藤黃酸HPβCD包合物凍干粉針的質(zhì)量標準初步研究

1、藤黃酸HP-CD包合物凍干粉針的質(zhì)量標準初步研究【摘要】目的制備藤黃酸的HP-D包合物凍干粉針,并初步考察藤黃酸包和物凍干粉針的質(zhì)量標準。方法采用冷凍枯燥法制備包和物，HPL分析藤黃酸的體外釋放規(guī)律，并測定包合物凍干粉中藤黃酸的含量。結(jié)果優(yōu)化的包合工藝制備的凍干粉針外觀形態(tài)，溶解性好,用生理鹽水稀釋200毫升后在一個半小時內(nèi)釋放不超過20%,建立的含量測定方法重現(xiàn)性好、準確簡便。結(jié)論含量測定方法可行，包合及凍干工藝優(yōu)化合理?！娟P(guān)鍵詞】藤黃酸包合物質(zhì)量標準1藤黃酸的提取別離純化工藝1.1.1藤黃酸的提取稱取藤黃原料200g，加丙酮800l，溫度控制在60左右，回流提取2h，倒出上清液后繼續(xù)加60

2、0l，400l的丙酮，依次反響2h，1h回收多余溶劑，旋蒸提取物，再放置恒溫水浴鍋中蒸發(fā)至溶劑很少再置于真空枯燥儀中得藤黃酸粗提物的枯燥品132g。1.1.2藤黃酸吡啶鹽的制備稱取藤黃酸粗提物50g，參加吡啶85l，于70水浴上加熱溶解，趁熱抽濾，濾瓶等容器用少量吡啶洗滌，合并洗液，濾液，量筒量取共計140l。按以前探究的條件：100/13=140/X，X=18l，參加溫?zé)嵴麴s水18l，攪拌，放置冰箱中過夜，析出沉淀，抽濾得到橙紅色沉淀，70%吡啶洗3次共100l，水洗3次，于60烘箱中烘干，得藤黃酸吡啶鹽40g。1.1.3藤黃酸的純化稱取藤黃酸吡啶鹽粗品40g，參加甲醇:乙酸乙酯=16：1的

3、混合液85l，80回流至完全溶解后，趁熱抽濾，濾液置冰箱中冷藏過夜，析出大量橘紅色沉淀，抽濾，濾餅烘干，得藤黃酸吡啶鹽精品21.5g。將重結(jié)晶得到的藤黃酸吡啶鹽用H2l溶解，依次由1N鹽酸,水洗至中性，合并有機層，無水Na2S4,枯燥，過濾，濾液于56旋蒸濃縮至少量，轉(zhuǎn)移到蒸發(fā)皿中，于60真空枯燥，得藤黃酸5.91g。1.1.4自制藤黃酸的驗證用熔點儀對制備的藤黃酸連續(xù)進展三次熔點測定分別為：82.483.1，82.683.0，82.183.7.與文獻值:8083相符。2不同濃度的HPD對藤黃酸的增溶作用依次配成濃度為4、8、12、16、20、24、28、32、36、40、44、48的HP-D

4、2l的水溶液，另取1.2g藤黃酸溶于16l2H5H。溫度控制在30-40，向上述不同濃度的HP-D的溶液中逐漸滴加0.8l藤黃酸的2H5H溶液，即每毫升溶液里面滴加30g的藤黃酸，反響24小時。溫度分別為室溫、40-50、50-60，其它條件不變進展同樣的反響，經(jīng)高效后觀察5060的條件下增溶效果最好。50-60經(jīng)HPL后結(jié)果。48637563增溶試驗結(jié)果說明HP-D對藤黃酸有增溶作用,相溶解度圖顯示出典型的AN型特征。一般AN型特征的藥物包合物的表觀穩(wěn)定常數(shù)不能計算或計算沒有意義。盡管包合機理復(fù)雜,包合物主客分子比擬難以計算,但是可以肯定的是HP-D可以與藤黃酸在溶液中形成包合物，屬于不穩(wěn)定

5、包合，需要考慮稀釋穩(wěn)定性，所以參加L精氨酸助溶1。2.2藤黃酸的包合依次配制濃度為10%、20%、30%、40%、50%、60%的2lHPD水溶液。另取藤黃酸0.3g，用8l無水乙醇溶解，溫度控制在5060，分別向上述不同濃度的HPD溶液滴加0.8l藤黃酸乙醇溶液，即每份溶液中加了30g的藤黃酸，攪拌反響24小時。反響完畢后將反響液倒入小安瓿瓶中，再用少量蒸餾水洗圓底燒瓶，一并倒入小安瓿瓶中，置冰箱中冷凍結(jié)冰2.3藤黃酸成鹽后的包合稱取L-精氨酸0.6g于小錐形瓶中，參加4l蒸餾水，攪拌溶解后，再分批參加藤黃酸0.12g，使之完全溶解。另取HPD0.9g、0.6g、0.3g于25l圓底燒瓶中，

6、參加2l蒸餾水使溶解，緩緩滴加上述L精氨酸的藤黃酸溶液1l，即HPD的濃度為30%、20%、10%的溶液，于5060水浴中反響89小時，反響完畢后將反響液轉(zhuǎn)移至小安瓿瓶中，置冰箱中冷凍結(jié)冰2。2.4凍干粉中藤黃酸含量測定的研究2.4.1藤黃酸成鹽后最大吸收波長確實定取藤黃酸鹽溶液適量,加甲醇溶解并稀釋制成濃度約為10ug/l，按分光光度法,在200400n波長范圍內(nèi)進展掃描,測定其最大吸收波長為365n。2.42條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱：HypersilDS18色譜柱4.6250，25)；流動相：甲醇-0.1%H3P4(91)；檢測波長365n；流速1.0Lin-1；進樣體積20L；柱溫為室

7、溫。甘露糖衍生物峰理論塔板數(shù)計算不低于50000。2.4.3藤黃酸成鹽的標準曲線配制2l10、20、30的HPD溶液，再配制15的L精氨酸溶液，使每毫升中含有30g的藤黃酸，配制成鹽。在5060條件下反響8小時3，在反響過程中緩緩參加上述鹽溶液1l，反響完畢將反響液稀釋100倍。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.4.2.4.4黃酸的含量測定分別取3批號的凍干粉各五份，再用甲醇溶解并稀釋成適宜的濃度超聲3次，每次20分鐘4，進樣分析。2.4.5精細度試驗取一批片劑樣品用甲醇稀釋并超聲后連續(xù)進樣6次，結(jié)果RSD=0.65%。2.4.6重現(xiàn)性試驗對同一批片劑樣品按2.4.4中的方法重復(fù)平行測定5次，RSD=

8、0.91%。2.4.7回收率取樣品兩份，一份用甲醇稀釋并超聲3次后定量參加藤黃酸對照品后測定含量，另一份不加對照品測定含量，計算回收率。結(jié)果回收率分別為100.67%和98.34%，RSD分別為2.74%和3.22%(n=5)。2.5凍干粉用生理鹽水稀釋后藤黃酸體外釋放的規(guī)律研究配置質(zhì)量分數(shù)為10%、15%、20%、25%、30%的HP-D的水溶液，分別滴加藤黃酸鹽溶液各1毫升含藤黃酸30毫克，溫度控制在5060下反響8小時,反響液用生理鹽水稀釋成200l之后，在一個半小時內(nèi)連續(xù)進樣7針，HPL分析結(jié)果。第1針進樣根本反映出反響的包合率，當(dāng)HP-D的質(zhì)量分數(shù)大于20%時，包合率到達90%以上，

9、在一個半小時內(nèi)從HP-D中釋放出來的藤黃酸的量不超過25%,并且HP-D的質(zhì)量分數(shù)越大釋放得越少。以體外釋放情況作為對包合工藝的評價標準，最終確定了包合的優(yōu)化工藝條件為：HP-D的質(zhì)量分數(shù)為30%，溫度5060，反響時間8小時。3結(jié)果與討論HPD對藤黃酸有增溶作用，通過分析當(dāng)HPD的濃度在016時，藤黃酸溶解度與HPD的質(zhì)量分數(shù)成正比，當(dāng)HPD的濃度在大于16時，對藤黃酸的增溶作用增加不明顯。優(yōu)化的包合工藝的凍干粉在一個半小時內(nèi)從HP-D中釋放出來的藤黃酸的量不超過20%，根本到達試驗設(shè)計的目的。本實驗建立的含量測定方法精細度高、重現(xiàn)性好。參考文獻1于大海,高坤,孫英華,等.那格列奈-2-羥丙基-環(huán)糊精包合物的制備及其理化性質(zhì)J.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報,2022,24(8):465-469.2殷殿書,蔣建蘭.紫杉醇透明質(zhì)酸注射用凍干制劑的研究J.中國藥學(xué)雜志,2022,39(1