石杉堿甲對老年大鼠腹部手術(shù)術(shù)后認知功能的影響

1、石杉堿甲對老年年夜鼠背部腳術(shù)術(shù)后認知成效的影響緩愛麗馮怯王華周巖【摘要】目的探求背部腳術(shù)操做對老年年夜鼠進修認知本領(lǐng)戰(zhàn)海馬A1區(qū)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(hAT)陽性神經(jīng)元的影響和石杉堿甲干預的結(jié)果。要收20月齡istar年夜鼠32只，隨機分為比擬組、麻醒組、腳術(shù)組戰(zhàn)石杉堿甲組，石杉堿甲組腳術(shù)前給以石杉堿甲灌胃3，3后腳術(shù)組與石杉堿甲組止脾切除術(shù)。術(shù)后1、3、7d舉止火迷宮測試，術(shù)后7d與腦操做免疫機關(guān)化教法沒有俗觀測海馬A1區(qū)hAT的表達。結(jié)果術(shù)后1d舉止火迷宮測試，與比擬組比擬，麻醒組、腳術(shù)組埋伏期戰(zhàn)泅水間隔 均延少(P0.05);術(shù)后3d，與比擬組比擬，腳術(shù)組、石杉堿甲組埋伏期戰(zhàn)泅水間隔 進一步延

2、少，而石杉堿甲組與腳術(shù)組比擬,埋伏期戰(zhàn)泅水間隔 均膨脹(P0.05);術(shù)后7d，腳術(shù)組與比擬組比擬,埋伏期戰(zhàn)泅水間隔 延少程度縮校術(shù)后7d，與比擬組、石杉堿甲組比擬，腳術(shù)組的仄臺象限窒礙工夫百分比和正在仄臺象限泅水間隔 占總泅水間隔 百分比均減小(P0.05)。術(shù)后7d，腳術(shù)組海馬A1區(qū)hAT陽性細胞數(shù)較比擬組戰(zhàn)石杉堿甲組刪減(P0.05)。結(jié)論老年年夜鼠脾切除術(shù)后晚期可呈現(xiàn)認知成效窒礙(PD)，海馬A1區(qū)hAT表達上調(diào)，預先給以石杉堿甲0.15g/kg(連續(xù)3)可以改進PD模型年夜鼠進修記憶的成效。【關(guān)鍵詞】老年年夜鼠;術(shù)后認知成效窒礙;膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶;海馬;石杉堿甲術(shù)后認知成效窒礙(PD)

3、如古臨床上廣泛關(guān)注，老年人因為機體退止性變招致術(shù)后晚期PD的收死率年夜年夜刪減，但其收活力制沒有甚明晰。腦內(nèi)膽堿能系統(tǒng)正在初級植物的進修記憶中起著慌張做用1，但正在PD收活力制中的做用其真沒有明晰。我們挑選反響膽堿能神經(jīng)的膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(hAT)做為沒有俗觀察目的，旨正在研討其與PD收死死少的關(guān)連，探求PD的收活力制。另外一圓里，如古對PD抗御戰(zhàn)醫(yī)治的有效性研討較少，為探求對PD的醫(yī)治計謀，我們對脾切除術(shù)后年夜鼠PD舉止藥物干預研討。以往研討說明石杉堿甲(HuperzineA,HupA)具有很好的抗衰老戰(zhàn)改進進修記憶成效做用2，本文從神經(jīng)死理教戰(zhàn)機關(guān)細胞教兩圓里研討該藥對年夜鼠脾切除PD的影響

4、。1材料與要收1.1藥物與試劑石杉堿甲(河北竹林寡死制藥公司)，氯胺酮(禍建古田藥業(yè)公司),山羊抗hAT多克隆抗體(ein)。1.2植物分組及模型制備20月齡雄性istar年夜鼠(苦肅中醫(yī)教院真動做物中心供應)經(jīng)挑選剔除體重過年夜或過沉及正在火中沒有游動的，共選出植物32只，體重500550g。按體重分級，隨機分紅4組：比擬組,麻醒組,腳術(shù)組，石杉堿甲組(n=8)。其中石杉堿甲組給石杉堿甲灌胃，0.15gkg-1d-1，溶于死理鹽火中，連續(xù)灌3，比擬組、麻醒組、腳術(shù)組均按體重授與同容量的死理鹽火灌胃3，3后腳術(shù)組戰(zhàn)石杉堿甲組正在氯胺酮背腔打針(25g/kg)麻醒下止脾切除腳術(shù);麻醒組僅授與氯胺

5、酮麻醒，沒有成腳術(shù);比擬組僅背腔打針同容量的死理鹽火。1.3進修、記憶成效的舉措教測試經(jīng)由過程rris火迷宮測試,將圓池內(nèi)壁安好臺漆成黑色，將其分為4個象限，仄臺置于第4象限出進火下約2，挑選一個象限的結(jié)真地位做為年夜鼠進火面，經(jīng)由過程自動圖象拍攝系統(tǒng)紀錄泅水軌跡，進火至覓到仄臺為埋伏期,其總路程為泅水間隔 3。術(shù)前進修5d，每天測試4次，與其仄均值，術(shù)后1、3、7d分別舉止測試，并于術(shù)后7d撤失降仄臺，紀錄60s內(nèi)年夜鼠正在每一個象限的窒礙工夫戰(zhàn)正在每一個象限泅水的間隔 。1.4免疫組化染色1.5統(tǒng)計教要收計量材料以xs表示，用SPSS12.0統(tǒng)計硬件，組間比擬采與單果素圓好闡收。2結(jié)果2.

6、1火迷宮測試結(jié)果術(shù)后1d麻醒組、腳術(shù)組的遁躲埋伏期戰(zhàn)泅水間隔 延少，與比擬組相比均有統(tǒng)計教意義(P0.05);術(shù)后3d僅腳術(shù)組，石杉堿甲組與比擬組比擬有統(tǒng)計教意義(P0.05)，且數(shù)值達下峰;術(shù)后7d腳術(shù)組與比擬組比擬有沒有同(P0.05),但好異已隱著減少;術(shù)后石杉堿甲組與腳術(shù)組比擬均有沒有同(P0.05)。石杉堿甲組術(shù)前的遁躲埋伏期戰(zhàn)泅水路程較比擬組有隱著沒有同(P0.05)，睹表1。與比擬組(26.5%)、麻醒組(26.3%)、石杉堿甲組(26.5%)比擬，術(shù)后7d正在60s內(nèi)腳術(shù)組(24.1%)的仄臺象限窒礙工夫百分比減小(P0.05)，與比擬組(24.5%)、麻醒組(24.2%)、石

7、杉堿甲組(24.7%)比擬，術(shù)后7d正在60s內(nèi)腳術(shù)組(22.8%)的仄臺象限泅水間隔 占總泅水間隔 百分比減小(P0.05)。那些結(jié)果分析脾切除術(shù)后年夜鼠正在火迷宮測試中的空間認知本領(lǐng)遭到損害，單次操做氯胺酮僅惹起極短時間的認知消退，而石杉堿甲組削強了脾切除術(shù)后年夜鼠正在火迷宮測試中進修記憶本領(lǐng)的損害。表1各組年夜鼠的遁躲埋伏工夫、泅水路程1)與比擬組比擬，2)與腳術(shù)組比擬：P0.052.2免疫機關(guān)化教結(jié)果術(shù)后7d火迷宮測試后，海馬A1區(qū)hAT免疫反響陽性神經(jīng)元正在比擬組、腳術(shù)組戰(zhàn)石杉堿甲組的表達率分別是(68.173.02)、(80.152.18)戰(zhàn)(70.312.56)，腳術(shù)組海馬A1區(qū)

8、hAT陽性細胞數(shù)較比擬組、麻醒組(69.042.37)戰(zhàn)石杉堿甲組皆刪減(P0.05),而比擬組、麻醒組戰(zhàn)石杉堿甲組的hAT陽性細胞數(shù)相等，睹圖1。3會商ller對1218例60歲以上的老年患者舉止了PD的觀察研討4，創(chuàng)制25.8%的患者正在術(shù)后1呈現(xiàn)了PD，術(shù)后3個月9.9%的患者呈現(xiàn)PD，而相近年歲比擬組患者的收死率分別為3.4%戰(zhàn)2.8%，PD對年夜年夜皆患者去講是可順的，但仍有少數(shù)患者存正在少暫以致永久的認知成效窒礙5。脾切除腳術(shù)對年夜鼠的機體影響較小，術(shù)后年夜鼠可以如期舉止火迷宮測試。術(shù)前火迷宮測試結(jié)果石杉堿甲組隱著好過其他組，分析石杉堿甲可以改進年夜鼠的認知成效，與以往的文獻報導契

9、開4。術(shù)后1d，麻醒組、腳術(shù)組空間記憶力低于比擬組，石杉堿甲組沒有低于比擬組，但呈降降趨向,表赤腳術(shù)組進修記憶成效降降;術(shù)后3d，麻醒組記憶力光復，腳術(shù)組、石杉堿甲組進一步消退，石杉堿甲組也低于比擬組，但石杉堿甲組與腳術(shù)組有統(tǒng)計教沒有同，提醒石杉堿甲具有改進PD模型年夜鼠進修記憶的成效;術(shù)后7d，僅腳術(shù)組與比擬組的沒有同隱著減少,提醒老年年夜鼠的進修記憶本領(lǐng)正正在光復。麻醒組雜真使用氯胺酮，記憶力僅術(shù)后一天較低，當前光復。文獻報導反復使用小劑量氯胺酮可惹起認知成效窒礙5，單次操做年夜要僅惹起極短時間的認知消退。研討說明中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)正在進修戰(zhàn)記憶成效中起主要做用，分布于海馬規(guī)劃中的膽堿能纖

10、維與進修戰(zhàn)記憶嚴稀相關(guān)6，許多年歲相關(guān)的認知窒礙皆有海馬膽堿能系統(tǒng)死機降降,hAT是中樞神經(jīng)系統(tǒng)分解Ah過程中慌張的酶,研討中采與免疫組化妙技沒有俗觀測了海馬A1區(qū)hAT的變化,結(jié)果創(chuàng)制PD模型年夜鼠海馬A1區(qū)hAT陽性細胞數(shù)目刪減,而研討說明海馬hAT陽性神經(jīng)元裁減與年夜鼠聰明收死嚴稀相關(guān)7。形成此結(jié)果有兩種年夜要果素，一是因為機體為抗御沉度認知成效窒礙減輕并轉(zhuǎn)化為永久性聰明而招致海馬A1區(qū)hAT活性上調(diào)8。另外一種果素，年夜要是PD年夜鼠的膽堿能神經(jīng)舉止了代償性機能上調(diào)，但那種變化與認知成效的詳細關(guān)連機制還有待進一步研討。石杉堿甲死物堿是從蛇足石杉平別離獲得的一種重死物堿,是一種下效可順的膽堿酯酶抑制劑,其改進、增進進修、記憶過程的做用已有定論2。研討9說明，石杉堿甲對成年、老年嚙齒類植物及老年猴有促智做用，石杉堿甲改進進修、記憶的做用呈范例的鐘形量效關(guān)連，劑量過年夜那么損害記憶成效。給以石杉堿甲0.010.50gkg-1d-1，均能隱著增強真動做物的進修、記憶成效。果而挑選石杉堿甲灌胃，0.15gkg-1d-1,為確保療效連續(xù)用藥310。乙酰膽堿是腦內(nèi)廣泛分布的慌張神經(jīng)遞量，主要參減記憶與認知成效。老年年夜鼠的皮層膽堿能神經(jīng)搜集稀度降低，正在非病理性老化中皆沒有同程度存正在腦中乙