2022年儀器分析各個章節(jié)小結(jié)

1、第八章電位法和永停滴定法- 章節(jié)小結(jié)1基本概念 指示電極 ：是電極電位值隨被測離子的活（濃）度變化而變化的一類電極；參比電極 ：在肯定條件下,電極電位基本恒定的電極；膜電位 ：跨過整個玻璃膜的電位差；不對稱電位 ：在玻璃電極膜兩側(cè)溶液pH 相等時,仍有1mV 3mV 的電位差,這一電位差稱為不對稱電位；是由于玻璃內(nèi)外兩表面的結(jié)構(gòu)和性能不完全相同,以及外表面弄臟、機械刻劃、化學腐蝕等外部因素所致的；酸差 ：當溶液 pH9 時, pH 測得值（即讀數(shù)）小于真實值,這一負誤差為堿差,也叫鈉差；轉(zhuǎn) 換系 數(shù) ： 指 當 溶 液pH每 改 變 一 個 單 位 時 , 引 起 玻 璃 電 極 電 位 的

2、變 化 值 ；離子挑選電極 ：一般由電極膜（敏銳膜） 、電極管、內(nèi)充溶液和內(nèi)參比電極四個部分組成；電位挑選性系數(shù)：在相同條件下, 同一電極對X 和 Y 離子響應才能之比,亦即供應相同電位響應的X 和 Y 離子的活度比；可逆電對 ：電極反應是可逆的電對；此外仍有相界電位、液接電位、原電池、殘余液接電位；2基本理論（ 1）pH 玻璃電極 ： 基本構(gòu)造：玻璃膜、內(nèi)參比溶液（H+與 Cl-濃度肯定）、內(nèi)參比電極（ Ag-AgCl 電極）、絕緣套； 膜電位產(chǎn)生原理及表示式：； 玻璃電極作為測溶液pH 的理論依據(jù)；（ 2）直接電位法測量溶液pH ： 測量原理 兩次測量法； pHs 要準,而且與pHx 差值

3、不大于3 個 pH 單位,以排除液接電位；（ 3）離子挑選電極 ： 基本構(gòu)造：電極膜、電極管、內(nèi)參比溶液、內(nèi)參比電極； 分類：原電極、敏化電極； 響應機理及電位挑選性系數(shù)； 測量方法：兩次測量法、校正曲線法、標準加入法；（ 4）電位滴定法 ：以電位變化確定滴定終點（EV 曲線法、曲線法、曲線法）；（ 5）永停滴定法 ：以電流變化確定滴定終點,三種電流變化曲線及終點確定；第九章光譜分析法概論- 章節(jié)小結(jié)1基本概念 電磁輻射 ：是一種以龐大速度通過空間而不需要任何物質(zhì)作為傳播媒介的光子流；磁輻射性質(zhì) ：波動性、粒子性電磁波譜 ：全部的電磁輻射在本質(zhì)上是完全相同的,它們之間的區(qū)分僅在于波長或頻率不同

4、；如把電磁輻射按波長長短次序排列起來,即為電磁波譜；光譜和光譜法 ：當物質(zhì)與輻射能相互作用時,物質(zhì)內(nèi)部發(fā)生能級躍遷,記錄由能級躍遷所產(chǎn)生的輻射能強度隨波長（或相應單位）的變化,所得的圖譜稱為光譜；利用物質(zhì)的光譜進行定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法稱光譜法；非光譜法 ：是指那些不以光的波長為特點訊號,僅通過測量電磁輻射的某些基本性質(zhì)（反射、 折射、 干涉、 衍射和偏振）的變化的分析方法；原子光譜法 ：測量氣態(tài)原子或離子外層電子能級躍遷所產(chǎn)生的原子光譜為基礎的成分分析方法；為線狀光譜；分子光譜法 ：以測量分子轉(zhuǎn)動能級、分子中原子的振動能級（包括分子轉(zhuǎn)動能級）和分子電子能級（包括振轉(zhuǎn)能級躍 遷）所產(chǎn)生的分

5、子光譜為基礎的定性、定量和物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析方法；為帶狀光譜；吸取光譜法 ：物質(zhì)吸取相應的輻射能而產(chǎn)生的光譜,其產(chǎn)生的必要條件是所供應的輻射能量恰好滿意該吸取物質(zhì)兩能級 間躍遷所需的能量；利用物質(zhì)的吸取光譜進行定性、定量及結(jié)構(gòu)分析的方法稱為吸取光譜法；發(fā)射光譜法 ：發(fā)射光譜是指構(gòu)成物質(zhì)的原子、離子或分子受到輻射能、熱能、電能或化學能的激發(fā)躍遷到激發(fā)態(tài)后,由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時以輻射的方式釋放能量,譜法；2基本運算而產(chǎn)生的光譜； 利用物質(zhì)的發(fā)射光譜進行定性定量及結(jié)構(gòu)分析的方法稱為發(fā)射光（ 1）電磁輻射的頻率： =C/ =1/ = /C（ 2）電磁輻射的能量：E=h =hC/ =hC3光譜分析儀器組成：輻射

6、源、分光系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)第十章 紫外 -可見分光光度法- 章節(jié)小結(jié)1基本概念系數(shù)透光率（ T）：透過樣品的光與入射光強度之比；T=I t /I0和百分吸光吸光度（ A）：透光率的負對數(shù)；A= lgT=lgI0/It 吸光系數(shù)（ E）：吸光物質(zhì)在單位濃度及單位厚度時的吸光度；依據(jù)濃度單位的不同,常有摩爾吸光系數(shù)之分；電子躍遷類型 ：成鍵軌道上的電子吸取光能后躍遷到* 反鍵軌道；飽和烴中電子躍遷均為此種類型,吸（ 1） - * 躍遷：處于收波長小于150nm；（2） - * 躍遷：處于 成鍵軌道上的電子吸取光能后躍遷到* 反鍵軌道上,所需的能量小于 - * 躍遷所需的能量；孤立的 - * 躍遷吸取波

7、長一般在200nm左右,共軛的 - * 躍遷吸取波長 200nm,強度大；（ 3）n- * 躍遷：含有雜原子不飽和基團,其非鍵軌道中的孤對電子吸取能量后向 * 反鍵軌道躍遷,這種吸取一般在近紫外區(qū)（ 200400nm）,強度小；（ 4）n- * 躍遷：含孤對電子的取代基,其雜原子中孤對電子吸取能量后向 * 反鍵軌道躍遷,吸取波長約在 200nm；以上四種類型躍遷所需能量 - * n- * - * n- *（ 5）電荷遷移躍遷和配位場躍遷生色團 ：有機化合物分子結(jié)構(gòu)中含有 - * 或 n- * 躍遷的基團,能在紫外可見光范疇內(nèi)產(chǎn)生吸取的原子團；助色團 ：含有非鍵電子的雜原子飽和基團,與生色團或飽

8、和烴連接時,能使該生色團或飽和烴的吸取峰向長波方向移動,并使吸取強度增加的基團；紅移（長移） ：由于化合物的結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變,如發(fā)生共軛作用、引入助色團以及溶劑轉(zhuǎn)變等,使吸取峰向長波方向移動；藍移（紫移或短移）：當化合物的結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變或受溶劑影響使吸取峰向短波方向移動；增色效應 ：由于化合物結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變或其他緣由,使吸取強度增加；減色效應 ：由于化合物結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變或其他緣由,使吸取強度減??；強帶 ：化合物的紫外可見吸取光譜中,摩爾吸光系數(shù)值大于104 的吸取峰；其他特點弱帶 ：化合物的紫外可見吸取光譜中,摩爾吸光系數(shù)值小于102 的吸取峰；吸取帶及其特點：吸取帶符號躍遷類型波長（ nm）吸取強度（max）R n*

9、250-500 104 共軛雙鍵 ,max ,強度B 芳芳香族 C=C骨架振動及環(huán)內(nèi) *230-270 200 蒸氣狀態(tài)顯現(xiàn)精細結(jié)構(gòu)E 苯環(huán)內(nèi) *共軛 180（E1） 104 助色團取代 max ,生色團取 200（E2） 103 代,與 K 帶合并通過量測試驗設計與數(shù)據(jù)的變換、運算分光光度法：運用數(shù)學、 統(tǒng)計學與運算機科學的方法,在傳統(tǒng)分光光度法基礎上,解析和猜測對物質(zhì)進行定性定量的方法；2基本原理（ 1）Lambert-Beer定律： 當一束平行單色光通過勻稱的非散射樣品時,樣品對光的吸取度與樣品的濃度及厚度成正比；A=ECl （ 2）吸光度的加和原理：溶液中存在多種無相互作用的吸光物質(zhì)時

10、,體系的總吸光度等于各物種吸光度之和；A總=Aa+Ab+Ac+ （ 3）運算分光光度法：雙波長分光光度法：等吸取雙波長消去法和系數(shù)倍率法均利用使 A干擾 =0, A 信號 = A 被測原理消去干擾組分的吸光度值；導數(shù)光譜法： 利用導數(shù)光譜的輸出信號更多、更明顯（可顯示出結(jié)構(gòu)相像的不同化合物的微小差別）及易于辨認等特點定性；利用導數(shù)光譜法能排除背景干擾及分別重疊譜帶等優(yōu)勢定量；褶合光譜法： 是一種信號處理技術,即通過褶合變換,顯示原始光譜在構(gòu)成上的局部細節(jié)特點,對結(jié)構(gòu)相像的物質(zhì)進行定性鑒別；同時削減了混合物中共存組分之間的數(shù)學相關性,因而可以測定共存組分的含量；3基本運算（ 1）Lambert-

11、Beer 定律數(shù)學表達式：A=-lgT=ECl 或 T=10-A =10-ECl（ 2）摩爾吸光系數(shù)與百分吸光系數(shù)的關系：（ 3）單組分定量：吸光系數(shù)法：CA/El 對比法：校正曲線法（4）多組分定量（a + b 的混合物）：解線性方程組：等吸取雙波長消去法：系數(shù)倍率法： A第十二章紅外吸取光譜法- 章節(jié)小結(jié)1基本概念 基頻峰 ：當分子吸取肯定頻率的紅外線,由振動基態(tài) （V=0）躍遷至第一激發(fā)態(tài) （ V=1）時,所產(chǎn)生的吸取峰稱為基頻峰；泛頻峰 ：將倍頻峰、合頻峰及差頻峰統(tǒng)稱為泛頻峰；伸縮振動 ：化學鍵兩端的原子沿著鍵軸方向作規(guī)律性的伸縮運動；彎曲振動 ：鍵角發(fā)生規(guī)律性變化的振動,又稱為變形振

12、動；振動自由度 ：分子基本振動的數(shù)目；簡并 ：振動形式不同但振動頻率相同而合并的現(xiàn)象稱為簡并；紅外活性振動 ：能引起偶極矩變化而吸取紅外線的振動；紅外非活性振動：不能引起偶極矩變化,不吸取紅外線的振動；特點峰 ：凡是能用于鑒別基團存在的吸取峰；相關峰 ：由一個基團產(chǎn)生的一組相互具有依存關系的吸取峰；特點區(qū) ： 40001300cm-1 的區(qū)域稱為特點區(qū)；-1 區(qū)域稱為指紋區(qū)；指紋區(qū) ： 1300400cm 2基本原理（ 1）振動自由度：非線型分子有3N 6 個振動自由度；線型分子有3N5 個；相同時,一般 ；（ 2）紅外吸取光譜產(chǎn)生的條件：EL = V h或L= V ； 0；（ 3）基頻峰的分

13、布規(guī)律：愈小,愈高；相同, K 愈大,愈高；（ 4）解析光譜的三大要素：第一是峰位,其次是峰強,第三是峰形；（ 5）解析光譜的原就：遵循用一組相關峰確定一個基團；（ 6）解析光譜的次序：先特點區(qū),再指紋區(qū)；（ 7）把握各類化合物的主要光譜特點；3基本運算L= V 第十六章色譜分析法概論- 章節(jié)小結(jié)一、主要內(nèi)容1基本概念 保留時間 t R：從進樣到某組分在柱后顯現(xiàn)濃度極大時的時間間隔；死時間 t0：安排系數(shù)為零的組分即不被固定相吸附或溶解的組分的保留時間；調(diào)整保留時間 t R：某組分由于溶解（或被吸附）于固定相,比不溶解（或不被吸附）的組分在柱中多停留的時間；相對保留值 r 2,1：兩組分的調(diào)整

14、保留值之比；安排系數(shù) K ：在肯定溫度和壓力下,達到安排平穩(wěn)時,組分在固定相與流淌相中的濃度之比；保留因子 k：在肯定溫度和壓力下,達到安排平穩(wěn)時,組分在固定相和流淌相中的質(zhì)量之比；分別度 R：相鄰兩組分色譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比；安排色譜法 ：利用被分別組分在固定相或流淌相中的溶解度差別或安排系數(shù)的差別而實現(xiàn)分別的色譜法；吸附色譜法 ：利用被分別組分對固定相表面吸附中心吸附才能的差別或吸附系數(shù)的差別而實現(xiàn)分別的色譜法；離子交換色譜法：利用被分別組分別子交換才能的差別或挑選性系數(shù)的差別而實現(xiàn)分別的色譜法；分子排阻色譜法：依據(jù)被分別組分分子的線團尺寸或滲透系數(shù)的差別而進行分別的色譜

15、法；渦流擴散 ：在填充色譜柱中, 由于填料粒徑大小不等,填充不勻稱,使同一個組分的分子經(jīng)過多個不同長度的途徑流出 色譜柱,使色譜峰展寬的現(xiàn)象；縱向擴散 ：由于濃度梯度的存在,組分將向區(qū)帶前、后擴散,造成區(qū)帶展寬的現(xiàn)象；傳質(zhì)阻抗 ：組分在溶解、擴散、轉(zhuǎn)移的傳質(zhì)過程中所受到的阻力稱為傳質(zhì)阻抗；保留指數(shù) I：在氣相色譜法中,常把組分的保留行為換算成相當于正構(gòu)烷烴的保留行為,也就是以正構(gòu)烷烴系列為組分相對保留值的標準,即用兩個保留時間緊鄰待測組分的基準物質(zhì)來標定組分的保留,這個相對值稱為保留指數(shù),又稱 Kovats指數(shù)；保留體積 V R：是從進樣開頭到某組分在柱后顯現(xiàn)濃度極大時,所需通過色譜柱的流淌相

16、體積；調(diào)整保留體積 VR：是由保留體積扣除死體積后的體積；保留比 R ：設流淌相的線速度為 u,組分的移行速度為 v,將二者之比稱為保留比；2基本理論（1）色譜分別的原理：組分在固定相和流淌相間進行反復多次的“ 安排 ”,由于安排系數(shù)K 或容量因子k的不同而實現(xiàn)分別；各種色譜法的分別機制不同；（ 2）塔板理論 ：塔板理論描述組分在色譜柱中的安排和轉(zhuǎn)移行為,由塔板理論導出的流出曲線方程為：塔板理論有如下基本假設：在色譜柱內(nèi)一小段長度即一個塔板高度 H 內(nèi),組分可以在兩相中瞬時達到安排平穩(wěn)；安排系數(shù)在各塔板上是常數(shù)；試樣和新奇流淌相都加在第0 號塔板上； 流淌相不是連續(xù)地而是間歇式地進入色譜柱,且

17、每次只進入一個塔板體積；試樣在柱內(nèi)的縱向擴散可以忽視；塔板理論在說明流出曲線的外形和位置、組分的分別及評判柱效等方面是勝利的；（ 3）速率理論 ：速率理論說明了影響塔板高度或使色譜峰展寬的各種因素,包括渦流擴散、縱向擴散、傳質(zhì)阻抗和流動相線速度；其表達式為：H=A+B/u+Cu Cs 和流淌相傳質(zhì)阻抗Cm A 為渦流擴散系數(shù)：A=2ldp B 為縱向擴散系數(shù)：B=2gDm C 為傳質(zhì)阻抗：包括固定相傳質(zhì)阻抗3基本運算（ 1）保留值： tR=tR-t0, V R=V R-V 0, r2,1=tR1/tR2=V R1/V R2 （2）分配系數(shù)和保留因子：01+ k ,k=tR/t0,t R=t01

18、+KVs/Vm =t（ 3）峰寬度： W 1/2=2.355,W=4 =1.699W 1/2（ 4）柱效：（ 5）分別度：二、重點和難點本章主要學習色譜過程和分別原理、各類色譜的分別機制；特別是色譜法的有關概念和色譜基本理論,是學習其后各章色譜分析方法的基礎；1色譜過程色譜過程是組分的分子在流淌相和固定相間多次安排的過程；如兩組分的安排系數(shù)存在微小的差異,經(jīng)過反復多次的分配平穩(wěn), 使微小的差異積存起來,其結(jié)果就使安排系數(shù)小的組分被先洗脫,從而使兩組分得到分別；色譜分別的前提是安排系數(shù)或保留因子不等；2有關概念及運算公式這是本章的重點,肯定要深化懂得,堅固把握；3基本類型色譜方法及其分別機制（

19、1）安排色譜法 ：利用被分別組分在固定相或（和）流淌相中的溶解度差別,即安排系數(shù)的差別而實現(xiàn)分別；包括氣液安排色譜法和液液安排色譜法；（ 2）吸附色譜法 ：利用被分別組分對固定相表面吸附中心吸附才能的差別,即吸附系數(shù)的差別而實現(xiàn)分別；包括氣固吸附色譜法和液固吸附色譜法；在硅膠液固吸附色譜中,極性強的組分吸附力強；常見化合物的吸附才能有以下次序：烷烴烯烴鹵代烴醚硝基化合物叔胺酯酮醛酰胺醇酚伯胺羧酸；（ 3）離子交換色譜法：利用被分別組分別子交換才能的差別即挑選性系數(shù)的差別而實現(xiàn)分別；按可交換離子的電荷符號又可分為陽離子交換色譜法和陰離子交換色譜法；（ 4）分子排阻色譜法：依據(jù)被分別組分分子的線團

20、尺寸,即滲透系數(shù)的差別而進行分別；安排色譜法是基礎,而且在 GC 和 HPLC 中都仍會有爭論；在 TLC 一章重點爭論吸附色譜法；后兩種方法只存在于液相色譜法中,但在后續(xù)章中都沒有特地爭論,故在本章加以介紹；值得留意的是在實際色譜過程中各種分別機制極少單獨發(fā)生,4塔板理論經(jīng)常是幾種機制同時發(fā)生, 只是某種機制起主導作用而已；塔板理論沿用分餾塔中塔板的概念來描述組分在兩相間的安排行為；認為在每個塔板的間隔內(nèi),試樣組分在兩相中達到安排平穩(wěn), 經(jīng)過多次的安排平穩(wěn)后,安排系數(shù)小的組分先流杰出譜柱；同時仍引入塔板數(shù)作為衡量柱效的指標；而理論塔板數(shù) n 可懂得為在色譜柱內(nèi)溶質(zhì)平穩(wěn)的次數(shù) n=L/H, 平

21、穩(wěn)的次數(shù)越多 ,柱效越高 ,組分間分別的可能性越大；塔板理論實際上是把組分在兩相間的連續(xù)轉(zhuǎn)移過程,分解為間歇的在單個塔板中的安排平穩(wěn)過程；重點是要搞清溶質(zhì)在色譜柱內(nèi)的質(zhì)量安排和轉(zhuǎn)移；在色譜柱各塔板內(nèi)組分的質(zhì)量分布符合二項式 ms+m mN 的綻開式；需要留意的是, 在爭論二項式分布時,用二項式綻開式或通式求得的 Nmr 是組分在色譜柱中各塔板內(nèi)的溶質(zhì)質(zhì)量分數(shù)；當轉(zhuǎn)移次數(shù) N=n（塔板數(shù)）時,柱出口開頭能檢測到溶質(zhì)；流出曲線的縱坐標是柱出口處的質(zhì)量分數(shù),該曲線也符合二項式分布曲線；當塔板數(shù)很大時流出曲線趨于正態(tài)分布曲線；5速率理論Van Deemter 方程式為： H=A+B/u+Cu 速率理論

22、的塔板高度H 與塔板理論中的塔板高度有所不同,是色譜峰展寬的指標,但兩者均是柱效的的度量；B 及 C分別代表渦流擴散系數(shù)、縱向擴散系數(shù)和傳質(zhì)阻抗系數(shù),其單位分別為 點是要懂得這些影響柱效的因素的物理含義；cm、cm2/s 及 s；三者均與色譜動力學因素有關；重渦流擴散：也稱為多徑擴散,與填充不規(guī)章因子 l 和填料（固定相）顆粒的平均直徑 dp 有關： A=2ldp 縱向擴散：縱向擴散系數(shù) B 與彎曲因子 g 和組分在流淌相中的擴散系數(shù) Dm 有關： B=2gDm 傳質(zhì)阻抗：影響組分溶解、擴散、轉(zhuǎn)移的阻力,包括固定相傳質(zhì)阻抗 Csu 和流淌相傳質(zhì)阻抗 Cmu；流淌相線速度對塔板高度的影響：在較低

23、線速度時,縱向擴散項起主要作用,線速度上升,塔板高度降低,柱效上升；在較高線速度時,傳質(zhì)阻抗起主要作用,線速度上升,塔板高度增高,柱效降低；速率理論爭論影響柱效（或峰展寬即組分別散）的各種動力學因素,用于指導色譜試驗條件的挑選；Van Deemter 方程在 GC、HPLC 和 CE 中的具體形式和應用將在相應章節(jié)爭論；依據(jù)此方程仍可以求出流淌相的正確流速 uop；以 H=A+B/u+Cu對 u 微 分,得 H=-Bu-2+C,當 其 等 于 0 時,H 有 極 值,于 是-Bu-2+C=0,因 此,此時塔板高度為；第十七章氣相色譜法- 章節(jié)小結(jié)1. 基本概念固定液相對極性,麥氏常數(shù),程序升溫

24、,噪聲,漂移,分流比,檢測器靈敏度,檢測限等；2基本理論（ 1）差速遷移 ：在色譜分析中,安排系數(shù)不同是組分分別的前提條件；氣相色譜法中,載氣種類少,可選余地小,要轉(zhuǎn)變組分之間安排系數(shù)的或大小或比例,主要通過挑選合適的固定液；（ 2）GC中的速率理論 ：速率理論是從色譜動力學的角度闡述影響柱效的因素,以 速率方程為：Van Deemter 方程式表示,在填充柱中,H=A+B/u+Cu =2 dp+ 2gDg/u+ 在開管柱中, A 0,此時速率方程為：H=B/u+Cgu+Clu = u +最小板高對應的載氣線速度稱為正確線速度,為了削減分析時間,常用的正確有用線速度大于正確線速度；在學習速率理

25、論時,應熟識速率方程式中各項和各符號的含義,即這些因素是如何影響柱效的,從而懂得分別條件的挑選；（ 3）色譜柱分 填充柱 及毛細管柱 兩類,填充柱又分 氣- 固色譜柱 及 氣- 液色譜柱 ；固定液按極性分類可分成非極性、中等極 性、 極性以及氫鍵型固定液；固定液的挑選按相像性原就；常用硅藻土載體分為紅色載體和白色載體,紅色載體常用于涂漬非極性固定液, 白色載體常用于涂漬極性固定液；硅藻土載體常需進行鈍化,其目的是為了減小載體表面的活性；載體鈍化 的方法有酸洗（AW）、堿洗（ BW）和硅烷化,這些鈍化方法分別除去堿性氧化物（主要是氧化鐵）、酸性氧化物（氧化鋁）和掩蓋硅羥基；毛細管柱可分為涂壁毛細

26、管柱（WCOT）、載體涂層毛細管柱（SCOT）、多孔層毛細管柱（PLOT）和填充毛細管柱；檢測器分濃度型及質(zhì)量型兩類；氫焰檢測器是質(zhì)量型檢測器,具有靈敏度高,檢測限小,死體積小等優(yōu)點；熱導檢測器是濃度型檢測器, 組分與載氣的熱導率有差別即能檢測；電子捕捉檢測器也是一種濃度型檢測器,檢測含有強電負性基團的物質(zhì),具有高挑選性和高靈敏度；為愛護檢測器和色譜柱,開氣相色譜儀時,必需先開載氣,后開電源,加熱；關機時,先關電源,最終關載氣；（ 4）柱溫的挑選原就為：在使最難分別的組分有盡可能好的分別度的前提下,要盡可能采納較低的柱溫,但以保留時間適 宜及不拖尾為度；對寬沸程樣品,采納程序升溫方式；（ 5）

27、定性與定量：定性方法有已知物對比法,相對保留值,保留指數(shù),利用化學方法協(xié)作,兩譜聯(lián)用定性；定量方法常用歸一化法和內(nèi)標法,在沒有校正因子情形下,使用內(nèi)標對比法較好；3基本運算固定液的相對極性分別方程式 R=相對重量校正因子=歸一化法 Ci%=外標法 mi =內(nèi)標法mi=fiAi ms=fsAs mi=Ci%=內(nèi)標對比法第十八章高效液相色譜法- 章節(jié)小結(jié)一、主要內(nèi)容1基本概念（ 1） 化學鍵合相 ：利用化學反應將有機基團鍵合在載體表面形成的固定相；（2） 化學鍵合相色譜法：以化學鍵合相為固定相的色譜法；（3） 正（反）相色譜法：流淌相極性?。ù螅┯诠潭ㄏ鄻O性的液相色譜法；（ 4） 抑制型（雙柱）離

28、子色譜法：用抑制柱排除流淌相的高電導本底,以電導為檢測器的離子交換色譜法；（ 5） 手性色譜法： 利用手性固定相或手性流淌相添加劑分別分析手性化合物的對映異構(gòu)體的色譜法；（ 6） 親合色譜法： 利用或模擬生物分子之間的專一性作用,從復雜生物試樣中分別和分析特別物質(zhì)的色譜方法,是基于組分與固定在載體上的配基之間的專一性親和作用而實現(xiàn)分別的色譜法；（ 7） 梯度洗脫： 在一個分析周期內(nèi)程序掌握轉(zhuǎn)變流淌相的組成,如溶劑的極性、離子強度和 pH 值等；（ 8） 靜態(tài)流淌相傳質(zhì)阻抗 Csm：由于組分的部分分子進入滯留在固定相微孔內(nèi)的靜態(tài)流淌相中,因而相對晚回到流路中,引起的峰展寬；（9） 鍵合相的含碳量

29、：鍵合相碳的百分數(shù),可通過對鍵合硅膠進行元素分析測定；（ 10） 鍵合相的掩蓋度：參與反應的硅醇基數(shù)目占硅膠表面硅醇基總數(shù)的比例；（ 11） 封尾： 在鍵合反應后,用三甲基氯硅烷等對鍵合相進行鈍化處理,削減殘余硅醇基,即封尾；（ 12） 溶劑的極性參數(shù) P：表示溶劑與三種極性物質(zhì)乙醇（質(zhì)子賜予體）、二氧六環(huán)（質(zhì)子受體 P）和硝基甲烷（強偶極體）相互作用的強度；用于度量安排色譜的溶劑強度；P越大,溶劑的極性越強,在正相安排色譜中的洗脫才能越強；（ 13） 溶劑的強度因子 S：常為反相鍵合相色譜的溶劑洗脫才能的度量；（ 14） 三維光譜色譜圖：用 DAD 檢測器檢測,經(jīng)過運算機處理,將每個組分的吸

30、取光譜和試樣的色譜圖結(jié)合在一張三維坐標圖上,即獲得三維光譜-色譜圖；2基本理論（ 1）速率理論在HPLC 中表達式為： H=A+C mu+Csmu 用于指導試驗條件的挑選；A 、 Cm 和 Csm 均隨固定相粒度dp變小而變小,因此保證HPLC 高柱效的主要措施是使用小粒度的固定相；此外,要求粒度和柱填充勻稱、使用低粘度流淌相、適當?shù)牧魉俸椭鶞兀唬?2）反相鍵合相色譜法保留機制：可用“疏溶劑理論 ” 說明,即溶質(zhì)的保留是其分子受到溶劑的斥力,而與鍵合相的烴基發(fā)生疏水締合的結(jié)果；反相鍵合相色譜法的 k 受以下因素影響：溶質(zhì)的極性越強,k 越?。涣魈氏嗟暮吭礁?使組分的 k 越大；流淌相的 p

31、H（離子抑制作用）和離子強度都影響 k；鍵合相的烴基越長,使溶質(zhì) k 增大；（ 3）正相鍵合相色譜法：以氨基、氰基等極性鍵合相為固定相,以烷烴加少量極性調(diào)劑劑為流淌相,極性強的組分 k大；（ 4）反相離子對色譜法：組分的離子與加入到流淌相中的離子對試劑的反離子生成中性離子對,增加在反相固定相上的保留；保留因子受離子對試劑的種類和濃度、流淌相的 pH 等影響；3基本運算（ 1）混合溶劑的強度以下式運算：式中 P為混合溶劑的極性參數(shù),Pi和 ji 為純?nèi)軇?i 的極性參數(shù)及該溶劑在混合溶劑中的體積分數(shù)；S 混為混合溶劑的強度因子,Si 和 ji 為純?nèi)軇?i 的強度因子及該溶劑在混合溶劑中的體積分

32、數(shù)；（ 2）HPLC 的定量分析運算：與 GC 相同；4 HPLC 儀器（ 1）輸液泵（ 2）檢測器：有紫外、熒光、電化學和蒸發(fā)光散射檢測器等；紫外檢測器：原理是朗伯比爾（Lambert-Beer ）定律；適用于有紫外吸取的組分；二極管陣列檢測器：可獲得三維光譜色譜圖,同時供應定性定量信息；熒光檢測器：原理是熒光強度與組分的濃度成線性關系；Q）的大小符合法拉第定律：Q=nFN；電化學檢測器：原理是當組分經(jīng)過電極表面時,發(fā)生氧化仍原反應,產(chǎn)生電量（蒸發(fā)光散射檢測器：散射光的強度（I）與氣溶膠中組分的質(zhì)量（m）有下述關系：I=kmb 或 lgI=blgm+lgk 二、重點和難點由于 HPLC 中的

33、常用術語、 色譜參數(shù)和色譜基本理論等都已在第16 章中作了具體的闡述,定性、定量分析方法又與GC相同,因此,本章只爭論高效液相色譜的各種具體方法,重點是反相鍵合相色譜法；1正相鍵合相色譜法 以極性鍵合相為固定相,如氰基（CN ）、氨基（ NH2）或二羥基鍵合相等,以非極性或弱極性溶劑,如烷烴,加適 量極性調(diào)整劑, 如醇類作流淌相； 正相鍵合相色譜主要用于分別溶于有機溶劑的中等極性的分子型化合物；分別挑選性打算 于鍵合相的種類、流淌相的強度和試樣的性質(zhì)；主要是懂得其一般規(guī)律：極性強的組分的保留因子 k 大,后洗脫出柱；流淌 相的極性增強,洗脫才能增加,使組分 k 減小, tR 減?。蝗苜|(zhì)與鍵合極

34、性基團間的作用力,如氫鍵、 誘導或靜電作用等,是打算色譜保留和分別挑選性的首要因素；流淌相的選 擇性是通過其與試樣分子間的相互作用來實現(xiàn)的,分子間作用力不同,就分別的挑選性不同；同系物,如甲醇與丙醇,作用力類型相同,其色譜分別的挑選性相像,假如換成高偶極矩溶劑二氯甲烷,就挑選性將發(fā)生變化；2反相鍵合相色譜法 在現(xiàn)代色譜學中, 反相鍵合相色譜法一般就稱為反相色譜法；這是本章要把握的重點；反相色譜法通常以非極性鍵合相為固定相, 以極性溶劑及其混合物為流淌相,固定相的極性比流淌相的極性弱；能分別極性范疇很寬的試樣；鍵合相的烷基鏈長和含碳量是影響溶質(zhì)的保留因子（及柱效）、挑選性和載樣量的重要因素；保留

35、行為的主要影響因素：溶質(zhì)的極性越弱,其疏水（疏溶劑）性越強,k 越大, tR 也越大；增加流淌相中水的含量,就溶劑強度降低,使溶質(zhì)的 k 增大；流淌相的 pH 變化會轉(zhuǎn)變?nèi)苜|(zhì)的離解程度,溶質(zhì)的離解程度越高,k 值越??；因 此,常加入少量弱酸、弱堿或緩沖溶液,調(diào)劑流淌相的 pH ,抑制有機弱酸、弱堿的離解,增加它與固定相的疏水締合作用,以達到分別的目的；這種色譜方法又稱為離子抑制色譜法；固定相鍵合烷基的碳鏈延長,硅膠表面鍵合烷基的濃度越大,溶質(zhì)的 k 越大；3反相離子對色譜法把離子對試劑加入到含水流淌相中,與組分別子生成中性離子對,從而增加溶質(zhì)與非極性固定相的作用,使安排系數(shù)增加,改善分別成效；

36、用于分別可離子化或離子型的有機酸、堿、鹽等；影響容量因子的因素有離子對試劑的種類和濃度、流 動相的 pH 和流淌相中有機溶劑的種類和比例等；4鍵合相的特點 鍵合相有如下優(yōu)點：使用過程中不流失；化學穩(wěn)固性好；適于梯度洗脫；載樣量大；使用一般化學鍵合相時流淌相中水相的pH 應維護在 28,以免引起硅膠溶解,但目前已有很多鍵合相能夠承擔更寬的pH 范疇；新型鍵合相性5鍵合相色譜法中流淌相對分別的影響依據(jù)分別方程式：Xn ）,將挑選n 由固定相及色譜柱填充質(zhì)量打算,（即挑選性）主要受溶劑種類的影響,k 受溶劑配比的影響；溶劑的挑選性：斯奈德（Snyder）依據(jù)溶劑的質(zhì)子接受才能（Xe）、質(zhì)子賜予才能（

37、Xd ）和偶極作用力（參數(shù)定義為：,依據(jù) XeXd Xn 的相像性,將常用溶劑分為8 組（教材表 20-2）,并得到溶劑挑選性分類三角形；處于同一組中的各溶劑的作用力類型相同,在色譜分別中具有相像的挑選性,而處于不同組別的溶劑,其挑選性差別較大；溶劑極性參數(shù)：溶劑的極性和強度：溶劑的洗脫才能即溶劑強度直接與它的極性相關；在正相色譜中,溶劑極性參數(shù) P值越大,就溶劑的極性越強,洗脫才能越強；反相鍵合相色譜法的溶劑強度常用強度因子S 表示；極性弱的溶劑S 大,洗脫才能強；混合溶劑的強度：5高效液相色譜中的速率理論高效液相色譜的流淌相是液體,液體與氣體性質(zhì)的差異是導致高效液相色譜的擴散和傳質(zhì)過程對柱

38、效的影響與氣相色譜有差別的主要緣由；（ 1）縱向擴散可忽視：縱向擴散系數(shù) =2 Dm,在 HPLC 中,液體流淌相粘度大,使 Dm 很小；因此只有在流速很低時才能觀看到縱向擴散對柱效的影響；在常用色譜條件下,縱向擴散可以忽視,故流速上升,H 總是上升；但上升速率比GC 中慢,因此,為了快速分析,一般仍挑選大于正確流速的條件；（ 2）傳質(zhì)阻抗：化學鍵合相色譜法中,df 可忽視,故固定相傳質(zhì)阻抗 Cs 可忽視；流淌相傳質(zhì)阻抗 Cm= mdp2/Dm 中的 m與柱內(nèi)徑、 外形、 填料性質(zhì)等有關, 但至今仍沒準確的數(shù)值或關系；與 GC 中的 Cs 不同,Cm 與保留因子無關； HPLC中仍有一項靜態(tài)流

39、淌相傳質(zhì)阻抗 Csm,而且 Cm 和 Csm 都與固定相的粒度 dp 有關；（ 3）渦流擴散?。盒☆w粒球形固定相,勻漿高壓填充,降低渦流擴散；（ 4）HPLC 中的范第姆特方程為：H=A+C mu+Csmu （ 5）固定相粒度對塔板高度的影響：dp 變小, A 、Cm 和 Csm 均變小,而且塔板高度受流淌相線速度的影響也越?。豢梢娦×６鹊奶盍媳仍?GC 中更為重要；依據(jù)速率理論, HPLC 的試驗條件應當是：小粒度、勻稱的球形化學鍵合相；低粘度流淌相,流速不宜快；柱溫適當；6反相鍵合相色譜試驗條件的挑選在反相鍵合相色譜中,常選用非極性鍵合相；非極性鍵合相可用于分別分子型化合物,也可用于分別離子型或可離