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文檔簡介
1、關于免疫組化應用第一張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月免疫組化介紹 免疫組化原理 Enlivision染色方法 免疫組化的使用范圍各系統腫瘤的抗體表達第二張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月免疫組化的原理根據抗原和抗體特異性反應的免疫學原理,應用標記抗體檢測組織中未知抗原的方法。抗原+抗體(標記)抗原抗體復合物通過抗原和抗體的特異性結合檢測組織中的化學成分(蛋白抗原)顯示系統:抗原抗體復合物+檢測系統將二抗和酶通過一個多聚葡聚糖骨架聯接成一個多聚體(即EnVision)第三張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月Primary AntibodyPolymer complexSu
2、bstrate-chromogensolutiontissue第四張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月Enlivision染色方法(1)、將切片撈至APES膠片上,放入60溫箱中烘烤1小時。(2)、經二甲苯脫蠟,梯度酒精脫水后流水沖洗。(3)、過3 H2O2中20min后流水沖洗。(4)、修復高火3min后,低火15min后,自然冷卻至室溫。(5)、取出玻片放至濕盒,PBS沖洗,3minx3。擦干玻片,每張玻片加1滴或 50l的第一抗體40min。(6)、PBS沖洗,3minx3。擦干玻片,每張玻片加1滴或50l的聚合物增強劑(試劑A),室溫孵育20min。(7)、PBS沖洗,3minx
3、3。擦干玻片,每張玻片加1滴或50l的酶標鼠/兔聚合物(試劑B),室溫下孵育30min。(8)、PBS沖洗,3minx3。擦干玻片,每張玻片加2滴或100l的DAB液,顯微鏡下觀察,10min顯色。(9)、流水沖洗,蘇木素復染1-2min,0.1鹽酸分化,自來水沖洗后返藍。(10) 、梯度酒精脫水干燥,二甲苯透明,中性樹膠封片。第五張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月免疫組化的使用范圍組織學標本中的應用細胞塊中的應用第六張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月各系統腫瘤的抗體表達對腫瘤進行來源分類 上皮性腫瘤的標記物 CK 間葉腫瘤的標記物 Vimentin 淋巴造血系統腫瘤的標記物
4、LCA 神經內分泌腫瘤的標記物 Syn、CgA、CD56各系統腫瘤的抗體表達第七張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月上皮性腫瘤中的腺癌第八張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月CK7+CK20-Villin+Villin-可見于:胃腺癌(41.67%)、乳頭狀腎細胞癌(17.39%)、乳腺浸潤性導管癌(5.36%)、卵巢漿液性腺癌(3.7%)少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、直腸腺癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢粘液性癌??梢娪冢喝橄俳櫺托∪~癌(100%)、肺腺癌(95.83 %)、乳腺浸潤型導管癌(78.57%)、卵巢漿液性腺癌(70.37%)、嫌
5、色細胞癌(66.67%)、卵巢粘液性腺癌(37.5%)、肺鱗癌(11.43%)、前列腺癌(9.09%)、直腸腺癌(2.78%)、胃腺癌(2.78%)、腎透明細胞癌(2.33%)。少見于:肺小細胞癌、乳頭狀腎細胞癌。第九張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月CK7+CK20+Villin+Villin-可見于:胃腺癌(13.89%)、卵巢粘液性腺癌(12.5%)、直腸腺癌 (5.56%),乳頭狀腎細胞癌 (4.35%)少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、腎嫌色細胞癌、乳腺癌、卵巢漿液性癌??梢娪冢郝殉舱骋盒韵侔?12.5%)乳腺浸潤性導管癌(3.57%)、胃腺癌(2.78%)、
6、直腸腺癌(2.78%)。少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、 乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢漿液性癌。第十張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月CK7-CK20-Villin+Villin-可見于:乳頭狀腎細胞癌(43.47%)、胃腺癌(18.06%)、直腸腺癌(16.67%)、卵巢粘液腺癌(12.5%)、嫌色細胞癌(11.11%)、前列腺癌(4.54%)。少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳腺浸潤型導管癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢漿液性癌。可見于:肺小細胞癌(100%)、腎透明細胞癌(42/43,97.67%)肺鱗癌(88.57%
7、)、前列腺癌(86.36%)、乳頭狀腎細胞癌(34.78%)、嫌色細胞癌(22.22%)、卵巢漿液腺癌(18.52%)、乳腺浸潤型導管癌(16.07%)、胃腺癌(13.89%)、直腸腺癌(5.56%)、肺腺癌(4.17%)。少見于:乳腺浸潤性小葉腺癌、卵巢粘液腺癌。第十一張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月CK7-CK20+Villin+Villin-可見于:直腸腺癌(52.78%)、卵巢粘液性腺癌 (25%)、胃腺癌(6.94%)、卵巢漿液性癌(3.7%)。少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性導管癌、乳腺浸潤性小葉癌??梢娪?/p>
8、:直腸腺癌(13.89%)、卵巢漿液性腺癌(3.7%)。少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性導管癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢粘液性癌、胃腺癌第十二張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1、軟組織第十三張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月小圓細胞腫瘤 CK Vim EMA LCA NSE CgA Des S-100小細胞未分化癌 + - + - - - - -神經內分泌癌 + - + - + + - -神經母細胞瘤 - + - - + + - +/-尤文肉瘤/PNET - + - - + + - +/-胚胎性橫紋肌肉瘤 - +
9、 - - - - + -惡性淋巴瘤 - - - + - - - -惡性黑色素瘤 - + - - -/+ - - +(HMB45+)CK 、Vim 、NSE、CgA 、Des、 HMB45胞漿 EMA 胞膜/胞漿LCA 胞膜S-100 胞核/漿第十四張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月間皮:EMA、Calretinin陽性橫紋?。篋esmin(+) Actin、MyoD1(弱+)Myglobin 血管 :CD31、CD34陽性顆粒細胞瘤:S-100、NSE第十五張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 CD34 Bcl-2 S-100神經纖維瘤 + + +孤立性纖維性腫瘤 + + -滑膜
10、肉瘤 - + -孤立性纖維性腫瘤CD99+滑膜肉瘤CK、Vimentin 雙陽第十六張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2、乳腺 P63 CK5/6 E-cad 34E12導管原位癌 + - + -浸潤性導管癌 - - + -浸潤性小葉癌 - - - +P63 胞核CK5/6 胞漿E-cad 胞漿、胞膜34E12 胞漿第十七張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月乳腺病理ER、PR顯示腫瘤的內分泌表達,與腫瘤的內分泌治療反應率相關CerbB-2腫瘤相關因子,靶向治療KI-67顯示細胞增殖指數ER、PR 胞核CerbB-2 胞膜KI-67 胞核第十八張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年
11、6月 中間型上皮 成熟型 CK5/6+,CK8/18+ CK5/6-,CK8/18+干細胞CK5/6+,CK8/18-SMA-,P63- 中間型肌上皮 成熟型 CK5/6+,SMA+,P63+ CK5/6-,SMA+,P63+ CK5/6, CK8/18,SMA胞漿P63胞核第十九張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月CerbB-2的染色意義陽性強度的判斷:強的著色是指4x或10 x物鏡下易于觀察到,弱的強的著色是指需要用40 x物鏡觀察。第二十張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月CerbB-2與治療及預后的關系不僅與浸潤型乳腺癌的不良預后有關,并能預測多種化療藥機內分泌治療的敏感性
12、。靶向藥物赫賽汀第二十一張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月CerbB-2的染色意義0+ 浸潤性腫瘤細胞無著色1+ 任何比例的浸潤性腫瘤細胞呈弱而不完整的包膜著色或10%的腫瘤細胞呈弱且完整著色2+ 10%的腫瘤細胞呈現弱或不一致的、完整的包膜著色;或30%的腫瘤細胞呈現強且完整的包膜著色3+ 30%的浸潤性腫瘤細胞呈強且完整包膜著色第二十二張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月指導治療ER,PR,CerbB-2,Ki-67ER+PR+: 60-70%的內分泌治療反應率ER-PR-: 10%的內分泌治療反應率ER+PR-: 40%的內分泌治療反應率ER-PR+: 46%的內分泌治療反
13、應率陽性分級(或陽性細胞數比例)與治療反應的相關性尚缺乏統一認識第二十三張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月3、消化CK7-/CK20+胃腸間質瘤CD117,CD34肝 TTF-1 漿陽、Hep、AFPCDX2主要表達于結腸,胃癌和卵巢粘液性腺癌也有表達CD117胞膜/胞漿,CD34胞膜CDX2胞核CK7,CK20, AFP, Hep胞漿第二十四張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月4、泌尿第二十五張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月腎 CK-H CK -L Vimentin E-cad CD10 EMA CD117透明細胞 - + + - + (膜) + -(乳頭狀癌)嫌色細
14、胞癌 + + - + -/+(漿)Hale鐵+ +(嗜酸細胞腺瘤)集合管癌 + + + - Villin-CK-H、 CK L、Vimentin胞漿 CD10胞膜 EMA、CD117、 E-cad 胞膜/胞漿 第二十六張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月移行上皮:正常CK7陽性,CK20陽性提示腫瘤第二十七張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月5、生殖第二十八張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月卵巢上皮性腫瘤 CK7+/CK20-,CA125卵巢上皮(+)無性細胞瘤(女性)=精原細胞瘤(男性) Vimentin,PLAP,CD117胚胎性癌 AFP,CD30,PLAP第二十九張
15、,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月子宮 HCG HPL合體滋養(yǎng)葉 + 弱+細胞滋養(yǎng)葉 - -中間滋養(yǎng)葉 +/弱+ +HCG ,HPL胞漿第三十張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 Vimentin ER CEA子宮內膜樣癌 + + -宮頸癌 - - +Vimentin胞漿ER 胞核 CEA胞膜/胞漿第三十一張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月前列腺基底細胞陽性標記:高分子量CK( 34E12 ,CK5/6)P504s 腫瘤性腺泡(+),良性腺泡(-)PSA 前列腺上皮(+)34E12 ,CK5/6 , PSA, P504s胞漿第三十二張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月
16、6、神經內分泌第三十三張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月甲狀腺 TG TTF-1 Calcitonin CD56乳頭狀癌 + + - -濾泡癌 + + - +髓樣癌 - + + +甲狀腺乳頭狀癌Galectin-3,CK19TG、Calcitonin胞漿TTF-1 胞核CD56胞膜第三十四張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月腎上腺皮質 Mart-1 、Syn、NSE、inhibin 陽性髓質 CgA 、 Syn 、CD15陽性Mart-1 、 Syn、 NSE、 CgA胞漿inhibin 胞核/胞漿CD15 胞膜/胞漿第三十五張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月7、肺鱗狀細胞癌CK14、CK5/6、34E12和p63;腺癌CK7和TTF-l;神經內分泌癌CD56、CgA、 Syn 、 AE1/AE3、 CK18、NSE。 衛(wèi)生部2011肺癌診療規(guī)范第三十六張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月鼻腔嗅神經母細胞瘤NSE、Syn、CgA?;グ┤饬錾掀ば?、間葉性、神經源性都表達一部分第三十七張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月8、神經系統第三十八張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月中樞神經系統腦膠質瘤GFA
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