絞股藍(lán)中槲皮素提取條件的優(yōu)化

1、絞股藍(lán)中槲皮素提取條件的優(yōu)化【摘要】目的優(yōu)化絞股藍(lán)中槲皮素的提取條件。方法以絞股藍(lán)中槲皮素為指標(biāo)，用液相色譜法測定，采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)L9(34)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，比照研究了微波輔助提取法(AE)與索氏提取和室溫浸漬法提取絞股藍(lán)中槲皮素的提取率。結(jié)果確定了AE提取絞股藍(lán)中槲皮素的最正確條件為：粒度160250，水分含量為15%，功率為100，萃取時間為10in。優(yōu)化的AE提取絞股藍(lán)中槲皮素提取產(chǎn)率分別比索氏提取法和室溫浸漬法進(jìn)步約46.2%和63.3%，提取時間僅是索氏提取法的1/24倍，是室溫浸漬法的1/144倍。結(jié)論AE不僅提取率高，而且提取時間大大縮短，是一種適宜于絞股藍(lán)中槲皮素快速高效的提取

2、方法。【關(guān)鍵詞】絞股藍(lán)槲皮素正交設(shè)計(jì)微波輔助提取高效液相色譜絞股藍(lán)Gynsteapentaphyllu(Thunb.)akin,GP,又名七葉膽、五葉參、七葉參等,是葫蘆科絞股藍(lán)屬植物,為多年生蔓生草本。具有廣泛的藥理作用，在抗衰老、抗疲勞、抗輻射和消除自由基的同時，還能改善神經(jīng)系統(tǒng)功能、抗?jié)?、抑制膽結(jié)石形成和調(diào)節(jié)內(nèi)分泌活動1，具有保護(hù)心、腦、血管和肝臟，降低血脂、降膽固醇、降轉(zhuǎn)氨酶、調(diào)節(jié)免疫和抗誘變等作用24。因此，對絞股藍(lán)的研究引起了國內(nèi)外廣闊學(xué)者的興趣，冠以絞股藍(lán)名稱的藥品、保健品、飲料、食品添加劑等的開發(fā)已成為一個研究熱點(diǎn)5。絞股藍(lán)所含化學(xué)成分復(fù)雜1，絞股藍(lán)含槲皮素(Queretin

3、)等多種成分6。提取絞股藍(lán)中槲皮素有乙醇滲漉法1、索氏提取法7等；采用微波輔助萃取iraveassistedextratin，簡稱AE絞股藍(lán)中槲皮素的方法未見文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)建立微波輔助萃取絞股藍(lán)中槲皮素的方法，優(yōu)化絞股藍(lán)中槲皮素的提取條件，可望為絞股藍(lán)中有效成分提取方法提供一些理論根據(jù)。1器材與材料日本島津L-10Avp高效液相色譜儀；SPD-10Avp紫外可見光檢測器；LASS-VPV5103色譜數(shù)據(jù)處理工作站；AEL-200電子分析天平湘儀天平儀器廠，湖南長沙；改裝的NB-微波爐(蘇州三星電子，江蘇蘇州)。槲皮素對照品(中國藥品生物制品檢驗(yàn)所)；絞股藍(lán)采自湖南邵陽市，經(jīng)邵陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)

4、校藥學(xué)系鑒定；乙腈為色譜純,水為重蒸水,其他試劑均為分析純。2方法2.1樣品處理2.2色譜條件Diansil18柱(2004.6,5)；流動相：乙腈：0.02%H3P4水溶液(6040,V/V；流速：1l/in；柱溫：30；檢測波長：254n。在本色譜條件下，對照品和樣品的色譜圖見圖1。3結(jié)果與討論3.1微波輔助萃取參數(shù)的優(yōu)化微波加熱具有選擇性，即不同介電常數(shù)的物質(zhì)，其吸收微波能的程度不同，由此產(chǎn)生的熱能及傳遞給周圍環(huán)境的熱能也不一樣8。鑒于此特性，在實(shí)驗(yàn)的過程中，我們考慮了影響微波輔助萃取的4個參數(shù)粒度、水分含量、萃取時間及功率，按照4因素3程度L9(34)對實(shí)驗(yàn)進(jìn)展設(shè)計(jì)見表1，選擇了最正確

5、萃取條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。表1正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)因素與程度略表2正交設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理略從表2的分析結(jié)果來看，粒度對槲皮素提取率的影響隨著顆粒粒徑增加，槲皮素提取產(chǎn)率相應(yīng)減少,當(dāng)粒徑小于160時,對產(chǎn)率的影響不顯劇。從功率對槲皮素提取產(chǎn)率的影響可看出，100的功率提取效率最好，在該功率下微波就足以能穿透整個萃取體系，整個萃取體系樣品內(nèi)外部能同等程度地承受微波輻射。在給定的實(shí)驗(yàn)條件中，在10in效果最好。適量的水分含量有利于目的物的提取，水分含量在15%時，提取效率最好。綜合表2分析來看，在各影響參數(shù)中，按照對槲皮素提取產(chǎn)率影響的主次Deltak大小來分，依次為樣品的粒度、功率、時間和水分。而最正確萃

6、取條件應(yīng)為：粒度160250，功率為100，萃取時間為10in，水分含量為15%。3.2AE、索氏提取法與室溫浸漬法的比較按照“3.1項(xiàng)優(yōu)選的最優(yōu)條件，進(jìn)展優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，得到AE、索氏提取法和室溫浸漬法3種方法提取絞股藍(lán)中槲皮素的產(chǎn)率分別為：0.018%，0.013%和0.011%，結(jié)果與文獻(xiàn)7的報(bào)道接近。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出：在設(shè)定的實(shí)驗(yàn)條件下，微波輔助提取絞股藍(lán)中槲皮素的提取產(chǎn)率最高，提取絞股藍(lán)中槲皮素的提取率分別比索氏提取法和室溫浸漬法相進(jìn)步約46.2%和63.6%，而且提取時間僅是索氏提取回流的1/24倍，是室溫浸漬法的1/144倍。因此，AE具有快速高效的特點(diǎn)，大大節(jié)省了能源。4結(jié)論本實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了微波輔助萃取絞股藍(lán)中槲皮素的提取條件，即粒度160250，水分含量為15%，功率為100，萃取時間為10i