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1、羊水基質(zhì)金屬卵白酶與胎膜破碎的干系臨盆時(shí)胎膜天然破碎的機(jī)理尚不完全明晰,如今以為,胎膜中膠原的落解是其產(chǎn)生的緊張基矗膠原的落解依靠基質(zhì)金屬卵白酶(atrixetallprtEinase,P)的作用1。為探究P與胎膜正常破碎及胎膜早破(preaturerupturefebrane,PR)產(chǎn)生的干系,我們檢測(cè)了胎膜正常破碎及PR孕婦羊水中總P的活性及其身分,現(xiàn)報(bào)道如下。一、資料與要領(lǐng)1.資料泉源:網(wǎng)絡(luò)本院足月剖宮產(chǎn)臨盆的孕婦60例,胎膜正常破碎者30例為比較組,PR者30例為PR組,每組中未臨產(chǎn)、暗藏期及活潑期各10例,均無(wú)妊娠歸并癥。2.要領(lǐng):(1)標(biāo)本網(wǎng)羅:于剖宮產(chǎn)時(shí)抽取羊水3l,立即離心、過(guò)
2、濾,-70保存。(2)酶活性的測(cè)定:羊水消化生物素標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟明膠,用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定剩余明膠的含量,換算出酶的活性以37下每1l羊水12h消化的明膠量表現(xiàn),單元:ng/l*12h,用加乙二胺四乙酸(終濃度80l/L)的羊水作陰性比較。3羊水中P身分的酶譜闡發(fā):參照l(shuí)l等2先容的要領(lǐng)舉行明膠電泳,電泳完畢將凝膠置于造就皿中,經(jīng)2.5%Tritn-X100洗滌后,37下孵育18h,用考馬斯亮藍(lán)G-250染色1h,末了脫色48h;酶經(jīng)電泳組分后,將該處的明膠消化,染色后形成不著色的透明帶。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處置懲罰:實(shí)行效果作t查驗(yàn)。二、效果1.比較組羊水總P的活性變革:未臨產(chǎn)時(shí)為(491
3、5)ng/l*12h,暗藏期為(5815)ng/l*12h,活潑期為(10229)ng/l*12h。暗藏期高于未臨產(chǎn)期,但差異無(wú)明顯性,活潑期較暗藏期明顯升高,差異有極明顯性(P0.01)。2.PR組羊水中總P的活性變革:PR組未臨產(chǎn)時(shí)羊水中總P活性為(8510)ng/l*12h,暗藏期為(917)ng/l*12h,活潑期為(10423)ng/l*12h。暗藏期高于未臨產(chǎn)期,但差異無(wú)明顯性,活潑期較未臨產(chǎn)期明顯升高,差異有極明顯性(P0.01)。在未臨產(chǎn)期和暗藏期,PR組羊水中總P的活性均明顯高于比較組,差異有極明顯性(P0.01)。3.羊水中P的酶譜變革:羊水中較明白的P帶有4條,相對(duì)分子質(zhì)
4、量別離為92000、83000、72000和66000。比較組未臨產(chǎn)期羊水中以92000和72000的P條帶為主,活潑期那么4條條帶都有,此中相對(duì)分子質(zhì)量為92000和83000的P條帶所消化的明膠帶,較未臨產(chǎn)期顯著增寬。PR組羊水中P的身分與比較組根本雷同,但在未臨產(chǎn)時(shí)羊水中各P消化的明膠帶較比較組寬。三、討論1.P的特性:P是一類布局中含有鋅和鈣等金屬離子的卵白水解酶,能水解膠原、彈性卵白、氨基葡聚糖等多種細(xì)胞外基質(zhì),如今已創(chuàng)造的有十幾種,其布局相似,均以酶原的情勢(shì)從細(xì)胞中排泄,活性都能被構(gòu)造金屬卵白酶按捺因子和乙二胺四乙酸按捺。比年來(lái)的研究創(chuàng)造,P大概在胎膜破碎、臨盆及產(chǎn)后子宮復(fù)舊等歷程
5、中發(fā)揮緊張的生理成效。2.羊水中P的身分:Vadill-rtega等3在正常臨盆產(chǎn)婦的羊水中,檢測(cè)出了3條P條帶,相對(duì)分子質(zhì)量別離為183000、92000和83000,別離是P-9的二聚體、酶原和活化情勢(shì)。但我們創(chuàng)造,羊水中存在4種P身分,相對(duì)分子質(zhì)量別離為92000、83000、72000和66000,未能創(chuàng)造183000的P-9二聚體,推測(cè)大概是人種的差異,也有大概是要領(lǐng)的差異。按照相對(duì)分子質(zhì)量推測(cè),92000和66000的P大概別離是P-9的酶原和活化情勢(shì),而72000和66000為P-2的酶原和活化情勢(shì)。因此,羊水中P的重要身分為P-9,包羅其酶原和活化情勢(shì),畢竟是否存在P-9二聚體
6、和P-2有待進(jìn)一步的研究證明。3.羊水中P活性變革與胎膜破碎的干系:胎膜完備性的保持依靠宮腔內(nèi)壓與胎膜強(qiáng)度的平衡。正常臨盆活潑期宮內(nèi)壓增長(zhǎng)和胎膜強(qiáng)度落落導(dǎo)致胎膜破碎。膠原的合成不敷和落解增長(zhǎng),引起胎膜強(qiáng)度落落。胎膜中膠原的大量落解大概與P活性升高有關(guān)。aj等4創(chuàng)造,臨盆發(fā)動(dòng)后胎膜構(gòu)造中P的活性明顯升高,并以P-9活性升高更顯著;我們的研究效果表白,比較組羊水中總P的活性在產(chǎn)程的活潑期明顯升高,從明膠酶譜來(lái)看,以P-9的升高更顯著。因此活潑期羊水中總P,特殊是P-9活性的增高,引起胎膜中膠原的大量落解,大概是胎膜破碎產(chǎn)生的緊張生理基矗4.羊水中P活性非常與PR的干系:PR患者的胎膜中膠原的含量低
7、于正常同孕周婦女,這與其胎膜中膠原合成淘汰和剖析非常增長(zhǎng)有關(guān)。我們創(chuàng)造PR組羊水中總P活性非常升高。尚有研究表白,PR患者羊水中基質(zhì)金屬卵白酶按捺因子的含量那么明顯低于正常孕婦5。因此,羊水中總P活性非常增高和其按捺因子的低落,從而引起胎膜中膠原的過(guò)分落解,大概是PR產(chǎn)生的重要緣故原由之一。PR的產(chǎn)生與熏染及炎癥嚴(yán)密相干6,熏染或炎癥歷程中產(chǎn)生的細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素1、8(IL-1、IL-8)及細(xì)菌產(chǎn)生的脂多糖等都能誘導(dǎo)P的合成和活化。因此我們推測(cè)羊水中P活性的非常升高,大概是多種因素誘發(fā)PR的配合環(huán)節(jié)之一。參考文獻(xiàn)2,llU,YunglerbGL,RsinskiKB,etal.Turprte
8、r-stiulatedr93,000gelatinaseseretedbynralandalignanthuanells:IslatinandharaterizatinftheenzyefrHT1080turells.anerResearh,1990,50:6162-6170.3,Vadill-rtegaF,Gnzalez-AvilaG,FuthEE,etal.92-KDtypeIVllagenase(atrixetallprtEinase-9)ativityinhuananihrininreasesithlabr.AJPathl,1995,146:148-156.4,ajJG,Kankfer.Ativityf72-KDand92-KDatrixetallprteinasesinplaentaltissuesfsithandithutretainedfetalebranes.Plaenta,1997,18:683-687.5,Vadill-rtegaF,HernanderzA,Gnzalez-AvilaG,etal.Inreasedatrixetallprteinaseativityandreduedtissueinhibitrfetallprteinase-1levelsinanitifluidsfrpregnaniespliatedbypr
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