常用培養(yǎng)基配方

1、 常用培養(yǎng)基配方（微生物學(xué)與微生物檢驗(yàn)學(xué)部分）渤海大學(xué)生物與食品科學(xué)學(xué)院2006年3月01糖發(fā)酵管02ONPG培養(yǎng)基03西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基04緩沖葡萄糖蛋白胨水（MR和VP試驗(yàn)用）05克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基06丙二酸鈉培養(yǎng)基07葡葡糖銨培養(yǎng)基08HughLeifson培養(yǎng)基（0/F試驗(yàn)用）09馬尿酸鈉培養(yǎng)基營養(yǎng)明膠苯丙氨酸培養(yǎng)基氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基13蛋白胨水（靛基質(zhì)試驗(yàn)用）硫酸亞鐵瓊脂（硫化氫試驗(yàn)用）尿素瓊脂16氰化鉀（KCN）培養(yǎng)基氧化酶試驗(yàn)硝酸鹽培養(yǎng)基細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)過氧化氫酶試驗(yàn)過氧化物酶試驗(yàn)磷酸鹽緩沖液明膠磷酸鹽緩沖液乳酸苯酚溶液肉浸液肉湯26肉浸液瓊脂牛肉（或牛心）消化湯血消化湯

2、豆粉瓊脂30血瓊脂營養(yǎng)瓊脂營養(yǎng)肉湯乳糖膽鹽發(fā)酵管乳糖發(fā)酵管EC肉湯36緩沖蛋白胨水（BP）37氯化鎂孔雀綠增菌液（MM）38四硫磺酸鈉煌綠增菌液（TTB）39四硫磺酸鈉煌綠增菌液（換用方法）40亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC）41GN增菌液42腸道菌增菌肉湯43亞硫酸鉍瓊脂(BS)44DHL瓊脂HE瓊脂SS瓊脂WS瓊脂麥康凱瓊脂49伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)50三糖鐵瓊脂(TSI)51三糖鐵瓊脂(換用方法)52克氏雙糖鐵瓊脂(KI)克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法)葡萄糖半固體發(fā)酵管5%乳糖發(fā)酵管CAYE培養(yǎng)基Honda氏產(chǎn)毒肉湯Elek氏培養(yǎng)基(毒素測定用)氯化鎂孔雀綠羧芐青霉素培養(yǎng)基胰蛋白胨水Rustig

3、ian氏尿素培養(yǎng)液氯化鈉結(jié)晶紫增菌液氯化鈉蔗糖瓊脂嗜鹽菌選擇性瓊脂3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂氯化鈉血瓊脂3.5%氯化鈉生化試驗(yàn)培養(yǎng)基改良磷酸鹽緩沖液(小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌專用)CIN1培養(yǎng)基嗜鹽性試驗(yàn)培養(yǎng)基71改良Y培養(yǎng)基72改良克氏雙糖73快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂DNA酶甲基綠瓊脂(DTA)CaryBlair氏運(yùn)送培養(yǎng)基Skirrow氏培養(yǎng)基TTC瓊脂甘氨酸培養(yǎng)基改良磷酸鹽緩沖液氯化鎂孔雀綠肉湯胰酪胨大豆肉湯BairdParker氏培養(yǎng)基7.5%氯化鈉肉湯匹克氏肉湯甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂863.8%檸檬酸鈉溶液87酪蛋白瓊脂88木糖明膠培養(yǎng)基89庖肉培養(yǎng)基90卵黃瓊脂培養(yǎng)基91亞硫酸鹽一多

4、粘菌素一磺胺嘧啶瓊脂(SPS)92液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)93含鐵牛奶培養(yǎng)基94動力-硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)95動力一硝酸鹽培養(yǎng)基(B法)血清肉湯馬丁氏肉湯明膠培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基高鹽察氏培養(yǎng)基101馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)馬鈴薯瓊脂孟加拉紅培養(yǎng)基玉米粉瓊脂大米粉培養(yǎng)基亞硒酸鹽煌綠增菌液煌綠肉湯增菌液腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基0.1%蛋白胨水稀釋劑110半固體瓊脂01糖發(fā)酵管成分：TOC o 1-5 h z牛肉膏5g蛋白胨10g氯化鈉3g HYPERLINK l bookmark52 o Current Document 磷酸氫二鈉(Na2HPO412H2O)2g0.2%滇麝香草酚藍(lán)溶液12mL蒸餾水1

5、000mLpH7.4制法：1葡萄糖發(fā)酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分裝于有一個(gè)倒置小管的小試管內(nèi)，121C高壓滅菌15min。2其他各種糖發(fā)酵管可按上述成分配好后，分裝每瓶100mL,121C高壓滅菌15min。另將各種糖類分別配好10%溶液，同時(shí)高壓滅菌。將5mL糖溶液加入于100mL培養(yǎng)基內(nèi)，以無菌操作分裝小試管。注：蔗糖不純，加熱后會自行水解者，應(yīng)采用過濾法除菌。試驗(yàn)方法：從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種，于36C1C培養(yǎng)，一般觀察23d。遲緩反應(yīng)需觀察1430d。02ONPG培養(yǎng)基成分：60mg10mL30mL鄰硝基酚卩一D-半乳糖昔(ONPG)(ONitrophenyl卩

6、一Dgalactopyranoside)0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5)1%蛋白胨水(PH7.5)制法：將ONPG溶于緩沖液內(nèi)，加入蛋白胨水，以過濾法除菌，分裝于10mmx75mm試管，每管0.5mL，用橡皮塞塞緊。試驗(yàn)方法：自瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物1滿環(huán)接種，于361C培養(yǎng)13h和24h觀察結(jié)果。如果卩半乳糖苷酶產(chǎn)生，則于13h變黃色，如無此酶則24h不變色。5g0.2g1g1g5g20g1000mL40mL成分：氯化鈉硫酸鎂(MgSO47H2O)磷酸二氫銨磷酸氫二鉀檸檬酸鈉瓊脂蒸餾水0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液pH6.8制法：先將鹽類溶解于水內(nèi)，校正pH,再加瓊脂，加熱溶化。然后加入

7、指示劑，混合均勻后分裝試管，121C高壓滅菌15min。放成斜面。試驗(yàn)方法：挑取少量瓊脂培養(yǎng)物接種，于361C培養(yǎng)4d，每天觀察結(jié)果。陽性者斜面上有菌落生長，培養(yǎng)基從綠色轉(zhuǎn)為藍(lán)色。04緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR和VP試驗(yàn)用)成分：磷酸氫二鉀多胨葡萄糖蒸餾水5g7g5g1000mLpH7.0制法：溶化后校正pH，分裝試管，每管1mL，121C高壓滅菌15min。甲基紅(MR)試驗(yàn)：自瓊脂斜面挑取少量培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于361C培養(yǎng)25d，哈夫尼亞菌則應(yīng)在2225C培養(yǎng)。滴加甲基紅試劑一滴，立即觀察結(jié)果。鮮紅色為陽性，黃色為陰性。甲基紅試劑配法：10mg甲基紅溶于30mL95%乙醇中，然后加入2

8、0mL蒸餾水。VP試驗(yàn)：用瓊脂培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于361C培養(yǎng)24d。哈夫尼亞菌則應(yīng)在2225C培養(yǎng)。加入6%a萘酚一乙醇溶液0.5mL和40%氫氧化鉀溶液0.2mL,充分振搖試管，觀察結(jié)果。陽性反應(yīng)立刻或于數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅色，如為陰性，應(yīng)放在361C下培養(yǎng)4h再進(jìn)行觀察。成分：檸檬酸鈉葡萄糖酵母浸膏單鹽酸半胱氨酸磷酸二氫鉀氯化鈉0.2%酚紅溶液瓊脂蒸餾水3g0.2g0.5g0.1g1g5g6mL15g1000mL制法：加熱溶解，分裝試管，121C高壓滅菌15min。放成斜面。試驗(yàn)方法：用瓊脂培養(yǎng)物接種整個(gè)斜面，在361C培養(yǎng)7d，每天觀察結(jié)果。陽性者培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。06丙二酸鈉培養(yǎng)基成分：

9、酵母浸膏硫酸銨磷酸氫二鉀磷酸二氫鉀氯化鈉丙二酸鈉0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液1g2g0.6g0.4g2g3g12mL蒸餾水1000mLpH6.8制法：先將酵母浸膏和鹽類溶解于水，校正pH后再加入指示劑，分裝試管，121C高壓滅菌15min。試驗(yàn)方法：用新鮮的瓊脂培養(yǎng)物接種，于361C培養(yǎng)48h，觀察結(jié)果。陽性者由綠色變?yōu)樗{(lán)色。07葡葡糖銨培養(yǎng)基成分：TOC o 1-5 h z氯化鈉5g HYPERLINK l bookmark69 o Current Document 硫酸鎂(MgSO47H2O)0.2g磷酸二氫銨1g磷酸氫二鉀1g葡萄糖2g瓊脂20g蒸餾水1000mL0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液40

10、mLpH6.8制法：先將鹽類和糖溶解于水內(nèi)，校正pH，再加瓊脂，加熱溶化，然后加入指示劑，混合均勻后分裝試管，121C高壓滅菌15min,放成斜面。試驗(yàn)方法：用接種針輕輕觸及培養(yǎng)物的表面，在鹽水管內(nèi)做成極稀的懸液，肉眼觀察不見混濁，以每一接種環(huán)內(nèi)含菌數(shù)在20100之間為宜。將接種環(huán)滅菌后挑取菌液接種，同時(shí)再以同法接種普通斜面一支作為對照。于361C培養(yǎng)24h。陽性者葡萄糖銨斜面上有正常大小的菌落生長；陰性者不生長，但在對照培養(yǎng)基上生長良好。如在葡萄糖銨斜面生長極微小的菌落可視為陰性結(jié)果。注：容器使用前應(yīng)用清潔液浸泡。再用清水、蒸餾水沖洗干凈，并用新棉花做成棉塞，干熱滅菌后使用。如果操作時(shí)不注意

11、，有雜質(zhì)污染時(shí)，易造成假陽性的結(jié)果。08Hugh-Leifson培養(yǎng)基(O/F試驗(yàn)用)成分：蛋白胨2g氯化鈉5g磷酸氫二鉀0.3g瓊脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液12mL蒸餾水1000mLpH7.2制法：將蛋白胨和鹽類加水溶解后，校正pH至7.2。加入葡萄糖、瓊脂煮沸，溶化瓊脂，然后加入指示劑?；靹蚝?，分裝試管，121C高壓滅菌15min,直立凝固備用。試驗(yàn)方法：從斜面上挑取小量培養(yǎng)物作穿刺接種，同時(shí)接種兩支培養(yǎng)基，其中一支于接種后滴加溶化的1%瓊脂液于表面，高度約1cm，于361C培養(yǎng)。09馬尿酸鈉培養(yǎng)基成分：馬尿酸鈉1g肉浸液100mL制法：將馬尿酸鈉溶解于肉浸液內(nèi)，分裝于小試

12、管內(nèi)，并于管壁畫一橫線。以標(biāo)志管內(nèi)液面高度，高壓滅菌121C20min。試劑：三氯化鐵(FeC136H2O)12g，溶于2%鹽酸溶液100mL中即成。試驗(yàn)方法：用純培養(yǎng)物接種，于42C培養(yǎng)48h,觀察培養(yǎng)液是否到達(dá)試管壁上記號處，如不足時(shí),用蒸餾水補(bǔ)足至原量。經(jīng)離心沉淀，吸取上清液0.8mL，加入三氯化鐵試劑0.2mL，立即混合均勻，經(jīng)1015min,觀察結(jié)果。結(jié)果：出現(xiàn)恒久之沉淀物為陽性。10營養(yǎng)明膠成分：TOC o 1-5 h z蛋白胨5g牛肉膏3g明膠120g蒸餾水1000mLpH6.87.0制法：加熱溶解、校正至pH7.47.6，分裝小管，121C高壓滅菌10min,取出后迅速冷卻，使

13、其凝固。復(fù)查最終pH應(yīng)為6.87.0。試驗(yàn)方法：用瓊脂培養(yǎng)物穿刺接種，放在2225C培養(yǎng)，每天觀察結(jié)果，記錄液化時(shí)間?；蚍旁?6士1C培養(yǎng)，每天取出，放冰箱內(nèi)30min后再觀察結(jié)果。11苯丙氨酸培養(yǎng)基成分：酵母浸膏3gDI苯丙氨酸(或L苯丙氨酸1g)2g磷酸氫二鈉1g氯化鈉5g瓊脂12g蒸餾水1000mL制法：加熱溶解后分裝試管，121C高壓滅菌15min,使成斜面。試驗(yàn)方法：自瓊脂斜面上挑取大量培養(yǎng)物，移種于苯丙氨酸瓊脂，在361C培養(yǎng)4h或1824ho滴加10%三氯化鐵溶液23滴，自斜面培養(yǎng)物上流下，苯丙氨酸脫氨酶陽性者呈深綠色。12氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基成分：TOC o 1-5 h z蛋

14、白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸餾水1000mL1.6%滇甲酚紫乙醇溶液1mLL氨基酸或DL氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法：除氨基酸以外的成分加熱溶解后，分裝每瓶100mL，分別加入各種氨基酸：賴氨酸、精氨酸和鳥氨酸。L氨基酸按0.5%加入，DL氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。對照培養(yǎng)基不加氨基酸。分裝于滅菌的小試管內(nèi)，每管0.5mL，上面滴加一層液體石蠟，115C高壓滅菌10min。試驗(yàn)方法：從瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物接種，于361C培養(yǎng)1824h，觀察結(jié)果。氨基酸脫羧酶陽性者由于產(chǎn)堿，培養(yǎng)基應(yīng)呈紫色。陰性者無堿性產(chǎn)物，但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色。對照管應(yīng)為黃色。13

15、蛋白胨水（靛基質(zhì)試驗(yàn)用）成分：蛋白胨（或胰蛋白胨）20g氯化鈉5g蒸餾水1000mLpH7.4制法：按上述成分配制，分裝小試管，121C高壓滅菌15min。靛基質(zhì)試劑柯凡克試劑：將5g對二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中。然后緩慢加入濃鹽酸25mL。歐一波試劑：將1g對二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇內(nèi)。然后緩慢加入濃鹽酸20mL。試驗(yàn)方法：挑取小量培養(yǎng)物接種，在361C培養(yǎng)12d,必要時(shí)可培養(yǎng)45d。加入柯凡克試劑約0.5mL，輕搖試管，陽性者于試劑層呈深紅色；或加入歐一波試劑約0.5mL，沿管壁流下，覆蓋于培養(yǎng)液表面，陽性者于液面接觸處呈玫瑰紅色。注：蛋白胨中應(yīng)含有豐富的色氨酸。每批

16、蛋白胨買來后，應(yīng)先用已知菌種鑒定后方可使用。牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亞鐵0.2g硫代硫酸鈉0.3g氯化鈉5g瓊脂12g蒸餾水1000mLpH7.4制法：加熱溶解，校正pH,分裝試成分：14硫酸亞鐵瓊脂（硫化氫試驗(yàn)用），115C高壓滅菌15min,取出直立候其凝固。試驗(yàn)方法：挑取瓊脂培養(yǎng)物，沿管壁穿刺，于361C培養(yǎng)12d，觀察結(jié)果。產(chǎn)硫化氫者使培養(yǎng)基變?yōu)楹谏Ｗⅲ耗c桿菌科細(xì)菌測定硫化氫的產(chǎn)生，應(yīng)采用三糖鐵瓊脂或本培養(yǎng)基。15尿素瓊脂成分：蛋白胨1g氯化鈉5g葡萄糖1g磷酸二氫鉀2g0.4%酚紅溶液3mL瓊脂20g蒸餾水1000mL20%尿素溶液100mLpH7.20.1制法：將除

17、尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正pH,加入瓊脂，加熱溶化并分裝燒瓶。121C高壓滅菌15min。冷至5055C，加入經(jīng)除菌過濾的尿素溶液。尿素的最終濃度為2%，最終pH應(yīng)為7.20.1。分裝于滅菌試管內(nèi)，放成斜面?zhèn)溆?。試?yàn)方法：挑取瓊脂培養(yǎng)物接種，在361C培養(yǎng)24h,觀察結(jié)果。尿素酶陽性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。16氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基成分：蛋白胨10g氯化鈉5g磷酸二氫鉀0.225g磷酸氫二鈉5.64g蒸餾水1000mL0.5%氰化鉀溶液20mLpH7.6制法：將除氰化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶，121C高壓滅菌15min。放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻。每100mL培養(yǎng)基加入0.5%氰化鉀

18、溶液2.0mL(最后濃度為1：10000)，分裝于12mmx100mm滅菌試管，每管約4mL,立刻用滅菌橡皮塞塞緊，放在4C冰箱內(nèi)，至少可保存兩個(gè)月。同時(shí)，將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基，分裝試管備用。17氧化酶試驗(yàn)試劑：1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液：少量新鮮配制，干冰箱內(nèi)避光保存。l%a-萘酚一乙醇溶液。試驗(yàn)方法：取白色潔凈濾紙沾取菌落。加鹽酸二甲基對苯二胺溶液一滴，陽性者呈現(xiàn)粉紅色，并逐漸加深；再加a-萘酚溶液一滴，陽性者于半分鐘內(nèi)呈現(xiàn)鮮藍(lán)色。陰性于兩分鐘內(nèi)不變色。以毛細(xì)吸管吸取試劑，直接滴加于菌落上，其顯色反應(yīng)與以上相同。硝酸鹽培養(yǎng)基成分：硝酸鉀0.2g蛋白5g蒸餾水1000mLpH7

19、.4制法：溶解，校正pH，分裝試管，每管約5mL，121C高壓滅菌15min。硝酸鹽還原試劑：甲液：將對氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。乙液：將甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。試驗(yàn)方法：接種后在361C培養(yǎng)14d,加入甲液和乙液各一滴，觀察結(jié)果。硝酸鹽還原為亞硝酸鹽時(shí)于立刻或數(shù)分鐘內(nèi)顯紅色。注：本試驗(yàn)陰性的原因有三：細(xì)菌不能還原硝酸鹽；亞硝酸鹽繼續(xù)分解，生成氨和氮；培養(yǎng)基不適于細(xì)菌的生長。如欲檢查培養(yǎng)基中硝酸鹽是否未被分解，可再加入鋅粉少許，可使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽而呈現(xiàn)紅色。細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)試劑：1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液。l%a-萘

20、酚一乙醇溶液。試驗(yàn)方法：取37C(或低于37C)培養(yǎng)20h的斜面培養(yǎng)物一支，將兩種試劑各23滴，從斜面上端滴下，并將斜面略加傾斜，使試劑混合液流經(jīng)斜面上的培養(yǎng)物。如系平板培養(yǎng)物，則可用試劑混合液滴在菌落上。結(jié)果：于2min內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色者為陽性。陽性培養(yǎng)物大多數(shù)于半分鐘內(nèi)出現(xiàn)強(qiáng)陽性反應(yīng)，2min以后出現(xiàn)微弱或可疑反應(yīng)均作為陰性結(jié)果。過氧化氫酶試驗(yàn)試劑：3%過氧化氫溶液：臨用時(shí)配制。試驗(yàn)方法：挑取固體培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán)，置于潔凈試管內(nèi)，滴加3%過氧化氫溶液2mL,觀察結(jié)果。結(jié)果：于半分鐘內(nèi)發(fā)生氣泡者為陽性，不發(fā)生氣泡者為陰性。過氧化物酶試驗(yàn)試劑：2%兒茶酚溶液。3%過氧化氫溶液。試驗(yàn)方法：挑取固體

21、培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán)，置于潔凈試管內(nèi)，滴加2%兒茶酚溶液1mL及3%過氧化氫溶液ImL。靜置于室溫(20C)中3060min,觀察結(jié)果。結(jié)果：陽性反應(yīng)，細(xì)菌變?yōu)楹诤稚魂幮苑磻?yīng)，細(xì)菌不變色。注：過氧化物酶的作用可受氰化鉀的抑制。磷酸鹽緩沖液TOC o 1-5 h z儲存液磷酸二氫鉀34g HYPERLINK l bookmark173 o Current Document 1mol/L氫氧化鈉溶液175mL蒸餾水825mLpH7.2制法：先將磷酸鹽溶解于500mL蒸餾水中，用lmol/L氫氧化鈉溶液校正pH后，再用蒸餾水稀釋至1000mL。稀釋液：取儲存液1.25mL，用蒸餾水稀釋至lOOOm

22、L。分裝每瓶100mL或每管10mL，121C高壓滅菌l5min。明膠磷酸鹽緩沖液2g4g1000mL成分：明膠磷酸氫二鈉蒸餾水pH6.2制法：加熱溶解，校正pH,121C高壓滅菌15min。乳酸苯酚溶液成分：苯酚10g乳酸（比重1.21）10g甘油20g蒸餾水10mL制法：將苯酚在水中加熱溶解，然后加入乳酸及甘油。用途：檢驗(yàn)真菌形態(tài)時(shí)用。25肉浸液肉湯成分：絞碎牛肉500g氯化鈉5g蛋白胨10g磷酸氫二鉀2g蒸餾水1000mL制法：將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g加蒸餾水lOOOmL,混合后放冰箱過夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時(shí)，使肉渣完全凝結(jié)成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)

23、足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽，溶解后校正pH7.47.6煮沸并過濾，分裝燒瓶,121C高壓滅菌30min。26肉浸液瓊脂成分：肉浸液肉湯（PH7.4）lOOOmL瓊脂1720g制法：加熱溶化瓊脂，分裝燒瓶或試管，121C高壓滅菌30min。根據(jù)需要，傾注平板或放成斜面。27牛肉（或牛心）消化湯成分：絞碎牛肉（或牛心）1000g15%氫氧化鈉溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化鈉10g蒸餾水2000mL制法：1稱取碎牛肉，加蒸餾水，隔水加熱到80C，維持15min。2加氫氧化鈉溶液，對pH試紙呈弱堿性，冷至40Co3加胰蛋白酶、氯仿，在361C放置45h,每小時(shí)搖動一二次。44h

24、后，吸取上層液5mL于試管中，加5%硫酸銅溶液0.1mL、4%氫氧化鈉溶液5mL,混合之。若呈紅色，則不須再消化，可由溫箱取出。5加入15%乙酸溶液45mL，對pH試紙呈酸性。6煮沸15min,使胰蛋白酶破壞，冷后，放冰箱內(nèi)一夜。7次日吸取上層清液，加氯化鈉10g,并加水補(bǔ)足原量，煮沸。8校正pH7.47.6（加15%氫氧化鈉溶液約10mL）,加熱，用濾紙過濾，分裝燒瓶，121C高壓滅菌20min。注：此培養(yǎng)基可作為瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)，不需加蛋白胨。胰蛋白酶之配制：稱取去脂絞碎的豬胰500g，加入乙醇500mL、蒸餾水1500mL,混合之，裝人玻塞瓶內(nèi)。每日搖勻三次。3d后，用絨布過濾擠出其汁，

25、加鹽酸至0.05%，放冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。血消化湯成分：TOC o 1-5 h z絞碎豬胃100g絞碎豬血塊100g蒸餾水1000mL HYPERLINK l bookmark147 o Current Document 濃鹽酸10mL制法：洗滌豬胃，除去油脂，保留胃粘膜，用絞肉機(jī)絞碎。用絞肉機(jī)將豬血塊絞碎。3將蒸餾水加熱至55C，加入豬胃、豬血塊和鹽酸，置55C水浴中24h，時(shí)常加以搖動。4從水浴內(nèi)取出，加入1moL/L碳酸鈉溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱內(nèi)一夜。5吸取上層清液，加磷酸氫二鉀1g,加熱至75C，加入1mol/L碳酸鈉溶液45mL，煮沸，校正pH7.27.4。6用濾紙過濾，分

26、裝燒瓶，121C高壓滅菌20min。豆粉瓊脂成分：牛心消化湯（PH7.47.6）1000mL瓊脂20g黃豆粉浸液50mL制法：將瓊脂加在牛心消化湯內(nèi)，加熱溶解，過濾。加入豌豆粉浸液，分裝每瓶100mL，121C高壓滅菌15min。豌豆粉浸液制法：取豌豆粉5g、氯化鈉10g,加入蒸餾水100mL。置100C水浴內(nèi)加熱1h,放于冰箱中過夜。吸取上清液即為豌豆浸液。30血瓊脂成分：pH7.47.6豆粉瓊脂100mL脫纖維羊血（或兔血）510mL制法：加熱溶化瓊脂，冷至50C，以滅菌手續(xù)加入脫纖維羊血，搖勻，傾注平板。亦可分裝滅菌試管，置成斜面。亦可用其他營養(yǎng)豐富的基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制血瓊脂。31營養(yǎng)瓊脂成

27、分：蛋白胨10g牛肉膏3g氯化鈉5g瓊脂1520g蒸餾水1000mL制法：將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內(nèi)，加入15%氫氧化鈉溶液約2mL,校正pH至7.27.4。加入瓊脂，加熱煮沸，使瓊脂溶化。分裝燒瓶，121C高壓滅菌15min。注：此培養(yǎng)基可供一般細(xì)菌培養(yǎng)之用，可傾注平板或制成斜面。如用于菌落計(jì)數(shù)，瓊脂量為1.5%如作成平板或斜面，則應(yīng)為2%。32營養(yǎng)肉湯成分：蛋白陳牛肉膏氯化鈉蒸餾水pH7.410g3g5g1000mL制法：按上述成分混合，溶解后校正pH,分裝燒瓶，每瓶225mL，121C高壓滅菌15min。33乳糖膽鹽發(fā)酵管成分：蛋白胨20g豬膽鹽（或牛、羊膽鹽）5g乳糖10g0.

28、04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸餾水1000mLpH7.4制法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH,加入指示劑，分裝每管10mL，并放入一個(gè)小倒管，115C高壓滅菌15min。注：雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管除蒸餾水外，其他成分加倍。34乳糖發(fā)酵管成分：TOC o 1-5 h z蛋白胨20g乳糖10g HYPERLINK l bookmark223 o Current Document 0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸餾水1000mLpH7.4制法：將蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH,加入指示劑，按檢驗(yàn)要求分裝30mL、10mL或3mL,并放入一個(gè)小倒管，115C高壓滅菌15min。注：雙料乳糖發(fā)酵管

29、除蒸餾水外，其他成分加倍。30mL和10mL乳糖發(fā)酵管專供醬油及醬類檢驗(yàn)用，3mL乳糖發(fā)酵管供大腸菌群證實(shí)試驗(yàn)用。35EC肉湯成分：胰蛋白胨20g3號膽鹽(或混合膽鹽)1.5g乳糖5g磷酸氫二鉀4g磷酸二氫鉀1.5g氯化鈉5g蒸餾水1000mL制法：將上述成分混合，溶解后，分裝有發(fā)酵倒管的試管中，121C高壓滅菌15min,最終pH為6.90.2。36緩沖蛋白胨水(BP)成分：蛋白胨10g氯化鈉5g磷酸氫二鈉(Na2HPO412H2O)9g磷酸二氫鉀1.5g蒸餾水1000mLpH7.2制法：按上述成分配好后以大燒瓶裝，121C高壓滅菌15min。臨用時(shí)無菌分裝每瓶225mL。注：本培養(yǎng)基供沙門

30、氏菌前增菌用。37氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)甲液TOC o 1-5 h z胰蛋白胨5g氯化鈉8g磷酸二氫鉀1.6g蒸餾水1000mL乙液 HYPERLINK l bookmark239 o Current Document 氯化鎂(化學(xué)純)40g蒸餾水100mL4.13.3丙液0.4%孔雀綠水溶液。制法：分別按上述成分配好后，121C高壓滅菌15min備用。臨用時(shí)取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL，以無菌操作混合即可。注：本培養(yǎng)基亦稱Rappaport10(R10)增菌液。38四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)基礎(chǔ)培養(yǎng)基多胨或眎胨5gTOC o 1-5 h z膽鹽1g碳酸鈣10g硫代硫酸鈉

31、30g蒸餾水1000mL碘溶液TOC o 1-5 h z碘6g碘化鉀5g蒸餾水20mL制法：將基礎(chǔ)培養(yǎng)基的各成分加入蒸餾水中，加熱溶解，分裝每瓶lOOmL。分裝時(shí)應(yīng)隨時(shí)振搖，使其中的碳酸鈣混勻121C高壓滅菌15min備用。臨用時(shí)每lOOmL基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入碘溶液2mL、0.1%煌綠溶液1mL。39四硫磺酸鈉煌綠增菌液（換用方法）基礎(chǔ)液：蛋白胨1Og牛肉膏5g氯化鈉3g碳酸鈣45g蒸餾水1OOOmL將各成分加入于蒸餾水中，加熱至約70C溶解，校正pH至7.00.1，121C高壓滅菌20min。硫代硫酸鈉溶液硫代硫酸鈉（Na2S2O35H2O)5Og蒸餾水加至1OOmL碘溶液碘片2Og碘化鉀25

32、g蒸餾水加至1OOmL將碘化鉀充分溶解于是少量的蒸餾水中，加入碘片，振搖玻瓶至碘片全部溶解，再加入蒸餾水至規(guī)定量。貯于棕色玻瓶內(nèi)，緊塞瓶蓋備用。煌綠水溶液TOC o 1-5 h z煌綠O.5g蒸餾水1OOmL存放暗處，不少于1d,使其自然滅菌。牛膽鹽溶液干燥的牛膽鹽1Og蒸餾水1OOmL煮沸溶解，121C高壓滅菌20min。制備：基礎(chǔ)液9OOmL硫代硫酸鈉溶液1OOmL碘液2OmL煌綠溶液2mL牛膽鹽溶液5OmL臨用前，按上列順序，以無菌操作依次加入于基礎(chǔ)液中，每加入一種成分，均應(yīng)搖勻后再加入另一種成分。分裝于滅菌瓶中，每瓶100mL。40亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC）成分：蛋白胨5g乳糖4g亞

33、硒酸氫鈉4g磷酸氫二鈉5.5g磷酸二氫鉀4.58L-胱氨酸0.01g蒸餾水1000mL1%L-胱氨酸一氫氧化鈉溶液的配法：稱取L胱氨酸O.lg(或DL胱氨酸0.2g),加lmol/L氫氧化鈉1.5mL，使溶解，再加入蒸餾水8.5mL即成。制法：將除亞硒酸氫鈉和L胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸餾水中，加熱煮沸，俟冷備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中，加熱煮沸，候冷，以無菌操作與上液混合。再加入1%L胱氨酸一氫氧化鈉溶液1mL。分裝于滅菌瓶中，每瓶100mL,pH應(yīng)為7.00.1。41GN增菌液成分：胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g檸檬酸鈉5g去氧膽酸鈉0.5g磷酸氫二鉀4g磷酸

34、二氫鉀1.5g氯化鈉5g蒸餾水1000mLpH7.0制法：按上述成分配好，加熱使溶解，校正pH。分裝每瓶225mL,115C高壓滅菌15min。42腸道菌增菌肉湯成分：蛋白胨110g葡萄糖5g牛膽鹽20g磷酸氫二鈉8g磷酸二氫鉀2g煌綠0.015g蒸餾水1000mLpH7.2制法：按上述成分配好，加熱使浴解，校止pH。分裝母瓶30mL,115C咼壓火菌15min。43亞硫酸鉍瓊脂(BS)成分：蛋白胨10g牛肉膏5g葡萄糖5g硫酸亞鐵0.3g磷酸氫二鈉4g煌綠0.025g檸檬酸鉍銨2g亞硫酸鈉6g瓊脂l820g蒸餾水l000mLpH7.5制法：1將前面5種成分溶解于300mL蒸餾水中。2將檸檬酸

35、鉍銨和亞硫酸鈉另用50mL蒸餾水溶解。3將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解，冷至80C4將以上三液合并，補(bǔ)充蒸餾水至lOOOmL，校正pH，加0.5%煌綠水溶液5mL,搖勻。冷至5055C，傾注平皿。注：此培養(yǎng)基不需高壓滅菌。制備過程不宜過分加熱.以免降低其選擇性。應(yīng)在臨用前一天制備，貯存于室溫暗處。超過48h不宜使用。44DHL瓊脂成分：蛋白胨20g牛肉膏3g乳糖l0g蔗糖l0g去氧膽酸鈉lg硫代硫酸鈉2.3g檸檬酸鈉lg檸檬酸鐵銨lg中性紅0.03g瓊脂l820g蒸餾水l000mLpH7.3制法：將除中性紅和瓊脂以外的成分溶解于400mL蒸餾水中，校正pH。再將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸

36、溶解，兩液合并，并加入0.5%中性紅水溶液6mL,待冷至5055C，傾注平板。45HE瓊脂成分：脙胨l2g牛肉膏3g乳糖l2g蔗糖l2g水楊素2g膽鹽20g氯化鈉5g瓊脂1820g蒸餾水1000mL0.4%溴麝香草酚藍(lán)溶液16mLAndrade指示劑20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法：將前面七種成分溶解于400mL蒸餾水內(nèi)作為基礎(chǔ)液；將瓊脂加入于600mL蒸餾水內(nèi)，加熱溶解。加入甲液和乙液于基礎(chǔ)液內(nèi)，校正pH。再加入指示劑，并與瓊脂液合并，待冷至5055C，傾注平板。注：此培養(yǎng)基不可高壓滅菌。甲液的配制TOC o 1-5 h z硫代硫酸鈉34g檸檬酸鐵銨4g蒸餾水100mL乙液的配

37、制去氧膽酸鈉10g蒸餾水100mLAndrade指示劑酸性復(fù)紅0.5g HYPERLINK l bookmark277 o Current Document 1mol/L氫氧化鈉溶液16mL蒸餾水100mL將復(fù)紅溶解于蒸餾水中，加入氫氧化鈉溶液。數(shù)小時(shí)后如復(fù)紅褪色不全，再加氫氧化鈉溶液12mL。46SS瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基：牛肉膏5g眎胨5g三號膽鹽3.5g瓊脂17g蒸餾水1000mL再將兩液混合，121C咼壓火菌15min,保存?zhèn)溆?。完全培養(yǎng)基：TOC o 1-5 h z基礎(chǔ)培養(yǎng)基100mL乳糖10g檸檬酸鈉8.5g硫代硫酸鈉8.5g10%檸檬酸鐵溶液10mL1%中性紅溶液2.5mL0.1%煌綠溶

38、液0.33mL加熱溶化基礎(chǔ)培養(yǎng)基，按比例加入上述染料以外之各成分，充分混合均勻，校正至pH7.0加入中性紅和煌綠溶液，傾注平板。注：制好的培養(yǎng)基宜當(dāng)日使用，或保存于冰箱內(nèi)于48h內(nèi)使用?；途G溶液配好后應(yīng)在10d以內(nèi)使用?？梢再徲肧S瓊脂的干燥培養(yǎng)基。47WS瓊脂成分：胨12g牛肉膏3g氯化鈉5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸鈉2g瓊脂15gAndrade指示劑20mL0.4%溴麝香草酚藍(lán)溶液16mL甲液20mL蒸餾水1000mLpH7.0制法：除指示劑和甲液外，將其他成分加熱溶解，不需消毒，校正pH后加入指示劑和甲液，傾注平板應(yīng)呈草綠色。注：供沙門氏菌分離用。Andrade指示劑和甲液的配制

39、均見HE瓊脂。48麥康凱瓊脂成分：蛋白胨17g眎胨3g豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)5g氯化鈉5g瓊脂17g蒸餾水1000mL乳糖10g0.01%結(jié)晶紫水溶液10mL0.5%中性紅水溶液5mL制法：1將蛋白胨、眎、膽鹽和氯化鈉溶解于400mL蒸餾水中，校正pH7.2。將瓊脂加入600mL加熱溶解。將兩液合并，分裝于燒瓶內(nèi)，121C高壓滅菌15min備用。2臨用時(shí)加熱溶化瓊脂，趁熱加入乳糖，冷至5055C時(shí)，加入結(jié)晶紫和中性紅水溶液，搖勻后傾注平板。注：結(jié)晶紫及中性紅水溶液配好后須經(jīng)高壓滅菌。49伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)成分：蛋白胨10g乳糖10gTOC o 1-5 h z磷酸氫二鉀2g瓊脂17g2%伊紅

40、Y溶液20mL0.65%美藍(lán)溶液10mL蒸餾水1000mLpH7.1制法：將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正pH,分裝于燒瓶內(nèi)，121C高壓滅菌15min備用。臨用時(shí)加入乳糖并加熱溶化瓊脂，冷至5055C,加入伊紅和美藍(lán)溶液，搖勻，傾注平板。50三糖鐵瓊脂(TSI)成分：蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化鈉5g硫酸亞鐵銨Fe(NH4)2(SO4)26H2O0.2g硫代硫酸鈉0.2g瓊脂12g酚紅0.025g蒸餾水1000mLpH7.4制法：將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH。加入瓊脂，加熱煮沸，以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5mL，搖勻。

41、分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層o121C高壓滅菌15min。放置高層斜面?zhèn)溆谩?1三糖鐵瓊脂(換用方法)成分：蛋白胨15g眎胨5g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化鈉5g硫酸亞鐵0.2g硫代硫酸鈉0.3g瓊脂12g酚紅0.025g蒸餾水1000mLpH7.4制法：將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH。加入瓊脂，加熱煮沸，以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5mL,:咼壓火菌15min,放置咼層斜面?zhèn)溆?2上層培養(yǎng)基成分血消化湯(pH7.6)500mL瓊脂6.5g硫代硫酸鈉0.1g硫酸亞鐵銨0.1g乳糖5g0.2%酚紅溶液5mL下層培養(yǎng)基成分血消化

42、湯(pH7.6)500mL瓊脂2g葡萄糖1g0.2%酚紅溶液5mL克氏雙糖鐵瓊脂(KI)。分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121C制法：取血消化湯按上層和下層的瓊脂用量，分別加入瓊脂，加熱溶解。分別加入其他各種成分。將上層培養(yǎng)基分裝于燒瓶內(nèi)；將下層培養(yǎng)基分裝于滅菌12mmx100mm試管內(nèi)，每管約2mL。115C高壓滅菌10min。3將上層培養(yǎng)基放在56C水浴箱內(nèi)保溫；將下層培養(yǎng)基直立放在室溫內(nèi)，使其凝固。4當(dāng)下層培養(yǎng)基凝固后，以無菌手續(xù)將上層培養(yǎng)基分裝于下層培養(yǎng)基的上面,每管約1.5mL,放成斜面。53克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法)20g3g3g10g1g5g0.5g0.5g12g0.

43、025g1000mL成分：蛋白胨牛肉膏酵母膏乳糖葡萄糖氯化鈉檸檬酸鐵銨硫代硫酸鈉瓊脂酚紅蒸餾水pH7.4制法：將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH。加入瓊脂，加熱煮沸，以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5mL,搖勻。分裝試管，裝量宜多些，以便得到比較高的底層。121C高壓滅菌15min。放置高層斜面?zhèn)溆谩?4葡萄糖半固體發(fā)酵管成分：蛋白胨1g牛肉膏0.3g氯化鈉0.5g1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1mL葡萄糖1g瓊脂0.3g蒸餾水100mLpH7.4制法：將蛋白胨、牛肉膏和氯化鈉加入于水中，校正pH后加入瓊脂加熱溶解，再加入指示劑和葡萄糖，分裝小試管，滅菌121C15min

44、。555%乳糖發(fā)酵管成分：TOC o 1-5 h z蛋白胨0.2g氯化鈉0.5g乳糖5g2%溴麝香草酚藍(lán)水溶液1.2mL蒸餾水100mLpH7.4制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸餾水內(nèi)，校正pH。將乳糖溶解于另外50mL蒸餾水內(nèi)，分別滅菌121C15min，將兩液混合，以無菌操作分裝于滅菌小試管內(nèi)。注：在此培養(yǎng)基內(nèi)，大部分乳糖遲緩發(fā)酵的細(xì)菌可于1d內(nèi)發(fā)酵。56CAYE培養(yǎng)基此培養(yǎng)基附在腸毒素診斷試劑盒內(nèi)，如無此培養(yǎng)基，亦可用Honda氏產(chǎn)毒肉湯。57Honda氏產(chǎn)毒肉湯成分：水解酪蛋白酵母浸膏粉氯化鈉磷酸氫二鈉葡萄糖微量元素蒸餾水pH7.520g10g2.5g15g5g0.5mL10

45、00mL制法：溶解后校正pH，高壓滅菌121C15min，待冷至4550C時(shí)，加入林可霉素溶液，每毫升培養(yǎng)基內(nèi)含90“g微量元素配方：硫酸鎂5g，氯化鐵0.5g，氯化鉆2g，蒸餾水100mL成分：胨麥芽糖58Elek氏培養(yǎng)基（毒素測定用）20g3g乳糖0.7g氯化鈉5g瓊脂15g40%氫氧化鈉溶液1.5mL蒸餾水1000mLpH7.8制法：用500mL蒸餾水溶解瓊脂以外的成分，煮沸，并用濾紙過濾。用lmol/L氫氧化鈉校正pH。用另外500mL蒸餾水加熱溶解瓊脂。將兩液混合，分裝試管10mL或20mL121C高壓滅菌15min。臨用時(shí)加熱溶化瓊脂傾注平板。59氯化鎂孔雀綠羧芐青霉素培養(yǎng)基成分：

46、TOC o 1-5 h z甲液：胰蛋白胨10g蒸餾水1000mL乙液：磷酸氫二鈉9.5g蒸餾水1000mL HYPERLINK l bookmark335 o Current Document 丙液：氯化鎂(MgCl26H2O)40g蒸餾水400mL以上分別在121C滅菌15min。丁液：孔雀綠0.2g蒸餾水100mL戊液：羧芐青霉素1mg/mL制法：取甲液620mL、乙液160mL、丙液212mL混合，再加入丁液6.4mL和戊液2.4mL，即為1000mL培養(yǎng)基。分裝滅菌燒瓶，每瓶100mL，或滅菌試管10mL。60胰蛋白胨水成分：胰蛋白胨10g蒸餾水1000mLpH7.0制法：將上述成分溶

47、解，校正pH。分裝試管，121C高壓滅菌15min。61Rustigian氏尿素培養(yǎng)液成分：尿素20.0g酵母浸膏0.1g磷酸二氫鉀(KH2PO4)0.091g磷酸氫二鈉(Na2HPO4)0.095g酚紅0.01g蒸餾水1000mL制法：將上述成分：于蒸餾水中溶解，校正pH為6.80.2。不要加熱，過濾除菌，無菌分裝于滅菌小試管中，每管為約3mL。用途：尿素酶試驗(yàn)用。氯化鈉結(jié)晶紫增菌液成分：TOC o 1-5 h z蛋白胨20g氯化鈉40g HYPERLINK l bookmark351 o Current Document 0.01%結(jié)晶紫溶液5mL蒸餾水1000mLpH9.0制法：除結(jié)晶紫

48、外，其他按上述成分：配好，加熱溶解。約加30%氫氧化鉀溶液4.5mL，校正pH。加熱煮沸，過濾。再加入結(jié)晶紫溶液，混合后分裝試管。121C高壓滅菌15min。氯化鈉蔗糖瓊脂成分：蛋白胨10g牛肉膏10g氯化鈉50g蔗糖10g瓊脂18g0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液20mL蒸餾水1000mLpH7.8制法：將牛肉膏、蛋白胨及氯化鈉溶解于蒸餾水中，校正pH。加入瓊脂，加熱溶解，過濾。加入指示劑，分裝燒瓶100mLo121C高壓滅菌15min備用。臨用前在100mL培養(yǎng)基內(nèi)加入蔗糖1g，加熱溶化并冷至50C，傾注平板。嗜鹽菌選擇性瓊脂成分：蛋白胨20g氯化鈉40g瓊脂17g0.01%結(jié)晶紫溶液5mL蒸餾水

49、1000mLpH8.7制法：除結(jié)晶紫和瓊脂外，其他按上述成分配好，校正pH。加入瓊脂，加熱溶解。再加入結(jié)晶紫溶液，分裝燒瓶，每瓶100mL。653.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂成分：三糖鐵瓊脂1000mL氯化鈉30g制法：按前面三糖鐵瓊脂，再加入氯化鈉30g，分裝試管，121C高壓滅菌15min。放置高層斜面?zhèn)溆谩?6氯化鈉血瓊脂成分：酵母膏3g蛋白胨10g氯化鈉70g磷酸氫二鈉5g甘露醇10g結(jié)晶紫0.001g瓊脂15g蒸餾水1000mL制法：調(diào)pH8.0加熱30min(不必高壓)，待冷至45C左右時(shí)，加入新鮮人或兔血(5%10%)混合均勻，傾注平皿。673.5%氯化鈉生化試驗(yàn)培養(yǎng)基成分及制法：根據(jù)

50、所需糖的種類按3.2配制。只是將氯化鈉含量改為3.5%，pH為7.7。68改良磷酸鹽緩沖液(小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌專用)成分：磷酸氫二鈉(Na2HPO48.23g磷酸二氫鈉(NaPOyO)1.2g氯化鈉(NaCl)5.0g三號膽鹽1.5g山梨醇20g制法：將磷酸鹽及氯化鈉溶于蒸餾水中，再加入三號膽鹽及山梨醇，溶解后校正pH為7.6,分裝試管，于121C高壓滅菌15min，備用。69CIN1培養(yǎng)基介胰胨20.0g酵母浸膏2.0g甘露醇20.0g氯化鈉1.0g去氧膽酸鈉2.0g硫酸鎂(MgSO47H2O)0.01g瓊脂12.0g蒸餾水950mLpH7.50.1將基礎(chǔ)培養(yǎng)基高壓滅菌。Irgasan以9

51、5%的乙醇作溶劑，溶解二苯醚，配成0.4%的溶液，待基礎(chǔ)液冷至80C時(shí)，加入1mL混勻。冷至50C時(shí)，加入：中性紅(3mg/mL)10.0mL結(jié)晶紫(0.1mg/mL)10.0mL頭抱菌素(1.5mg/mL)10.0mL新生霉素(0.25mg/mL)lO.OmL最后不斷攪拌著加入lO.OmL的10%氯化鍶，倒平皿。70嗜鹽性試驗(yàn)培養(yǎng)基成分：蛋白胨氯化鈉蒸餾水pH7.72g按不同量加100mL制法：配制2%蛋白胨水，校正pH,共配制5瓶，每瓶100mL。每瓶分別加入不同量的氯化鈉：(1)不加；(2)3g；(3)7g；(4)9g；(5)11go待溶解后分裝試管。121C高壓滅菌15min。71改良

52、Y培養(yǎng)基成分：蛋白胨15.0g氯化鈉5.0g乳糖10.0g草酸鈉2.0g去氧膽酸鈉6.0g三號膽鹽5.0g丙酮酸鈉2.0g孟加拉紅40mg水解酪蛋白5.0g瓊脂17.0g蒸餾水1000mL制法:將上述成分:混合，于121高壓滅菌15min,待冷至45C左右時(shí)，傾注平皿。最終pH7.40.1。72改良克氏雙糖成分：蛋白胨20g牛肉膏3g酵母膏3g山梨醇20g葡萄糖1g氯化鈉5g檸檬酸鐵銨0.5g硫代硫酸鈉0.5g瓊脂12g酚紅0.025g蒸餾水1000mLpH7.4制法：將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH。加入0.02%酚紅水溶液12.5mL，搖勻。分裝試管，裝量宜多些，以便得到

53、比較咼的底層o121C咼壓火菌15min,放置咼層斜面?zhèn)溆谩?3快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂制法：A液：布氏桿菌肉湯無水磷酸氫二鈉無水磷酸二氫鉀瓊脂970mL1.18g0.23g2g加熱溶解，高壓滅菌，121C15min。加入B液10%硫酸亞鐵(含7H2O),C液10%偏亞硫酸氫鈉，D液10%丙酮酸鈉。上述B、C、D溶液均新鮮配制，用除菌濾膜過濾。將此除菌溶液各1mL混合后再入A液中,無菌調(diào)pH到7.3，無菌分裝，每管3mL,塞緊備用。74DNA酶甲基綠瓊脂(DTA)成分：DNA植物蛋白胨胰蛋白胨氯化鈉瓊脂(1.5%)蒸餾水pH7.32.0g5.0g15.0g5.0g15.0g1000mL制法

54、：稱取各成分后，加水徐徐加熱，避免形成餅溶性絲狀物，121C15min高壓。甲基綠配制(MG)：配制0.5%的甲基綠水溶液。用等體積氯仿作57次抽提，直到氯仿層無色為止。過濾除菌，置4C保存。每100mL滅菌溶化的DTA培養(yǎng)基加1mL(MG)染料液，甲基綠最終濃度為0.005%。75CaryBlair氏運(yùn)送培養(yǎng)基成分：硫乙醇酸鈉磷酸氫二鈉氯化鈉瓊脂蒸餾水1%氯化鈣溶液1.5g1.1g5g5g1000mL9mLpH8.4制法：除氯化鈣外，其他均按上述成分配制，加熱溶解。冷至50C，加入氯化鈣溶液，校正pH到8.4。分裝試管，每支5mL,或注入具有膠塞的瓶內(nèi)。121C高壓滅菌15min。用途：作空腸彎曲桿菌、霍亂弧菌、沙門氏菌、志賀氏菌采樣時(shí)用。注：在該采樣管中的標(biāo)本，只能保存72h。76Skirrow氏培養(yǎng)基成分：蛋白胨胰蛋白胨(tryptone)15.0g2.5gTOC o 1-5 h z酵母浸膏5.0g氯化鈉5.0g瓊脂15.0g蒸餾水1000.0mL甲氧芐氨嘧啶(trimethoprim,TMP)5.0mg萬古霉素(vancomycin)lO.Omg多粘菌素B(polymyxin)2500.0國際單位凍溶馬血70.0mL制法：1除甲氧芐氨嘧啶、抗生素和凍溶馬血外，將其他成分混合溶解。校正pH7.4,裝瓶100mL。12