獸醫(yī)微生物學(xué)

1、獸醫(yī)微生物學(xué)獸醫(yī)微生物學(xué) (多媒體教學(xué)課件)課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件3緒言 共六部分，介紹微生物與微生物學(xué)的概念，微生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史，微生物學(xué)理論與技術(shù)成就及應(yīng)用，獸醫(yī)微生物學(xué)的地位、任務(wù)與貢獻(xiàn)。細(xì)菌總論 共七章，介紹細(xì)菌的形態(tài)、構(gòu)造、生理，消毒與滅菌，細(xì)菌生態(tài)、致病機(jī)理、遺傳變異，細(xì)菌分類與命名等。免疫基礎(chǔ) 共七章，介紹抗原抗體，免疫系統(tǒng)，抗感染免疫，變態(tài)反應(yīng)，免疫調(diào)節(jié)，免疫技術(shù)及應(yīng)用等。細(xì)菌各論 共十二章，介紹各屬重要病原細(xì)菌的形態(tài)、生化特性、致病性、微生物學(xué)診斷和免疫防治等。真菌 共二章，介紹真菌的分類、形態(tài)、生化及致病特性，真菌病的診斷與防治等。病毒 共十四章，介紹病毒的形態(tài)、構(gòu)造

2、、繁殖、遺傳、培養(yǎng)，病毒的致病性。各科屬重要病毒形態(tài)、生化及致病特性，微生物學(xué)診斷和防治等。實(shí)驗(yàn) 共十多個(gè)，顯微鏡油鏡的使用，細(xì)菌形態(tài)及構(gòu)造觀察，細(xì)菌抹片制備及染色，培養(yǎng)基的制備，細(xì)菌的分離培養(yǎng)、生長(zhǎng)表現(xiàn)觀察、生化試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)，沉淀反應(yīng)和凝集反應(yīng)，重要病原菌的認(rèn)識(shí)，真菌與病毒培養(yǎng)測(cè)定等。內(nèi)容簡(jiǎn)介課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件4第十五章 革蘭氏陽性球菌第十六章 腸桿菌科第十七章 弧菌科第十八章 巴氏桿菌科及相關(guān)屬第十九章 革蘭氏陰性需氧桿菌第二十章 革蘭氏陰性無芽孢微需氧和厭氧菌第二十一章 革蘭氏陽性無芽孢桿菌第二十二章 革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌第二十三章 分支桿菌及相似屬第二十四章 螺旋體第二十

3、五章 霉形體第二十六章 立克次體及衣原體第三篇細(xì)菌學(xué)各論課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件5第二十二章 革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌第一節(jié) 芽孢桿菌屬第二節(jié) 梭菌屬第三篇課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件6第一節(jié) 芽孢桿菌屬炭疽芽孢桿菌 炭疽芽孢桿菌又稱炭疽桿菌，是引起人類、各種家畜和野生動(dòng)物炭疽的病原，在獸醫(yī)學(xué)和醫(yī)學(xué)上均占有相當(dāng)重要的地位。一、形態(tài)及染色特性 本菌為革蘭氏陽性大桿菌，。無鞭毛，不運(yùn)動(dòng)。芽孢橢圓形，位于菌體中央，芽孢囊不大于菌體?？尚纬汕v膜。 在動(dòng)物組織和血液中，此菌單在或呈短鏈，菌體直，菌端平截，呈竹節(jié)狀，圍繞以豐厚的莢膜。莢膜具有較強(qiáng)的抗腐敗能力，當(dāng)菌體因腐敗而消失后，仍有殘留莢膜，稱為“

4、菌影”。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件7動(dòng)物體內(nèi)的炭疽桿菌只有當(dāng)暴露接觸空氣中的氧氣之后，方能形成芽孢。 在培養(yǎng)基中，此菌常形成長(zhǎng)鏈，并于培養(yǎng)18-24h后開始形成芽孢。在普通培養(yǎng)基中不形成莢膜，但若在血液、血清瓊脂上或在碳酸氫鈉瓊脂上，于10-20CO2環(huán)境中培養(yǎng)則形成莢膜。二、培養(yǎng)特性 此菌為需氧菌，最適溫度30-37。最適pH為。營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基中即能生長(zhǎng)良好。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件8 在普通瓊脂上形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥、邊緣呈卷發(fā)狀的粗糙(R)型菌落(圖22-1)，無毒或弱毒菌株形成光滑(S)型菌落。在血瓊脂上一般不溶血。 于普通肉湯中培養(yǎng)

5、后，上部液體清朗透明，液面無菌膜或菌環(huán)，管底有白色絮狀沉淀，輕搖不消散。 在含青霉素0.51U/ml的培養(yǎng)基中，細(xì)胞壁肽聚糖合成抑制，形成原生質(zhì)體串，稱為“串珠反應(yīng)”。若青霉素加至10IU/ml，則完全不能生長(zhǎng)或輕微生長(zhǎng)。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件9三、抵抗力 本菌繁殖體的抵抗力不強(qiáng)，6030-60min即可殺死。常用消毒劑均能將其殺死，對(duì)青霉素等多種抗生素高度敏感，可用于臨床治療。在未解剖的尸體中，細(xì)菌可隨腐敗而迅速死亡。 芽孢的抵抗力特別強(qiáng)，在干燥狀態(tài)下可長(zhǎng)期存活。需經(jīng)煮沸15-25 min，121 滅菌5-10min，或160 干熱滅菌1h方被殺死。干燥保存40年以上的炭疽芽

6、孢仍有活力。炭疽芽孢對(duì)碘特別敏感，0.04碘液10 min即將其破壞，過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、次氯酸鈉等效果較好，可用于皮毛等消毒。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件10四、抗原結(jié)構(gòu) 已知本菌有莢膜抗原、菌體抗原、保護(hù)性抗原及芽孢抗原4種主要抗原成分。 莢膜抗原 僅見于有毒菌株，與毒力有關(guān)，是一種半抗原，無保護(hù)作用，可用于血清學(xué)鑒定。 菌體抗原 有兩種，一種是存在于本菌細(xì)胞壁及菌體內(nèi)的半抗原，為多糖成分。與細(xì)菌毒力無關(guān)，但性質(zhì)穩(wěn)定，經(jīng)腐敗、加熱抗原性不被破壞。Ascoli反應(yīng)，加熱處理抗原依據(jù)在此。 保護(hù)性抗原 是一種胞外蛋白質(zhì)抗原成分，為炭疽毒素的組成成分之一，具有免疫原性，能使機(jī)體產(chǎn)生抗本

7、本菌感染的保護(hù)力。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件11 芽孢抗原 是芽孢的外膜層含有的抗原決定簇，它與皮質(zhì)一起組成炭疽芽孢的特異性抗原，具有免疫原性和血清學(xué)診斷價(jià)值。五、致病性 本菌可引致各種家畜、野獸和人類的炭疽，牛、綿羊、鹿等易感性最強(qiáng)，馬、駝、豬、山羊等次之，犬、貓、食肉獸等則有相當(dāng)大的抵抗力，禽類一般不感染。 通過消化道傳染，但也可經(jīng)呼吸道及皮膚創(chuàng)傷或通過吸血昆蟲傳播。食草動(dòng)物炭疽常表現(xiàn)為急性敗血癥。豬炭疽多表現(xiàn)為慢性的咽部局限感染，犬、貓和食肉獸則多表現(xiàn)為腸炭疽。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件12 人類對(duì)炭疽桿菌的易感性介于食草動(dòng)物與豬之間，經(jīng)消化道、呼吸道或皮膚創(chuàng)傷感

8、染而發(fā)生腸炭疽、肺炭疽或皮膚炭疽。 此菌毒力主要與莢膜和毒素有關(guān)。莢膜抗吞噬，使易于擴(kuò)散，引起感染乃至敗血癥。炭疽桿菌的毒素稱為炭疽毒素，包括水腫毒素及致死毒素兩種。六、微生物學(xué)診斷 疑似炭疽的病畜尸體嚴(yán)禁剖檢，只能自耳根部采取血液，必要時(shí)可切開肋間采取脾臟。皮膚炭疽可采取病灶水腫液或滲出物，腸炭疽可采取糞便。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件131. 細(xì)菌學(xué)檢查 病料涂片以堿性美藍(lán)、瑞氏染色法或姬姆薩染色法染色鏡檢，如發(fā)現(xiàn)有莢膜竹節(jié)狀大桿菌，即可作出初步診斷。細(xì)菌分離可用普通瓊脂或血瓊脂平板。2. 血清學(xué)檢查 有多種血清學(xué)方法，多以已知抗體來檢查被檢的抗原。Ascoli氏沉淀反應(yīng) 是用加

9、熱抽提待檢炭疽菌多糖抗原與已知抗體進(jìn)行的沉淀試驗(yàn)。適用于各種病料、皮張、嚴(yán)重腐敗污染尸體材料，方法簡(jiǎn)便，反應(yīng)清晰，故應(yīng)用廣泛。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件14 間接血凝試驗(yàn) 將炭疽抗血清吸附于炭粉或乳膠，制成炭粉診斷血清或乳膠診斷血清。檢查被檢樣品中是否含有炭疽芽孢。 協(xié)同凝集試驗(yàn) 可快速檢測(cè)炭疽桿菌或病料中的可溶性抗原。 串珠熒光抗體檢查 將串珠試驗(yàn)與熒光抗體法結(jié)合起來。 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶標(biāo)葡萄球菌A蛋白間接染色法、熒光抗體間接染色法等。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件15七、免疫防治 炭疽痊愈動(dòng)物可獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫，再次感染者很少?？固烤已逡部捎糜谥委熀途o急預(yù)防，我國(guó)目前應(yīng)

10、用的菌苗有兩種。1. 第號(hào)炭疽芽孢苗 此菌苗系將培養(yǎng)產(chǎn)生的炭疽芽孢，用30甘油蒸餾水混懸制成，有效期2年。適用牛、馬、驢、騾、駱駝、綿羊、山羊和豬，一般不引起接種反應(yīng)。注射后14d即可產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免度力，免疫期1年。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件162. 無毒炭疽芽孢苗 其殘余毒力較第號(hào)炭疽芽孢苗者強(qiáng)，可殺死小鼠及部分豚鼠，有效期2年。適用于牛、馬、驢、騾、綿羊和豬，免疫期1年。但是必須注意，此菌苗對(duì)山羊反應(yīng)強(qiáng)烈，可引起嚴(yán)重局部反應(yīng)，有的甚至發(fā)生死亡，故禁用于山羊。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件17第二節(jié) 梭菌屬 菌體呈桿狀、厭氧呼吸、不還原硫酸鹽成硫化物，這3項(xiàng)特性可與其他革蘭氏

11、陽性產(chǎn)芽孢桿菌相區(qū)別。一、屬的特征 菌體桿狀，兩端鈍圓或尖銳，常單在，革蘭氏染色陽性。可形成卵圓形或圓形的芽孢，常使菌體膨大。由于芽孢的形狀和位置不同，芽孢體可表現(xiàn)為不同的形狀。當(dāng)芽孢位于菌體中央而膨大時(shí)，則芽孢體形如梭狀，并非梭菌屬的細(xì)菌均為梭形。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件18二、梭菌分布 梭菌在自然界分布廣泛，常見于土壤、污水、腐爛的動(dòng)植物，人和其他脊椎動(dòng)物的腸道、人與動(dòng)物的傷口及軟組織感染灶。三、病原梭菌及梭菌病的診斷原則 本屬有80多種，多為非病原菌，常見的致病菌約11種，多為人獸共患病病原(表22-4)。病原梭菌通常均能產(chǎn)生外毒素，其毒力強(qiáng)。由梭菌引起動(dòng)勿的疾病，按性質(zhì)和

12、癥狀可大致分為5類。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件19第22章1. 氣腫疽與惡性水腫 兩病皆為急性敗血性傳染病，而且均有氣性水腫的癥狀特征，在臨床上極為相似，應(yīng)注意鑒別。氣腫疽病原為氣腫疽梭菌，主要通過消化道感染。惡性水腫由刨傷感染引起，其病原復(fù)雜多樣，在動(dòng)物主要是腐敗梭菌、在人主要是A型產(chǎn)氣莢膜梭菌，此外還可能是A型諾維梭菌或其他，也可是兩種以上梭菌的混合感染。兩病的微生物學(xué)診斷主要衣靠病原菌檢查。課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件20第22章2. 快疫與類快疫 是一類病程極短的急性致死性傳染病，包括羊快疫、羊猝狙(ju)、腸毒血癥、黑疫及細(xì)菌性血紅素尿，在臨床上有許多相似之處，本質(zhì)均為

13、毒血癥。 羊猝狙和腸毒血癥的病原為產(chǎn)氣莢膜梭菌，系在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素，細(xì)菌不一定侵人體內(nèi)，故微生物學(xué)診斷主要依靠腸內(nèi)容物的毒素檢查。 羊快疫系腐敗梭菌經(jīng)消化道感染所致，病菌雖最初在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素，但其后則侵人體內(nèi)造成敗血癥，故微生物學(xué)診斷為依靠病原菌檢查。課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件21第22章 黑疫的病原為B型諾維梭菌，細(xì)菌性血紅素尿的病原為溶血梭菌，二者均主要存在于肝臟，因肝組織損害，細(xì)菌乘機(jī)繁殖，產(chǎn)生毒素而引起發(fā)生。微生物學(xué)診斷主要依靠病原菌檢查，但也可檢查毒素。3. 痢疾與腸炎 是由產(chǎn)氣莢膜梭菌在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素引起，包括羔羊痢疾、犢牛痢疾和人、禽壞死性腸炎，細(xì)菌不一定侵入體內(nèi)，微生物學(xué)

14、診斷亦主要依靠腸內(nèi)容物的毒素檢查。課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件22第22章4. 食物中毒 包括人畜肉毒中毒癥與人產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒，都是由于病原菌在食物或飼料中生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生毒素被食人而致病。肉毒中毒癥的微生物學(xué)診斷主要檢測(cè)肉毒毒素，其次是細(xì)菌檢查。產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒則須依靠由可疑食物分離細(xì)菌，并測(cè)定其毒素產(chǎn)生能力。5. 破傷風(fēng) 系破傷風(fēng)梭菌經(jīng)創(chuàng)傷感染，在感染部位發(fā)育繁殖，產(chǎn)生毒素而引起疾?。ǘ狙Y）。此病癥狀極其特征，通常不需微生物學(xué)診斷。課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件23第22章四、分離鑒定 梭菌大多專性厭氧，培養(yǎng)須采用厭氧培養(yǎng)法。諾維梭菌、溶血梭菌等厭氧要求十分苛刻，所用培養(yǎng)基必須

15、新鮮制備或保存于厭氧環(huán)境之中。若在空氣環(huán)境中放置超過數(shù)小時(shí)，其中某些物質(zhì)轉(zhuǎn)化為氧化型，雖再作厭氧培養(yǎng)，細(xì)菌亦不生長(zhǎng)。這些細(xì)菌對(duì)氧極為敏感，僅在空氣中暴露20-30min即遭抑制而不再生長(zhǎng)。因此劃線接種后應(yīng)立即厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)物應(yīng)迅速移植，不能久置于空氣之中。 課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件24 污染材料分得純培養(yǎng)，可根據(jù)梭菌芽孢耐熱性較強(qiáng)的特點(diǎn)，先經(jīng)80 加熱20min以殺死不耐熱的細(xì)菌，然后再作分離培養(yǎng)。 腐敗梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌易于死后侵入，諾維梭菌、溶血梭菌等存在于正常動(dòng)物體中，由動(dòng)物體內(nèi)分出梭菌，并不能肯定是病原，應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)、病變及微生物學(xué)檢查。此時(shí)，細(xì)菌毒力測(cè)定極為重要。第22章課件

16、002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件25五、產(chǎn)氣莢膜梭菌 本菌舊名魏氏梭菌或產(chǎn)氣莢膜桿菌。在自然界分節(jié)極廣，可見于土壤、污水、飼料、食物、糞便以及人畜腸道等中，在一定條件下，也可引起多種嚴(yán)重疾病。1. 形態(tài)及染色特征 菌體直桿狀，兩端鈍圓，單在，革蘭氏陽性。芽孢大圓，位于菌體中央或近端，使菌體膨脹，但在一般條件下罕見形成芽孢。多數(shù)菌株可形成莢膜。2. 致病性 本菌致病作用主要在于它所產(chǎn)生的毒素。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件26 A型菌主要是引起人氣性壞疽和食物中毒，也引起動(dòng)物氣性壞疽，還可引起牛、羔羊、新生羊駝、野山羊、馴鹿、仔豬等腸毒血癥；B型菌主要引起羔羊痢疾，還可引起駒、犢牛、羔羊、綿羊

17、和山羊的腸毒血癥或壞死性腸炎；C型菌主要是綿羊猝狙的病原，也能引起羔羊、犢牛、仔豬、綿羊的腸毒血癥和壞死性腸炎以及人的壞死性腸炎；D型菌引起羔羊、綿羊、山羊、牛的腸毒血癥；E型菌可致犢牛、羔羊腸毒血癥。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件273. 微生物學(xué)診斷 本菌A型所致氣性壞疽及人食物中毒的微生物學(xué)診斷，主要依靠細(xì)菌分離鑒定。其余各型所致的各種疾病，均系細(xì)菌在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素所致，因止從病料中檢出該菌，并不能說明它就是病原。所以細(xì)菌學(xué)檢查只有當(dāng)分離到毒力強(qiáng)大的此菌才具有一定的參考意義。 鑒定本菌要點(diǎn)：厭氧生長(zhǎng)、菌落整齊、生長(zhǎng)快、革蘭氏陽性粗干菌、不運(yùn)動(dòng)，有雙層溶血環(huán)，引起牛奶暴烈發(fā)酵，胸肌

18、注射鴿越夜死亡，胸肌涂片可見有莢膜的菌體。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件28 有效微生物學(xué)診斷方法是腸內(nèi)容物毒素檢查。其方法為取回腸內(nèi)容物，加適量生理鹽水，離心取上清液分兩分，一份不加熱，一份加熱(60C30min)，分別靜脈注射家兔(1-3m1)或小鼠(0.1-0.3m1)。如有毒素存在，不加熱組動(dòng)物常于數(shù)分鐘至十?dāng)?shù)小時(shí)內(nèi)死亡，而加熱組動(dòng)物不死亡。4. 免疫防治 預(yù)防羔羊痢疾、猝狙、腸毒血癥以及仔豬腸毒血癥等，可用三聯(lián)菌苗或五聯(lián)菌苗。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件29六、肉毒梭菌 本菌廣泛分布于土壤，動(dòng)物腸道，飼料以及食品中。不能在活的機(jī)體內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。當(dāng)有適宜營(yíng)養(yǎng)和厭氧環(huán)境時(shí)

19、，即可生長(zhǎng)繁殖并產(chǎn)生肉毒毒素。人畜食人含此毒素的食品、飼料或其他物品，即可中毒而發(fā)生肉毒中毒癥。1. 形態(tài)及染色特性 本菌多呈直桿狀， 單在或成雙，革蘭氏陽性。著生周鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。芽孢卵圓，位于菌體近端，大于菌體直徑，使細(xì)胞膨大，易于在液體和固體培養(yǎng)基上形成芽孢。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件302. 培養(yǎng)特性 本菌專性厭氧。最適溫度30-37。產(chǎn)毒素的最適溫度為25-30。營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基中均能生長(zhǎng)。 在血平板上，可形成直徑1-6mm，圓形到扇狀、裂葉狀或根狀邊緣的不規(guī)則菌落，常帶有斑狀或花葉狀的中心結(jié)構(gòu)， 溶血。3. 抵抗力 本菌繁殖體抵抗力中等，加熱80C30min或1

20、00C10min能將其殺死，但芽孢抵抗力極強(qiáng)。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件31 芽孢在濕熱1005-7h、高壓105100min或120 5-20min、干熱18015min可被殺死。肉毒毒素的抵抗力：耐酸，但對(duì)堿敏感，pH8.5以上破壞。0.1高錳酸鉀、加熱8030min或100 10min，均能破壞毒素。4. 抗原性及分型 根據(jù)毒素抗原性的差異，可將該菌分為A、B、C、D、E、F、G7個(gè)型，用各型毒素(或類毒素)免疫動(dòng)物，只能獲得中和相應(yīng)型毒素的特異性抗毒素。各型菌雖產(chǎn)生其型特異性毒素，但型間尚存在交叉現(xiàn)象。 第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件325. 肉毒毒素 是一類鋅結(jié)合

21、蛋白質(zhì)，具蛋白酶活性，性質(zhì)穩(wěn)定，是毒性最強(qiáng)的神經(jīng)麻痹毒素之一。如A型毒素，每克含毒食品可致死十幾萬至幾十萬只小鼠。純化肉毒毒素lmg可殺死2億只小鼠，對(duì)人的致死量約為0.1ug 。 A-G型肉毒毒素合成時(shí)均為無毒性的毒素前體，由神經(jīng)毒及非毒性兩個(gè)亞單位組成。非毒性亞單位保護(hù)毒素前體的免受胃蛋白酶的水解。在小腸吸收后兩個(gè)亞單位分解，神經(jīng)毒亞單位通過淋巴、血流作用于靶器官細(xì)胞，阻斷乙酰膽堿的釋放，導(dǎo)致肌肉弛緩型麻痹。G型毒素須胰酶激活后才有毒性。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件336. 致病性 所有溫血?jiǎng)游锖屠溲獎(jiǎng)游飳?duì)肉毒毒素均有感受性，在家畜中馬、牛、羊、水貂、禽類、豬，小鼠、大鼠、豚鼠、

22、家兔、貓、犬、猴等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以及雞、鴿等各種禽類都敏感。7. 微生物學(xué)診斷 從可疑媒介物或患病人畜胃腸內(nèi)容物及血清中檢查肉毒毒素，是主要的微生物學(xué)診斷手段。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件34肉毒毒素檢測(cè) A. 材料處理 被檢材料，稀釋、研磨成乳狀，室溫浸泡數(shù)小時(shí)、離心。取上清液分為兩份，一份按1/10量加入10胰酶液混勻，于37作用60min，然后進(jìn)行檢測(cè)。另1份不處理。B. 檢出試驗(yàn) 取兩種處理液，分別腹腔注射小鼠2只（0.5mL/只），觀察4d 。若有毒素存在，小鼠多在注射后24h內(nèi)發(fā)病、死亡。主要表現(xiàn)為豎毛、四肢癱軟、呼吸困難，呼吸呈風(fēng)箱式，腰部凹陷，宛若蜂腰，最終死于呼吸麻痹。則

23、判定可能有肉毒毒素存在。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件35C. 證實(shí)試驗(yàn) 分3組進(jìn)行。各取l mL被檢液，第1組(毒素中和組)，加等量多型混合肉毒抗毒素，混勻后置37 作用30min；第2組(毒素滅活對(duì)照組)，加等量緩沖液，混勻后煮沸10min；第3組(毒素對(duì)照組)，加等量緩沖液混勻即可。3組混合液分別腹腔注射小鼠各2只（0.5mL/只），觀察4d 。若1和2組的小鼠均獲保護(hù)存活，而第3組小鼠以特有癥狀死亡，則可確定有肉毒毒素的存在。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件36D定型試驗(yàn) 可先進(jìn)行毒力測(cè)定，取含10-100MLD/ml的毒素液，分別與各型肉毒抗毒素及明膠磷酸鹽緩沖液等量混合，37作用30min后依上法進(jìn)行試驗(yàn)，能保護(hù)小鼠免于死亡的抗毒素組，即為所含肉毒毒素的型別。8. 免疫防治 在常發(fā)地區(qū)，可用明礬沉淀類毒素預(yù)防注射，有效免0.5-1年。人畜一旦出現(xiàn)肉毒中毒癥，可立即用多價(jià)抗毒素（或同型抗毒素）血清進(jìn)行治療。第22章課件002獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件37七、破傷風(fēng)梭菌 本菌又名破傷風(fēng)桿菌，是引起人畜破