細(xì)胞模型精品課件

1、關(guān)于細(xì)胞模型第一張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月口服給藥是最重要的給藥方式之一，藥物在腸道內(nèi)的吸收速度及程度是影響藥物生物利用度的重要因素。胃腸道上皮細(xì)胞是藥物口服吸收的必經(jīng)之路。藥物的腸道吸收研究可以提供吸收機(jī)制、吸收部位及影響吸收的因素等重要信息，為藥物的研發(fā)提供參考。第二張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月目前研究口服藥物吸收的方法主要有體內(nèi)法、在體法和體外法3種：體內(nèi)法能夠真實(shí)反映藥物的總體吸收情況，但難以從細(xì)胞和分子水平研究藥物的吸收機(jī)制;在體法保證了腸道神經(jīng)和血管的完整性，常用于研究藥物的滲透和吸收動(dòng)力學(xué);體外法簡便易行，試驗(yàn)條件容易控制，主要用于研究藥物的吸收機(jī)制。細(xì)

2、胞模型是體外法評價(jià)藥物吸收的重要手段，最常用的是Caco-2細(xì)胞模型。第三張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月1、產(chǎn)生2、特點(diǎn)3、機(jī)制4、優(yōu)點(diǎn)5、不足6、作用第四張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 Caco-2細(xì)胞模型(human colon adenocarcinoma cell line ) 最早是由美國堪薩斯大學(xué)藥學(xué)院Ronald T. Borchardt 博士的實(shí)驗(yàn)室以及英國的Ciba-Geigy實(shí)驗(yàn)室在二十世紀(jì)八十年代后期建立的。是第一個(gè)被國外制藥企業(yè)以及實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用的腸道吸收的細(xì)胞模型。也是迄今為止的最好的腸道轉(zhuǎn)運(yùn)模型和上皮轉(zhuǎn)運(yùn)模型。第五張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于202

3、2年6月 Caco-2細(xì)胞系來源于人的直腸癌，其結(jié)構(gòu)和生化作用類似于人小腸上皮細(xì)胞，含有與小腸刷狀緣上皮相關(guān)的酶系，與正常的成熟小腸上皮細(xì)胞在體外培育過程中出現(xiàn)逆向分化(反分化)不同，Caco-2細(xì)胞在傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)條件下，生長在多孔的可滲透的聚碳酸酯膜上可達(dá)到融合并自發(fā)分化為腸上皮細(xì)胞，形成連續(xù)的單層(monolayer)。 第六張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月培育約3星期后，其電阻值達(dá)到400 （有的要求達(dá)到600），它們形成致密的細(xì)胞單層，結(jié)構(gòu)和生化作用類似于小腸上皮細(xì)胞，3-5天內(nèi)適合進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn)。第七張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月AP Side(Lumen) BL

4、Side(Serosal)Apical to Basolateral Transport: Absorptive TransportA to B Basolateral to Apical Transport: Secretory TransportB to A Efflux to both sidesCaco-2 Cell Culture Model第八張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第九張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月Caco-2細(xì)胞雖然是來源于人的結(jié)腸癌細(xì)胞，但在很多方面，其功能與人小腸上皮細(xì)胞是相似的，同源性好，不會(huì)產(chǎn)生上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)和生理學(xué)性質(zhì)上的種屬差異；與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

5、相比，Caco-2細(xì)胞生命力強(qiáng)，培養(yǎng)方法簡單，相對要比動(dòng)物實(shí)驗(yàn)更省時(shí)、經(jīng)濟(jì)；Caco-2細(xì)胞模型的優(yōu)點(diǎn)第十張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月Caco-2細(xì)胞模型可同時(shí)對大批量藥物進(jìn)行快速篩選，所需藥物量少，僅需要數(shù)毫克即可；培養(yǎng)成熟的Caco-2細(xì)胞是致密的單層細(xì)胞，具有與正常的小腸上皮細(xì)胞相同的極性，可以從不同方向進(jìn)行攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)，可用于區(qū)分腸腔內(nèi)吸收的差別；第十一張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 但是，Caco-2細(xì)胞與人小腸上皮也有一定差異，在研究藥物轉(zhuǎn)運(yùn)中表現(xiàn)出一定的局限性，如:缺少粘蛋白產(chǎn)生細(xì)胞，缺少腸壁粘液層；具有較高的細(xì)胞通透性，若喂養(yǎng)次數(shù)多，某些酶載體或細(xì)胞內(nèi)容

6、物溢出；缺少某些代謝酶；Caco-2細(xì)胞模型的局限性第十二張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞的培養(yǎng)和代系對于Caco-2細(xì)胞形態(tài)學(xué)和生理性質(zhì)有影響，引起細(xì)胞對藥物轉(zhuǎn)運(yùn)產(chǎn)生差別；由于培養(yǎng)條件差別，使不同實(shí)驗(yàn)室出來結(jié)果缺乏可比性；第十三張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月Caco-2細(xì)胞模型在國外被廣泛用于新藥的篩選及吸收機(jī)制的研究。2002年被國際認(rèn)定為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)替代方法,已經(jīng)被FDA批準(zhǔn)。第十四張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月藥物溶出/Caco-2細(xì)胞組合模型可通過組合模型滲透性結(jié)果預(yù)測藥物的體內(nèi)吸收，用于評價(jià)固體制劑釋藥特征的合理性。因此，藥物溶出/Caco-2細(xì)胞組合模型可作為制劑處方優(yōu)化和質(zhì)量控制的重要研究模型，促進(jìn)Caco-2細(xì)胞模型在制劑學(xué)中的應(yīng)用。第十五張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月盡管Caco-2細(xì)胞模型有許多限制，但是在闡明藥物吸收機(jī)制，預(yù)測體內(nèi)吸收和藥物相互作用，設(shè)計(jì)有更好吸收和更高生物利用度的口服藥物或制劑并評價(jià)它們的安全性等方面仍然是一個(gè)很好的工具。第十六張，PPT共十九頁，創(chuàng)作于2022年6月隨著新一代細(xì)胞模型的建立，如加速的Caco-2細(xì)胞穿透模型，使原有的Caco-2細(xì)胞單層模型的一些缺點(diǎn)將得到克服，細(xì)胞模型在藥物開發(fā)研究中將發(fā)揮愈來愈大的作用，Caco-2細(xì)胞模型的研