大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞工廠

1、大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞工廠第1頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二內(nèi)容一）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞工廠二）生物制品三）疫苗四）現(xiàn)代生物技術(shù)與基因工程五）單克隆抗體與抗體藥物六）干細(xì)胞與體細(xì)胞治療第2頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二我們熟知的細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)第3頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)1）無(wú)菌環(huán)境：超凈臺(tái)、安全柜2）生長(zhǎng)環(huán)境：CO2培養(yǎng)箱3）營(yíng)養(yǎng)環(huán)境：培養(yǎng)基4）貼壁環(huán)境：培養(yǎng)瓶（皿）等、細(xì)胞工廠第4頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二動(dòng)物細(xì)胞的形態(tài)貼壁細(xì)胞：細(xì)胞的生長(zhǎng)必須有可以貼附

2、的支持物表面，依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該表面上生長(zhǎng)、增殖，當(dāng)細(xì)胞在該表面生長(zhǎng)后，一般形成兩種形態(tài)，即成纖維樣細(xì)胞型或上皮樣細(xì)胞型 懸浮細(xì)胞：懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞兼性貼壁細(xì)胞：中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞、小鼠L929細(xì)胞 第5頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二（一）貼附型：大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞貼附生長(zhǎng)，屬于貼壁依賴性細(xì)胞貼附:是大多數(shù)有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)生存和生長(zhǎng)發(fā)育的基本存在方式結(jié)果: 基于貼附特性，使細(xì)胞與細(xì)胞之間相互結(jié)合形成組織，有機(jī)體的絕大多數(shù)細(xì)胞必須貼附于一固相表面才能生存和生長(zhǎng)。培養(yǎng)時(shí)：這些細(xì)胞被放到體外環(huán)境中以后,同樣需要貼附于某一固

3、相表面才能生存和生長(zhǎng)，因而屬于貼附型細(xì)胞貼附(錨定或錨著)依賴型(性)細(xì)胞：唯有貼附于固相表面才能生存的細(xì)胞第6頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二貼附生長(zhǎng)型細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、6孔板、96孔板第7頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二細(xì)胞貼附材料與表面貼附的固相表面材料：玻璃、塑料（聚苯乙烯）玻璃：本身具有親水性，適于細(xì)胞貼壁塑料：沒(méi)有親水性，不能使細(xì)胞貼壁，所以必須在 塑料表面進(jìn)行親水性接枝（等離子處理）第8頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二（二）懸浮型：見(jiàn)于少數(shù)特殊的細(xì)胞，如某些類型的癌細(xì)胞及白血病細(xì)胞。胞體

4、圓形，不貼于支持物上，呈懸浮生長(zhǎng)。這類細(xì)胞容易大量繁殖。概念：培養(yǎng)時(shí)不貼附于底物而呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)或以機(jī)械方法使保持懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)來(lái)源：自血，脾或骨髓，血中白細(xì)胞癌腫細(xì)胞特點(diǎn)：在懸浮中生長(zhǎng)良好細(xì)胞圓形，單個(gè)或小細(xì)胞團(tuán)優(yōu)點(diǎn)：生存空間大，提供數(shù)量大，傳代方便(不需消化)，易于收獲，可獲得穩(wěn)定狀態(tài)缺點(diǎn)：純化不方便，不能通過(guò)離心將死、活細(xì)胞分離第9頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二懸浮生長(zhǎng)型細(xì)胞第10頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二懸浮培養(yǎng)磁力攪拌器第11頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞工廠培養(yǎng)技術(shù)在大規(guī)模細(xì)胞

5、培養(yǎng)中的應(yīng)用.doc第12頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的缺點(diǎn)轉(zhuǎn)瓶技術(shù)為傳統(tǒng)的貼壁細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，細(xì)胞接種在旋轉(zhuǎn)的圓筒形培養(yǎng)器-轉(zhuǎn)瓶中，培養(yǎng)過(guò)程中轉(zhuǎn)瓶不斷旋轉(zhuǎn)，使細(xì)胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣。缺點(diǎn)：勞動(dòng)強(qiáng)度大，占地空間大，單位體積提供細(xì)胞生長(zhǎng)的表面積小，細(xì)胞生長(zhǎng)密度低，瓶間差異較難控制等，因而難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)?；a(chǎn)。重要的是：轉(zhuǎn)瓶由于不是靜止培養(yǎng)，產(chǎn)品質(zhì)量經(jīng)常達(dá)不到要求或由于細(xì)胞易破碎而存在DNA毒性潛在危險(xiǎn)，據(jù)稱國(guó)家準(zhǔn)備淘汰轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)技術(shù)。 第13頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二細(xì)胞工廠用于大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)與生產(chǎn)第14頁(yè)，共24頁(yè)，2022

6、年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二細(xì)胞工廠關(guān)鍵技術(shù)：貼壁處理：高真空等離子接枝表面處理（know-how: 接枝材料與接枝技術(shù)）材料性能：生物相容性（無(wú)細(xì)胞毒性）多層焊接技術(shù)：密封性與牢固性滅菌技術(shù)：Y射線輻照第15頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二細(xì)胞工廠競(jìng)爭(zhēng)Nunc CorningDHS 第16頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二DHS 細(xì)胞工廠DHS大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng) 單頁(yè).pdf第17頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二Nunc Cell Factory第18頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二

7、Corning CellSTACK ChamberChoice of traditional surface treatment(TC), new Corning CellBIND Surface for enhanced cell attachment, or Ultra-Low Attachment Surface for reduced cell attachment第19頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二Corning CellSTACK Chamber第20頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二三種細(xì)胞工廠的比較材料：均為PS塑料表面處理：各自的Know-how頂層：DHS同Nunc, 便于顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況焊接工藝：Nunc采用超聲焊接，Corning采用特殊膠粘接，Corning的更加牢固（不易開(kāi)裂），所以DHS采用Corning的粘接工藝只有DHS是可以定制任意層的細(xì)胞工廠第21頁(yè)，共24頁(yè)，2022年，5月20日，15點(diǎn)12分，星期二細(xì)胞工廠的使用.easyfillNUNC_EasyFill_FINAL_WM_0510.wmv第22頁(yè)，共24頁(yè)，2022年