藥業(yè)公司潔凈區(qū)房間沉降菌靜態(tài)測試方案

1、藥業(yè)公司潔凈區(qū)房間沉降菌靜態(tài)測試方案1測試方法本測試方法利用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來評定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈區(qū)的潔凈度。2使用的儀器和設備高壓消毒鍋：使用時應嚴格按照操作規(guī)程進行。恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定。3培養(yǎng)皿一般采用90mm15mm硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。使用前將培養(yǎng)皿置于121濕熱滅菌30min。4培養(yǎng)基：大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）。將培養(yǎng)基加熱熔化，冷卻至約45在無菌操作條件下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿，每皿約15ml。待瓊脂培養(yǎng)基凝固后，將培

2、養(yǎng)基平皿放入3035恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時，若培養(yǎng)基平皿上確無菌落生長，即可供采樣用，制備好的培養(yǎng)基平皿應在28的環(huán)境中存放。5測試步驟采樣方法：將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預先確定取樣點，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時，再將培養(yǎng)皿蓋上蓋后倒置。培養(yǎng)全部采樣結束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在3035培養(yǎng)，時間不少于2天。每批培養(yǎng)基應有對照試驗，可每區(qū)域選定3只培養(yǎng)皿作對照試驗，與采樣皿同時操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，結果應無菌落生長。菌落計數(shù)用肉眼直接計數(shù)，然后用510倍放大鏡檢查，是否有遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊，可分辨時仍以2個

3、或2個以上的菌落計數(shù)。注意事項測試用具要做滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。采取一切措施防止人為對樣本的污染。對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，必要時用顯微鏡鑒別。采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量，如發(fā)現(xiàn)變質、破損或污染的應剔除。6測試規(guī)則測試狀態(tài)靜態(tài)測試，室內(nèi)測試人員不得多于2人。沉降菌測試前，被測試潔凈區(qū)的溫濕度須達到規(guī)定的要求，靜壓差必須控制在規(guī)定值內(nèi)。沉降菌測試前，被測試潔凈區(qū)已經(jīng)過消毒。測試時間測試宜在操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過20min自凈后開始。7沉降菌計數(shù)采樣點數(shù)目最

4、少采樣點數(shù)目：沉降菌的最少采樣點數(shù)可按下表確定。在滿足最少測點數(shù)的同時，不宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見下表。最少采樣點數(shù)目：面積（）潔凈度級別A 、B級C級D級102-32210-2042220-4082240-1001642100-20040103注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指的是送風面積，對于非單向流潔凈室，指的是房間面積。采樣點的布置工作區(qū)測試點位置離地0.81.5m左右（略高于工作面）。 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點，采樣點的布置應力求均勻，避免采樣點在某局部區(qū)域過于集中，某局部區(qū)域過于稀疏（如圖3）。8 記錄：測試報告中應記錄測試者的名稱和地址測試日期，測試依據(jù)，被測潔凈室的平面位置，有關測試儀器及其測試方法描述，測試結果。9結果計算單個沉降碟的暴露時間可以少于4 小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。 10 結果評定用平均菌落數(shù)判斷潔凈室的空氣中的微生物。潔凈區(qū)內(nèi)的平均菌落數(shù)必須符合所選定的評定標準。若某潔凈區(qū)的菌落數(shù)超過評定標準，則必須對此區(qū)域先行消毒，然后重新測試兩次，測試結果必須合格。 測定結果見附件。附件 潔凈區(qū)沉降菌測試記錄 驗證記錄樣張