乙肝六項(xiàng)操作及檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

1、 乙肝六項(xiàng)的操作、本卷須知及檢驗(yàn)結(jié)果的解釋第一頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBSAg (雙抗體夾心法原理在微孔條上預(yù)包被，被純化的乙肝外表抗體，配以酶標(biāo)記抗體HBsAb-HRP及TMB等其它試劑，采用夾心法原理檢測(cè)人血清或血漿中乙肝外表抗原HBsAg。第二頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBSAg (雙抗體夾心法操作步驟一.準(zhǔn)備1.1平衡：將試劑盒各組分別取出，平衡至室溫18-25，1.2配液：濃縮洗滌液配制前充分搖勻如有晶體應(yīng)充分溶解，濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按25倍稀釋后使用。1.3編號(hào)：將微孔條固定于支架，按序編號(hào)。第三頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBSAg (雙抗體夾心法) 二.HBS

2、Ag操作2.1加樣：分別用加樣器在對(duì)照孔中參加陰、陽(yáng)性對(duì)照血清各75l于相應(yīng)孔中。2.2溫育：置37溫育60分鐘。2.3 加酶：不用洗滌，分別在每孔中參加酶標(biāo)記抗體50l，輕輕混勻。2.4 溫育：置37溫育30分鐘，室溫平衡5分鐘。2.5 洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完扣干每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間。2.6顯色：每孔參加底物A、B各50l，輕拍混勻，置37暗處30分鐘。2.7終止：每孔加終止液50l，混勻。 三.HBSAg測(cè)定用酶標(biāo)儀單波長(zhǎng)450nm或雙波長(zhǎng)450/630nm測(cè)定各孔OD值用單波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)需設(shè)空白對(duì)照一孔，30分鐘內(nèi)完成測(cè)定，并記錄結(jié)果。第四頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作

3、HBSAg (雙抗體夾心法)結(jié)果判斷與分析 臨界值C.O.的計(jì)算：Cutoff臨界值=陰性對(duì)照孔OD值N2.1，陰性對(duì)照OD均值大于0.05時(shí)按實(shí)際OD值計(jì)算，小于0.05時(shí)以0.05計(jì)算。 結(jié)果判定：樣品OD值S/C.O=1者為HBsAg陽(yáng)性樣品OD值S/C.O1者為HBsAg陰性第五頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBeAb檢測(cè)ELISA)競(jìng)爭(zhēng)法 一.試劑準(zhǔn)備同上 二.HBeAb操作 加樣：分別用加樣器在對(duì)照孔中參加陰、陽(yáng)性對(duì)照血清各50l于相應(yīng)孔中。 加酶：分別在每孔中參加酶標(biāo)記抗體50l，輕輕混勻。 溫育：置37溫育30分鐘，室溫平衡5分鐘。 洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完扣干每次應(yīng)保

4、持30-60秒的浸泡時(shí)間。 顯色：每孔參加底物A、B各50l，輕拍混勻，置37暗處15分鐘。 終止：每孔加終止液50l，混勻。 三.HBeAb測(cè)定用酶標(biāo)儀單波長(zhǎng)450nm或雙波長(zhǎng)450/630nm測(cè)定各孔OD值用單波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)需設(shè)空白對(duì)照一孔，30分鐘內(nèi)完成測(cè)定，并記錄結(jié)果。第六頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBeAb檢測(cè)ELISA)競(jìng)爭(zhēng)法 四 .結(jié)果判斷與分析臨界值C.O.的計(jì)算：臨界值陰性對(duì)照孔OD值N+陽(yáng)性對(duì)照孔OD值P0.5， 結(jié)果判定：樣品OD值S/C.O1者為HBeAb陰性注意：加底物顯色，顯色的強(qiáng)弱與待測(cè)標(biāo)本中HBeAb的含量成反比。第七頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBCAb測(cè)定競(jìng)爭(zhēng)

5、法原理在微孔條上預(yù)包被，被純化乙肝核心抗原HBcAg，配以酶標(biāo)記抗體HbcAb-HRP及TMB等其它試劑，采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理檢測(cè)人血清或血漿中乙肝核心抗體HBcAb。第八頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBCAb測(cè)定競(jìng)爭(zhēng)法試劑準(zhǔn)備同上加樣：每測(cè)定孔參加50l樣品。對(duì)照孔中參加陰、陽(yáng)性對(duì)照血清各50l。作為臨床診斷依據(jù)，必須將原倍血清樣品按1：30稀釋后再檢驗(yàn)，稀釋液應(yīng)采用生理鹽水；作為流行病學(xué)調(diào)查依據(jù)，使用原倍血清檢驗(yàn)。加酶：每孔參加酶標(biāo)記抗體50l，輕拍混勻。育溫：置37溫育30分鐘，室溫平衡5分鐘。洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完扣干每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間。顯色：每孔參加底物A、B

6、各50l，輕拍混勻，置37暗處30分鐘。終止：每孔加終止液50l，混勻。測(cè)定：用酶標(biāo)儀單波長(zhǎng)450nm或雙波長(zhǎng)450/630nm測(cè)定各孔OD值用單波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)需設(shè)空白對(duì)照一孔，30分鐘內(nèi)完成測(cè)定，并記錄結(jié)果。結(jié)果判斷與分析臨界值C.O.的計(jì)算：臨界值陰性對(duì)照孔OD值N0.5未稀釋臨界值陰性對(duì)照孔OD值N0.3結(jié)果判定：樣品OD值S/C.O1者為HBcAb陰性 注意：加底物顯色，顯色的強(qiáng)弱與待測(cè)標(biāo)本中HBCAb的含量成反比。第九頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBCAb-lgM(捕獲法測(cè)定原理采用兔抗人HbcAg- IgM包被固相載體反響板，參加待測(cè)標(biāo)本，同時(shí)參加HbcAg-HRP，當(dāng)標(biāo)本中存在Hbc

7、Ab時(shí)，該HbcAb-IgM與包被HbcAg結(jié)合并與酶結(jié)合形成HBcAg-HbcAb-HBcAg-HRP復(fù)合物，參加TMB底物產(chǎn)生顯色反響，反之那么無(wú)顯色反響。第十頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBCAb-lgM(捕獲法 操作步驟 1.待測(cè)樣品用生理鹽水作1:1000稀釋，每孔加人稀釋樣品100微升，設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各2孔，每孔加人陰性對(duì)照(或陽(yáng)性對(duì)照) 各100微升(或2滴)，并設(shè)空白對(duì)照1孔，封板，置37 孵育20分鐘。2.手工洗板:棄去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)3次后拍干。洗板機(jī)洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。3.每孔參加HBcAg30微升(或1滴)，酶結(jié)合物50微升

8、(或1滴)(空白對(duì)照孔除外)，充分混勻，封板，置37孵育20分鐘4.手工洗板:棄去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。洗板機(jī)洗板:選擇洗滌5次程序洗板后拍干。5.每孔加顯色劑A液，顯色劑B液各50微升(或l滴) 充分混勻，封板，置37 孵育10分鐘。6.每孔加人終止液50微升(或1滴)，混勻。7.用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm(建議使用雙波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀比色，參考波長(zhǎng)630nm )，先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。記錄結(jié)果。第十一頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBCAg-lgM(捕獲法8. 結(jié)果判斷與分析8.1 臨界值C.O.的計(jì)算：臨界值陰性對(duì)照孔OD值N4，陰性對(duì)照O

9、D均值小于0.05時(shí)以0.05計(jì)算，大于0.05時(shí)應(yīng)實(shí)際OD值計(jì)算。8.2 結(jié)果判定：樣品OD值S/C.O=1者為陽(yáng)性 樣品OD值S/C.O1者為陰性9. 質(zhì)量控制：每次均應(yīng)有陰陽(yáng)對(duì)照，其OD值應(yīng)在要求范圍內(nèi)。第十二頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝六項(xiàng)操作HBCAb-lgM(捕獲法10.參考值范圍：參考值cut-off value(COV)=陰性對(duì)照平均OD值x 4陰性對(duì)照OD值低于0.050作0.050計(jì)算，高于0.050按實(shí)際OD值計(jì)算。例如1：陰性對(duì)照孔1 COV: 0.016.陰性對(duì)照孔2 COV: 0.010. 0.05040.200例如2：陰性對(duì)照孔 COV: 0.056 陰性對(duì)照孔 COV:

10、 0.0600.056+0.060/240.232第十三頁(yè)，共三十五頁(yè)。ELISA法檢測(cè)乙肝六項(xiàng)的本卷須知 及結(jié)果分析 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(簡(jiǎn)稱 ELISA 法)檢測(cè)乙型肝炎免疫學(xué)標(biāo)志物問世以來(lái)， 由于測(cè)定靈敏高 、特異好和操作簡(jiǎn)便等諸多優(yōu)點(diǎn)， 具有實(shí)用性和可操作性 ，并廣泛應(yīng)用于各類醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室 ，作為檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物的首選 ，但通過(guò)對(duì)臨床乙肝六項(xiàng)檢測(cè)的觀察、 存在不同血清物質(zhì)變化及各種影響因素 ，直接或間接的影響檢驗(yàn)結(jié)果的正確表達(dá) 。綜合資料和實(shí)踐 ，作如下探討：第十四頁(yè)，共三十五頁(yè)。1 樣本的采集與處理影響1.1 樣本離心處理不全， 使得標(biāo)本嚴(yán)重溶血及混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔

11、內(nèi)不易洗凈 ，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白，具有過(guò)氧化物酶樣的活性， 催化底物顯色造成假陽(yáng)性， 溶血標(biāo)本禁用。第十五頁(yè)，共三十五頁(yè)。1.2 正常血液采集后半個(gè)小時(shí)至兩小時(shí)開始凝固， 有時(shí)工作中為了快速檢測(cè) ，常會(huì)在血液未開始凝固時(shí) ，即強(qiáng)行離心別離血清 。特別是在冬天 使得血清中殘留局部纖維蛋白原，在 ELISA 測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白凝塊附著在酶標(biāo)反響孔壁內(nèi)使得不易洗掉 易造成假陽(yáng)(陰)性、 影響結(jié)果 。因此血液標(biāo)本采集后要使其充分凝固后再別離血清，標(biāo)本離心時(shí) ，可加大離心轉(zhuǎn)速 ，延長(zhǎng)離心時(shí)間 或者要節(jié)約時(shí)間就用帶別離膠的采血管采集標(biāo)本。第十六頁(yè)，共三十五頁(yè)。1.3 血清標(biāo)本應(yīng)防止細(xì)菌

12、污染， 細(xì)菌的一些內(nèi)源性酶本身會(huì)對(duì)相應(yīng)酶作標(biāo)記測(cè)定方法產(chǎn)生干擾。1.4 標(biāo)本儲(chǔ)存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)， 應(yīng)新鮮 4 保存不宜超過(guò)7天 ，以免因標(biāo)本中的 IgG 聚合導(dǎo)致本底加深 甚至假陽(yáng)性，影響判斷結(jié)果。第十七頁(yè)，共三十五頁(yè)。2 試劑的影響2.1 試劑盒在運(yùn)輸中時(shí)間太長(zhǎng) ，溫度過(guò)高會(huì)使顯色偏淡，靈敏度偏低 ，要求試劑盒應(yīng)存放于 2 -8 冰箱中，從冷藏環(huán)境中取出的試劑盒、全部瓶裝試劑以及待測(cè)標(biāo)本所需的微孔反響板，都應(yīng)預(yù)先在室溫下平衡后，再開啟使用 。余者應(yīng)及時(shí)封存于冰箱。不同批號(hào)試劑盒中的組份、不能進(jìn)行交叉使用 ，包括試劑瓶蓋，相互交叉使用 ，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高 ，花板情況。 所以不同試劑瓶蓋不

13、能混淆，試劑盒不要使用超過(guò)有效期。第十八頁(yè)，共三十五頁(yè)。2.2 不同廠家出產(chǎn)的試劑特異性和敏感性不相同。 有的廠家酶標(biāo)板空間 A 值差 15% ，標(biāo)記酶活性及顯色液的穩(wěn)定性較差，使用劣質(zhì)試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性或假陰性 。選擇高質(zhì)量的試劑是保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵之一第十九頁(yè)，共三十五頁(yè)。3 操作技術(shù)的影響3.1 加樣吸嘴的潔凈和吸液量的準(zhǔn)確性直接影響結(jié)果 ，移液器吸量缺乏 ，移液抽吸排放太快， 吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔， 所以要定期校正移液器， 吸頭要配套， 每次裝吸頭要吻合緊密， 移液不宜過(guò)快， 排放應(yīng)完全 ，盡可能使用同一移液器和裝緊吸頭移液時(shí)用力及抽吸速度均勻一致 加樣后要充分混勻

14、，在 100 ul和 50 ul的移液不精密度應(yīng) 在1%范圍以內(nèi)， 分別在99 -101 ul和 49.5- 50.5 ul之間。第二十頁(yè)，共三十五頁(yè)。3.2 溫浴影響 96 孔酶標(biāo)板結(jié)構(gòu)特別 ，易產(chǎn)生邊緣效應(yīng) ，抗原抗體結(jié)合及酶促反響對(duì)溫度要求嚴(yán)格， 標(biāo)本要貼好密封膜 ，防止水蒸氣和污物浸入， 放置 37 水浴箱時(shí) ，應(yīng)讓反響孔底部 2/3 浸入水中， 才能減少受熱不均 防止邊緣效應(yīng) ，干浴與水浴存在明顯的差異 ，盡可能使用水浴 ，并控制好水浴時(shí)間。第二十一頁(yè)，共三十五頁(yè)。3.3 洗滌是 ELISA 法操作的重要環(huán)節(jié)， 洗滌液的配制要嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作 ，不能用自來(lái)水代替蒸餾水配制 因?yàn)?/p>

15、自來(lái)水中的次氯酸鈉會(huì)影響結(jié)果 ，手洗易交叉污染 盡量使用洗板機(jī)洗滌， 血清中殘留的纖維蛋白或洗滌瓶，未經(jīng)常清洗而留有的污垢 ，結(jié)晶易使洗板機(jī)針孔全堵塞或半堵塞 ，造成未結(jié)合標(biāo)記酶洗脫不徹底， 導(dǎo)致花板而造成假陽(yáng)性或假陰性 ，所以操作洗板機(jī)過(guò)程中要不時(shí)觀察洗板機(jī)針孔內(nèi)洗液的通暢情況 ，及時(shí)糾正調(diào)整， 洗板機(jī)要做好維護(hù)保養(yǎng)， 不用時(shí)應(yīng)用去離子水清洗幾遍。第二十二頁(yè)，共三十五頁(yè)。3.4 顯色劑應(yīng)避光保存 滴加顯色劑 A 、B 時(shí) ，順序不能顛倒 ，注意不要漏加， 顯色時(shí)間要嚴(yán)格控制， 可用計(jì)時(shí)器來(lái)計(jì)時(shí)，保證準(zhǔn)確， 肉眼判斷結(jié)果時(shí)， 顯色淺不易觀察， 影響結(jié)果準(zhǔn)確性， 必須使用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果， 以保證

16、結(jié)果一致性 ，滴加終止液后隨著時(shí)間的增加， 吸光度值逐漸下降， 而且濃度越高其吸光度隨時(shí)間下降越快， 可能會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果，建議在終止反響后立即比色。第二十三頁(yè)，共三十五頁(yè)。4 鉤狀效應(yīng)(Hook)影響隨著 ELISA 一步法的應(yīng)用 ，在日常工作中會(huì)發(fā)現(xiàn) HBsAg陰性而 HBeAg 陽(yáng)性的現(xiàn)象 ，其原因就是當(dāng)標(biāo)本中的抗原濃度過(guò)高時(shí)產(chǎn)生的鉤狀效應(yīng) (Hook)現(xiàn)象 ，從而出現(xiàn)假陰性造成真陽(yáng)性的漏檢， 即隨著被測(cè)物濃度增高反而顯色減弱甚至不顯色， 往往造成假陰性結(jié)果 ，采用同步稀釋測(cè)定或用線性范圍高的乙肝六項(xiàng)定量法可以減少 Hook 效應(yīng)的發(fā)生。第二十四頁(yè)，共三十五頁(yè)。有學(xué)者認(rèn)為大約 4

17、0%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì) ，可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果 ，常見的干擾物質(zhì)有： 類風(fēng)濕因子、 補(bǔ)體、異嗜性抗體 、治療性抗體 、溶菌酶、總蛋白濃度等， 某些自身抗體都會(huì)影響結(jié)果造成假陽(yáng)性。5.干擾物質(zhì)的影響第二十五頁(yè)，共三十五頁(yè)。6 藥物的影響 高效價(jià)的乙肝免疫球蛋白會(huì)與外表抗原形成復(fù)合物,影響 HBsAg 的檢出,所以一些 HBsAg 陽(yáng)性患者注射乙肝免疫球蛋白后,HBsAg 檢測(cè)會(huì)呈陰性反響,導(dǎo)致乙肝兩對(duì)半少見模式的出現(xiàn)。為預(yù)防乙肝，局部 HBsAg 陰性人群在接種乙肝疫苗后的 1 2 周內(nèi)，血清中可檢出 HBsAg 成分，形成一過(guò)性HBsAg 陽(yáng)性，這可能是乙肝疫苗主要成分是

18、HBsAg，建議接種乙肝疫苗后 1 個(gè)月內(nèi)不應(yīng)作 HBsAg 檢測(cè)。 總之,沒有嚴(yán)格的室內(nèi)質(zhì)控,沒有標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程,結(jié)果判定用肉眼而不用儀器,操作隨意(如試劑自冰箱取出后不復(fù)溫,溫育時(shí)不封板,洗板后無(wú)扣板過(guò)程),試劑、儀器、器材(如微量移液器)質(zhì)量差等。而對(duì)一些操作細(xì)節(jié)(如溫育時(shí)間的控制)的無(wú)視都可能導(dǎo)致結(jié)果的不同。乙肝六項(xiàng)檢測(cè)必須排除各種影響因素的干擾，才能為臨床提供正確可靠的檢測(cè)依據(jù)。第二十六頁(yè)，共三十五頁(yè)。乙肝外表抗原前S1HBSAg前S1：1.主要存在于完整乙肝病毒外表 ,2.肝細(xì)胞膜上存在有前S1蛋白受體 ,3.誘導(dǎo)乙肝病毒吸附在肝細(xì)胞外表 , 4.促使病毒進(jìn)入肝細(xì)胞內(nèi).第二十七頁(yè)，

19、共三十五頁(yè)。乙肝核心抗體臨床意義乙型肝炎核心抗體是人體感染乙型肝炎病毒后第一個(gè)出現(xiàn)的抗體,是人體感染乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物之一.乙型肝炎核心抗體又可分為乙型肝炎核心抗體IgM抗HBc.IgM和乙型肝炎核心抗體IgG(抗HBc.IgG)兩種,前者隨ALT升高而不斷增長(zhǎng).大約在乙型肝炎病毒感染后1-2個(gè)月時(shí),隨者ALT升高而不斷增長(zhǎng).大約在乙型肝炎病毒感染后1-2個(gè)月時(shí),隨之產(chǎn)生的便是乙型肝炎核心抗體IgG. 目前認(rèn)為,抗HBc.IgM是乙型肝炎病毒新近感染或持續(xù)復(fù)制的標(biāo)志,這種抗體持續(xù)陽(yáng)性提示疾病遷延,而抗HBc.IgG的持續(xù)存在只能說(shuō)明以往有過(guò)乙型肝炎病毒感染.因此,乙型肝炎核心抗體IgM和

20、IgG平行檢測(cè),有助于對(duì)急性乙型肝炎與隱匿型乙型肝炎和乙型肝炎病毒攜帶者急性發(fā)作之間的鑒別.約有20%急性乙型肝炎病人的血清中查不到乙型肝炎外表抗原,而乙型肝炎核心抗體IgM可陽(yáng)性,而且與病情變化相一致,病情恢復(fù),乙型肝炎核心抗體IgM陰轉(zhuǎn).當(dāng)病情重新活動(dòng)時(shí),ALT重新出現(xiàn)異常時(shí),乙型肝炎核心抗體IgM亦重新出現(xiàn)陽(yáng)性,滴度上升.所以說(shuō),乙型肝炎核心抗體IgM是用來(lái)評(píng)價(jià)乙型肝炎病情的較好指標(biāo)第二十八頁(yè)，共三十五頁(yè)。常見乙肝六項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋第二十九頁(yè)，共三十五頁(yè)。HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAbHBcAb- lgM簡(jiǎn)要意義乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗體乙型肝炎e抗原乙型肝炎e

21、抗體乙型肝炎核心抗體乙型肝炎核心抗體lgMHBsAg是乙肝病毒標(biāo)志物，陽(yáng)性提示乙肝攜帶；HBeAg、HBcAb- lgM 陽(yáng)性提示乙肝病毒復(fù)制活躍,傳染性強(qiáng),是治療療效評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)；HBsAb、HBeAb陽(yáng)性提示機(jī)體產(chǎn)生免疫力抵抗病毒，趨于恢復(fù)。-沒有乙肝病毒感染，不具備免疫力-+-接種疫苗，乙肝恢復(fù)，具備免疫力+-表面抗原攜帶；急性乙肝病毒感染潛伏期后期+-+-+急性乙肝早期，病毒復(fù)制，有傳染性強(qiáng)+-+-+急慢性乙肝，病毒復(fù)制，有傳染性強(qiáng)+-+-急慢性乙肝，沒有傳染性或傳染性弱+-+-急慢性乙肝，沒有傳染性或傳染性弱+-+急慢性乙肝，病毒復(fù)制有傳染性，乙型肝炎E抗原變異-+-乙肝核心抗隱性攜帶，有乙肝既往有感染史-+-急性乙肝恢復(fù)期或既往有感染史-+-+-乙肝恢復(fù)期或既往有輕度乙肝病毒感染史+-+-慢乙肝病毒感染攜帶，沒有傳染性或傳染性弱+-+急性乙肝趨于恢復(fù)，表面抗原攜帶，病毒復(fù)制，有傳染性強(qiáng)-+提示乙肝病毒早期感染，有傳染性第三十頁(yè)，共三十五