金銀花采收加工及質(zhì)量評(píng)價(jià)方法研究

1、金銀花采收加工及質(zhì)量評(píng)價(jià)方法研究金銀花是忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花,又名銀花、雙花、二花等,是河南省的主要道地藥材之一,藥用歷史已有上千年。中藥來(lái)源復(fù)雜,在化學(xué)成分,外觀等方面存在巨大的不同,使得質(zhì)量控制的研究成為是一項(xiàng)復(fù)雜、艱辛又嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪^(guò)程。金銀花的采收和加工過(guò)程作為影響藥材質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一,如何制定合理的采收加工規(guī)范來(lái)提高藥材品質(zhì)是目前值得深入探究的問(wèn)題。中藥指紋圖譜及一測(cè)多評(píng)技術(shù)作為質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要手段,能夠全面反映該藥材所含化學(xué)成分類型、數(shù)量及含量,成為目前國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。本文利用高效液相色譜法等多種現(xiàn)代技術(shù)手段,對(duì)金銀花的不同采

2、收期、不同產(chǎn)地加工方法、質(zhì)量評(píng)價(jià)方法及抗病毒活性進(jìn)行研究,同時(shí)結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué),對(duì)不同批次的金銀花進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià),為合理制定金銀花采收加工規(guī)范和質(zhì)量控制提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。主要內(nèi)容如下:1.對(duì)金銀花的采收期和不同加工方式進(jìn)行系統(tǒng)研究通過(guò)測(cè)定一般檢查項(xiàng)（包括水分、灰分、酸不溶性灰分）和主要成分 TOC o 1-5 h z 含量（包括綠原酸、木犀草苷）。結(jié)果如下:不同采收期及產(chǎn)地加工方式的金銀花一般檢查項(xiàng)均符合藥典要求。金銀花采收從五月上旬持續(xù)到九月下旬,其中五月采收品質(zhì)最佳;適宜在花蕾期,尤其是二白至大白期采收?？疾炝瞬煌a(chǎn)地加工方式（包括晾干、烘干、蒸汽殺青烘干、微波殺青烘干）對(duì)金銀花外觀和內(nèi)

3、在品質(zhì)影響,其中微波殺青烘干法所得金銀花成品外觀飽滿,氣味濃郁,色澤碧綠,綠原酸含量明顯提高,較烘干法高出約1倍;不同產(chǎn)地加工方法對(duì)木犀草苷含量影響較小。并進(jìn)一步對(duì)微波殺青烘干法工藝優(yōu)化,得最佳工藝：殺青時(shí)間為45s130s,殺青功率為9kW,干燥溫度為75C,該工藝可適用于金銀花干燥并值得推廣。2.建立金銀花藥材的HPLC旨紋圖譜及咖啡酰奎寧酸類成分一測(cè)多評(píng)方法確定金銀花藥材的9個(gè)共有峰并指認(rèn)7個(gè)特征峰,25批的金銀花相似度均在0.93以上；建立5種咖啡?？鼘幩犷惓煞郑ㄐ戮G原酸、綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B和異綠原酸C一測(cè)多評(píng)的方法，測(cè)定結(jié)果與外標(biāo)法進(jìn)行對(duì)比，顯示所建立的多指標(biāo)定量指紋

4、圖譜方法可以用于評(píng)價(jià)金銀花藥材的質(zhì)量。3.對(duì)三個(gè)主產(chǎn)區(qū)的13批金銀花藥材進(jìn)行農(nóng)藥、重金屬及二氧化硫殘留檢測(cè)50種農(nóng)藥殘留檢出結(jié)果顯示:山東產(chǎn)區(qū)6批樣品共檢出5批、河南產(chǎn)區(qū)5批共檢出1批、河北產(chǎn)區(qū)2批均檢出,農(nóng)藥殘留包括苯醚甲環(huán)唑、毒死蜱、甲拌磷、甲基異硫磷、聯(lián)苯菊酯、氟氯氰菊酯和高效氟氯氰菊酯、氯氰菊酯和高效氯氰菊酯菊酯、氧樂(lè)果。重金屬檢測(cè)結(jié)果顯示:5批山東產(chǎn)區(qū)及2批河南產(chǎn)區(qū)的金銀花藥材鎘元素超過(guò)限量;山東產(chǎn)區(qū)中有2批金銀花藥材汞元素超過(guò)限量。13批金銀花藥材均未檢出二氧化硫殘留。金銀花農(nóng)殘和重金屬問(wèn)題值得深入分析與探究。4.優(yōu)化金銀花抗病毒成分提取工藝并比較不同批次金銀花抗病毒活性差異通過(guò)單

5、因素試驗(yàn),確定金銀花抗病毒成分最佳提取工藝:藥材粉末過(guò)三號(hào)藥典篩（50目）,以10倍量純水超聲提取50min。比較了不同批次金銀花提取物的抗病毒活性差異（神經(jīng)氨酸酶抑制率表示）,同時(shí)對(duì)金銀花中咖啡酰奎尼酸、環(huán)烯醚萜苷及黃酮類成分進(jìn)行抗病毒活性篩選,為深入研究金銀花的抗病毒活性成分物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)。5.HPLC指紋圖譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)評(píng)價(jià)金銀花藥材質(zhì)量對(duì)13批金銀花藥材的指紋圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)、聚類分析及主成分分析,相似度結(jié)果顯示,13批藥材的相似度均能達(dá)到0.95以上。聚類分析與主成分分析結(jié)合“一測(cè)多評(píng)”結(jié)果顯示河南封丘-烘貨、河南新密野生-烘貨和曬貨、河南新密大毛花-烘貨和河北巨鹿-烘貨質(zhì)量較好,其他產(chǎn)地的質(zhì)量相對(duì)較好,可用于評(píng)價(jià)金銀花藥材質(zhì)量。本文系統(tǒng)研究了金銀花采收和加工過(guò)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)并優(yōu)化了微波殺青烘干工藝，建立了HPLC旨紋圖譜并同時(shí)測(cè)