糖尿病合并冠心病患者血小板表面受體FcγRⅡA和CD40配體

1、糖尿病合并冠心病患者血小板外表受體FcRA和CD40配體【摘要】目的：討論2型糖尿病(2-d)合并冠心病(hd)病人血小板外表受體fra(d32)和d40配體d40l的表達(dá)程度及二者的相關(guān)性。方法：選擇單純hd患者36例(組)、單純2-d患者35例(組)、2-d合并hd患者33例(組)及正常對(duì)照者30名(正常對(duì)照組)，采用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)其血小板外表fra和d40l的表達(dá)程度,并將二者作相關(guān)分析。結(jié)果：組血小板fra和d40l程度較對(duì)照組、組及組均顯著升高p0.050.01,血小板外表fra和d40l的表達(dá)程度呈正相關(guān)(r=0.374,p0.05)。結(jié)論：2-d合并hd患者的血小板外表fra

2、和d40l表達(dá)程度明顯升高,二者呈明顯正相關(guān)。血小板外表fra和d40l的表達(dá)程度可能是反映糖尿病患者合并冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的有用指標(biāo)。【關(guān)鍵詞】受體，f；d40配體；冠狀動(dòng)脈疾??；糖尿病，2型abstrat：bjetive:tdeterinetheplateletsurfaeexpressinffgaara(fra,d32andd40linpatientsithtype2diabetesellitus2-dandrnaryheartdiseasehdandtexplretherelatinshipbeteenthe.ethds:theplateletsurfaeexpressinffraand

3、d40lereeasuredbyflytetryatfastingstatein104nseutivepatients，inluding36patientsithhd(grup),35patientsith2-dithuthd(grup)，and33patientsith2-dandhd(grup).the30subjetsereservedasantrlgruptherrelatinbeteenplateletfraandd40lereinvestigated.results:plateletsurfaeexpressinffraandd40leresignifiantlyhighering

4、rupthanthseinntrlgrup,grupandgrup(p0.050.01)thelevelfplateletfraaspsitivelyrrelatediththelevelfplateletd40l(r=0.374，p0.05).nlusin:plateletsurfaeexpressinffraandd40l，aybeusefularkersfrpreditingthepresenefrnaryatherslersisinpatientsithtype2diabetesauthrsaddress：departentfardilgy,thesendaffiliatedhspit

5、alfdalianedialuniversity,dalian，lianing，116027，hinakeyrds：reeptrs,f;d40ligand;rnaryarterydisease;diabetesellitus,type2糖尿病(d)是冠心病(hd)的等危癥,其10年內(nèi)發(fā)生心血管事件的危險(xiǎn)較非d患者高510倍,這兩種疾病具有多個(gè)共同的危險(xiǎn)因素,如胰島素抵抗等。近年研究提醒血小板活性的改變、炎癥反響在糖尿病患者的病情開展及血栓性并發(fā)癥的發(fā)生中起著一定作用1。眾所周知，膠原是血管內(nèi)皮細(xì)胞外基質(zhì)的重要組份，不僅支持血小板粘附，而且是血小板活化的強(qiáng)誘導(dǎo)劑。血小板外表f受體鏈(freept

6、r-hain)參與血小板與膠原之間的反響過程2。冠心病根底是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化as及冠脈內(nèi)的血栓形成，在這一過程中，血小板外表f受體frafgaara起到非常重要的作用3。d40配體(d40ligand，d40l)是腫瘤壞死因子-tnf-家族的一種跨膜蛋白質(zhì)，d40l作為重要的炎癥信號(hào)通路的配體，在as發(fā)生、開展中起重要作用。有的研究說明免疫與炎癥反響參與了冠心病的as斑塊形成及破裂,d40l可以誘導(dǎo)細(xì)胞黏附,趨化因子形成,誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)降解,引發(fā)血小板的活化4,抗d40l抗體可以減少急性冠脈事件的發(fā)生。本研究主要對(duì)單純hd患者及2型糖尿病(2-d)有或無合并hd患者的血小板外表fra和d40l

7、的表達(dá)程度進(jìn)展檢測(cè)，并作相關(guān)分析。1資料與方法1.1一般資料住院患者104例,均承受冠狀動(dòng)脈造影檢查，根據(jù)是否患有2-d(空腹血糖程度7.0l/l或餐后2h血糖程度11.1l/l，或服用降糖藥物，或承受胰島素治療,排除繼發(fā)性糖尿病及型糖尿病患者被分為3組：組，hd患者36例，其空腹血糖程度5.61/l;組,2-d患者35例，冠狀動(dòng)脈造影結(jié)果正常；組,2-d合并hd患者33例。另選擇30名作為正常對(duì)照組，其既往史及體檢，心電圖，胸片，心臟超聲檢查及肝、腎功能，血糖等生化指標(biāo)均經(jīng)檢測(cè)分析，確診無d及hd。采集所有入選對(duì)象的有關(guān)臨床資料，剔除有急、慢性病毒或細(xì)菌感染史、免疫系統(tǒng)異?；蚰[瘤病史的患者。

8、1.2方法血小板外表fra和d40l表達(dá)程度的檢測(cè)：所有患者空腹12h后于清晨采取肘靜脈血2l，抗凝，取0.1l新穎血用150磷酸鹽緩沖液pbs稀釋后，分別與熒光標(biāo)記的單克隆抗體d32-異硫氰酸熒光素fitbizl,德國、d40l-fitalbihe,德國室溫避光孵育60in后，采用美國bd公司fasalibur型流式細(xì)胞儀分析，測(cè)定血小板外表fra和d40l的平均熒光強(qiáng)度fi，用ellquest軟件獲取結(jié)果。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用spss11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)展統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)與百分比表示，采用x2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn),以pearsn相關(guān)方程計(jì)算變量

9、間關(guān)系。p0.05為差異有顯著性。2結(jié)果2.1基線特征各組間年齡、男女比例沒有顯著差異,在三組患者中，血小板數(shù)大致一樣,主要危險(xiǎn)因素在三組間沒有明顯差異。見表1。表1對(duì)照組和疾病組根底臨床資料2.2各組血小板外表fra和d40l表達(dá)程度組的血小板外表fra和d40l的表達(dá)程度顯著高于組、組和正常對(duì)照組p0.050.01；組、組的以上指標(biāo)亦顯著高于正常對(duì)照組(p0.01)。見表2。表2各組血小板外表fra和d40l表達(dá)程度注：與對(duì)照組比較p0.01；與組比較p0.05；與組比較#p0.01。2.3血小板外表f受體fra和d40l表達(dá)程度的相關(guān)性分析血小板外表f受體fra和d40l的表達(dá)程度呈明顯

10、正相關(guān)(r=0.374,p0.05)。3討論d是一種慢性代謝性疾病,除葡萄糖、蛋白質(zhì)及脂質(zhì)代謝紊亂外尚有血小板功能變化及凝血纖溶系統(tǒng)功能的紊亂,可導(dǎo)致各種并發(fā)癥尤其是血管并發(fā)癥的出現(xiàn)。有報(bào)道認(rèn)為d患者的血小板活性與其血管并發(fā)癥的發(fā)生開展相關(guān),與患者病情的控制好壞相關(guān)。故研究d患者的血小板功能變化有一定的臨床意義。血小板的活化及炎癥反響在as的發(fā)生、開展中起重要作用。血小板的活性增強(qiáng)不但參與粥樣斑塊的形成,還參與斑塊的破裂,促進(jìn)血管內(nèi)血栓的形成。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)說明,抑制血小板與動(dòng)脈管壁的粘附,可以減少as的發(fā)生和開展。膠原是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分，在血小板與動(dòng)脈管壁的粘附中起重要作用，這一過程是通過血小

11、板f受體鏈與糖蛋白gp組成的復(fù)合物發(fā)揮作用的。在血小板膜上，gp與f受體鏈以復(fù)合物形式存在，兩者在構(gòu)造和功能上親密相關(guān)。gp跨膜區(qū)的精氨酸與f受體鏈跨膜區(qū)的天冬氨酸以鹽鍵的形式非共價(jià)連接5。將gp和f受體鏈基因共轉(zhuǎn)染k562細(xì)胞，后者表達(dá)這兩種蛋白并重建對(duì)膠原的粘附和細(xì)胞內(nèi)磷酸化反響；如僅轉(zhuǎn)染gp基因，那么細(xì)胞對(duì)膠原的上述反響消失6。f受體鏈缺陷小鼠,因血小板不能表達(dá)f受體鏈,gp也不能表達(dá),不能對(duì)膠原刺激產(chǎn)生反響2。提示這兩種蛋白分子在血小板膜外表定位和功能發(fā)揮上親密相關(guān)。f受體鏈以二聚體形式存在,其胞內(nèi)區(qū)肽鏈含有免疫受體酪氨酸活化基序(ita)，該基序中的酪氨酸發(fā)生磷酸化后募集并活化其他信

12、號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子,從而發(fā)生有序的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),產(chǎn)生生物效應(yīng),引起血小板的活化和分泌6,7。膠原介導(dǎo)的血小板活性增強(qiáng)可引起動(dòng)脈硬化及動(dòng)脈血栓形成,在這一過程中,fra起到關(guān)鍵性的作用3,8，作者在國外的研究及其他學(xué)者均發(fā)現(xiàn)d病人血小板fra的表達(dá)增強(qiáng)9，10)。但血小板fra在d合并hd病人的表達(dá)情況尚未見報(bào)道。本研究結(jié)果顯示,d合并hd病人血小板fra的表達(dá)程度明顯高于單純d及單純hd組和正常對(duì)照組(p0.050.01)，單純d及單純hd病人血小板f受體fra的表達(dá)程度也明顯高于正常對(duì)照組,可見,隨著d病人冠脈病變的出現(xiàn)，血小板f受體fra表達(dá)增加，其監(jiān)測(cè)有可能成為預(yù)測(cè)d病人合并冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的重

13、要指標(biāo)。d40l存在于血小板及t淋巴細(xì)胞外表,可與b淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞的d40相結(jié)合產(chǎn)生一系列炎癥反響。目前認(rèn)為d40l是各種免疫炎癥反響調(diào)節(jié)的信號(hào)通路,參與as斑塊內(nèi)主要細(xì)胞成分的炎癥反響調(diào)節(jié)11。d40l能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)組織因子,是炎癥反響、粥樣斑塊不穩(wěn)定的基矗假設(shè)阻斷d40l,可以減緩斑塊的開展,使其構(gòu)造特征趨于穩(wěn)定。d40l還可通過調(diào)節(jié)粥樣斑塊內(nèi)金屬蛋白酶的表達(dá),降解細(xì)胞外基質(zhì),減弱粥樣斑塊穩(wěn)定性12。另外,d40l調(diào)節(jié)的機(jī)體免疫反響信號(hào)通路,可能刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,血管平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生與as有關(guān)的生物活性因子,如選擇素、細(xì)胞因子等,使之在組織中表達(dá)增

14、強(qiáng)。d40l越高,as危險(xiǎn)性越大。因此,d40l是心臟事件的危險(xiǎn)因子,也是識(shí)別as斑塊和血栓形成的外周血標(biāo)志物。有文獻(xiàn)報(bào)道在急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者中d40l程度升高13，與本研究中d患者的情況相似,故d患者血小板活化與其冠狀動(dòng)脈的并發(fā)癥相關(guān)。2型d患者由于在疾病過程中存在血管內(nèi)皮細(xì)胞受損、脂質(zhì)過氧化等原因,可導(dǎo)致血小板激活?；颊叩母哐菭顟B(tài)本身也可導(dǎo)致血小板活化,血小板被激活后其凝血活性增高,表如今其聚集功能增強(qiáng)、細(xì)胞外表-顆粒膜蛋白表達(dá)量增多等。在本研究中2-d合并hd患者血小板fra及d40l增高p均0.01，并且通過直線相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血小板fra與d40l的表達(dá)程度呈明顯正相關(guān)，說明二者都

15、參與了冠脈斑塊的形成,對(duì)于as發(fā)病互相促進(jìn)。以上結(jié)果反映2型d患者體內(nèi)存在著血小板的活化及炎癥反響,血小板激活在d患者的病情開展、并發(fā)癥的發(fā)生方面起一定的作用。對(duì)d患者進(jìn)展抗血小板功能藥物的治療以降低血小板活化程度,有助于d病情的控制并可預(yù)防其冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。總之，血小板fra和d40l程度可能是反映d病人并發(fā)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的有用指標(biāo),對(duì)于d將來風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)具一定價(jià)值。但目前針對(duì)血小板fra的研究不多，詳細(xì)的機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究和驗(yàn)證?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1yazbekn,bapata,kleiann.plateletabnralitiesindiabetiellitusj.rnarteryd

16、is,2022,14:365-371.3alverleyd,brasse,hakerr,etal.ptentialrlefplateletfgaariiainllagen-ediatedplateletativatinassiatedithatherthrbsisj.atherslersis,2002,164:261-267.5leetsnkj,leetsnj.plateletllagenreeptrsj.thrbhaest,2001,86:189-197.7niesandtb,bergeier,shultev,etal.expressinandfuntinftheusellagenreept

17、rglyprteinviisstritlydependentnitsassiatiniththefrgaahainj.jbilhe,2000,275:23998-24002.9abezan,liz,shulz,etal.surfaeexpressinfllagenreeptrfreeptr-/glyprteinviisenhanednplateletsintype2diabetesandediatesreleasefd40ligandandativatinfendthelialellsj.diabetes,2022,53(8):2117-2121.10alverleyd,hakerr,ldaka,etal.inreasedp