科技攻關(guān)計劃項目可行性研究報告

1、省科技攻關(guān)計劃項目可行性研究報告省科技攻關(guān)計劃項目可行性研究報告一、立項的背景和意義二十一世紀(jì)的生命科學(xué)將是基因科學(xué)，隨著人類基因組圖譜的全部破譯，基因治療腫瘤將使醫(yī)學(xué)科學(xué)進(jìn)入一個嶄 新的時代。基因治療技術(shù)研究的迅速發(fā)展，IL-24在腫瘤治療方面將會 是一座新的里程碑?；蛑委煇盒詫?shí)體腫瘤是臨床醫(yī)生面臨的挑戰(zhàn)性 課題，由于腫瘤易轉(zhuǎn)移的特性，使手術(shù)、化療和放療等傳統(tǒng)治療方法 對晚期腫瘤的治療有限。研究表明，腫瘤生長的關(guān)鍵因素是血管形 成，實(shí)體瘤表達(dá)，如血管生長因子、堿性成纖細(xì)胞生長因子和血小板 源性生長因子等血管形成介導(dǎo)腫瘤產(chǎn)生新血管，利用原發(fā)腫瘤的血管 的形成而轉(zhuǎn)移。因此，尋找抑制腫瘤生長和血

2、管形成進(jìn)而阻止腫瘤轉(zhuǎn) 移的方法尤為重要，基因療法為惡性實(shí)體腫瘤的治療提供了這種可能 性。理想的功能基因表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡、抑制腫瘤生長 和腫瘤血管形成，對正常組織細(xì)胞無明顯毒副作用。白細(xì)胞介素 -24(IL-24 )具有上述功能。目前，利用白細(xì)胞介素-24 (IL-24 )對惡性 腫瘤的基因治療，是發(fā)達(dá)國家的研究熱點(diǎn)之一。白細(xì)胞介素-24 (IL- 24) 是1995年Jiang H等人首先克隆并分離出該細(xì)胞因子，原名稱黑 色瘤分化相關(guān)抗原(mda- 7) , 201X年，mda- 7因其分子結(jié)構(gòu)、基因 定位和細(xì)胞因子樣特性而被正式命名為白細(xì)胞介素24 (IL-24 )。研究表明，借

3、助腺病毒表達(dá)載體，將人白細(xì)胞介素- 24基因轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì) 胞，可特異性抑制腫瘤細(xì)胞生長，誘導(dǎo)其調(diào)亡，但不會影響正常細(xì) 胞。IL-24的這種作用在至少50余種人類惡性腫瘤細(xì)胞實(shí)驗中得到證 實(shí)，包括黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、子宮頸癌、第1頁共17頁 肺癌、結(jié)腸癌、鼻咽癌、前列腺癌、胰腺癌等?？梢哉J(rèn)為 IL-24是目 前發(fā)現(xiàn)的唯一能即抑制腫瘤細(xì)胞生長又表達(dá)刺激免疫系統(tǒng)的蛋白基因。目前，P53、P10、Rb等抑癌基因正在用于基因治療的臨床試驗（其中重組人P53腺病毒注射液已在我國生產(chǎn)上市，也是世界上第一個上市的基因治 療藥物），但均不具有通過刺激免疫應(yīng)答來殺傷腫瘤細(xì)胞的特性。所 以，通過

4、比較可以證明IL-24的研究有著重要的臨床意義。通過腺病 毒介導(dǎo)人IL-24基因進(jìn)行治療腫瘤的基因治療的技術(shù)，具有非常重要 的社會、理論和臨床意義。基因治療產(chǎn)品使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的目的蛋 白質(zhì)或多肽，產(chǎn)生特異的生物治療?；蛑委熓菇o藥更加特異、高效 和安全，達(dá)到醫(yī)學(xué)科學(xué)所期望達(dá)到的最高目標(biāo)?；蛑委熕幬飳?因工程蛋白質(zhì)或者肽類藥物也形成嚴(yán)重的挑戰(zhàn)，用基因治療方法可代 替反復(fù)使用、費(fèi)用極高的蛋白質(zhì)藥物，一次注射，可帶來長久的療效 或根治。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WH。統(tǒng)計，全世界每年有500多萬人死于 各種癌癥，每年各種癌癥患者多達(dá) 2200萬人。我國每年約有600萬腫 瘤患者，假如有百分之一的患者使

5、用“重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液”，治療一個療程，用藥 20支，其用量為120萬支，按每支201X 元人民幣計算，國內(nèi)市場為24億元人民幣，國內(nèi)外市場的百分之一為 44億元人民幣。所以，基因治療腫瘤是關(guān)系到廣大患者生命安全和生 活質(zhì)量的高科技項目。該項目是我單位獨(dú)立研究的基因治療項目，現(xiàn) 已獨(dú)立完成了人白細(xì)胞介素一24基因的克隆。從中國人外周血中分離 的單核細(xì)胞中克隆出人白細(xì)胞介素一24的基因，經(jīng)測序與國外公布的 人IL-24的基因序列一致，說明我們已得到人IL-24的基因。正進(jìn)行第2頁共17頁 重組腺病毒載體的構(gòu)建。本單位是生物醫(yī)藥研究、開發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營 的專業(yè)化企業(yè)，是山東省高新技術(shù)

6、企業(yè)，十余年來承擔(dān)了多個項目的 研究。獨(dú)立研究的IL-2 (125ser)是山東省火炬計劃項目、IL-18是 201X年山東省重大科技攻關(guān)項目、G-CSF是濟(jì)南市星火計劃項目、 - 2b干擾素抗病毒口含片是201X年山東省SAR躲合防治技術(shù)研究藥物 開發(fā)中標(biāo)項目、重組人新型溶栓酶是 201X年濟(jì)南市科技發(fā)展計劃項 目，其中IL-2 (125ser)獲省、市、區(qū)科技進(jìn)步獎，并獲國家科技部 等五部委聯(lián)合頒發(fā)的國家重點(diǎn)新產(chǎn)品證書。有較強(qiáng)的生物技術(shù)藥 物研究開發(fā)能力。該項目的成功開發(fā)及產(chǎn)業(yè)化，勢必將帶動我國整個 生物高新技術(shù)的發(fā)展，并構(gòu)成一個生物高技術(shù)平臺，一個巨大的產(chǎn) 業(yè)，一個新的經(jīng)濟(jì)增長點(diǎn)。同時，

7、不僅能夠在臨床上有著重要的治療意 義，而且能夠?qū)V大腫瘤患者提供一條嶄新的治療途徑，也將會對生 命科學(xué)的發(fā)展和山東省經(jīng)濟(jì)的發(fā)展起到一定的作用。二、國內(nèi)外現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢：經(jīng)檢索，在國內(nèi)，只檢索到軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院和蘇州大學(xué)細(xì)胞和分 子生物學(xué)教研室對IL-24基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá)文獻(xiàn)，未 發(fā)現(xiàn)利用腺病毒介導(dǎo)人IL-24基因來治療腫瘤的報道。也未發(fā)現(xiàn)利用 AdmaX泉病毒表達(dá)系統(tǒng)來介導(dǎo)人白細(xì)胞介素- 24基因治療腫瘤的專 利。所以，我單位研制的重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液可形成自 己的知識產(chǎn)權(quán)。在國外，只有美國等少數(shù)發(fā)達(dá)國家對攜帶IL-24基因的重組腺病毒進(jìn)行研究，尚未有對其開發(fā)成藥物的

8、報道。目前國內(nèi)未 發(fā)現(xiàn)有對IL-24進(jìn)行藥物研究的單位和個人。我單位從上世紀(jì)八十年 代中期開始對生物技術(shù)進(jìn)行研究，基本與國外同行業(yè)同步。已獨(dú)立研 制成功了 IL-2 (125ser)、IL-第3頁共17頁18、G-CSF % -2b干擾素抗病毒口含片、重組人新型溶栓酶等生 物技術(shù)高科技成果產(chǎn)品。擁有一支素質(zhì)較高、經(jīng)驗豐富的科研隊伍。 已對該項目進(jìn)行了一年多的研究，已完成人白細(xì)胞介素一24基因的克隆。從中國人外周血中分離的單核細(xì)胞中克隆出人白細(xì)胞介素一24的基因，經(jīng)測序與國外公布的人IL-24的基因序列一致，證明我們已得 到人IL-24的基因。正進(jìn)行重組腺病毒載體的構(gòu)建。基因治療的關(guān)鍵 技術(shù)是表

9、達(dá)系統(tǒng)，腺病毒表達(dá)系統(tǒng)被廣泛用于基因治療、基因功能性 研究、反義治療、疫苗開發(fā)等領(lǐng)域。我單位利用AdmaX泉病毒表達(dá)系統(tǒng)來介導(dǎo)人白細(xì)胞介素24基因治療腫瘤，AdmaX泉病毒載體系統(tǒng)比 現(xiàn)有的其它腺病毒載體系統(tǒng)更有優(yōu)勢，具有構(gòu)建簡單、出毒快、單細(xì) 胞病毒產(chǎn)量高等優(yōu)點(diǎn)。三、現(xiàn)有研究基礎(chǔ)、特色和優(yōu)勢1、現(xiàn)階段已達(dá)到的主要技術(shù)指標(biāo)和經(jīng)濟(jì)指標(biāo)(1)現(xiàn)階段已完成人白細(xì)胞介素一24基因的克隆。(2)從中國人外周血中分離的單核細(xì)胞中克隆出人白細(xì)胞介素一 24的基因，經(jīng)測序與國外公布的人IL-24的基因序列一致，說明我們 已得到人IL-24的基因。(3)正進(jìn)行重組腺病毒載體的構(gòu)建。2、項目的創(chuàng)新點(diǎn)及在人才、資源

10、和產(chǎn)業(yè)方面的特色優(yōu)勢重組人白 細(xì)胞介素-24腺病毒主要創(chuàng)新點(diǎn)：(1)、白細(xì)胞介素一24是新發(fā)現(xiàn)的抗腫瘤細(xì)胞因子，國內(nèi)外均 未上市。第4頁共17頁、利用AdmaX泉病毒作載體將IL-24基因介導(dǎo)到人體，對腫 瘤細(xì)胞進(jìn)行基因治療的方法。腺病毒載體系統(tǒng)一般應(yīng)用人類病毒作為 載體，以人類細(xì)胞作為宿主，因此為人類蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確的翻譯后加工 和適當(dāng)?shù)恼郫B提供了一個理想的環(huán)境。大多數(shù)人類蛋白都可達(dá)到高水 平表達(dá)并且具有完全的功能。腺病毒載體系統(tǒng)可廣泛用于人類及非人 類蛋白的表達(dá)。腺病毒可感染一系列哺乳動物細(xì)胞，因此在大多哺乳 動物細(xì)胞和組織中均可用來表達(dá)重組蛋白。特別需要指出的是：腺病毒具有嗜上皮細(xì)胞性，而人

11、類的大多數(shù)的腫瘤就是上皮細(xì)胞 來源的。因此，腺病毒載體系統(tǒng)具有靶向性，使其可以靶向特定的組 織或細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，表達(dá)目的基因，直接作用于病灶，抑制腫瘤細(xì) 胞生長，誘導(dǎo)其調(diào)亡。（3）、AdmaX泉病毒表達(dá)載體具有構(gòu)建簡單，出毒快，單細(xì)胞病 毒產(chǎn)量高等特點(diǎn)。AdmaX泉病毒系統(tǒng)是由腺病毒載體鼻祖 Dr.Frank Graham在1999年創(chuàng)建的一套重組腺病毒構(gòu)建系統(tǒng)，該系統(tǒng)基本原理是 通過Cre-loxP或FLP-frt重組酶，使共轉(zhuǎn)染到293細(xì)胞中的腺病毒載 體穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒（腺病毒基因組質(zhì)粒）在重組酶的作用下產(chǎn)生 重組腺病毒。得到的重組病毒是 E1/E3缺失的復(fù)制缺型腺病毒。與目 前使用最

12、普及的AdEasy系統(tǒng)相比，有一定的優(yōu)勢：AdMa媒統(tǒng)只需要24周就能完成從質(zhì)粒構(gòu)建到重組出毒，成功 率大于98% （其中95%勺克隆含有目的基因），因在真核細(xì)胞內(nèi)重組出 毒，保持了對腺病毒的生存壓力，有助于重組腺病毒的基因組的完整 性；而AdEasy系統(tǒng)的出毒成功率只有18-34% （Stratagene公司新版 的AdEasy XL系統(tǒng)成功率在94施右），且在原核細(xì)胞（BJ5183）中完 成病毒基因組重組，理論上，失去了生存壓力的腺病毒基因組更容易第5頁共17頁 發(fā)生突變，病毒遺傳背景及活性可能會受到影響。人才、資源和產(chǎn)業(yè) 方面的特色優(yōu)勢：本單位是山東省科技廳認(rèn)定的高新技術(shù)企業(yè)及重點(diǎn)聯(lián)系單

13、位。在 人才、資源和產(chǎn)業(yè)化方面具備如下優(yōu)勢：1、有研究開發(fā)基因藥物的專業(yè)機(jī)構(gòu)-生物技術(shù)研究所。配備有較 完善的科研生產(chǎn)檢測儀器和設(shè)備(DN始成儀、PCFT增儀、70L貝克 曼的發(fā)酵罐、發(fā)瑪西亞的蛋白層析系統(tǒng)、 Waters的高效液相、萬級凈 化級別的實(shí)驗室等)。2、擁有一支經(jīng)驗豐富、老中青相結(jié)合的科研隊伍。已開發(fā)出的國 家級新藥“重組人白細(xì)胞介素-2 (125ser) ”和“重組人粒細(xì)胞集落 刺激因子”，并已獲得國家藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的新藥證書和批準(zhǔn)文 號，現(xiàn)已投放市場。3、有一座4000m2的GM酢準(zhǔn)的生物藥品生產(chǎn)車間(GMPE書編 號：C1064 ,年生產(chǎn)藥品能力可達(dá)千萬支。4、有完善的科

14、研協(xié)作網(wǎng)絡(luò)。我單位與“美國俄亥俄州立大學(xué)分子 生物學(xué)中心”、“中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)”、“山東大學(xué)藥學(xué)院”等國內(nèi) 外大專院校和科研院所有緊密合作關(guān)系。本項目是與中國協(xié)和醫(yī)科大 學(xué)共同合作研究的科研項目。5、我單位科研工作經(jīng)驗豐富，承擔(dān)過省、市、區(qū)級科研項目多 項。上述條件，為“重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液”的研制奠定 了基礎(chǔ)。四、應(yīng)用或產(chǎn)業(yè)化前景、市場需求人白細(xì)胞介素-24 (IL-24) 是目前發(fā)現(xiàn)的唯一能即抑制腫瘤細(xì)胞生長又表達(dá)刺激免疫系統(tǒng)的 具有雙重功效的蛋白基因。研究表明，借助腺病毒表達(dá)載體，將人白第6頁共17頁 細(xì)胞介素-24基因轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞，工業(yè)濾布可特異性抑制腫瘤細(xì)胞生 長，誘導(dǎo)

15、其調(diào)亡，但不會影響正常細(xì)胞。IL-24的這種作用在至少50 余種人類惡性腫瘤細(xì)胞實(shí)驗中得到證實(shí)，包括黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì) 胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、子宮頸癌、肺癌、結(jié)腸癌、鼻咽癌、前列腺 癌、胰腺癌等。全世界每年有 500多萬人死于各種癌癥，每年各種癌 癥患者多達(dá)2200萬人。我國每年約有600萬腫瘤患者，假如有百分之 一的患者使用“重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液”，治療一個療 程，用藥20支，其用量為120萬支，按每支201X元人民幣計算，國 內(nèi)市場為24億元人民幣，國內(nèi)外市場的百分之一為 44億元人民幣。 該項目產(chǎn)業(yè)化后，可年產(chǎn)100萬支，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值20億元人民幣，年銷售 收入可達(dá)12億元人

16、民幣，年利稅6億元人民幣，年創(chuàng)匯201X萬美 元。所以，基因治療腫瘤是關(guān)系到廣大患者生命安全和生活質(zhì)量的高 科技項目。同時，對包裝、印刷、玻璃制品等行業(yè)起到帶動作用。五、研究內(nèi)容與預(yù)期目標(biāo)研究內(nèi)容：1、人白細(xì)胞介素-24基因的克隆2、重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒的建立3、重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液的質(zhì)量控制和檢測方法的 建立4、重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液的抗腫瘤實(shí)驗總體目標(biāo)本 項目預(yù)計投入800萬元人民幣?？赏瓿苫A(chǔ)性研究，獲得重組人白細(xì) 胞介素-24腺病毒注射液樣品，整理出科研文獻(xiàn)。本單位現(xiàn)有資產(chǎn)1.6億元人民幣，員工116人。經(jīng)濟(jì)目標(biāo)項目完成時，預(yù)計年新增產(chǎn)品銷 售額300

17、0萬元、年新增交稅總額200萬元、年新增凈利潤1000萬第7頁共17頁 元、年新增創(chuàng)（節(jié)）匯200萬美元、年新增產(chǎn)值4000萬元。技術(shù)、 質(zhì)量指標(biāo)：參照國家 人基因治療研究和制劑質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則、中國生物制品規(guī)程、中國藥典（201X年版）等要求建立重組人白細(xì)胞介 素-24腺病毒注射液的質(zhì)量控制和檢測方法。著重對重組人白細(xì)胞介素 -24腺病毒制品的病毒純度、病毒7前度的測定和復(fù)制型病毒（ RCA、 腺相關(guān)病毒檢測的方法學(xué)進(jìn)行研究。1、比活性：病毒比滴度=病毒感染滴度/病毒顆粒數(shù)測定，3.3%。2、復(fù)制型病毒（RCA的檢測：A549細(xì)胞檢測法，每3.0X1010VP中應(yīng)不高于1RCA（即 W1

18、RCA/3.0X1010VP 。3、腺相關(guān)病毒的檢測：采用PCR&,應(yīng)無腺相關(guān)病毒（AAV的污染。4、病毒純度檢測：采用高效液相色譜法或A260/A280法純度大于95%本項目屬科 技攻關(guān)項目，主要是完成技術(shù)性研究，取得該技術(shù)領(lǐng)域的科研成果。產(chǎn)業(yè)化達(dá)產(chǎn)后，預(yù)計可實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值 10億元人民幣，年銷售收入6億元人 民幣，年利稅3億元人民幣，年創(chuàng)匯1000萬美元。用腺病毒攜帶IL- 24 基因治療腫瘤的方法可形成專利。六、研究方案、技術(shù)路線、組織方式與課題分解1、重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液的技術(shù)方案1.1重組人白 細(xì)胞介素-24腺病毒的建立第8頁共17頁(1)人白介素-24基因的克隆從人外周血單

19、個核細(xì)胞中提取 mRNA設(shè)計并合成特異引物，應(yīng)用 PCR勺方法擴(kuò)增得到人白細(xì)胞介素- 24的基因片段。 人白介素一24基因序列的確證將用PCFT增出的人白介素 -24基因，進(jìn)行測序，并與 GeneBank艮道的結(jié)果比較，以確定擴(kuò)增的 白介素一24基因序列的正確性。(3 )攜帶人白細(xì)胞介素一24基因腺 病毒穿梭質(zhì)粒載體的構(gòu)建與鑒定采用基因工程的方法，將人白細(xì)胞介 素-24基因克隆至腺病毒穿梭質(zhì)粒載體中，通過限制性內(nèi)切酶圖譜法 鑒定人白細(xì)胞介素-24基因是否重組到腺病毒穿梭質(zhì)粒載體中。(4)重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒的構(gòu)建通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技 術(shù)，將攜帶人白細(xì)胞介素-24基因腺病毒穿梭質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染2

20、93細(xì)胞 (人胚腎細(xì)胞)，提取重組腺病毒 DN破彳f PCRg定。(5)擴(kuò)增前重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒的空斑篩選利用噬斑 純化方法，將感染重組腺病毒的293細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，挑選出單個重組 腺病毒，以保證擴(kuò)增的純度和穩(wěn)定性。(6)重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒的擴(kuò)增、純化將經(jīng)噬斑純化 獲得重組腺病毒大量感染293細(xì)胞，以大量生產(chǎn)重組腺病毒。待感染 病毒的293細(xì)胞成熟后收獲細(xì)胞，經(jīng)反復(fù)凍融及離心等方法，除去細(xì) 胞碎片，收集上清，獲得重組腺病毒。并通過超濾和離子交換的方法 來純化和濃縮重組腺病毒，從而獲得大量、高滴度、高純度的重組人 白細(xì)胞介素-24腺病毒樣品。1.2、重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒

21、注射液的質(zhì)量控制和檢測方法的 建立參照國家 人基因治療研究和制劑質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則、中國生物制品規(guī)程、中國藥典(201X年版)等要求建立重組人白細(xì)胞介第9頁共17頁 素-24腺病毒注射液的質(zhì)量控制和檢測方法。著重對重組人白細(xì)胞介素 -24腺病毒制品的病毒的純度、病毒滴度的測定和復(fù)制型病毒(RCA、腺相關(guān)病毒檢測的方法學(xué)研究。(1)比活性：病毒比滴度=病毒感染滴度/病毒顆粒數(shù)測定(2)復(fù)制型病毒(RCA的檢測：A549細(xì)胞檢測法，每3.0X1010VP中應(yīng)不高于1RCA(即 W1RCA/3.0X1010VP腺相關(guān)病毒的檢測采用 PCFfc,應(yīng)無腺相關(guān)病毒(AAV的 污染。(4)病毒純度檢測采用

22、高效液相色譜法或 A260/A280法純度大 于95% 1.3重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液的抗腫瘤實(shí)驗將重組 人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射到腫瘤細(xì)胞，觀察重組人白細(xì)胞介素 -24 腺病毒抗腫瘤效果。2、本企業(yè)在生產(chǎn)場地、公用工程、輔助設(shè)施等方面已具備的條件 和需新增加的基本建設(shè)內(nèi)容。我單位有研究開發(fā)基因藥物的專業(yè)性生 物技術(shù)研究所，有著從事多年生物技術(shù)藥物研究和開發(fā)經(jīng)驗，曾研制 出“注射用重組人白介素-2 (125Ser)、濾布注射用重組人白介素- 18、-2b干擾素口含片、新型溶栓酶”等高科技生物藥品，具有 良好的科研基礎(chǔ)。配備有較完善的科研生產(chǎn)檢測儀器和設(shè)備：DN給成儀、PCRT增儀

23、、70L貝克曼的發(fā)酵罐、發(fā)瑪西亞的蛋白 層析系統(tǒng)、Waters的高效液相、萬級凈化級別的實(shí)驗室等?，F(xiàn)有生物 藥品GM性產(chǎn)車間和兩條生物藥品生產(chǎn)線，具備良好的生產(chǎn)條件。第10頁共17頁3、述生產(chǎn)過程中“三廢”排放、“三廢”處理的措施和生產(chǎn)過程 中職業(yè)危害因素分析及采取的保護(hù)措施方案。重組人白細(xì)胞介素-24腺病毒注射液研制和生產(chǎn)過程，無三廢排放。4、特殊行業(yè)許可證報批情況我單位企業(yè)法人營業(yè)執(zhí)照(執(zhí)照號：3700001806766、藥品生產(chǎn)企業(yè)許可證(證號：魯01Sz201X002O和藥品GMPE書(證書編號：C1064等證照齊全。5、說明本項目推廣應(yīng)用計劃和保障措施(1)本項目研制成功后，我單位自

24、行生產(chǎn)。(2)本單位有一座4000m2 GM標(biāo)準(zhǔn)的生物藥品生產(chǎn)車間，具有 完備的生產(chǎn)儀器、設(shè)備，年生產(chǎn)能力可達(dá)上千萬支生物制劑。(3)本單位有專業(yè)銷售公司，銷售網(wǎng)絡(luò)遍布全國30多個省市自治區(qū)，本項目產(chǎn)業(yè)化后即可上市推廣。(4)該項目有著巨大的社會意義和經(jīng)濟(jì)效益，公司對該項目極為 重視，不但組織了科研能力較強(qiáng)的專職研究隊伍，加大資金的投入， 而且組織了由5位國內(nèi)著名院士、6名知名專家組成的專家組，對“重 組人白細(xì)胞介素-24注射液”基因治療項目進(jìn)行了論證指導(dǎo)，保證了 本項目的可行性。七、年度計劃內(nèi)容：本項目計劃為三年201X年1月-201X年6月載體的構(gòu)建經(jīng)費(fèi)投入 預(yù)計300萬元201X年7月-

25、201X年12月 載體的鑒定經(jīng)費(fèi)投入預(yù)計 100萬元201X年1月-201X年6月重組腺病毒的擴(kuò)增純化經(jīng)費(fèi)投入預(yù) 計100萬元201X年7月-201X年12月 重組腺病毒的質(zhì)量研究經(jīng)費(fèi)投 入預(yù)計100萬元201X年1月-201X年12月 重組腺病毒的抗腫瘤細(xì)胞 實(shí)驗經(jīng)費(fèi)投入預(yù)計200萬元第11頁共17頁八、主要研究人員和單位簡況及具備的條件1、主要參加人員情況鄒立家，研究生導(dǎo)師，藥理、藥學(xué)專業(yè)教 授，在藥理、藥學(xué)學(xué)科方面有著很深的造詣和貢獻(xiàn)，有著作 5部，科 研成果8項。曾參加研制開發(fā)IL-2 (125Ser)、IL-18的工作；現(xiàn)參 加白介素-24 (IL-24 )的研制開發(fā)工作，并任課題組

26、負(fù)責(zé)人。韓代 書，博士、教授，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士生導(dǎo)師，細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)教 授，在細(xì)胞生物學(xué)學(xué)科方面有著很深的造詣和貢獻(xiàn)，有數(shù)十篇論在國 際刊物上發(fā)表。是本單位科研課題組主要成員。王加旺，博士，微生 物專業(yè)，有6篇論文在國家級刊物上發(fā)表，曾參加IL-2 (125Ser)、 IL-18的工作、0c -2b干擾素抗病毒口含片、新型溶栓酶等項目的研究 開發(fā)，是本單位研究所課體組主要成員。苑波，博士后、教授，長期 在美國從事基因組學(xué)科技研究，是美國著名的基因組學(xué)科學(xué)家，201X年被美國政府評為“十大科技青年”，近年來一直與我單位合作。課 題組其他成員均在生物技術(shù)研究所長期工作，是“注射用重組人白介 素

27、-2 (125Ser) ”課題組原班人馬，他們在“白介素-2(125Ser) ”、“rhG-CSF和“IL-18”等高科技產(chǎn)品的研制開發(fā)過 程中做了大量的工作，取得了優(yōu)異的成績，被濟(jì)南市科技局評為“科 技先進(jìn)集體”、被濟(jì)南市藥監(jiān)局評為“科技進(jìn)步先進(jìn)集體”。2、單位法人近幾年來研究開發(fā)業(yè)績我單位法人長期從事科研工 作，帶領(lǐng)企業(yè)承擔(dān)了國家級、省級、市級星火計劃、火炬計劃、科技 攻關(guān)、技術(shù)改造、重點(diǎn)工業(yè)項目等十幾項科研開發(fā)及產(chǎn)業(yè)化項目，被 廣泛應(yīng)用于社會各重要領(lǐng)域，多項成果填補(bǔ)了國家空白，取得了令人 矚目的成績，受到各級政府和社會各界的充分肯定和高度評價。主要 科技成果3項，科技著作2部。并領(lǐng)導(dǎo)本單

28、位全體科研人員研制出了第12頁共17頁“注射用重組人白介素-2 (125Ser) ”、“重組人粒細(xì)胞集落刺激因 子注射液(rhG-CSF) ”、“注射用重組人白細(xì)胞介素-18 (IL- 18) ”、“新型重組溶栓酶”、“ -2b干擾素口含片”等多項生物技 術(shù)藥物?！白⑸溆弥亟M人白介素-2 (125Ser) ”和“重組人粒細(xì)胞集 落刺激因子注射液(rhG-CSF) ”兩項新藥分別被列為國家星火計劃 項目和山東省火炬計劃，山東省技術(shù)改造導(dǎo)向計劃，濟(jì) 南市三十項重點(diǎn)技術(shù)改造項目。其中“注射用重組人白介素-2(125Ser) ”的各項主要技術(shù)指標(biāo)，均達(dá)到國際領(lǐng)先水平，填補(bǔ)了國 內(nèi)空白。被國家五部委(中

29、華人民共和國科學(xué)技術(shù)部、國家稅務(wù)總 局、中華人民共和國商務(wù)部、中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫 總局、國家環(huán)境保護(hù)總局)認(rèn)定為“國家重點(diǎn)新產(chǎn)品”，獲山東省科 技進(jìn)步一等獎。在抗癌科研方面也做了長期大量的工作，正式發(fā)表的 文章已被國外學(xué)術(shù)雜志引用，被聘為“山東省抗癌協(xié)會”常務(wù)理事， 201X年被“國際兒童癌癥治療聯(lián)合會”聘為高級顧問。企業(yè)投資上億 元建起了生物工程藥品生產(chǎn)基地。建有 GM注物制藥生產(chǎn)車間、科研 綜合樓、辦公樓等16000多平方米的基礎(chǔ)設(shè)施，并從發(fā)達(dá)國家引進(jìn)了 先進(jìn)的科研、生產(chǎn)設(shè)備儀器，建立了產(chǎn)學(xué)研一體化的產(chǎn)業(yè)基礎(chǔ)。3、單位技術(shù)裝備水平、實(shí)驗儀器狀況。(1)我單位現(xiàn)已具備4000

30、m2的GM吐產(chǎn)車間(GMPE書編號： C1064(2)研究開發(fā)基因藥物的生物技術(shù)研究所，多年從事生物技術(shù)藥 物的研究和開發(fā)，具有良好的科研基礎(chǔ)。(3)研究所配備有較完善的科研生產(chǎn)檢測儀器和設(shè)備：第13頁共17頁DN給成儀、PCFT增儀、70L貝克曼的發(fā)酵罐、發(fā)瑪西亞的蛋白 層析系統(tǒng)、Waters的高效液相和萬級凈化級別的實(shí)驗室等。九、經(jīng)費(fèi) 預(yù)算項目總投資800萬元，申請科技三項經(jīng)費(fèi)100萬元，自籌440萬 元，銀行貸款250萬元，省科技經(jīng)費(fèi)撥款10萬元。其中已完成投資 100萬元。劃項目可行性研究報告編制提綱一、立項的背景和意義主要說明：1、技術(shù)來源，包括國外技術(shù)、國內(nèi)技術(shù)、自有技術(shù)及合作開發(fā)

31、、 引進(jìn)消化吸收。2、研發(fā)形式，包括與本市、本省、國內(nèi)外院校及研發(fā)機(jī)構(gòu)合作。3、曾列入國家哪類科技計劃項目、獲獎及專利情況。4、對國家或我市經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展的意義作用。二、國內(nèi)外現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢包括知識產(chǎn)權(quán)現(xiàn)狀主要說明：1、國內(nèi)外基本情況及發(fā)展趨勢。2、申請承擔(dān)單位目前研發(fā)應(yīng)用情況。三、現(xiàn)有研究基礎(chǔ)、特色和優(yōu)勢主要說明：1、現(xiàn)階段已達(dá)到的主要技術(shù)指標(biāo)和經(jīng)濟(jì)指標(biāo)。2、項目創(chuàng)新點(diǎn)及在人才、資源和產(chǎn)業(yè)方面的特色優(yōu)勢。四、應(yīng)用 或產(chǎn)業(yè)化前景、市場需求。主要說明：1、結(jié)合發(fā)展趨勢和基礎(chǔ)優(yōu)勢說明，主要應(yīng)用領(lǐng)域及對相關(guān)產(chǎn)業(yè)的 帶動作用及國內(nèi)外市場需求。2、具體說明已有和有待開發(fā)的市場情況。五、研究內(nèi)容與預(yù)期目 標(biāo)（此欄目各項指標(biāo)是項目立項后，簽定合同的主要內(nèi)容，也是項目驗 收的主要依據(jù)）第14頁共17頁1、總體目標(biāo)，包括項目執(zhí)行期間預(yù)計投資總額、項目完成時實(shí)現(xiàn) 年生產(chǎn)能力、單位資產(chǎn)規(guī)模和單位人員規(guī)模等。2、經(jīng)濟(jì)目標(biāo)，包括項目實(shí)施期間實(shí)際達(dá)到的年度指標(biāo)、完成時預(yù) 計可實(shí)現(xiàn)的年銷售收入、年交稅總額、年凈利潤、年創(chuàng)匯額等。3、技術(shù)、質(zhì)量指標(biāo)，包括項目完成時，項目達(dá)到的主要技術(shù)性能 指標(biāo)、單位通過的質(zhì)量認(rèn)證體系、產(chǎn)品執(zhí)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、產(chǎn)品通過的 國家相關(guān)行業(yè)許可認(rèn)證以及獲得專利等知識產(chǎn)權(quán)情況。六、研究方案、技術(shù)路線、組織方式與課題分解主要說明