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1、扦插嫁接壓條 營(yíng)養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條 組織培養(yǎng) 指植物的離體部分(包括任何器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體),在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件(溫度及光照)下,得以生長(zhǎng)和分化成完整植株的一種無(wú)菌培養(yǎng)技術(shù)。又稱:植物離體培養(yǎng)一、植物組織培養(yǎng)的概念概念:細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。原因:是生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)植物組織培養(yǎng)原理:植物細(xì)胞的全能性二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程什么叫分化?其實(shí)質(zhì)是什么?什么叫脫(去)分化、再分化?愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)?如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化? 閱讀32頁(yè)解決下列問(wèn)題:二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程基因的選擇性表達(dá) 脫分化:讓

2、已經(jīng)分化的細(xì)胞,經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后, 失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分 化細(xì)胞的過(guò)程。再分化:脫分化的細(xì)胞,在一定的條件下, 又重新分化成各種特異性的組織細(xì)胞 的過(guò)程。愈傷組織:細(xì)胞排列疏松、無(wú)規(guī)則、高度 液泡化的無(wú)定形的薄壁細(xì)胞。愈傷組織愈傷組織是通過(guò)細(xì)胞分裂形成的,其細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則,高度液泡化呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。三、影響植物組織培養(yǎng)的因素:1、外植體的選取 不同植物的組織培養(yǎng)難度不同 同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同2、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基) 大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有機(jī)物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、

3、蔗糖等 植物激素:生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等未開(kāi)花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝3、不同植物激素使用順序使用順序 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 先生長(zhǎng)素,后細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂但不分化 先細(xì)胞分裂素,后生長(zhǎng)素 細(xì)胞既分裂也分化 同時(shí)使用 分化頻率提高 思考:以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問(wèn)題?生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素高 利于根和愈傷組織的形成適中 利于根芽的分化4、不同植物激素使用量生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值結(jié)果 比值高時(shí) 促根分化,抑芽形成 比值低時(shí) 促芽分化,抑根形成 比值適中 促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng) 5、pH、溫度、光照(菊花組培) pH=5.8 溫度控制在1822 每日光照12h6、消毒在培養(yǎng)的整個(gè)過(guò)程中,都需要是一個(gè)

4、無(wú)菌環(huán)境制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒 接種 培 養(yǎng)栽 培四、實(shí)驗(yàn)操作 移 栽沖洗酒精無(wú)菌水沖洗氯化汞無(wú)菌水沖洗至少三次之上配制各種母液配制培養(yǎng)基滅菌固體基質(zhì)型,含水量高、蓄水性強(qiáng)、透性好,適合栽培珍珠巖 ,珍珠巖是一種火山噴發(fā)的酸性熔巖,經(jīng)急劇冷卻而成的玻璃質(zhì)巖石,有弧形或圓形裂隙,如珍珠的結(jié)構(gòu),所以被命名為珍珠巖 。蛭石是一種天然、無(wú)毒的礦物質(zhì),在高溫作用下會(huì)膨脹的礦物。它是一種比較少見(jiàn)的礦物,屬于硅酸鹽。 1、培養(yǎng)基的滅菌(高壓蒸汽滅菌)2、外植體的消毒(酒精、氯化汞)3、接種的無(wú)菌操作(酒精、酒精燈灼燒)4、無(wú)菌箱中的培養(yǎng);5、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操作過(guò)程中,是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌環(huán)境的?結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(一

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