動物復習歸納總結全部

1、緒論 試驗動物科學 1,試驗動物科學包含的內容 分為兩個領域 1,試驗動物學（試驗動物） 2,比較醫(yī)學（動物試驗） 包括 1 個爭論（通過人工培育或人工改造等爭論） 3 個把握（對動物攜帶的微生物及其遺傳,養(yǎng)分,環(huán)境等因素實行 把握； 使實現(xiàn)動物的來源清楚,遺傳背景明確； 為科學爭論,教學,藥品和生物制品的生產及其質量檢定,以及其 他科學試驗供應專用的標準化試驗動物； ） 內容包括： 1,試驗動物遺傳育種學 2,試驗動物醫(yī)學 3,比較醫(yī)學 4,試驗動物環(huán)境生態(tài)學 5,動物試驗技術 2,試驗用動物的分類 經濟動物 野生動物 觀看動物 試驗動物 3,試驗動物的定義 指經過人工培育和改造,對其攜帶的

2、微生物,遺傳及養(yǎng)分,環(huán)境因子實行把握,來源清楚,遺傳背景明確；為中意 科學爭論,教學,藥品,生物制品的生產及檢定,及其他科學試驗的需要而馴養(yǎng),繁殖,育成的動物； 4,我國第一部試驗動物法規(guī), 1988 年試驗動物治理條例 衛(wèi)生部 2 項法規(guī)醫(yī)學試驗動物治理實施細就 醫(yī)學試驗動物標準 其次章 遺傳學質量把握 1. 試驗動物的遺傳學分類 原生動物門海綿動物門腔腸動物門扁形動物門線性動物門環(huán)節(jié)動物門軟體動物門節(jié)肢動物門 棘皮動物門原索動物門 11 脊椎動物門 2.近交系動物 1近交系動物的定義 （ 3 點） 經連續(xù) 20 代以上的全同胞兄妹或親子交配培育而成,同品系內全部個體都可追溯到起源于 20

3、代或以后的一對 共同祖先的遺傳群體,近交系數達 2近交系動物的命名 98.6%,該品系稱為近交系； 一般以大寫英文字母命名,亦可以用大寫英文字母加阿拉伯數字命名,阿拉伯數字與英文字母等高,符號應盡 量簡短； C3HBALB/c3近交系動物的遺傳學特性 基因純和性同基因性表現(xiàn)型的均一性遺傳穩(wěn)固性個體性分布廣泛性 背景資料和數據比較完整可辨論性 4近親交配的弊端 意義：試驗動物獲得遺傳均一性的典型方法； 使用較少的近交系動物, 即可達到統(tǒng)計學要求的精密度 同 一近交系的全部動物,在遺傳上相同,從而削減了表現(xiàn)型的變異在個體之間能相互接受皮膚和腫瘤移植 弊端：在固定基因時, 有害的隱性基因也會純合 ,

4、顯現(xiàn)不利的性狀而造成育種失敗近交仍可能導致多基因 之間丟失平穩(wěn), 從而使高度純化的動物 對不良環(huán)境的調劑適應才能降低 近交使動物失去為保持足夠生物適 合度所必需的最低水平的基因雜合性,從而影響動物生長率,壽命,對疾病的感受性,生活力,體力及繁殖能 力； （ 5）近交系數 Fn=1-1- Fnn：d 代數 F 每一代近交系數的上升率, 連續(xù)合同胞的兄弟妹交配, 每代 F=19%（舉例：近交系數 F20=1-（ ） 3.封閉群動物 1. 封閉群動物的定義 以非近交交配方式進行繁殖生產的一個試驗動物種群,在不從其外部引入新個體的條件下,至少連續(xù)繁殖 上,稱為一個封閉群,或叫遠交群； 4 代 以 2.

5、 封閉群動物的命名 封閉群由 24 個大寫英文字母命名,種群名稱前標明保持者的英文縮寫名稱,第一個字母須大寫,后面的字母小 寫,一般不超過 4 個字母；保持者與種群名字之間用冒號分開； Ssmu:KM3. 封閉群動物的遺傳學特性 基因庫大, 雜合率高 群體基因頻率基本保持穩(wěn)固 在封閉群體內, 個體間差異程度主要取決于其祖代起源 第 1 頁,共 13 頁封閉群動物每代近交系數上升率必需低于 1%；（隨機交配時,至少 200 對） 4.試驗動物遺傳學質量把握 嚴格的繁育制度和遺傳學質量檢測 1. 遺傳學質量檢測的 “四 E”原就 四 E 原就：精確 exact,簡便 easy,有效 efficie

6、nt,經濟 economic2. 遺傳學質量檢測的方法： . 生化標志基因位點測定 鑒定某個品系或個體的基本方法 . 皮膚移植 同品系的個體間能相互接受皮膚移植 對頑皮膚,旋轉 180 度 常用尾部皮膚移植法,植皮后至少觀看 100 天,只有在 100 天以上植皮雙方均不發(fā)生排斥,才能正式待測小鼠 或大鼠的遺傳純和性；在對已知品系檢測時,如急性排斥占手術例數 仍是其他緣由造成的結果； 兩塊皮膚同時長好,可能無遺傳污染； 兩塊皮膚均脫落,手術失敗； 30%,須重新考慮采樣,以確認是技術性 兩塊皮膚,自體移植的正常生長,異體移植的排異脫落,說明確定發(fā)生了遺傳污染； . 下頜骨外形學分析 下頜骨的外

7、形是高度遺傳的性狀,由多態(tài)性位點確定； . 毛色基因交配試驗 A-B-C 野生色 A-bb-C 桂皮色 aaB-C 黑色 aabbC 棕色 -cc 白化 第三章 通常將待測小鼠雌鼠與已知有所謂基因結構的 主要毛色基因,檢定是否純和；如待測小鼠 DBA/2（ aabbCC 棕色） 雄鼠雜,依據 F1 的毛色確定待測小鼠 A, B 位點是純和的,就雜交 交 F1 的毛色只顯現(xiàn)一種顏色； 微生物和寄生蟲學質量把握 1.試驗動物的微生物學和寄生蟲學分類 一般動物 CV的概念 一般動物須不攜帶主要人獸共患病原體和動物烈性傳染病的病原體；通常飼養(yǎng) 在開放環(huán)境里的動物；清潔動物（ CL）的概念 此類動物必需

8、是不攜帶主要人獸共患病原體和動物烈性傳染病的病原體；又不攜帶對動物危害大和對科學爭論影響大 的病原體；通常飼養(yǎng)在屏障環(huán)境； 無特定病原體動物（ SPF）的概念 不攜帶主要人獸共患病原體和動物烈性傳染病的病原體；又不攜帶對動物危害大和對科學爭論影響大的病原體；仍不 攜帶主要潛在感染或條件致病菌和對科學試驗影響大的病原體的動物；通常飼養(yǎng)在屏障環(huán)境； 無菌動物（ GF） 與悉生動物 GN 的概念 無菌動物： 指動物體內外無可檢出的一切生命體的動物； 此種動物在自然界中并不存在, 必需用人為的方法培育出來； 通常飼養(yǎng)在封閉環(huán)境； 悉生動物：指動物體內外攜帶的生命體是已知的；此種動物原是無菌動物,系人為

9、的將指定微生物叢定居其體內外； 一般動物中的弓形蟲污染,必需排除； 清潔動物易感染流行性仙臺?。ǘ荆┖托∈蟾窝撞。ǘ荆?,必需排除； 動物易感染綠膿桿菌,金黃色葡萄球菌,肺炎克雷伯氏菌,必需排除； 第四章 環(huán)境對動物試驗的影響 1.試驗動物的環(huán)境因素組成； （ 1） 物理因素： 溫度,濕度,氣流（包括換氣次數和壓強梯度） ,光照,噪聲和空氣干凈度； （ 2） 化學因素： 養(yǎng)分（飼料,飲水） ,空氣質地（氨濃度） ,消毒劑,殺蟲劑； （ 3） 生物因素： 同種生物間,異種生物間的影響； 建筑設備,（ 4） 居住因素： 籠具,飼養(yǎng)設備,供食器,供水器等 2.物理因素 7 項,空氣質地（氨濃度）的基

10、本含義（照度,空氣干凈度）和國標要求； 試驗動物設施環(huán)境指標（溫度） 第 2 頁,共 13 頁（1） 物理因素：溫度,濕度,換氣次數,氣流速度,壓強梯度,噪聲,光照和空氣干凈度； NH3）,我國對有害 （2） 空氣質地（有害氣體） ：主要來源：動物糞,尿對室內空氣的污染；特點指標：氨濃度（ 氣體的把握標準和檢測項目均以氨濃度為主； （3） 照度和照度單位：勒克司（ LX）-離 1 國際燭光光源 1 米遠直角面的照度為 1LX； （4） 空氣干凈度是衡量空氣中塵埃顆粒濃度的計量單位； 空氣干凈度計量單位 級：每立方英尺空氣中含有大于等于 0.5 微米塵埃粒子數（ 塵埃粒子數 /ft3 ）；國際單

11、位： 0.5 塵埃粒子數 / 升； 1 ft = 28.3L 級（ 個 /ft 3） = 個 / 升 大鼠對濕度要求很高,在空氣相對濕度低于 40% 時易患環(huán)尾癥；（尾巴顯現(xiàn)圓形環(huán)尾紋,初期顯現(xiàn)水腫,出血,皮 膚壞死及脫皮,嚴肅者尾根及尾巴成干性壞疽病變,留下永久性環(huán)行；） 3 居住因素： 1, 主要設施的類型 ,基本操作要求,相應的微生物和寄生蟲級別動物； a.按環(huán)境凈化把握程度分類： 1.開放環(huán)境 （ Open System）：室內正壓,保持溫度,空氣干凈度不作要求； （一般室內配備獨立空調,用以調劑溫度, 并設有進氣風扇和排氣風扇,要求室內保持正壓（進氣量 排氣量）；一般沒有空氣過濾,凈

12、扮裝置,對操作試驗人員, 物品,氣流等也不作單向流程要求； ）可飼養(yǎng)一般級動物或進行一般級動物試驗； 2.屏障環(huán)境 （ Barrier System ）：空氣干凈度 10000 級；恒溫；空氣通過調劑形成清潔走廊,動物試驗室,污染走廊和外 界的空氣壓強梯度差（ 20 帕）；（屏障環(huán)境設施內動物生活環(huán)境受氣候影響較小,設施內外空氣由特地通道送入和排 出；屏障環(huán)境空氣實施過濾凈化,送入內部區(qū)域的空氣干凈度要求達到 10000 級；恒溫處理后的空氣通過調劑形成清 潔走廊,動物試驗室,污染走廊和外界的空氣壓強梯度差（ 20帕）；操作人員穿戴滅菌衣帽鞋和手套,口罩,并遵循 單向流程進,出；飼料,墊料,籠

13、器具等動物生產和試驗所需物品必需進行滅菌；有條件的地方實行電腦監(jiān)控； ）在屏 障環(huán)境設施內可以進行 SPF 級或清潔級動物飼養(yǎng)和試驗； 3.隔離環(huán)境 （Isolation System ）：空氣經過超高效過濾（濾過率達 %）,靜態(tài)空氣干凈度為 100 級；恒溫恒濕；正壓 （ 100-150帕）；（隔離環(huán)境動物試驗設施是在一般環(huán)境下利用專用動物試驗隔離器 （ Isolator ）進行動物飼養(yǎng)和動物試驗； 隔離器內送入和排出的空氣都經過超高效過濾 （達到 99.97%濾過率）,靜態(tài)空氣干凈度為 100 級；操作人員通過透亮薄 膜或有機玻璃進行觀看,通過附設在隔離器上的手套進行試驗和飼養(yǎng)操作；物品經

14、過嚴密包裝,高壓滅菌傳入,而溫 濕度需要室內空調或中心空調把握調劑； ） b.按設施用途和主要功能分類：試驗動物生成設施,動物試驗設施,特別動物試驗設施； 2,屏障環(huán)境操作要求（人員,物品,氣流等） 第 3 頁,共 13 頁 人員走向 物品走向 “箭頭指向不行逆行 ” 人員移動路線 雙走廊或三走廊式 脫衣（更衣室 1）穿衣（更衣室 2）淋浴風淋清潔走廊飼養(yǎng)室或動物試驗室污染走廊 更衣 外部區(qū)域 物品的移動路線 雙走廊或三走廊式 物品 高壓蒸汽滅菌器 傳遞窗 清潔走廊動物試驗室污染走廊外部區(qū)域 渡槽 動物的移動路線 雙走廊或三走廊式 外來動物傳遞窗檢疫室或健康動物 觀看室清潔走廊動物試驗室污染走

15、廊外部區(qū)域 空氣的流淌路線 雙走廊或三走廊式 清潔走廊動物試驗室污染走廊外部區(qū)域（壓力依次遞減 20Pa） 4 .居住因素： 主要設備的結構,工作原理和環(huán)境把握原理（屏障設施中的一般飼養(yǎng)設備, 層流架, IVC,隔離器）,基本操作 要求,相應的微生物和寄生蟲級別動物； （1） 不銹 鋼平板架 +塑料飼育盒：用途：嚙齒類動物試驗觀看；對環(huán)境要求：安放在屏障系統(tǒng)內,可達到清潔 級標準； （2） 不銹鋼兔籠 +托盤：用途：兔子,豚鼠等動物試驗觀看；對環(huán)境要求：安放在屏障系統(tǒng)內,可達到清潔級 標準； 自動水沖式不銹鋼兔籠架：用途：兔子,豚鼠等動物試驗觀看；對環(huán)境要求：安放在開放環(huán)境（3） 內,可達 到

16、一般級標準； （ 4） （ 5） 消化籠,代謝 籠：動物試驗中定量收集糞尿； 干凈層流柜（ Laminar Air Flow Rack,層流架） ：層流架可看作是一個小型屏障系統(tǒng),是一種動物試驗飼 育的專用設備；層流架通過連續(xù)送入高效過濾空氣,在動物飼養(yǎng)層內及玻璃移門前相應范疇形成 20 帕 以上的正壓,為試驗動物供應并保持了安全,干凈,舒適的清潔級或 SPF 級生活環(huán)境,特別適合進行種嚙齒類動物試驗； 各 結構：層流架主要由送風機,空氣過濾系統(tǒng),動物飼養(yǎng)層和把握指示系統(tǒng)等部分組成；一般層流架設有操作 層,雙體層流架仍配有操作臺和物品貯存室； 工作原理：以 36 型層流架為例 :室內恒溫空氣由

17、送風機從進風口吸入,經初效過濾膜,中效過濾袋,高效過 濾器三級過濾,干凈空氣進入靜壓倉,再送入各個動物飼養(yǎng)層；廢氣通過回風槽集合后,經位于頂端的 排風口集中排出室外；層流架的風量,風速和換氣次數可以通過把握面板上的調速器進行調劑； 基本操作要求：有關動物飼養(yǎng)和動物試驗的操作都應在層流架操作層或配套超凈工作臺內行； 飼養(yǎng)和試驗所需的物品如籠具,飲水瓶,試驗器械等必需進行滅菌處理； 飼料可選用小包裝真空 Co60 輻照滅菌料； （ 6） 獨立通氣籠盒系統(tǒng) （ Individually Ventilated Cages,簡稱 IVC）： IVC 是一種新型的動物飼育和動物試驗設備； IVC 主要由

18、籠盒,籠架和把握機箱 等三部分組成； 動物飼養(yǎng)和動物試驗操作在配套設備 -超凈工作臺中進行； （ 7） 無菌隔離器：是一個相對封閉的環(huán)境,內部保持正壓 100-150 帕斯卡,靜態(tài)環(huán)境隔離器室內空氣干凈 度達到 100 級；隔離器只需放置于一般干凈室內,對環(huán)境要求相對低；室內空氣經超高效濾過,由送風機送入隔離器 第 4 頁,共 13 頁室；動物飼養(yǎng)和基本試驗操作通過附著于隔離器上的手套進行； 微生物級別 飼育環(huán)境要求 猴,兔,犬 和豬； 專制型 -即經過爭奪, 一般動物 清潔動物 開放環(huán)境 屏障環(huán)無特定病原體動物 境,層流架, 屏障IVC 無菌動物及悉生動物 環(huán)境,層流架, 隔IVC 5. 生

19、物因素： 離環(huán)境（隔離器） （ 1）同種生物 -把握群內位置分類； A群內位置： 直線型 -即位置高低呈一,二,三 單個直線排列,如 產生一個首領,其余動物位置基本不分高低,如 貓,鼠 ； B.性別影響：雄性成年動物好斗,撕咬打斗等； 用成年雄性動物做試驗,生疏動物個體在一起往往會引起斗毆, 尤以犬,猴,小鼠中的津白 1 號多見,有條件應當單個飼養(yǎng)；室（籠,盒）內飼養(yǎng)動物過多,會造成局部溫度過高, 有害氣體濃度增加并積聚不散,動物簡潔患病死亡,并導致打斗,撕咬；在有條件的情形下,動物試驗以單只盒（籠） 養(yǎng)為好,特別是大動物,腫瘤接種動物和成年雄性動物； （ 2）動物性別和飼養(yǎng)密度對試驗的影響；

20、 飼養(yǎng)密度不同,會使動物的試驗反應產生差異,傳染病的發(fā)生率隨飼養(yǎng)密度的增加而上升；局部溫度過高,廢氣 多,潮濕,飼料不足,易打斗；書 P56 表 4-5 第 五 章 飼料養(yǎng)分對試驗動物的影響 1. 動物的養(yǎng)分和食性； 養(yǎng)分 -動物從外界攝取自身所需要的食物,經消化,吸取,用來保護生命活動的行為或作用； 食性 -因消化器官結構和生理功能上的差異,動物對選擇食物的不同習性； 標準化飼料 -依據不同動物的養(yǎng)分需求和動物的食性,經人工協(xié)作,加工而成的養(yǎng)分全面,適口性好,符合微生物要求的飼料； 2. 把握試驗動物飼料概略養(yǎng)分的組成； 飼料分為：有機飼料：蛋白質,脂肪,碳水化合物（無氮浸出物,粗纖維） ,

21、維生素； 無機飼料：水分,灰分（無機鹽） ； 3. 熟識草食,雜食,肉食動物對某些養(yǎng)分成分的需求量的區(qū)分； 脂肪,蛋白質：草食動物 雜食動物 雜食動物 肉食動物 4.明白各類動物常規(guī)養(yǎng)分要求,把握 各種動物對養(yǎng)分的特別要求； 特別養(yǎng)分要求： 大小鼠 大鼠和小鼠對養(yǎng)分需要大致相同； 粗蛋白質要求在 20%以上,消化能 15910KJ/kg； 為提高繁育母鼠的受孕率,飼料中應有足夠的維生素 E； 大小鼠自身能夠合成維生素 C,無須在飼料中特意添加； 豚 鼠 屬草食動物,懷孕期長,成熟較晚；飼料粗蛋白含量要求 20%左右； 由于盲腸發(fā)達,能有效地消化利用粗纖維,飼料粗纖維在 16%左右； 豚鼠體內不

22、能合成維生素 C, 必需在飼料中添加； 兔 子 亦屬草食動物；兔飼料中粗纖維含量不低于 15%,粗蛋白質比例也在 15%左右； 一般兔飼料中加入確定量的 干草 ,以提高粗纖維百分比,這對防止兔腹瀉這種常見病是至關重要的； 兔子有 “食糞癖 ”； 犬 屬于肉食動物,飼料中粗蛋白含量要求達到 25-30%,而粗纖維相對比例低一些； 犬對維生素 A, D, B1, B2 需要量較大； 猴 屬于非人靈長類,食性與人相近,對養(yǎng)分要求比較高； 一般以面粉,豆粉,玉米粉,雞蛋,食鹽等制成餅干作為主食； 第 5 頁,共 13 頁猴飼料中粗蛋白質含量占 24-26%左右；猴 對維生素 C 特別敏捷 ,假如缺乏可

23、造成牙齦出血,精神萎靡,長期缺 乏或不足會導致死亡； 每天定量供應新穎水果和蔬菜,或在主食中加入維生素添加劑,可以防止猴維生素缺乏癥的產生； 5.試驗動物的飲水要求（一般要求,滅菌要求 , 酸化要求）； . 水質要求：城市飲用水三級標準 . 凈化處理：過濾；凈水 . 酸化處理：用鹽酸將飲水 pH 調整到 ,抑制細菌的生長 . 滅菌處理：一般級動物可直接給飲自來水,清潔級以上試驗動物將自來水瓶裝后,進行滅菌處理； 6.把握物品（飼料,飲水等）主要滅菌方法； . 消毒 -主要用化學方法在一般環(huán)境中抑制或殺死微生物 . 滅菌 -在特別包裝的條件下,完全殺滅微生物 （ 1）高溫高壓蒸氣滅菌：最經典,牢

24、靠 A. 預真空滅菌（俗稱“ 干消毒”）： 131 4min；適合于飼料, 籠具,手術器械等； B.一般高壓滅菌（俗稱 “濕消毒 ”）：120 20min 左右；飲水 一般多接受這種方法； （ 2）輻射滅菌 俗稱 “冷消毒 ”； 飼料預先分成定量小包裝（一般每包 2kg）,密封,抽真空,然后用確定劑量的 Co 60 照射；由于射線穿透力強, 滅菌成效好,飼料中養(yǎng)分成分保持完好；動物試驗首選這種小包裝輻照管,使用便利,貯存時間也相對要長一些； （ 3）微波滅菌： 接受專用工業(yè)微波爐, 小規(guī)模也可以使用家用微波爐進行飼料滅菌； 微波具有對金屬固體產生反射,對非金屬固體產生穿透,對液體產生吸取作用；

25、飼料含有 磁控管發(fā)生高頻微波 （ 108-11 / 秒）,8-10%水分,吸取微波后水 分子產生高頻震蕩,在產熱的同時達到了滅菌作用； （ 4）干烤：在 80-100 下烘烤 2-3 小時；干烤方法簡潔,但時間較長,簡潔造成飼料變色,焦黃,并使養(yǎng)分成分受到 破壞； （ 5）環(huán)氧乙烷滅菌：方法簡潔,可能污染環(huán)境； 第六章 人類疾病動物模型 1.人類疾病動物模型的定義； 人類疾病動物模型 Animal models of human diseases是 指在醫(yī)學爭論中,在動物身上建立,或形成類似人類疾病動 物； 通過動物模型直接,或間接反映疾病的發(fā)生和進展過程,在明白疾病的基礎上開創(chuàng)和改進,優(yōu)化疾

26、病的治療； 2.醫(yī)學動物模型基本分類； （ 1）誘發(fā)性動物疾病模型 Experimental animal model是指以物理學,化學,生物學等致病手段,人為導致動物組織,器官或整體成為人類疾病動物模型；使其在功 能,代謝,外形結構等方面發(fā)生轉變,即人為地誘發(fā)動物產生類似人類疾病模型； （ 2）自發(fā)性動物模型 Spontaneous animal model是指不加任何人工誘發(fā), 在自然條件下動物自然產生的疾病, 或者由于基因突變的反常表現(xiàn), 通過遺傳育種保留 下來的動物疾病模型；其中包括近交系的腫瘤疾病模型和突變系的遺傳性疾病模型； （ 3）抗疾病型動物模型 Negative animal

27、 model是指特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生；因此,可借以探討何種動物對該疾病有自然的抗擊力； （ 4）生物醫(yī)學動物模型 Biomedical animal model是指以動物生物學特點供應人類疾病相像表現(xiàn)的疾病模型； 3.使用人類疾病動物模型意義； 1防止直 接試驗所造成危險； 2臨床上平常不易見的 疾病可以隨時復制； 3增加方法學上的可比 性； 4樣品易得,試驗方法簡化； 5有助 于明白疾病的本質； 4.明白常用的模型動物SHR,WKY； 高血壓模型（ SHR 大鼠）：該鼠自發(fā)性高血壓的變化與人類相像,并且可產生腦血栓,梗塞,出血,腎硬化,心 肌梗死和纖維化等變化；在 SHR 的基礎

28、上,又培育了兩個亞 SHRSP和 SHRSR,前者產生后,除顯現(xiàn)嚴肅高 系 血 壓外 ,90以上患腦卒中 腦出血和腦栓塞 ； SHRSR 就是抗腦卒中的自發(fā)性高血壓大 鼠； SHR：自發(fā)性高血壓大鼠（是近交系） 第 6 頁,共 13 頁SHRSP： 高卒中 自發(fā)性高血壓大鼠 SHRSR： 抗卒中 自發(fā)性高血壓大鼠 WKY wistar-Kyoto,與自發(fā)性高血壓大鼠相匹配的同源正常血壓大鼠 5.免疫缺陷動物的定義 免疫缺陷動物是指由于先天性遺傳突變,或用人工方法,培育一種或多種免疫功能缺陷的動物； 6.熟識 常見的免疫缺陷動物,基因符號 按免疫功能缺陷的種類常分為 :1T-淋巴細胞功能缺陷動物

29、：裸小鼠,裸大鼠,裸豚鼠等；裸基因 :nu2B-淋巴細胞功能缺陷動物： CBA/N 小鼠, Arabin 馬和 Quarter 馬等馬屬動物； 3NK 細胞功能缺陷動物： Beige 小鼠； 4聯(lián)合免疫缺陷動物： Scid 小鼠（ T, B 淋巴細胞功能雙缺陷）等其他人工定向培育的多種免疫功能缺陷動 物； 裸小鼠 :常見的有 BALB/c-nu, C3H-nu, C57BL/6-nu 等； 裸大鼠 :-Rnn 雌不孕 Beige（ bg）小鼠：純合子的親本,雌可孕 SCID 小鼠： 16 號染色體上,單突變基因,突變符合scid為 Motheaten 小鼠：突變基因位于第 6 號染色體 人工定

30、向培育的多聯(lián)免疫缺陷型小鼠： 基因 7.把握裸小鼠基本生物學特點 NK 細胞缺陷的 Beige 基因, T 細胞缺陷的 nu 基因和 B 細胞缺陷的 Xid裸小鼠：是指先天性無胸腺,且無被毛的小鼠 ,簡稱為裸小鼠；其突變基由于裸基因 ,符號為 :nu,是一個隱性突變基 因 ,位于小鼠的第 11 號染色體上；目前,此基因已導入到不同品系的小鼠中 ,常見的有 BALB/c-nu, C3H-nu,C57BL6/ -nu等 裸鼠的解剖生理特點： 毛囊發(fā)育不良,外觀上看幾乎沒有被毛,故稱“裸鼠” ； 無胸腺,僅有胸腺殘跡或反常的胸腺上皮；故不能分泌胸腺素,不能使 T 細胞正常分化,而 T 細胞是移植排異

31、 的主要細胞；細胞基本正常但功能欠佳；有較高的 NK 細胞數量和活性； 由于 IgG 的產生需要 T 細胞和巨噬細胞的參與,其 免疫球蛋白主要是 IgM,只有極少量的 IgG； 自發(fā)腫瘤現(xiàn)象罕見,可能與 NK 細胞的活性高有關； 裸鼠易患鼠肝炎和病毒性肺炎； 純合裸鼠母性極差, 且受孕率低, 乳房發(fā)育不良； 通常以純合雄鼠與帶有 可獲 1/2 裸鼠； 裸鼠需飼養(yǎng)在屏障環(huán)境中； 8.把握裸小鼠繁育,保持方式 nu 基因的雜合雌鼠 （ nu/+ nu/nu ） 通常以純合雄鼠與帶有 nu 基因的雜合雌鼠 （ nu/+ nu/nu ）可獲 1/2 裸鼠； 9.把握近交系裸小鼠裸基因導入方法 （ 1）

32、保持原種（把題目給的具體名稱寫入）近交系（ （ 2）導入 Nu（裸基因） B S） （ 3）反復自交 +回交 （ 4） Nu/Nu Nu/+ 裸鼠繁育接受該方式 （ 5）獲得與原近交系背景一樣的 BALB/c-nu小鼠 SCID 小鼠的全稱為 “重癥聯(lián)合免疫缺陷”小鼠；其突變點在 16 號染色體上,為單基因突變,突變符號為 scid,當其 純合時,性狀表現(xiàn)為淋巴細胞抗原受體基因編碼次序反常,造成 有多種不同品系的 SCID 小 鼠； SCID 小鼠的生物學特點： T,B 淋巴細胞不能分化為特異性的淋巴細胞,目前已 外觀與一般小鼠無異樣,但其胸腺,脾,淋巴結等免役器官的重量不到正常小鼠的 30%

33、；其胸腺多為脂肪組織包 圍,沒有皮質結構,僅殘存的髓質；外周白細胞較少,淋巴細胞僅占總數的 10-20%（正常小鼠為 70%）； 飼養(yǎng)環(huán)境 :SCID 小鼠需在屏障環(huán)境（空氣干凈度萬級以下）中,方能存活一年以上；其繁殖生產,以近交系繁殖 方 式進行,產子率和離乳率均低于正常小鼠； 第七章 動物試驗的設計和實施 1.動物試驗設計的原就 第 7 頁,共 13 頁a.課本 P116 防止直接在人身上作進行試驗,在生命科學爭論的設計中必需遵循以下原就： 1） 相像性 在人為設計的條件下,盡可能選擇相像的動物作為人的替代者；所獲得的試驗結果應金可能類似 于人類的情形；如能找到與人類疾病相同的動物自發(fā)模型

34、時最為理想的,但此類動物到底有限,通常需要 誘發(fā)； 2） 牢靠性 科研結果必需具備牢靠性, 要求在爭論中使用牢靠性高的試驗動物 -即遺傳學質量和微生物學質 量,寄生蟲學質量均符合國家標準的動物,并在符合試驗動物環(huán)境及設施的國家標準規(guī)定的試驗環(huán)境中完 成試驗； 3） 重復性 科研結果必需能夠重復,不能重復的爭論結果毫無意義；所以動物模型應能重復培育,且能實現(xiàn) 標準化； 4） 可控性 在爭論課題中使用的動物模型應考慮到今后臨床應用和便于把握其疾病的進展, 以利于分析試驗 結果； 5） 經濟性 在設計和執(zhí)行課題方案時,對選用的動物和接受的方法應符合課題經費預算； b. PPT：動物試驗的設計 :1.

35、分組隨機化；每組（包括各試驗組和對比組）數量盡量相等,目的是削減試驗誤差； 2.預試驗 3.數據處理方法 三個原就： .對比：用以把握試驗條件； .隨機：使試驗分組的客觀化,削減抽樣誤差； 重復：試驗要有足夠的樣本數及重復次數,以提高結果的牢靠性； 2.試驗動物選擇的 4 項基本原就 P118 1）選擇標準化的試驗動物 2）選擇在結構,技能,代謝以及發(fā)病機理與人相像的試驗動物 3）選用解剖,生理上有特點的動物 4）選用特別生理反應的動物以符合不同的試驗要求 3.動物試驗的分組 P1211分組原就 隨機性（機遇相等的原就） 目盡量相等； ,目的是削減干擾因素造成的試驗誤差；各組內動物（包括對比組

36、）數 2對比組設立的幾種方法 空白,試驗,有效,配對,交叉對比,試驗重復和確定,歷史對比； 第八章 動物試驗的 “3R”原就 一, “3R”的概念 P152替代 用其他方法而不用（高等）動物達到試驗目的； （是使用 其他方法而不用動物, 以達到某一試驗目的, 或者說使用沒有知覺的試驗材料代替以往使用神志清醒的 活的脊椎動物進行試驗的方法；簡潔的說就是應用無知覺的材料的科學方法來代替活體試驗； ） （ 1）低等動物替代高等動物（ 2）用組織,細胞替代整體動物（ 3）用分子生物學方法替代整體動物試驗（ 4）計 算機模擬,聲像教學（ 5）人工合成材料替代動物原料 2. Reduction 削減 用較

37、少的動物獲得同樣多的試驗數據；用同樣多的動物獲得更多的試驗數據； （是 在科學爭論中,用較少量的動物獵取同樣多的試驗數據,或者使用確定數量的動物能獲得更多試驗數據的方法, 即在動物試驗過程中削減動物使用數量； ） 3）替代 : 低等替代高等（ 4）重復使用動物（ 5）合 1）利用已有數據（ 2）合理設計,合理使用數據統(tǒng)計方法（ 理選擇動物 6）規(guī)范試驗操作,留意環(huán)境把握（ 7）試驗協(xié)作,提高使用率 3.Refinement 優(yōu)化 改進或完善試驗程序,減輕或削減因試驗給動物造成的疼痛和擔憂； （通過改進和 完善試驗程序,盡可能減輕或削減給動物造成的藤東和擔憂,提高動物福利的方法,以利動物試驗獲得

38、牢靠的結 果；） （ 1）優(yōu)化試驗方案,試驗指標（ 2）優(yōu)化試驗條件,試驗技術（ 3）改進涉及動物的 操作技術 二,動物福利法的核心： “善待活著的動物,削減死亡的痛楚 ” 三,安樂死概念和方法 試驗過程中或試驗完成后,不欲保留的動物實行“無痛楚”處死的科學方法； （ 1）頸椎脫臼法 （適合小動物） （ 2）空氣栓塞法（ 3）急性大出血法 （適合較大的動物） （ 4）過量麻醉法 （都適合） 第 8 頁,共 13 頁四,疼惜動物的意義 1,挽救瀕臨滅亡的動物物種； 2,使動物免受損害； 3,使動物康樂； 五,動物福利的價值 1.社會價值：疼惜動物,善待動物是人類的責任,是人類道德文明的表達,是人

39、與大自然和諧進展的需要；具 有愛心的人社會責任感強； 2 科學價值：實施動物福利將使科學試驗成效更好,結果可信,客觀真實,使科研水平與國際接軌； 3.經濟價值：實施動物福利,削減了應激反應,有助于供應優(yōu)質高產的動物產品,提高試驗效率 4.有用價值： 防止敵對,使試驗更順當,節(jié)省時間； 第 九 章 動物試驗的基本技術和方法 1.動物編號永久性標記方法 由內側到外側 20 40 7 3左耳（十位數） 右耳（個位數） 90 圓孔為為 1, 2 ,3 （背側） 單缺口為 4, 5 ,6 雙缺口為 7, 8 ,9 2.動物被毛去除方法 1. 剪毛法：用彎頭剪逆毛方向剪 適用于各種試驗動物 2. 拔毛法：

40、常用于兔的耳緣靜脈注射 3. 剃毛法：專用剃毛刀； 適用于大動物；為對動物刺激或可能造成 損耗最小 的方法； 4. 脫毛法：脫毛劑 3.常用動物安全采血量,最大灌胃劑量 動物種類 最大安全采血量 最小致死采血量（ ml） （ ml） 小鼠 2最大容積 5體重（ g） 最大容積（ ml） 大鼠 5豚鼠 1010兔 4050犬 30015猴 體重（ g） 60動物 動物 種類 20-24（ ml） 種類 250-3004-5小鼠 豚鼠 大鼠 25-304-5兔 30010030100-199150200-249200第 9 頁,共 13 頁250-300貓 10kg-15kg50-80300犬 1

41、00-050200-5004.常用麻醉方法和麻醉時的留意事項 麻醉的目的是,排除試驗過程中引起的痛楚和不適,確保試驗動物的安全和動物試驗的順當進行,也是動 物試驗倫理的一個重要方面； 麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉兩種； 1）大多數接受全身麻醉,麻醉藥通過呼吸道吸入,靜脈,肌肉,腹腔注射等途徑,進入試驗動物體內, 使其產生短時間意識丟失,痛覺消逝,肌肉放松和反射抑制等中樞神經系統(tǒng)抑制現(xiàn)象；當麻醉藥從體內排出或 在體內代謝破壞后,試驗動物逐步清醒,不留后遺癥；全麻有吸入麻醉法和注射麻醉法兩種途徑,吸入麻醉法 用揮發(fā)性麻醉藥,注射麻醉法用非揮發(fā)性麻醉藥； 2）局部麻醉： 普魯卡因：是無刺激性的局麻藥

42、物； 特點：麻醉速度快,注射后 13 分鐘就可產生麻醉；可以保護 3045 分鐘；對皮膚和黏膜穿透力很弱, 需要注射給藥才能產生局麻成效；它可以使血管舒張,易被吸取入血液而失去成效；在其溶液中加入腎上腺素 （每 100ml 加入 0.1%腎上腺素 ）可以使麻醉時間延長 12 小時； 效力和穿透力比普魯卡因強； 利多卡因： 效力和穿透力比普魯卡因強的卡因： 化學結構和普魯卡因類似, 試驗動物麻醉應留意的事項 麻醉之前應禁食； 麻醉之前應精確稱量動物體重,作為運算麻醉劑用量的依據； 應留意不同麻醉藥對動物的作用是不同的,如戊巴比妥鈉,硫賁妥鈉等能抑制心肌收縮力,使肌肉放松,而氯胺 酮就相反； 大動

43、物犬,猴,羊等麻醉前半小時應注射麻醉前給藥如阿托品和苯巴比妥鈉； 靜脈注射麻醉藥時必需緩慢,邊注射邊觀看動物的意識,角膜反射,肌肉緊急性和對疼痛的反應,達到麻醉要求 時應停止注射； 大動物手術時應配備麻醉師,在麻醉過程中親熱觀看動物的反應,如血壓,脈搏,呼吸和體溫,準時調劑麻醉藥 劑量,保證手術順當進行； 動物在麻醉期間,手術后至清醒期體溫會下降,應留意手術室的室溫； 留意術后護理； 預備好補充麻醉劑和解藥； 5.動物處死方法,以過量麻醉為優(yōu)選 6.SYXK,“ SCXK”含義 試驗動物使用許可證： SYXK（滬） 2022-0026 試驗動物生產許可證： SCXK（滬） 2022-0001

44、7.* 廢棄物處理方式焚燒,深埋 8.常用動物一些顯著特點 小鼠沒有汗腺,通過身體水份的蒸發(fā)來防止體溫上升；體溫上升并不引起血壓上升； ICR 小鼠 是國際通用的封閉群小鼠 NIH 小鼠 白化,免疫反應敏捷性較好 AKR 小鼠 白化,是白血病高發(fā)品系 ;缺乏補體 C5 易誘發(fā)免疫耐受性,對白血病因子敏捷,對百日咳組織胺易感 因子敏捷,常用于腫瘤學和免疫學等的爭論； BALB/cA 小鼠 白化； 6 月齡后顯現(xiàn)免疫球蛋白增多癥,主要是 IgG 和 IgA 量增加；老齡鼠易發(fā)生心臟病變, DBA/2 小鼠 淡棕色；血細胞多,血壓低,維生素 K 缺乏引起死亡率高,心臟有鈣鹽沉積 大鼠 不會嘔吐 （前

45、胃和胃體由一界限嵴隔開,食管通過此嵴進入胃小彎） ； 無膽囊； 汗腺不發(fā)達,爪底有汗腺,尾上有短毛和環(huán)狀角質鱗片是散熱器官； 雄性大鼠有許多發(fā)達的副性腺 不宜作為鉤體病的爭論（余敏捷） F344 大鼠 白化 腫瘤自發(fā)率高 第 10 頁,共 13 頁SHR 大 自發(fā)性高血壓大鼠 WKY 大鼠 鼠 豚鼠不能合成維生素 C 兔子食糞癖 SHR 大鼠的正常血壓對比組 動物編號永久性標記方法示意圖 （操作題） 由內側到外側 20 40 73左耳（十位數） 右耳（個位數） 90 圓孔為為 1, 2,3 單缺口為 4, 5,6 雙缺口為 7, 8,9 A-B-C 野生色 （背側） A-bb-C 桂皮色 aa

46、B-C 黑色 aabbC 棕色 一 . 用復隱性灰色小鼠 DBA（雄性,毛色基因型為： aabbCC對某白化小鼠（雌性）進行毛色基因交配試驗,它 們的 F1 代顯現(xiàn)黑色和棕色兩種毛色小鼠： （ 1）該白化小鼠毛色基因是否純合？（ 2）該白化小鼠毛色基因型是什么？ （ 3）用簡圖說明檢測過程； 答：（ 3） DBA （ aabbCC ） 待測鼠（ .ccabC .c F1 代 : a.b.Cc （ aaBbCc aabbCc） （ 1）由于 F1 代顯現(xiàn)兩種毛色 ,該白化小鼠毛色基由于雜合； （ 2）由于 F1 代顯現(xiàn)黑色和棕色兩種毛色小鼠,說明 “B”位點雜合,該白化小鼠毛色基因型是： aaB

47、bcc； （ F1代中黑色鼠毛色基因型為 aaBbCc棕 ; 色鼠毛色基因型為： aabbCc） 二用復隱性灰色小鼠 DBA（雄性,毛色基因型為： aabbCC對某白化小鼠（雌性）進行毛色基因交配試驗,它們的 F1 代全都是野生色小鼠： （ 1）該白化小鼠毛色基因是否純合？（ 2）該白化小鼠毛色基因型是什么？（ 3）用簡圖說明 檢測過程；（）對比下表,該白化小鼠可能是什么品系； 答：（ 3） DBA （ aabbCC ） 待測鼠（ .ccabC .c F1 代 :a.b.CcAABBcc； （ F1； （ 1）由于 F1 代顯現(xiàn)一種毛色 ,該白化小鼠毛色基由于純合； （ 2）由于 F1 代全為野生色小鼠,說明 “A,B”位點均為顯性純合,該白化小鼠毛色基因型是： 代野生色鼠毛色基因型為 AaBbCc ） 4該白化小鼠可能是 SJL/J 品 系 .小鼠品系名稱 毛色基因型 B