高效液相色譜法測定萬壽菊花萃取物中的葉黃素含量

1、高效液相色譜法測定萬壽菊花萃取物中的葉黃素含量李岑嶺王佩維聶永亮宋鵬【摘要】目的用高效液相色譜法對萬壽菊花萃取物中所含的葉黃素含量舉行闡發(fā)測定。要領起首由萬壽菊花萃取物制備出葉黃素單體，利用色譜柱為Diansil18柱；活動相為甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水3029401;流速0.75lin-1;檢測波長450n;柱溫25;進樣量20l。結(jié)果該要領最低檢出限量110-7gl-1,葉黃素在0.824gl-1范疇內(nèi)線性干系精良，要領細密度RSD相對尺度缺點為0.96%,加標接納率為99.49%100.22%,RSD為0.82%1.64%。結(jié)論該要領輕便、正確、重復性好?！娟P鍵詞】萬壽菊葉黃素高效液相色譜

2、法葉黃素(LutEin)，別名“植物黃體素，是一種普及存在于蔬菜、花草、水果與某些藻類生物中的自然抗氧化劑。葉黃素高活性、富含電子的長多烯碳鏈，能庇護人體免受單線態(tài)氧和自由基的作用而帶來的損害1，并且葉黃素是人體血液中重要的類胡蘿卜素之一，可以或許按捺腫瘤生長，可以防范因機體朽邁而引發(fā)的心血管硬化、冠心病2，3；葉黃素可以或許很好地庇護皮膚免受陽光灼傷，淘汰人體所受來自于電腦屏幕、電視屏幕等的輻射和超量紫外線照耀的損害4，具有顯著的防輻射、護膚、潤膚和抗朽邁作用。別的，葉黃素和玉米黃質(zhì)是眼睛中僅有的兩種類胡蘿卜素，防范老年性眼球視網(wǎng)膜黃斑區(qū)病變引起的視力落落與失明5、白內(nèi)障等眼部疾病6是葉黃素

3、的奇特的成效。別的，葉黃素照舊一種很好的自然著色劑，在飼料中添加葉黃素不但可以給動物增補營養(yǎng)，還可以進步動物肉質(zhì)和蛋的品格，因此，葉黃素被普及應用于醫(yī)藥、保健品、化裝品、食品著色、煙草、水產(chǎn)物及動物飼料1。在國際市場上，1g葉黃素的代價與1g黃金相稱，以是人們把它稱為“植物黃金。萬壽菊花花瓣中葉黃素是最重要的類胡蘿卜素，通常另有3%6%的玉米黃質(zhì),別的類胡蘿卜素的含量很小，因此黑白常好的葉黃素泉源。從萬壽菊花中提取葉黃素已經(jīng)成為國表里研究的熱門，以是創(chuàng)立科學、不變、可靠的闡發(fā)要領非常需要。如今,闡發(fā)檢測葉黃素的重要要擁有：紫外-可見分光光度法、色譜法、質(zhì)譜、液質(zhì)聯(lián)用、核磁共振等，HPL可以實現(xiàn)

4、對待測物中葉黃素的定性定量闡發(fā)7，8。本實行重要研究了由萬壽菊萃取物制備的葉黃素的高效液相色譜闡發(fā)要領。1儀器與試劑L5500高效液相色譜儀,北京工具電子技能研究所；ESJ120-4型電子天平，沈陽龍騰電子稱量儀器；E211型超聲波洗濯器，美國etterEletrnis公司；illipre膜過濾器及真空泵，美國aters公司；紫外可見分光光度計：UV22450UV-Visiblespetrphteter；葉黃素樣品，由萬壽菊干花經(jīng)超臨界2萃取制備出浸膏，經(jīng)皂化、分散和純化處置懲罰制得，所得的葉黃素樣品經(jīng)自然產(chǎn)物尺度樣品國度焦點實行室北京闡發(fā)斷定含量為97.29%作為尺度樣品。闡發(fā)用試劑為闡發(fā)純

5、，北京化工場消費，水為二次蒸餾水。2要領萬壽菊花經(jīng)超臨界2萃獲得到萃取物，將萬壽菊花萃取物在堿性條件下皂化，然后分散出游離葉黃素，顛末純化處置懲罰得到葉黃素樣品。稱取葉黃素樣品20.0g，用活動相配成810-6gl-1的溶液。色譜條件:色譜柱為Diansil18柱；活動相為甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水3029401；流速0.75lin-1；檢測波長450n;柱溫25;進樣量20l。3結(jié)果3.1色譜條件簡直定試驗了差異體積比的甲醇-乙腈、甲醇-乙腈-醋酸乙酯、甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水為活動相，終極確定活動相為甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水3029401；流速0.75lin-1；分散度、柱壓及峰形均較抱負，

6、取葉黃素尺度樣品適量，用活動相溶解,制成810-6gl-1的溶液，用紫外-可見分光光度計在200800n的波長范疇內(nèi)掃描見圖1，最大汲取波長為450n，本文選擇450n為檢測波長。葉黃素樣品高效液相色譜圖見圖2。以葉黃素峰面積A(vs-1)對進樣濃度(gl-1)舉行回歸,得到回歸方程為:Y=-14377.4+59811.7,r=0.9939。此方程可以用于葉黃素峰面積與濃度之間的定量闡發(fā)與盤算。配制110-7g/l的葉黃素尺度溶液，檢出信號薄弱，確定最低檢出限為110-7g/l。圖3葉黃素尺度曲線3.4加標接納率按差異比例正確稱取含量的葉黃素樣品和葉黃素尺度品,配制如表2所示的5種樣品,并用活動相溶解,制得濃度為810-6gl-1的溶液,在上述色譜條件下測定，每種樣品進樣3次，結(jié)果見表2。接納率為99.49%100.22%,RSD為0.82%1.64%。表1細密度實行結(jié)果3.5樣品測定將2022-12-13制得的葉黃素樣品，別離于2022-12-14、2022-03-25、2022-04-29在上述色譜條件下檢測其間樣品在暗處、0、密閉保存每個樣品進樣3次，結(jié)果見表3。表3樣品測定結(jié)果結(jié)果表白，葉黃素在暗處、0長時間安排對葉黃素含量有較顯著影響。4結(jié)論實行研究選定了以甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水3029401為活動相;流速0.75lin-1;檢測波長450n;柱溫25;進樣量20