C-反應(yīng)蛋白及臨床應(yīng)用1課件

1、C-反應(yīng)蛋白及臨床應(yīng)用楊紅玲Protein Structure CRP結(jié)構(gòu)C反應(yīng)蛋白的生理和生化 在細(xì)胞因子IL-6家族誘導(dǎo)下，CRP在肝中合 成迅速。 正常合成率為 l10 mgd，急性炎癥時(shí)每 天合成超過(guò) lg/d。 在急性相反應(yīng)高峰時(shí)肝大量合成蛋白，其中 20是合成CRP。 當(dāng)IL-6刺激物缺乏時(shí)，在 24 h內(nèi)合成率降 至正常。 循環(huán)中CRP半衰期約19h，但一旦它與配體結(jié) 合，可快速的被清除。 肝外合成對(duì)血清水平影響作用很小。CRP的生物學(xué)功能CRP的生物學(xué)功能-機(jī)理結(jié)合壞死的內(nèi)源性物質(zhì) 在鈣離子存在的情況下，CRP能結(jié)合壞死的內(nèi)源性物質(zhì)和效應(yīng)細(xì)胞, 當(dāng)正常的脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)被破壞致使內(nèi)

2、部磷脂暴露時(shí)，CRP可發(fā)生與宿主細(xì)胞的結(jié)合。在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的鼠模型中，注射CRP可改善SLE的狀況。人CRP基因的多態(tài)性導(dǎo)致的低基礎(chǔ)水平表達(dá)增加了發(fā)生系統(tǒng)性狼瘡的風(fēng)險(xiǎn)。CRP量的減少可能與SLE發(fā)病機(jī)理有關(guān)。 CRP量的減少使結(jié)合的細(xì)胞碎片減少。CRP的生物學(xué)功能-機(jī)理 結(jié)合外源性物質(zhì) 細(xì)菌、真菌、寄生蟲(chóng)中的細(xì)胞壁磷酸膽堿。CRP具有保護(hù)機(jī)體抗細(xì)菌感染的能力。 CRP 保護(hù)機(jī)體抵抗致命性的細(xì)菌脂多糖和各種炎癥介子的能力。 CRP的生物學(xué)功能-機(jī)理結(jié)合配體的CRP激活下列生物系統(tǒng)，導(dǎo)致配體的消除：CRP對(duì)補(bǔ)體系統(tǒng)的激活.CRP結(jié)合IgGFcR，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞的活性。CRP的調(diào)理性質(zhì)，調(diào)理即刺

3、激細(xì)胞吞噬作用。CRP和血小板激活因子(PAF)結(jié)合抑制PAF刺激的血小板聚集。急性相蛋白CRP合成的生物調(diào)控CRP基因位于1號(hào)染色體短臂，只有一個(gè)內(nèi)含子，其分離編碼信號(hào)肽的區(qū)域。肝臟CRP合成的調(diào)節(jié)主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄階段。由IL-6誘導(dǎo)，IL-1可增加此作用。 CRP啟動(dòng)子最近區(qū)為STAT3 和 Rel 蛋白的結(jié)合部位。這些因子的相互作用增加DNA 結(jié)合C/EBP家屬成員的穩(wěn)定性，從而有效地誘導(dǎo)了CRP基因的表達(dá)。神經(jīng)元細(xì)胞、動(dòng)脈硬化斑塊、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞也可以合成CRP。在這些部位的調(diào)節(jié)機(jī)制還不清楚。修飾的CRP(m-CRP) -Modified CRP目前認(rèn)為m-CRP是原CRP的單體。與

4、天然CRP不同,表現(xiàn)在分子大小,溶解度,抗原性,帶電荷數(shù)等方面的差別. m-CRP具抗菌作用。m-CRP具有強(qiáng)大地誘發(fā)炎癥的作用。方法靈敏度參考獻(xiàn)試管內(nèi)沉淀試驗(yàn)- JExpMed1930;52561毛細(xì)管內(nèi)沉淀試驗(yàn)1020mg/LAmJMed1950;8445改良平板雙擴(kuò)散法1020mg/LIntArchAllergy1962改良瓊脂柱擴(kuò)散法3.0mg/LProcSocExpBiol1955改良單擴(kuò)散法1.0mg/L ActaPatholMicrobiolScand瓊脂糖凝膠電泳法1.0mg/LClinChimActa1969放射電免疫擴(kuò)散法10g/LJClinLabInvest1973補(bǔ)體結(jié)

5、合試驗(yàn)0.6mg/LProcSocExpBiol1954膠乳凝集試驗(yàn)1.0mg/LNature(London)1961高敏乳膠增強(qiáng)濁度 0.35mg/ml Dade Germany2000熒光抗體法 Nature(London)1961放射免疫測(cè)定法 3g/L JLabClinMed1976檢測(cè)方法 檢測(cè)方法 - 標(biāo)記免疫測(cè)定ELISA和免疫發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光法等都可用于CRP的測(cè)定?；瘜W(xué)發(fā)光法的靈敏度和定量精確度可與RIA媲美,而無(wú)同位素污染,試劑穩(wěn)定,分析速度快。CRP-POCT(床邊試驗(yàn))法 ELISA干片法。把磷脂酰膽堿(PC)化學(xué)交聯(lián)固定于載體。被測(cè)CRP與載體的PC結(jié)合。被酶標(biāo)記的抗

6、CRP單抗結(jié)合?？伸`敏、特異性檢測(cè)CRP,約5分鐘可得結(jié)果.。檢測(cè)方法 - 膠乳增強(qiáng)試驗(yàn)（shCRP）：常規(guī)CRP檢驗(yàn)方法可在感染或組織損傷時(shí)檢測(cè)出CRP10mg/L。該檢測(cè)方法具有較高的靈敏度。這個(gè)水平（0.110mg/L）的C反應(yīng)蛋白又被稱(chēng)為超敏C反應(yīng)蛋白（hsCRP）。 CRP檢測(cè)的評(píng)估1、半定量：膠乳凝集試驗(yàn)等已棄用。2、定量：散射免疫比濁法、透射免疫比濁法：是目前常用方法。檢測(cè)限度為5150 mgL ，CV5% 。膠乳增強(qiáng)試驗(yàn)-shCRP檢測(cè)：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和熒光免疫分析：有潛在的靈敏度優(yōu)勢(shì)。膠乳增強(qiáng)試驗(yàn)-shCRP檢測(cè)方法很大程度提高了敏感度。CRP檢測(cè)對(duì)標(biāo)本的采

7、集也無(wú)特殊要求。高濃度的類(lèi)風(fēng)濕因子可產(chǎn)生CRP假性升高。CRP篩查的費(fèi)用遠(yuǎn)小于其他心血管檢查的費(fèi)用。臨床應(yīng)用_參考范圍CRP參考范圍中值成人和兒童0.0688.2 mg/L0.58 mg/L新生兒，臍血0.6 mg/L出生后第4天至1個(gè)月的嬰兒1.6 mg/L分娩母親47 mg/L臨床意義自身免疫或免疫復(fù)合物病。系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多肌炎、系統(tǒng)性硬化癥CRP無(wú)明顯改變，所以可用于與風(fēng)濕性疾病鑒別。若存在發(fā)熱為并發(fā)感染而非疾病的惡化。臨床意義-癌癥已升高或正在升高的CRP預(yù)示著不良的預(yù)后及常提示轉(zhuǎn)移。結(jié)腸癌是導(dǎo)致死亡人數(shù)第二多的癌癥。 研究顯示，血液C-反應(yīng)蛋白含量最高的那些人患結(jié)直腸癌的危險(xiǎn)，是C

8、-反應(yīng)蛋白含量最低者的兩倍.臨床意義 評(píng)估疾病活動(dòng)性和療效監(jiān)控 CRP為 1050 mgL表示輕度炎癥。 CRP升至 100mgL表示較嚴(yán)重的疾病，它的嚴(yán)重程度在必要時(shí)需靜脈注射。CRP 100 mgL表示嚴(yán)重的疾病過(guò)程并常表示細(xì)菌感染的存在。臨床意義-抗生素的治療監(jiān)測(cè) 系列血漿CRP的測(cè)定，可用來(lái)作為下列情況的治療監(jiān)測(cè)： 在許多感染時(shí)最有效使用抗生素治療。根據(jù)CRP水平的變化來(lái)決定抗炎藥物的劑量。在CRP下降至正常時(shí)，中 斷抗菌素治療。在高危人群缺少微生物學(xué)診斷時(shí)，為抗生素治療的指引。臨床意義-抗生素的治療監(jiān)測(cè) 臨床意義-外科 患者施行手術(shù)后2472h,血中CRP水平明顯升 高,約在第57天

9、恢復(fù)正常。 凡驟升后持續(xù)高水平多預(yù)示合并感染。 對(duì)中、大手術(shù)患者,在術(shù)前和術(shù)后37天各作 常規(guī)檢測(cè)一次。 凡術(shù)后57天CRP仍持續(xù)高水平者,理應(yīng)懷疑 合并感染,并配合治療作隨訪監(jiān)測(cè)。臨床意義-內(nèi)科 肺炎: CRP100mg/L，強(qiáng)烈提示細(xì)菌感染，如化膿性支氣管炎或肺炎;典型的病毒性肺炎不會(huì)超過(guò)50mg/L。 心血管病，在痛疼開(kāi)始后數(shù)小時(shí)內(nèi)，CRP升高， 3-4d達(dá)高峰，在CK-MB回到正常后7-10d也降至正常。 代謝綜合征 代謝綜合征分組，根據(jù)CRP水平可將為低危險(xiǎn)組，3 mg/臨床意義-婦產(chǎn)科 盆腔炎和子宮附件炎. CRP值升高 盆腔腫塊和子宮肌瘤通常多為陰性。 診斷胎膜早破宮內(nèi)感染. 胎膜早破時(shí)，如母親CRP在產(chǎn)前6-19h超過(guò)50mg/L可作為出現(xiàn)AIS的標(biāo)準(zhǔn)；產(chǎn)后第一天出現(xiàn)的AIS的CRP將比正常分娩時(shí)高出2-3倍。 無(wú)并發(fā)癥的CT和NG感染不會(huì)引起CRP升高。 但擴(kuò)散到盆腔可引起急時(shí)相反應(yīng)。臨床意義-兒科新生兒濃毒血癥:出生3天前CRP10mg/L表示感染.如果CRP在24h