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1、1實(shí)驗(yàn)四 對(duì)比試驗(yàn)及方法評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的性能判斷實(shí)驗(yàn)原理 用兩種方法同時(shí)檢測(cè)一批樣本,計(jì)算出兩種方法間測(cè)定結(jié)果的差異,用以估計(jì)試驗(yàn)方法在檢測(cè)樣本時(shí)可能引入的誤差。當(dāng)選擇準(zhǔn)確度已知的常規(guī)方法作為比較方法時(shí),部分誤差來(lái)自比較方法,其他部分誤差則來(lái)自試驗(yàn)方法。若選擇準(zhǔn)確度高的參考方法作為比較方法,可把方法間的任何分析誤差都?xì)w于試驗(yàn)方法。本實(shí)驗(yàn)以HK法測(cè)定血糖的參考方法作對(duì)比來(lái)評(píng)價(jià)GOD-POD法測(cè)定血糖的總系統(tǒng)誤差。2試劑與器材1.GOD-POD法試劑盒2. HK法試劑試劑盒3.血清標(biāo)本40份(其濃度盡可能覆蓋線性范圍)。 3500nM操作步驟1.取40份血清標(biāo)本,每份標(biāo)本用GOD-POD和HK兩種方法,
2、分別作雙份測(cè)定。2.每組兩人,每人測(cè)定10個(gè)標(biāo)本,共計(jì)40個(gè)標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)報(bào)告寫40個(gè)標(biāo)本。6對(duì)比試驗(yàn)-HK法測(cè)定結(jié)果ABOTT C800078加入物 B S 1 2 3 4血清 (l) 20 20 20 20標(biāo)準(zhǔn)液(l) 20 蒸餾水(l) 20 工作試劑(ml) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0混勻,置37水浴10分鐘,500nm波長(zhǎng),空白管調(diào)零,讀取測(cè)定管和標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度值(A)標(biāo)本測(cè)定按下表操作計(jì)算1.將實(shí)驗(yàn)結(jié)果作散點(diǎn)圖,圖中以x軸代表比較方法的測(cè)定值,y軸代表實(shí)驗(yàn)方法的測(cè)定值,在坐標(biāo)紙上作圖應(yīng)散布于整個(gè)測(cè)定范圍之內(nèi)。 通過(guò)散點(diǎn)圖可以觀察到,測(cè)定數(shù)據(jù)的分布趨勢(shì),若所有測(cè)定值在
3、坐標(biāo)圖中大致呈45角的直線分布,提示被實(shí)驗(yàn)方法與比較方法的測(cè)定結(jié)果之間存在密切的相關(guān)關(guān)系;若呈明顯的曲線分布,雖然在統(tǒng)計(jì)學(xué)上可按照非線性資料處理,但在這種情況下,實(shí)驗(yàn)方法被采用的可能性極小。2.如果x、y之間呈直線關(guān)系,可作直線回歸的統(tǒng)計(jì)處理,計(jì)算回歸方程y=a+bx和相關(guān)系數(shù)r。其結(jié)果可以顯示實(shí)驗(yàn)方法的測(cè)定結(jié)果有無(wú)系統(tǒng)誤差存在。截距a反映恒定系統(tǒng)誤差的大小,斜率b反映比例系統(tǒng)誤差的大小,相關(guān)系數(shù)r反映兩種方法相關(guān)性的密切程度(相關(guān)計(jì)算公式請(qǐng)參閱統(tǒng)計(jì)學(xué)教材)。910在評(píng)價(jià)一個(gè)實(shí)驗(yàn)方法時(shí),最理想的情況是回歸直線呈45角通過(guò)零點(diǎn),這時(shí)a=0,b(x/y比值)=1.0,表明恒定系統(tǒng)誤差和比例系統(tǒng)誤差
4、均不存在。但x和y都會(huì)有隨機(jī)誤差,a和b只是估計(jì)值,會(huì)有所波動(dòng),只要偏離程度比較小,該方法就能用于臨床檢驗(yàn)的常規(guī)分析。相關(guān)系數(shù)(r)可作為被評(píng)價(jià)方法可否被接受的一項(xiàng)統(tǒng)計(jì)學(xué)指標(biāo)。理想情況3.根據(jù)計(jì)算出的回歸方程的a、b值,可以計(jì)算候選方法系統(tǒng)誤差(SE)的大小,并與不同醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)的允許誤差(EA)作比較,對(duì)被評(píng)價(jià)方法的系統(tǒng)誤差的可接受性作出判斷。SE的可接受性判斷指標(biāo)為 血糖測(cè)定的Xc=2.8 mmol/L、6.7mmol/L、8.9mmol/L時(shí),Barnett提出的EA值為0.56mmol/L。作為比較方法,理論上要求應(yīng)該沒(méi)有誤差, 但在臨床實(shí)驗(yàn)室這是不可能達(dá)到的, EP9-A文件指出,如果比較方法(X)的取值范圍有足夠?qū)?比較方法的這種誤差在回歸分析中可忽略不計(jì)??捎孟嚓P(guān)系數(shù)(r)來(lái)粗略估計(jì)X取值范圍是否足夠?qū)?。r0.975(或者是r20.95)則認(rèn)為X范圍適合。注意事項(xiàng)1.選擇試驗(yàn)樣品 一般作40100例,包括常規(guī)工作中可能遇到的整個(gè)分析范圍(其中25%的標(biāo)本低于參考范圍下限,50%標(biāo)本在參考范圍之內(nèi),25%標(biāo)本高于參考范圍),選擇合適的樣品分析范圍比增加樣品的數(shù)目更為重要。2.試驗(yàn)方法 一般每個(gè)樣品用兩種方法各測(cè)一次,最好每個(gè)樣品用兩種方法各測(cè)定兩次,在做雙份第二次測(cè)定時(shí),標(biāo)本順序應(yīng)全
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