DNA重組技術(shù)的基本工具doc-泉州市第七中學(xué)首

1、DNA重組技術(shù)的基本工具1實(shí)施基因工程第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來，這要利用限制性內(nèi)切酶。一種限制性內(nèi)切酶能識(shí)別DNA子中的GAATTC順序，切點(diǎn)在G和A之間，這是應(yīng)用了酶的A酶的高高效性 B酶的專專一性 CC酶的的多樣性性 D酶的催催化活性性受外界界條件影影響2以下說說法正確確的是 A所所有的限限制酶只只能識(shí)別別同一種種特定的的核苷酸酸序列BB質(zhì)粒粒是基因因工程中中惟一的的運(yùn)載體體C運(yùn)運(yùn)載體必必須具備備的條件件之一是是：具有有多個(gè)限限制酶切切點(diǎn)，以以便與外外源基因因連接DD基因因治療主主要是對(duì)對(duì)有缺陷陷的細(xì)胞胞進(jìn)行修修復(fù)3.下列黏黏性末端端屬于同同一種限限制性內(nèi)內(nèi)切酶切

2、切割的是是（ ）ABCD4.下列四四條DNNA分子子，彼此此間具有有粘性末末端的一一組是 A B C D5依右圖圖有關(guān)基基因工程程的工具具酶功能能的敘述述，不正確的的是 A切斷aa處的酶酶為限制制核酸性性內(nèi)切酶酶 B連接aa處的酶酶為DNNA連接接酶C切斷bb處的酶酶為解旋旋酶 D切斷bb處的為為限制性性內(nèi)切酶酶6不屬于于質(zhì)粒被被選為基基因運(yùn)載載體的理理由是 A能復(fù)制制 B有多個(gè)個(gè)限制酶酶切點(diǎn)C具具有標(biāo)記記基因 D它它是環(huán)狀狀DNAA7.基因工工程技術(shù)術(shù)也稱為為DNAA重組技技術(shù)，其其實(shí)施必必須具備備的四個(gè)個(gè)必要條條件是A.目的基基因 限限制性內(nèi)內(nèi)切酶 運(yùn)運(yùn)載體 體細(xì)胞胞 B.重組DDNA R

3、NAA聚合酶酶 限制性性內(nèi)切酶酶 連接接酶C.工具酶酶 目目的基因因 運(yùn)運(yùn)載體 受體細(xì)細(xì)胞D.模板DDNA 信使RRNA 質(zhì)粒粒 受體細(xì)細(xì)胞8下列關(guān)關(guān)于各種種酶作用用的敘述述，不正正確的是是ADNAA連接酶酶能使不不同脫氧氧核苷酸酸的磷酸酸與脫氧氧核糖連連接BRNAA聚合酶酶能與基基因的特特定位點(diǎn)點(diǎn)結(jié)合，催催化遺傳傳信息的的轉(zhuǎn)錄C一種DDNA限限制酶能能識(shí)別多多種核苷苷酸序列列，切割割出多種種目的基基因D胰蛋白白酶能作作用于離離體的動(dòng)動(dòng)物組織織，使其其分散成成單個(gè)細(xì)細(xì)胞9.下列關(guān)關(guān)于限制制酶的說說法不正正確的是是A.限制酶酶廣泛存存在于各各種生物物中，尤尤其在微微生物細(xì)細(xì)胞中分分布最多多B.不

4、同的的限制酶酶識(shí)別不不同的核核苷酸序序列C.限制酶酶能識(shí)別別不同的的核苷酸酸序列，體體現(xiàn)了酶酶的專一一性D.限制酶酶的作用用只是用用來提取取目的基基因10有關(guān)關(guān)基因工工程的敘敘述中，不正確的是 A.DNAA連接酶酶將黏性性未端的的堿基對(duì)對(duì)連接起起來 B.限制性性內(nèi)切酶酶可用于于目的基基因的獲獲得 C.目的基基因須由由運(yùn)載體體導(dǎo)入受受體細(xì)胞胞 D.人工合合成目的的基因不不用限制制性內(nèi)切切酶11下圖圖所示限限制酶切切割基因因分子的的過程，從從圖中可可知，該該限制酶酶能識(shí)別別的堿基基序列和和切點(diǎn)是是ACTTTAAGG，切點(diǎn)點(diǎn)在C和和T之間間 BCTTTAAAG，切切點(diǎn)在GG和A之之間CGAAATTC

5、C，切點(diǎn)點(diǎn)在G和和A之間間 DGAAATTTC，切切點(diǎn)在CC和T之之間 12.下列列關(guān)于質(zhì)質(zhì)粒的敘敘述，正正確的是是（）A、質(zhì)粒是是廣泛存存在于細(xì)細(xì)菌細(xì)胞胞中的一一種顆粒粒狀細(xì)胞胞器B、質(zhì)粒是是細(xì)菌細(xì)細(xì)胞質(zhì)中中能夠自自主復(fù)制制的小型型環(huán)狀DDNA分分子C、質(zhì)粒只只有在導(dǎo)導(dǎo)入宿主主細(xì)胞后后才能在在宿主細(xì)細(xì)胞內(nèi)復(fù)復(fù)制D、細(xì)菌質(zhì)質(zhì)粒的復(fù)復(fù)制過程程一定是是在宿主主細(xì)胞外外獨(dú)立進(jìn)進(jìn)行的13科學(xué)學(xué)家常選選用的細(xì)細(xì)菌質(zhì)粒粒往往帶帶有一個(gè)個(gè)抗菌素素抗性基基因，該該抗性基基因的主主要作用用是A提高受受體細(xì)胞胞在自然然環(huán)境中中的耐熱熱性 B有有利于檢檢測目的的基因否否導(dǎo)入受受體細(xì)胞胞C增加質(zhì)質(zhì)粒分子子的相對(duì)對(duì)分子

6、質(zhì)質(zhì)量 D便便于與外外源基因因連接14下圖圖是基因因工程主主要技術(shù)術(shù)環(huán)節(jié)的的一個(gè)基基本步驟驟，這一一步需用用到的工工具是ADNAA連接酶酶和解旋旋酶 BDDNA聚聚合酶和和限制性性核酸內(nèi)內(nèi)切酶C限制性性核酸內(nèi)內(nèi)切酶和和DNAA連接酶酶 DDDNA聚聚合酶和和RNAA聚合酶酶15限制制酶是一一種核酸酸切割酶酶，可辨辨識(shí)并切切割DNNA分子子上特定定的核苷苷酸堿基基序列。下下圖為四四種限制制酶BaamHII，EcooRI，Hinnd以及Bggl的辨識(shí)識(shí)序列。箭箭頭表示示每一種種限制酶酶的特定定切割部部位，其其中哪兩兩種限制制酶所切切割出來來的DNNA片段段末端可可以互補(bǔ)補(bǔ)黏合？其正確確的末端端互補(bǔ)

7、序序列為何何？ A. BaamHII和EcooRI；末末端互補(bǔ)補(bǔ)序列AATTTB. BaamHII和Hinnd；末端端互補(bǔ)序序列GATTCC. EccoRII和Hinnd；末端端互補(bǔ)序序列AATTTD. BaamHII和BgllII；末末端互補(bǔ)補(bǔ)序列GATTC16在DDNA 測序工工作中，需需要將某某些限制制性內(nèi)切切核酸酶酶的限制制位點(diǎn)在在 DNNA上定定位，使使其成為為 DNNA 分分子中的的物理參參照點(diǎn)。這這項(xiàng)工作作叫做“限制酶酶圖譜的的構(gòu)建”。假設(shè)設(shè)有以下下一項(xiàng)實(shí)實(shí)驗(yàn)：用用限制酶酶 Hinnd，BaamH和二者者的混合合物分別別降解一一個(gè) 44kb（11kb即即1千個(gè)個(gè)堿基對(duì)對(duì)）大小小的

8、線性性DNAA 分子子，降解解產(chǎn)物分分別進(jìn)行行凝膠電電泳，在在電場的的作用下下，降解解產(chǎn)物分分開，如如下圖所所示。據(jù)此分析，這這兩種限限制性內(nèi)內(nèi)切核酸酸酶在該該DNAA 分子子上的限限制位點(diǎn)點(diǎn)數(shù)目是是以下哪哪一組？AHinnd1個(gè)，BBamHH2 個(gè) BBHiind2個(gè)，BBamHH3個(gè)CHinnd2個(gè)，BBamHH1 個(gè) DDHiind和BaamH各有2 個(gè)17.兩個(gè)個(gè)核酸片片段在適適宜的條條件下，經(jīng)經(jīng)X酶的的作用，發(fā)發(fā)生下述述變化，則則X酶是是A.連接酶酶 B.RRNA聚聚合酶 CC.DNNA聚合合酶 DD.限制制酶18基因因工程中中涉及多多種工具具酶：（1）限制制性內(nèi)切切酶是一一類能識(shí)識(shí)

9、別特定定核苷酸酸序列并并在特定定位點(diǎn)切切割雙鏈鏈DNAA的“基因剪剪刀”。被限限制酶識(shí)識(shí)別的序序列往往往正反讀讀順序相相同，斷斷裂的位位置交錯(cuò)錯(cuò)，但又又是圍繞繞著一個(gè)個(gè)軸線（對(duì)對(duì)稱軸）對(duì)對(duì)稱排列列，如下下左圖。PPstII和EccoRII都是限限制酶。請(qǐng)請(qǐng)補(bǔ)全下下右圖中中的互補(bǔ)補(bǔ)鏈，畫畫出對(duì)稱稱軸以及及切割后后的產(chǎn)物物。 （2）DNNA連接接酶是基基因操作作的“針線”，其作作用是把把基于 能力而而粘貼在在一起但但存在的的切口封封閉，進(jìn)進(jìn)而才可可能形成成有意義義的 。（3）逆轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶也也常被用用于基因因工程，其其存在于于 （生物物）中，催催化以 為模板板合成DDNA的的過程。 19.利用用基因工

10、工程生產(chǎn)產(chǎn)蛋白質(zhì)質(zhì)藥物，經(jīng)經(jīng)歷了三三個(gè)發(fā)展展階段。第第一階段段，將人人的基因因轉(zhuǎn)入細(xì)細(xì)菌細(xì)胞胞；第二二階段，將將人的基基因轉(zhuǎn)入入小鼠等等動(dòng)物的的細(xì)胞。前前兩個(gè)階階段都是是進(jìn)行細(xì)細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)，提取取藥物。第第三階段段，將人人的基因因轉(zhuǎn)入活活的動(dòng)物物體，飼飼養(yǎng)這些些動(dòng)物，從從乳汁或或尿液中中提取藥藥物。（1）將人人的基因因轉(zhuǎn)入異異種生物物的細(xì)胞胞或個(gè)體體內(nèi)，能能夠產(chǎn)生生藥物蛋蛋白的原原理是基基因能控控制。（2）人的的基因能能和異種種生物的的基因拼拼接在一一起，是是因?yàn)樗鼈兊姆址肿佣季呔哂须p螺螺旋結(jié)構(gòu)構(gòu)，都是是由四種種_構(gòu)成，基基因中堿堿基配對(duì)對(duì)的規(guī)律律都是_。（3）人人的基因因在異種種生物細(xì)細(xì)胞中

11、表表達(dá)成蛋蛋白質(zhì)時(shí)時(shí)，需要要經(jīng)過和和翻譯兩兩個(gè)步驟驟。在翻翻譯中需需要的模模板是，原原料是氨氨基酸，直直接能源源是ATTP，搬搬運(yùn)工兼兼裝配工工是，將將氨基酸酸的肽鍵鍵連接成成蛋白質(zhì)質(zhì)的場所所是_，“翻翻譯”可可理解為為將由_個(gè)“字字母”組組成的核核酸“語語言”翻翻譯成由由個(gè)“字字母”組組成的蛋蛋白質(zhì)“語語言”，從從整體來來看在翻翻譯中充充任著“譯譯員”。（4）利用轉(zhuǎn)基因牛、羊乳汁提取藥物工藝簡單，甚至可直接飲用治病。如果將藥物蛋白基因移到動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，利用轉(zhuǎn)基因牛羊尿液生產(chǎn)提取藥物比乳汁提取藥物的更大優(yōu)越性在于：處于不同發(fā)育時(shí)期的動(dòng)物都可生產(chǎn)藥物。20.在某某一特定定的植物物基因工工程中，用用土壤農(nóng)農(nóng)桿菌中中的Tii質(zhì)粒作作為運(yùn)載載體。把把目的基基因重組組入Tii質(zhì)粒上上的T-DNAA片段中中，再將將重組的的T-DDNA插插入植物物細(xì)胞的的染色體體DNAA中。(1)科學(xué)學(xué)家在進(jìn)進(jìn)行上述述基因操操作時(shí)，要要用同一一種 分別切切割質(zhì)粒粒和目的的基因，質(zhì)質(zhì)粒的黏黏性末端端與目的的基因DDNA片片段的黏黏性末端端就可通通過 而黏黏合。(2)將攜攜帶抗除除草劑基基因的重重組Tii質(zhì)粒導(dǎo)導(dǎo)入二倍倍體油菜菜細(xì)胞，經(jīng)經(jīng)培養(yǎng)、篩篩選獲得得一株有有抗除草草劑特性性的轉(zhuǎn)基基因植株株。經(jīng)分分析，該該植株含含有