定量PCR儀日常維護

1、定量PCR儀日常維護王爭強Hotline: 400 620 9660cnmcbsupport電腦及軟件的維護定量PCR儀主機的維護 2009 Applied Biosystems.2電腦及軟件的維護定量PCR儀主機的維護 2009 Applied Biosystems.3電腦及軟件維護專機專用 工程師現(xiàn)場安裝時，會確認計算機是否合乎要求 請勿自行更換電腦 請勿自行安裝其它第三方軟件 2009 Applied Biosystems.4電腦及軟件維護預防電腦病毒 不使用與實驗無關(guān)的移動存儲器 使用U盤轉(zhuǎn)實驗數(shù)據(jù)時，必須先把U盤格式化。 最好使用專用的U盤 2009 Applied Biosyste

2、ms.5電腦及軟件維護數(shù)據(jù)線的插拔 避免經(jīng)常拔插連接計算機與定量PCR儀的數(shù)據(jù)線 必須在關(guān)閉電腦及主機的情況下才可以拔插數(shù)據(jù)線 刪除多余的USB設備 2009 Applied Biosystems.6電腦及軟件維護執(zhí)行硬盤碎片整理程序 當運行實時定量 PCR 儀及使用軟件分析實驗結(jié)果時，計算機會刪除并創(chuàng)建若干文件，計算機硬盤的空閑空間會被分割成越來越多的小塊 當硬盤驅(qū)動器上文件以分解的碎片存儲時，程序需要更長的時間才能存取文件 碎片整理實用程序?qū)⒁粋€文件分解開的多個碎片合并在一起，并存儲到硬盤的同一個位置，從而優(yōu)化系統(tǒng)性能。 2009 Applied Biosystems.7電腦及軟件維護執(zhí)行

3、硬盤碎片整理程序如何整理硬盤碎片？ 在 Windows 桌面上，選擇Start Programmefiles Accessories System tools Defragment。 單擊Defragment now。 2009 Applied Biosystems.8電腦及軟件維護執(zhí)行硬盤碎片整理程序何時需要整理磁盤碎片？ 建議每月執(zhí)行一次或當碎片比例達到 20%以上時。 2009 Applied Biosystems.9電腦及軟件維護SDS軟件更新 訪問美國應用生物系統(tǒng)公司網(wǎng)站： 每半年檢查一次有無更新 如果升級為用戶可安裝程序，您可從美國應用生物系統(tǒng)公司網(wǎng)站,下載升級程序 2009 Ap

4、plied Biosystems.10電腦及軟件維護操作系統(tǒng)更新何時執(zhí)行 Windows Service Pack 更新？ 除非美國應用生物系統(tǒng)公司代表通知您更新操作系統(tǒng)，否則請不要更新連接定量 PCR 儀的計算機的操作系統(tǒng)。新版本的 Microsoft Windows 操作系統(tǒng)可能與SDS 軟件存在沖突，并導致儀器不能正常運行。如果您希望安裝service pack（更新包）以更新操作系統(tǒng)，應查看隨SDS 軟件提供的版本說明，避免兼容性問題。 2009 Applied Biosystems.11電腦及軟件維護實驗數(shù)據(jù)備份 建議經(jīng)常定期進行 備份*.sds或*.eds文件：刻錄光盤或轉(zhuǎn)移數(shù)據(jù)到

5、其它電腦 2009 Applied Biosystems.12電腦及軟件維護刪除多余的USB設備 在Control panel中選擇Add/Remove Hardware 選擇Unplug Hardware 在設備列表中刪除多余的USB設備 2009 Applied Biosystems.13電腦及軟件的維護定量PCR儀主機的維護 2009 Applied Biosystems.14定量PCR儀主機的維護實驗室環(huán)境 電源：建議配置UPS（1.5 KVA，電池供電2小時以上）或穩(wěn)壓器 通風：儀器的通風應該沒有阻擋 溫度：實驗室應該配有空調(diào)，控溫在20-25 濕度：控制相對濕度在20-80% 空間

6、：易于操作，安全 空氣潔凈 2009 Applied Biosystems.15定量PCR儀主機的維護電源開關(guān) 如果主機和計算機連續(xù)開機使用，每周應該進行一次關(guān)閉主機電源開關(guān)，關(guān)閉計算機，然后重新打開計算機和儀器電源開關(guān)的操作 注意正確的計算機和主機電源開關(guān)順序 2009 Applied Biosystems.16定量PCR儀主機的維護主機表面清潔 使用不脫毛的布塊擦拭儀器表面 切勿使用有機溶劑清潔定量PCR儀 2009 Applied Biosystems.177300/7500定量PCR儀主機的維護- v1.4定量PCR儀主機的維護ROI校正 ROI(Regions of Interest

7、) 校正用于生成目標區(qū)數(shù)據(jù)。 校正期間生成的數(shù)據(jù)，允許SDS 軟件映射樣本塊（Block)上反應孔的位置，從而在儀器操作期間，使軟件可判斷出反應板上特定反應孔中熒光強度的增量。 由于定量 PCR儀使用一組濾光片分離檢測運行期間生成的熒光能量，所以必須為每個濾光片生成校正圖像，以修正光學系統(tǒng)中的微小差異。 2009 Applied Biosystems.19定量PCR儀主機的維護準備ROI校正7300：7300 ROI校正反應板7500：7500 ROI校正反應板 2009 Applied Biosystems.20定量PCR儀主機的維護運行 ROI 校正 2009 Applied Biosys

8、tems.21定量PCR儀主機的維護分析并產(chǎn)生 ROI 校正數(shù)據(jù)Snapshot 2009 Applied Biosystems.22定量PCR儀主機的維護ROI校正 建議每半年執(zhí)行一次目標區(qū)（ROI）校正 如果懷疑儀器光路受到影響如搬動儀器，建議進行目標區(qū)（ROI）校正 執(zhí)行目標區(qū)（ROI）校正使用目標區(qū)（ROI）校正板 2009 Applied Biosystems.23定量PCR儀主機的維護背景校正 背景校正程序測量定量PCR儀的環(huán)境熒光強度 在運行校正程序期間，定量 PCR 儀在 10 分鐘內(nèi)連續(xù)地讀取背景校正反應板的熒光強度，運行溫度為 60 隨后，SDS 軟件計算運行期間所收集到的

9、熒光強度的平均值，提取出結(jié)果并保存到校正文件中 軟件在今后的分析中將自動調(diào)用此校正文件，從實驗數(shù)據(jù)中減去背景信號 2009 Applied Biosystems.24定量PCR儀主機的維護運行背景校正準備背景反應板： a.光譜校正試劑盒（Spectralcalibration kit)中的背景板(Background plate) b.如果光譜校正套件中的背景反應板多次使用后不好了，您可自己創(chuàng)建一個背景反應板以執(zhí)行背景校正。 2009 Applied Biosystems.25定量PCR儀主機的維護運行背景校正創(chuàng)建背景校正反應板文件 2009 Applied Biosystems.26定量PC

10、R儀主機的維護運行背景校正運行背景反應板 2009 Applied Biosystems.27定量PCR儀主機的維護運行背景校正分析背景數(shù)據(jù) 2009 Applied Biosystems.28定量PCR儀主機的維護72000如果背景信號大于72000，應該怎么做？ 2009 Applied Biosystems.29定量PCR儀主機的維護背景校正 建議每月執(zhí)行一次背景校正 如果發(fā)現(xiàn)信號異常，建議立即進行背景校正 執(zhí)行背景校正使用背景校正板 2009 Applied Biosystems.30定量PCR儀主機的維護加熱槽熒光污染的判斷 執(zhí)行背景校正，當背景熒光信號異常（強度超過72000或75

11、00的濾光片E超過90000）時 實驗中，連續(xù)出現(xiàn)不正常的偏高信號，并表明可能存在熒光物質(zhì)污染時 2009 Applied Biosystems.31定量PCR儀主機的維護清除熱槽中的污染70007300/7500 2009 Applied Biosystems.32定量PCR儀主機的維護清除熱槽中的污染 清潔樣本塊中污染的反應孔： a. 用移液器吸取少量水或乙醇并滴入每個污染的反應孔中。 b. 吹打數(shù)次。 c. 將廢液吸入廢液杯中。 重復以上步驟：乙醇三次，去離子水三次。 確認反應孔中的殘留液體蒸發(fā)完。 2009 Applied Biosystems.33定量PCR儀主機的維護確認已除去熱槽

12、中的熒光污染物 運行背景校正板。 確認污染已除去。 如未除去，重新清潔。 使用最新的背景校正。 2009 Applied Biosys34定量PCR儀主機的維護純熒光校正 純熒光校正根據(jù)一系列熒光標準品收集熒光數(shù)據(jù) 軟件將不同純熒光標準品的熒光信息分析并存儲到程序中 每次實驗運行中， SDS 軟件接收原始光譜信號。軟件將原始光譜與純熒光文件中包含的純熒光標準進行比較，以確定樣本中使用的每一種熒光的光譜表現(xiàn) 2009 Applied Biosystems.35定量PCR儀主機的維護純熒光校正 在每次執(zhí)行純熒光反應板之前，必須執(zhí)行ROI 校正和背景校正 使用純熒光校正板 2009 Applied

13、Biosystems.36定量PCR儀主機的維護準備純熒光反應板文件 2009 Applied Biosystems.37定量PCR儀主機的維護運行純熒光反應板 2009 Applied Biosystems.38定量PCR儀主機的維護分析純熒光校正數(shù)據(jù) 2009 Applied Biosystems.39定量PCR儀主機的維護純熒光校正 建議每半年執(zhí)行一次純熒光校正 如果使用自定義的熒光，必須進行純熒光校正 執(zhí)行純熒光校正使用純熒光校正板 2009 Applied Biosystems.40定量PCR儀主機的維護更換鹵素燈 根據(jù)需要更換鹵素燈 當您拿取鹵素燈時，請戴上無粉手套 2009 Ap

14、plied Biosystems.41定量PCR儀主機的維護更換鹵素燈7300/7500 2009 Applied Biosystems.42定量PCR儀主機的維護使用正確的支架 7000/7300/7500可以使用： 96孔板 0.2ml光學反應管 0.2ml八連管 如果你使用的是0.2ml光學反應管或八連管，請使用光學平蓋 2009 Applied Biosystems.437500/7500 Fast定量PCR儀主機的維護-v2.0定量PCR儀主機的維護 在 Windows 桌面上，選擇Start Programme files AppliedBiosystems 7500 Softwa

15、re 7500 Software v2.0.3 軟件自動檢測校正數(shù)據(jù)，如未校正或校正過期，會彈出提示對話框，點擊Open Instrument Maintenance Manager，打開校正界面。 2009 Applied Biosystems.45定量PCR儀主機的維護在Instrument MaintenanceManager界面，依次完成如下校正： ROI Background Optical Dye RNase P（可選） 2009 Applied Biosystems.46定量PCR儀主機的維護ROI校正點擊Start Calibrition 2009 Applied Biosys

16、tems.47定量PCR儀主機的維護ROI校正：按照軟件向?qū)нM行操作 2009 Applied Biosystems.48定量PCR儀主機的維護ROI校正：按照軟件向?qū)нM行操作 2009 Applied Biosystems.49定量PCR儀主機的維護完成ROI校正 校正成功，則Status顯示為Current。 校正失敗，則Status顯示為Failed。 2009 Applied Biosystems.50定量PCR儀主機的維護 Background 背景校正： 選擇背景校正界面 點擊Start Calibration 根據(jù)提示放入背景反應板 點擊Start Run 察看背景校正結(jié)果 分析

17、背景校正數(shù)據(jù) 校正成功，則Status顯示為Current。 校正失敗，則Status顯示為Failed。 2009 Applied Biosystems.51定量PCR儀主機的維護 Optical 光路校正： 選擇Optical校正界面 點擊Start Calibration 根據(jù)提示放入ROI反應板 點擊Start Run 察看Optical校正結(jié)果 分析Optical校正數(shù)據(jù) 校正成功，則Status顯示為Current。 校正失敗，則Status顯示為Failed。 2009 Applied Biosystems.52定量PCR儀主機的維護純熒光校正： 選擇Dye 校正界面 點擊Start Run，根據(jù)向?qū)нM行校正 完成后軟件判讀結(jié)果是否能夠通過 2009 Applied Biosystems.537300/7500定量PCR系統(tǒng)日常維護事項 2009 Applied Biosystems.54StepOne 系列定量PCR系