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文檔簡介

1、知識點2微生物的生長規(guī)律課件知識點2微生物的生長規(guī)律課件微生物細胞極其微小,其個體生長表現(xiàn)為細胞體積的增加和細胞內(nèi)物質(zhì)含量的增加兩個方面(病毒例外), 細胞有一個從小到大的生長過程。 研究微生物單個細胞的生長變化是很困難的,主要的方法: 1.電子顯微鏡觀察 2.同步培養(yǎng)技術(shù)一、微生物的個體生長和同步生長 微生物細胞極其微小,其個體生長表現(xiàn)為細胞體積的增加和細胞內(nèi)物同步培養(yǎng) 使培養(yǎng)物中所有微生物細胞都處于相同的生長階段的培養(yǎng)方法。通過分析此群體在各階段的生物化學(xué)特性變化,間接了解單個細胞的相應(yīng)變化規(guī)律性。同步生長 培養(yǎng)物中所有微生物細胞都處于同一生長階段,并都能同時分裂的生長方式。同步培養(yǎng)方法誘

2、導(dǎo)法:采取控制培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基成分和某些代謝抑制劑等,誘導(dǎo)形成同步生長的過程。篩選法:將處于不同生長階段的細胞,通過差異離心技術(shù)或濾膜過濾技術(shù)使它們分開,再行培養(yǎng)。同步培養(yǎng)同步培養(yǎng)方法誘導(dǎo)法:采取控制培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基成分和某 絕大多數(shù)微生物個體微小,個體質(zhì)量和體積的變化不易觀察,所以常是以微生物的群體作為研究對象,以微生物群體細胞的數(shù)量或群體細胞物質(zhì)量的增加作為生長的指標(biāo)。二、單細胞微生物的群體生長曲線 在純培養(yǎng)條件下,微生物的群體生長隨著時間的增加,表現(xiàn)出明顯的規(guī)律性,即開始緩慢,逐漸加快,達到最高階段后,又逐漸下降,呈現(xiàn)一個曲線式的生長過程。 絕大多數(shù)微生物個體微小,個體質(zhì)量和體積的變化不

3、易觀察單細胞微生物的群體生長規(guī)律分批培養(yǎng):將少量的細菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中,在適宜的條件下培養(yǎng),最后一次性收獲的過程。生長曲線:細菌在新的適宜的環(huán)境中生長、繁殖、衰老、死亡的動態(tài)變化。單細胞微生物的群體生長規(guī)律分批培養(yǎng):將少量的細菌接種到一定體 根據(jù)細菌生長繁殖速率將生長曲線分四個階段:緩慢期 對數(shù)期 穩(wěn)定期 衰亡期 根據(jù)細菌生長繁殖速率將生長曲線分四個階段:緩1)延滯期特點:分裂遲緩,生長速率等于零代謝活躍,細胞合成新的成分 補充消耗的材料 適應(yīng)新的培養(yǎng)基 細胞形態(tài)變大或變長 對外界不良環(huán)境敏感滯留適應(yīng)期產(chǎn)生原因:(1)接種時的機械損傷引(2) 細胞分裂必需因子的缺乏1)延滯期滯留適

4、應(yīng)期產(chǎn)生原因:(1)接種時的機械損傷引(2)影響延滯期長短的因素 接種菌齡: 對數(shù)期“種子”,延滯期較短; 延滯期或衰亡期“種子”,延滯期較長; 接種量:接種量大,延滯期較短; 接種量小,延滯期較長; 培養(yǎng)基成分:培養(yǎng)基成分豐富的, 延滯期較短; 培養(yǎng)基成分與種子培養(yǎng)基一致,延滯期較短; 菌株的遺傳性 研究滯留適期長短的意義?影響延滯期長短的因素研究滯留適期長短的意義?2)指數(shù)期特點:代謝活性強,生長速率最快,細胞呈指數(shù)增長世代時短而穩(wěn)定,生長速率恒定 群體的生理特性較一致對數(shù)生長期2)指數(shù)期對數(shù)生長期對數(shù)期(指數(shù)生長期)Nt=2n N0n=3.33(lgNt-lgN0) G=t/n=0.30

5、1t/(lgNt-lgN0) n繁殖代數(shù) G世代時(每繁殖一代所需的時間) N0對數(shù)生長期開始微生物數(shù)量 Nt對數(shù)生長期經(jīng)過時間t后微生物數(shù)量對數(shù)期(指數(shù)生長期)Nt=2n N0影響指數(shù)期的因素 菌種: 不同菌種的代時差異極大 營養(yǎng)成分:營養(yǎng)越豐富,代時越短 營養(yǎng)物濃度:影響微生物的生長速率和總生長量 培養(yǎng)溫度:影響微生物的生長速率 指數(shù)期的實踐意義 是代謝、生理研究的良好材料 是增殖噬菌體的最適宿主菌齡 是發(fā)酵生產(chǎn)中用作“種子”的最佳種齡 G+染色鑒定時采用此期微生物影響指數(shù)期的因素 菌種: 不同菌種的代時差異極大 3)穩(wěn)定期特點:活細胞總數(shù)維持不變,即新繁殖的細胞數(shù)與衰亡的細胞數(shù)相等,菌體

6、總數(shù)達到最高點。部分細菌大量積累代謝產(chǎn)物群體細胞生長速率為零細胞生理上處于衰老,代謝活力鈍化,細胞成分合成緩慢, G+染色發(fā)生變化。最高生長量期3)穩(wěn)定期活細胞總數(shù)維持不變,即新繁殖的細胞數(shù)與衰亡的細胞數(shù)為何細胞總數(shù)不再增加? 營養(yǎng)物質(zhì)被消耗不能滿足生長需要 代謝廢物或有害物質(zhì)積累到抑制生長水平 pH、氧化還原勢等物化條件越來越不適應(yīng)穩(wěn)定期的實踐意義 是發(fā)酵生產(chǎn)中以菌體為終產(chǎn)品的最佳收獲期; 某些代謝產(chǎn)物特別是次生代謝產(chǎn)物發(fā)生在此階段,某些細菌的芽孢也發(fā)生在此階段,故又稱作代謝產(chǎn)物合成期; 導(dǎo)致了連續(xù)培養(yǎng)原理的提出和工藝技術(shù)的改進。為何細胞總數(shù)不再增加?穩(wěn)定期的實踐意義4)衰亡期特點: 菌體活

7、性降低、大量死亡;細胞畸變、自溶革蘭氏染色不穩(wěn)定衰亡期4)衰亡期衰亡期影響衰亡期的因素及實踐意義與菌種的遺傳特性有關(guān): 有些細菌的培養(yǎng)經(jīng)歷所有的各個生長時期,幾天以后死亡, 有些細菌培養(yǎng)幾個月乃至幾年以后仍然有一些活的細胞;與是否產(chǎn)芽孢有關(guān):產(chǎn)芽孢的細菌更易于幸存下來;與營養(yǎng)物質(zhì)和有毒物質(zhì)有關(guān):補充營養(yǎng)和能源,以及中和環(huán)境毒性,可以減緩死亡期細胞的死亡速率,延長細菌培養(yǎng)物的存活時間。影響衰亡期的因素及實踐意義與菌種的遺傳特性有關(guān): 有些細菌的生長階段特 征延滯期細胞不分裂(不生長),但細胞變大,細胞內(nèi)RNA含量增高,原生質(zhì)呈堿性,合成代謝活躍,易合成新的誘導(dǎo)酶,對外界環(huán)境變化敏感。接種物中死細

8、胞較多或培養(yǎng)基不豐富時延滯期較長。對數(shù)期細胞分裂(生長)最快,細胞進行平衡生長,酶系活躍,代謝旺盛。生長速率由營養(yǎng)成分和培養(yǎng)條件決定。穩(wěn)定期新繁殖的細胞與死亡細胞數(shù)目相等,菌體產(chǎn)量達到最高,細胞開始儲藏糖原、脂肪等儲藏物,產(chǎn)芽孢的開始形成芽孢,開始合成次生代謝產(chǎn)物??赡苡捎跔I養(yǎng)物的消耗或抑制生長的代謝產(chǎn)物積累,細胞停止增殖,但仍存活。衰亡期死亡細胞數(shù)目超過新生細胞,細胞形態(tài)多樣,細胞開始自溶,開始釋放次生代謝產(chǎn)物。生長曲線各時期的特征生長階段特 征延滯期細胞不分裂(不生長),但細胞生長曲線的意義:a. 處于對數(shù)期的細菌,生長繁殖速率快,代謝旺盛,常作生產(chǎn)用菌種,以縮短生產(chǎn)周期b. 穩(wěn)定期時抗生

9、素等代謝產(chǎn)物逐漸增多,適當(dāng)補充營養(yǎng)物質(zhì),延長穩(wěn)定期、可提高代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量c. 連續(xù)培養(yǎng):在一個流動裝置中,以一定速度不斷地添加新的培養(yǎng)基,同時以同樣速度不斷放出老的培養(yǎng)基,以保證微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要,并排出部分有害代謝產(chǎn)物,使微生物保持較長時間的高速生長。應(yīng)用:酒精、丙酮、丁醇等產(chǎn)品的生產(chǎn)優(yōu)點:縮短了培養(yǎng)周期,提高了設(shè)備利用率,并且便于自動化管理生長曲線的意義:三、 微生物的連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng): 在一個恒定容積的流動系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物,一方面以一定速率不斷地加入新的培養(yǎng)基,另一方面又以相同的速率流出培養(yǎng)物(菌體和代謝產(chǎn)物),以使培養(yǎng)系統(tǒng)中的細胞數(shù)量和營養(yǎng)狀態(tài)保持恒定,即處于穩(wěn)態(tài)。 三、 微生物的

10、連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng):連續(xù)培養(yǎng)類型:恒化培養(yǎng)、恒濁培養(yǎng) 保持細菌培養(yǎng)液濁度保持細菌培養(yǎng)液營養(yǎng)物質(zhì)濃度連續(xù)培養(yǎng)類型:恒化培養(yǎng)、恒濁培養(yǎng) 保持細菌培養(yǎng)液濁度保持細菌四、天然環(huán)境中的微生物生長 天然環(huán)境特點: 天然環(huán)境比人工條件常常要更復(fù)雜和更動態(tài)。天然環(huán)境中微生物生長特點: 在自然環(huán)境中,微生物常常合成一些人工條件下生長時所不產(chǎn)生的結(jié)構(gòu),如細菌粘液層。因為微生物細胞能夠感受自然環(huán)境中發(fā)現(xiàn)的各種化合物,其直接反應(yīng)就是合成一些有用的結(jié)構(gòu)和酶以便在特定的環(huán)境中生存生長。 大量研究揭示,自然環(huán)境條件下的細菌能夠生長在復(fù)雜的群落中,表現(xiàn)出生長在試管中的純培養(yǎng)微生物所不曾發(fā)生的某些現(xiàn)象。 四、天然環(huán)境中的微生物生長 天然環(huán)境特點:活的但未能培養(yǎng)的微生物 很久以來,活的微生物被定義為能夠活躍生長,形成菌落或引起液體培養(yǎng)基渾濁的微生物。 英國科學(xué)家J.R. Postgate

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