基因工程的基本操作程序

1、基因工程的基本操作程序第1頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二自學(xué)提綱（自學(xué)教材P12P15，完成問(wèn)題）1、什么叫轉(zhuǎn)化？2、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有哪些？常用的是哪種方法？如何使用？3、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是什么？過(guò)程？4、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是什么？5、怎樣完成目的基因分子水平的檢測(cè)？6、怎樣完成目的基因個(gè)體生物水平的鑒定？第2頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化 方法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射法感受態(tài)細(xì)胞目的基因進(jìn)入

2、_內(nèi)，并且在 受體細(xì)胞內(nèi)維持_和_的過(guò)程受體細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)第3頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（1）農(nóng)桿菌介紹（2）原理及適用范圍第4頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二2、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞（1）方法：顯微注射法（2）程序：第5頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞（1）思考：為什么選用微生物作為受體細(xì)胞？（2）方法：Ca2+第6頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二四、目的基因的檢測(cè)與鑒定檢查是否成功檢測(cè)鑒定檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA

3、 上是否插入了目的基因檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法方法方法DNA分子雜交分子雜交（注意與上不同之處）抗原抗體雜交第7頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二多細(xì)胞生物的檢測(cè)，將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個(gè)體，檢測(cè)這些個(gè)體是否攝入目的基因，攝入的基因是否表達(dá)（是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀）。淘汰無(wú)變化的個(gè)體，保留有相應(yīng)變化的個(gè)體進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。例：用棉鈴飼喂棉鈴蟲(chóng)，如蟲(chóng)吃后不出現(xiàn)中毒癥狀，說(shuō)明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。如蟲(chóng)吃后中毒死亡，則說(shuō)明攝入了抗蟲(chóng)基因并得到表達(dá)。從個(gè)體水平鑒定第8頁(yè)，共16頁(yè)，2

4、022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二DNA分子雜交示意圖 采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物的DNA分子的單鏈放在一起，如果這兩個(gè)單鏈具有互補(bǔ)的堿基序列，那么，互補(bǔ)的堿基序列就會(huì)結(jié)合在一起，形成雜合雙鏈區(qū)；在沒(méi)有互補(bǔ)堿基序列的部位，仍然是兩條游離的單鏈。 第9頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二1）以下說(shuō)法正確的是 （ ） A、所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列 B、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體 C、運(yùn)載體必須具備的條件之一是：具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接 D、基因控制的性狀都能在后代表現(xiàn)出來(lái)C練習(xí)第10頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期

5、二2）不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是 A、能復(fù)制 （ ） B、有多個(gè)限制酶切點(diǎn) C、具有標(biāo)記基因 D、它是環(huán)狀DNAD練習(xí)第11頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二3）有關(guān)基因工程的敘述中，錯(cuò)誤的是（ ） A、DNA連接酶將黏性末端的堿基對(duì)連接起來(lái) B、 限制性內(nèi)切酶用于目的基因的獲得 C、目的基因須由運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞 D、 人工合成目的基因不用限制性內(nèi)切酶A練習(xí)第12頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二4）有關(guān)基因工程的敘述正確的是 （ ） A、限制酶只在獲得目的基因時(shí)才用 B、重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成 C、質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體 D、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)

6、可為合成目的基因提供資料D練習(xí)第13頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二5）基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的。在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 C、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 D、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)C練習(xí)第14頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二 為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開(kāi)發(fā)利用備受關(guān)注。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的_處，DNA連接酶作用于_處。（填“a”或“b”）aa第15頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，12點(diǎn)4分，星期二將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和_法。（3）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的_做探