的作用對象有一定范圍,這種作用范圍稱該抗生素的抗菌譜。廣譜:對多種微生物有作用(如:土霉素、四環(huán)素);窄譜:僅對某一類微生物有作用(如:多粘菌素)23抑制細(xì)胞壁的合成; 如:青霉素 破壞細(xì)胞膜功能; 如:多粘菌素可作用于膜磷脂使膜溶解 抑制蛋白質(zhì)合成; 如:氯霉素,四環(huán)素、鏈霉素等干擾核酸代謝; 如:利福霉素、新生霉素、絲裂霉素、灰黃霉素抗生素作用機(jī)制24抗菌藥物的使用與細(xì)菌的耐藥性的關(guān)系 無直接關(guān)系,抗菌藥物只起到一種選擇和擴(kuò)大耐藥菌株的作用25控制耐藥性的策略 (1)第一次使用的藥物劑量要足; (2)避免在一個(gè)時(shí)期或長期多次使用同種抗生素; (3)不同的抗生素(或與其他藥物)混合使用
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