DNA重組技術(shù)的基本工具教學(xué)課件(人教選修)

1、基因工程概念的理解 第1頁，共32頁?；蚬こ痰母拍畎凑杖藗兊脑竿?，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的。因此又叫做DNA重組技術(shù)。 第2頁，共32頁。第3頁，共32頁。第4頁，共32頁。第5頁，共32頁。第6頁，共32頁?；蚬こ痰墓ぞ?第7頁，共32頁。 1、來源： 2、作用特點(diǎn)3、結(jié)果：一、 “分子手術(shù)刀” 限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）主要是從原核生物中分離純化出來的一種酶。第8頁，共32頁。2.作用特點(diǎn)：一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列；Ec

2、oRSmaGAATTCCTTAAGCCCGGGGGGCCC只能在特定的切點(diǎn)切割；G A A T T C C T T A A G C C C G G G G G G C C C 中軸線中軸線第9頁，共32頁。 1、來源： 2、作用特點(diǎn)3、結(jié)果：一、 “分子手術(shù)刀” 限制性核酸內(nèi)切酶主要是從原核生物中分離純化出來的一種酶。一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列；只能在特定的切點(diǎn)切割；切斷磷酸二酯鍵第10頁，共32頁。 1、來源： 2、作用特點(diǎn)3、結(jié)果：一、 “分子手術(shù)刀” 限制性核酸內(nèi)切酶主要是從原核生物中分離純化出來的一種酶。一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列；只能在特定的切點(diǎn)切割；切斷磷酸

3、二酯鍵形成兩種末端黏性末端平末端第11頁，共32頁。第12頁，共32頁。第13頁，共32頁。鞏固練習(xí)以下是兩種不同的限制酶切割形成的 DNA片段：（1）CTGCA G（2）G CTTAA（4） G ACGTC（3）AATTC G你能用DNA連接酶將它們連接起來嗎？ 和 能連接； 和 能連接。1423第14頁，共32頁。要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端。供體生物細(xì)胞取出DNA用限制酶剪去多余部分目的基因第15頁，共32頁。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會(huì)怎樣呢？ 會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端，然后讓兩者的黏性末端黏合

4、起來，就可以合成重組的DNA分子了。第16頁，共32頁。第17頁，共32頁。第18頁，共32頁。第19頁，共32頁。AG T AC TA A T DNA母鏈DNA聚合酶DNA聚合酶TTAGATATCCGACGGTTTAA第20頁，共32頁。DNA連接酶尋根問底第21頁，共32頁。第22頁，共32頁。1.載體需要的條件：對(duì)受體細(xì)胞無害有1到個(gè)多個(gè)限制酶切點(diǎn)能夠自我復(fù)制有標(biāo)記基因三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 “分子運(yùn)輸車”第23頁，共32頁。2.常用運(yùn)載體：細(xì)菌的質(zhì)粒 裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。第24頁，共32頁。能復(fù)制并帶著插入的外源基因一起復(fù)制有切割位點(diǎn)有標(biāo)記基因的存在，便于重組DNA的鑒定和選擇。擬核第25頁，共32頁。2.常用運(yùn)載體：細(xì)菌的質(zhì)粒 噬菌體衍生物或動(dòng)植物病毒3.作用：將外源基因（目的基因）送入受體細(xì)胞第2