臨床全自動生化分析儀

1、關(guān)于臨床全自動生化分析儀第1頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四教學(xué)目標和要求掌握自動生化分析儀的分析方法類型及其 特點，連續(xù)監(jiān)測法的理論K值，必選的分析參數(shù)，雙波長測定的作用，雙試劑的優(yōu)點，分析儀與手工法比較的優(yōu)點和缺點。熟悉分立式自動生化分析儀的基本結(jié)構(gòu)，備選的分析參數(shù)，測定過程的自動監(jiān)測，校準方式和校準要求，影響分析儀分析速度的因素和分析儀性能指標。了解某些分析參數(shù)的特殊意義，分析儀的工作過程和操作方法，干片式分析儀的結(jié)構(gòu)和分析原理，常用分析儀的分析性能。第2頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 自動生化分析儀由電腦控制，將生化分析中的取樣(s

2、ampling)、加試劑、混勻、保溫反應(yīng)、檢測(detect)、結(jié)果計算、可靠性判斷、顯示和打印、以及清洗(cleaning)等步驟組合在一起自動進行操作的分析儀器。 第3頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 自動生化分析技術(shù)的應(yīng)用提高了臨床生化檢驗質(zhì)量和速度；減輕檢驗人員的勞動強度；節(jié)約樣品和試劑；增加檢驗項目；提高檢測精密度，減少實驗誤差；并且有利于臨床檢驗標準化的實現(xiàn)。不足：溫度、試劑、反應(yīng)時間、加樣 第4頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四自動生化分析儀按其工作方式不同分為連續(xù)流動式(continuousstreaming movements

3、tyle)或管道式：已很少用離心式(centrifugation style) ：已很少用分立式(discretestyle)：應(yīng)用最廣泛干片技術(shù)(drying style) ：急診多用第5頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四第一節(jié) 分立式自動生化分析儀的結(jié)構(gòu) 完全模仿手工操作方式設(shè)計，各部分結(jié)構(gòu)對應(yīng)手工操作的每個步驟包括取樣、加試劑、混勻、孵育、檢測、結(jié)果計算、器材清洗等 。第6頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四一、基本結(jié)構(gòu) （一）樣品盤或樣品架 樣品盤（specimen disc）：放置待測樣品的轉(zhuǎn)盤，可放置一定數(shù)量的樣品杯（specimen

4、cup）或不同規(guī)格的采血試管，通過樣品盤的轉(zhuǎn)動來控制不同樣品的進樣。第7頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 樣品架（specimen stock）：每個樣品架可放數(shù)只樣品杯或采血試管（多為5只或10只）。樣品架的移動通過樣品傳送帶來進行。樣品架 上 的 條形碼（barcode）或編碼孔可識別樣品架號及樣品位置號。 第8頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四樣品架的優(yōu)點隨著樣品架移動及樣品的被檢測，可不斷追加已放置樣品杯或采血試管的樣品架；通過樣品架的移動能將樣品傳送到另一個分析模塊（analysisdie-block）甚至另一臺分析儀上再進行分析。

5、第9頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（二）試劑室和試劑瓶 轉(zhuǎn)盤式試劑室（reagent chamber）：內(nèi)裝放置試劑瓶的轉(zhuǎn)盤，一般可放置20種以上具有一定形狀的塑料試劑瓶，大型分析儀可放置3045種試劑瓶。 試劑瓶容量一般為10100ml。通過試劑轉(zhuǎn)盤的轉(zhuǎn)動來選用不同試劑。 第10頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 試劑架式試劑室：可放置容量為250ml500ml的不同形狀的試劑瓶，試劑瓶不能轉(zhuǎn)動，但每個試劑瓶內(nèi)引出一條試劑管路及其噴嘴，即每種試劑均有專用的加試劑裝置，因而不同試劑間無交叉污染。 但試劑管路較長使試劑存在一定的死體積，因而適宜

6、用于使用頻率高、消耗試劑量大的檢測項目。 第11頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 大型分析儀同時備有第一試劑室和第二試劑室，即具備對同一檢測項目添加兩次試劑的功能，個別分析儀還具有加入第三試劑的功能。 對有條形碼裝置的儀器可將帶條形碼的試劑瓶放在試劑室轉(zhuǎn)盤上的任意位置，儀器能自動識別試劑的種類、批號和有效期。試劑室均具有冷藏裝置，可將試劑保存在410。 第12頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（三）反應(yīng)杯和反應(yīng)盤 反應(yīng)杯（reaction cup）是樣品與試劑進行化學(xué)反應(yīng)的場所，同時用作比色杯。由透光特性好的硬塑料或石英玻璃制成。比色杯光徑不同

7、分析儀有0.50.7厘米不等，大多數(shù)分析儀在計算時將其折算為1厘米光徑。 第13頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 反應(yīng)盤（reaction disc）：100只或更多的反應(yīng)杯圍成一圈組成。在測定過程中反應(yīng)盤作恒速的圓周運動，在靜止時向反應(yīng)杯中加入樣品、試劑或進行攪拌混勻，當反應(yīng)盤恒速圓周運動經(jīng)過檢測窗口的比色杯可進行吸光度檢測。第14頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（四）取樣和加試劑裝置 1取樣裝置（sampling assembly）： 由取樣針、取樣臂、取樣管路、取樣注射器和閥門組成，能定量吸取樣品并加入到反應(yīng)杯。 不同分析儀的取樣容量有

8、不同的范圍，一般為235l，步進0.1微升不等。第15頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 取樣針設(shè)有電子液面感應(yīng)器，取樣針于樣品上方下降，一旦接觸到樣品液面即停止下降而開始吸樣。適用于不同的采血試管上機測定。第16頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 多數(shù)加樣裝置設(shè)有防撞功能，遇到阻礙時取樣針立即停止運動并報警。某些取樣針還設(shè)有阻塞報警功能，當取樣針被樣品中的凝塊、纖維蛋白等物質(zhì)阻塞時，機器會自動報警、沖洗取樣針，并跳過當前樣品，進行下一個樣品的取樣檢測。 第17頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四取樣針防交叉污染（cross

9、ing contamination）措施 絕大多數(shù)采用水洗方式（又有瀑布式和涌泉式之分），在吸取另一個樣品前對接觸樣品的樣品針內(nèi)外壁進行沖洗； 也有采用化學(xué)惰性液（chemical inertiafluid）膜的方式來隔絕樣品與取樣針內(nèi)外壁之間的接觸。 第18頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四2加試劑裝置 加試劑裝置用于定量吸取試劑加入反應(yīng)杯，可加入試劑容量一般為20350l。步進15微升不等，取樣精度在1微升左右。 注射器方式：組成部件與取樣裝置類似，其液面感應(yīng)系統(tǒng)能檢測并提示試劑剩余量。 灌注式：具有許多條試劑管路及其噴嘴，每種試劑單獨使用一條試劑管路和噴嘴，不存在

10、各試劑間的交叉污染。 第19頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 大型自動生化儀多具有兩組加試劑裝置，可分別從兩個試劑室吸取同一個檢測項目的第一試劑和第二試劑，大多數(shù)分析儀所有檢測項目加入第二試劑的時間點統(tǒng)一固定為1個或2個點，也有分析儀有3個加入時間點可供選擇。 第20頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（五）混勻與攪拌裝置 反應(yīng)杯里的樣品與試劑通過攪拌棒攪拌而充分混勻，攪拌棒的形狀為扁平棒狀或扁平螺旋狀，表面的疏水材料能防止反應(yīng)液被攪拌棒所攜帶。其工作方式大多為旋轉(zhuǎn)式攪拌，也有震動式攪拌方式。也設(shè)置了防止攪拌棒在不同反應(yīng)液之間攜帶交叉污染的清洗措

11、施。 第21頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（六）溫控和定時系統(tǒng) 溫控系統(tǒng)使反應(yīng)杯浸浴在恒溫環(huán)境： 恒溫循環(huán)水浴方式：溫度傳遞速度快，保養(yǎng)要求較高。 恒溫空氣浴方式：溫度傳遞速度不如恒溫水浴循環(huán)方式，保養(yǎng)簡單。 溫度控制器能使循環(huán)水或循環(huán)空氣的溫度控制在規(guī)定溫度0.1。規(guī)定溫度可有37和30兩種選擇，一般固定在37。第22頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 定時系統(tǒng)： 不同分析儀對檢測吸光度的間隔時間有不同的規(guī)定，反應(yīng)時間應(yīng)該設(shè)定為此間隔時間的倍數(shù)?？偡磻?yīng)時間一般限制在8.5-10min內(nèi)，個別分析儀可以設(shè)定為15或22min等。 第23頁，共

12、139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（七）光路和檢測系統(tǒng) 自動生化分析儀以紫外可見分光光度法為其中心和主要的檢測手段，與一般分光光度計一樣，其光路和檢測系統(tǒng)由光源、單色器和檢測器組成。 第24頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四1光源（light source） 一般為鹵素鎢絲燈（halogentungsten filamentlamp），也有采用長壽命的氙燈（xe lamp），要求在340800nm波長范圍內(nèi)能發(fā)射出穩(wěn)定且較平坦的光能。 第25頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四2單色器（monochromato） 干涉濾光片（in

13、terference filter）分光系統(tǒng)：常帶有340、380、405、500、550、600、660nm等幾種濾光片，各濾光片固定在轉(zhuǎn)盤上，以轉(zhuǎn)盤旋轉(zhuǎn)的方式來選擇波長。這種分光系統(tǒng)在半自動和小型自動分析儀中常用，且不能同一時刻進行多波長檢測。 光柵（raster）分光系統(tǒng)：常在340（或293）800nm范圍內(nèi)選擇1013種固定的單色光。 第26頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四前分光和后分光方式 光柵分光有前分光和后分光兩種方式，光源首先經(jīng)過單色器分光，然后透射到比色溶液的方式為前分光。目前以后分光方式為多見，其優(yōu)點是單色器中沒有轉(zhuǎn)動部分，雙波長在同一時刻檢測，

14、因而提高了檢測的精度和速度。第27頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 光源先透過比色杯中的反應(yīng)液再照射到光柵上，經(jīng)色散后所有固定單色光同時通過各自的光纖傳輸?shù)綄?yīng)的檢測器，微處理器按該分析項目的分析參數(shù)，后分光方式 選擇其中一個或兩個波長（雙波長方式）的吸光度值，用于分析結(jié)果的計算。第28頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3檢測器（detector） 由光敏二極管及放大電路組成，可按設(shè)定的間隔時間連續(xù)測定各反應(yīng)杯的吸光度值。 第29頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（八）數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 具有多種數(shù)據(jù)處理功能。 計算測定結(jié)果

15、判斷結(jié)果準確性 保存各種數(shù)據(jù) 自我診斷功能 第30頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（九）清洗系統(tǒng) 反應(yīng)杯清洗裝置：一個反應(yīng)杯內(nèi)的反應(yīng)和檢測結(jié)束后，該反應(yīng)杯就被沖洗系統(tǒng)及時沖洗。 清洗過程：由廢液針吸取反應(yīng)杯內(nèi)廢液，加入清洗劑（detergent）沖洗并抽干后，再經(jīng)數(shù)次去離子水沖洗及抽干，然后做杯空白的吸光度檢查，若通過檢查則此反應(yīng)杯可繼續(xù)循環(huán)使用；更高級的儀器帶有風(fēng)干技術(shù)。如果不能通過，分析儀將提示該反應(yīng)杯異常，并跳過此反應(yīng)杯使用下一個反應(yīng)杯，或提示更換反應(yīng)杯。 第31頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四樣品針、試劑針和攪拌棒清洗 一般在用于下一

16、個樣品、試劑或反應(yīng)杯前即清洗一次，此時多數(shù)為去離子水沖洗，在一批檢測完成后，則自動進行清洗劑清洗。 清洗劑可配有1至3種可供選擇，除一種常規(guī)清洗劑外，其它1至2種可按設(shè)定對試劑針、樣品針或反應(yīng)杯進行補充清洗。 第32頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四二、組合式自動分析儀 （一）組合式自動生化分析儀 將相同或不同的兩臺或兩臺以上的分析部分，即分析模塊進行組合連接，采用樣品架方式使樣品通過傳輸線在不同分析模塊間進行傳遞并檢測。各分析模塊所分析項目的組合提高了分析效率，這些分析模塊除了基于紫外-可見光譜分析原理的分析模塊外，還有基于離子選擇電極的電解質(zhì)分析模塊，甚至還可組合建

17、立在免疫發(fā)光分析原理的免疫分析模塊。 第33頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四組合式分析儀i2000SRImmunoassay Modulec8000Clinical Chemistry Moduleci8200ImmunoChemistry Integration第34頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（二）實驗室自動化系統(tǒng) （laboratory automation system，LAS） 包括樣品前處理系統(tǒng)、樣品輸送系統(tǒng)和各樣品分析系統(tǒng)。不同功能的各模塊以同一標準來連接，通過計算機控制運行。隨著檢測樣品量的增加，只需添加需要的新模塊，將其

18、安裝連接，即可擴大處理能力。這樣可避免同類硬件和功能的重復(fù)投資，節(jié)省占地面積所需的基礎(chǔ)投入。當一模塊發(fā)生故障時，其余模塊仍在運行，在24小時內(nèi)任意時間對模塊進行交替保養(yǎng)維護，不影響日常工作。 第35頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四樣品前處理系統(tǒng) 能獨立工作，由樣品投入部、離心分離部、開栓部、在線分注部、非在線分注部、貼條碼部、蓋栓部、樣品分注收存部、樣品接收部等模塊構(gòu)成前處理系統(tǒng)，每一模塊既是系統(tǒng)的部分，又是獨立的單元，可根據(jù)不同需要選擇使用，具有靈活性和擴展性。 也可通過樣品輸送部分與樣品分析系統(tǒng)連接，組成類似工業(yè)領(lǐng)域的生產(chǎn)流水線，從而實現(xiàn)了從采血到報告的實驗室的全

19、自動化。 第36頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四第二節(jié) 生化自動化分析方法概要 一、分析方法分類（一）終點法（end assay） 被測物質(zhì)在反應(yīng)過程中完全被轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物，到達反應(yīng)終點，根據(jù)終點吸光度的大小求出被測物濃度，稱為終點法。該法稱為平衡法更為恰當。從時間-吸光度曲線來看，到達反應(yīng)終點或平衡點時，吸光度將不再變化。終點法參數(shù)設(shè)置簡單，反應(yīng)時間一般較長，精密度較好。 第37頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四終點時間的確定根據(jù)時間-吸光度曲線來確定，根據(jù)被測物反應(yīng)終點，結(jié)合干擾物的反應(yīng)情況來確定。第38頁，共139頁，2022年，5月20日，

20、17點6分，星期四1一點終點法（one point end assay） 在反應(yīng)到達終點，即在時間-吸光度曲線上吸光度不再改變時選擇一個終點吸光度值，用于計算結(jié)果。結(jié)果計算公式：待測物濃度CU=（待測吸光度AU試劑空白吸光度AB）KK為校準系數(shù) 第39頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四圖4-3一點終點法反應(yīng)曲線 A單試劑一點終點法 B雙試劑一點終點法第40頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四2兩點終點法（two point end assay） 在被測物反應(yīng)或指示反應(yīng)尚未開始時，選擇第一個吸光度，在反應(yīng)到達終點或平衡時選擇第二個吸光度，此兩點吸光度

21、之差用于計算結(jié)果。 計算公式為： CU=（待測吸光度A2待測吸光度A1）K。 第41頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四圖4-4兩點終點法反應(yīng)曲線 A單試劑兩點終點法 B雙試劑兩點終點法 第42頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 該法能有效地消除溶血(hemolysis)、黃疸（icterus）和脂濁（lipo-turbid）等樣品本身光吸收造成的干擾。 圖4-5 血紅蛋白、膽紅素和脂濁的光吸收曲線 第43頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（二）固定時間法（fixed-time assay） 指在時間-吸光度曲線上選擇兩個測

22、光點，此兩點既非反應(yīng)初始吸光度亦非終點吸光度，這兩點的吸光度差值用于結(jié)果計算。有時也稱此法為兩點法 。 計算公式與兩點終點法相同， CU=(A2-A1)K。第44頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四圖4-6固定時間法反應(yīng)曲線 A單試劑固定時間法 B雙試劑固定時間法該分析方法有助于解決某些反應(yīng)的非特異性問題。 第45頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（三）連續(xù)監(jiān)測法（continuous monitoring assay） 又稱速率法（rate assay），是在測定酶活性或用酶法測定代謝產(chǎn)物時，連續(xù)選取時間-吸光度曲線中線性期（各兩點間吸光度差值相

23、等）的吸光度值，并以此線性期的單位吸光度變化值（A/min）計算結(jié)果。第46頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四圖4-7連續(xù)監(jiān)測法反應(yīng)曲線 A單試劑連續(xù)監(jiān)測法 B雙試劑連續(xù)監(jiān)測法 第47頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四酶促反應(yīng)的線性段 1及5值偏小，而234，故A1點至A4點屬線性段 第48頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四連續(xù)監(jiān)測法的優(yōu)點 可以確定線性期并計算A/min，根據(jù)此值再準確地計算酶活性，因而使自動生化分析儀在酶活性測定方面顯著地優(yōu)于手工法。連續(xù)監(jiān)測法也可用于測定呈線性反應(yīng)的代謝物濃度，一般是某些基于酶法測定的

24、代謝物。 酶活性（U/L） A/min理論（或校準）K值。 代謝物濃度CU=A/min校準K值。 第49頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四1理論K值 多用于酶活性測定中，因酶活性尚無公認的校準品可用。根據(jù)酶活性的國際單位定義得出酶活性的計算公式為：酶活性 (U/L)=A/min將此式中 以K來表示，即為：理論K值-可作為分析參數(shù)輸入到分析儀中。 第50頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四采用理論K值的前提 應(yīng)當是樣品和試劑的加量準確、比色杯光徑準確、溫度控制精確以及波長準確等。但事實上由于各型分析儀在注射器容積步進電機精度、濾光片帶寬等方面的差異，

25、可造成樣品和試劑加量以及吸光度檢測的偏差，溫度的影響有時也非常大。 第51頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 由于摩爾吸光系數(shù)受比色杯光徑、波長等的影響，書本上或試劑廠家提供的理論摩爾吸光系數(shù)可能與實際所用分析儀所測的不同，因而有必要獲得實際的摩爾吸光系數(shù)，然后來計算理論K值。 第52頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（1）NADH（NADPH）“摩爾吸光系”數(shù)的測定 NADH（NADPH）沒有標準純制品，而且配成溶液后穩(wěn)定性又較差，不能直接用NADH 或NADPH標準液來校正儀器，須通過有NAD+(NADP+)參與的反應(yīng)途徑。 第53頁，共13

26、9頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四用已糖激酶 (HK)或葡萄糖脫氫酶(GD)方法測定葡萄糖時，葡萄糖的消耗與NADH的生成呈等摩爾關(guān)系。葡萄糖有標準純制品。根據(jù)公式A=bC，已知比色杯光徑b和葡萄糖標準液濃度，測得葡萄糖標準管的吸光度A后便可計算出NADH（NADPH）的摩爾吸光系數(shù)為 A/bC。 第54頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四測定方法 葡萄糖標準液濃度為1Ommo1/L(0.01mol/L)，標準液加入量為3.5L，酶試劑加入量為335L，比色杯光徑為0.7cm，在340nm測得吸光度為0.465，則實測NADH摩爾吸光系數(shù) 6424，即在此臺

27、分析儀上 340nm波長處測得NADH（NADPH）的摩爾吸光系數(shù)為6424，而理論上NADH（NADPH）的為6220。 第55頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（2）“色素原”酶促產(chǎn)物在405nm波長摩爾吸光系數(shù)的測定 有許多酶底物為人工合成的“色素原”底物，其本身無色，經(jīng)酶作用后釋放出有色的反應(yīng)產(chǎn)物，在405nm波長具有吸收峰。ALP底物磷酸對硝基苯酚 (4-Nitrophenyl phosphate，4-NPP) 經(jīng)酶作用后釋放出黃色的對硝基苯酚(4-Nitrophenol，4-NP)GGT底物-L-谷氨酰對硝基苯胺(-L-Glutamyl-p-nitroani

28、lide)或-L-谷氨酰-3-羥基-對硝基苯胺(-L-Glutamyl-3-carboxyl-p-nitroan)經(jīng)酶作用后釋放出黃色的對硝基苯胺(p-Nitroaniline，4-NA)或?qū)ο趸?5-氨基苯甲酸(2-amino-nitrobenzoicacid， ANBA)。 第56頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四以對硝基苯酚的摩爾吸光系數(shù)測定為例試劑： 4-NP標準儲存液(1Ommo1/L) 4-NP標準應(yīng)用液(2.5mmo1/L，以0.84mol/L AMP緩沖液稀釋而成) 底物緩沖液(l5mmol/L 4-NPP配于0.84mol/L AMP-HCL緩沖液中，

29、37,pH l0.09土0.02)。第57頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四測定方法 4-NP標準液加入量為5L，底物緩沖液加入量為350L，波長405nm，光徑0.7cm，溫度37，測定得吸光度為A1；另用蒸餾水代替4-NP標準液，按上述方法測定其吸光度為A2，4-NP標準液吸光度A= A1- A2，若測得A為0.460，則實測4-NP摩爾吸光系數(shù)18662 第58頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四2校準K值 酶活性校準品經(jīng)校準操作后由分析儀自動計算得出。在進行酶學(xué)測定時，如果分析條件的變化如溫度、樣品試劑加量和吸光度檢測偏差可同等程度地影響校

30、準物和待測樣品，則使用校準品能進行補償。一般來說以使用校準K值為好，但必須有兩個先決條件：必須使用配套的試劑；必須使用配套的高質(zhì)量的校準品，該校準品應(yīng)具有溯源性。 第59頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（四）透射比濁法 抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合形成的免疫復(fù)合物，在反應(yīng)液中具有一定的濁度，可由一般分光光度法進行透射比濁（transmission turbidimetry）測定，可用于某些蛋白質(zhì)和藥物濃度等的測定。該法須做多點校準，再經(jīng)非線性回歸，求出抗原或抗體的含量。 第60頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四二、常用生化檢測項目分析方法舉例 1終點法

31、檢測 常用的有總膽紅素（氧化法或重氮法）、結(jié)合膽紅素（氧化法或重氮法）、血清總蛋白（雙縮脲法）、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、總膽汁酸（酶法）、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸（尿酸酶法）、總膽固醇（膽固醇氧化酶法）、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白膽固醇（直接測定法）、鈣（偶氮砷法）、磷（紫外法）、鎂（二甲苯胺藍法）等。 第61頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四2固定時間法苦味酸法測定肌酐采用此法。 第62頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3連續(xù)監(jiān)測法 對于酶活性測定一般應(yīng)選用連續(xù)監(jiān)測法，如：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫

32、酶、堿性磷酸酶、谷氨氨?；D(zhuǎn)移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。一些代謝物酶法測定的項目如：脲酶偶聯(lián)法測定尿素等，也可用連續(xù)監(jiān)測法。 第63頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四4透射比濁法 透射比濁法可用于測定產(chǎn)生濁度反應(yīng)的項目，多數(shù)屬免疫比濁法，載脂蛋白、免疫球蛋白、補體、抗“O”、類風(fēng)濕因子，以及血清中的其他蛋白質(zhì)如前白蛋白、結(jié)合珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等均可用此法。 第64頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四第三節(jié) 分析參數(shù)設(shè)置 各種測定項目的分析參數(shù)（analysisparamete）大部分也已設(shè)計好，存于磁盤中，供用戶使用；目前大多數(shù)生化分析儀為開放式，用戶

33、可以更改這些參數(shù)。生化分析儀一般另外留一些檢測項目的空白通道，由用戶自己設(shè)定分析參數(shù)。因此必須理解各參數(shù)的確切意義。 第65頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四一、分析參數(shù)介紹（一）必選分析參數(shù) 1試驗名稱（test code）2方法類型（也稱反應(yīng)模式）(assay mode)3反應(yīng)溫度4主波長（primary wavelength） 5次波長（secondary wavelength）6. 反應(yīng)方向（response direction） 第66頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四7樣品量（sampling volum） 常量、減量和增量。8第一試

34、劑量 （first reagent volum） 一般20-300l9第二試劑量（second reagent volum）同上。10總反應(yīng)容量（total reacting volum） 一般180-350l，現(xiàn)儀器能減少至120l。11孵育時間（incubate time）12延遲時間（delay time）第67頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四13連續(xù)監(jiān)測時間 （continuous monitoring time）一般為60120s，不少于4個吸光度檢測點（3個吸光度變化值） 14校準液（calibrator）個數(shù)及濃度 15校準K值（calibrate co

35、efficient）或理 論K值16線性范圍（linearity range）17小數(shù)點位數(shù)（decimal point digit） 第68頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（二）備選分析參數(shù) 這類分析參數(shù)與檢測結(jié)果的準確性有關(guān)，一般來說不設(shè)置這類分析參數(shù)，分析儀也能檢測出結(jié)果，但若樣品中待測物濃度太高等，檢測結(jié)果可能不準確。 第69頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四1樣品預(yù)稀釋 設(shè)置樣品量、稀釋劑量和稀釋后樣品量三個數(shù)值，便可在分析前自動對樣品進行高倍稀釋。 2底物耗盡值（substrate exhaust limit） 在負反應(yīng)的酶活性測定

36、中，可設(shè)置此參數(shù)，以規(guī)定一個吸光度下降限。若低于此限時底物已太少，不足以維持零級反應(yīng)而導(dǎo)致檢測結(jié)果不準確。 第70頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3前區(qū)檢查免疫比濁法中應(yīng)用，以判斷是否有抗原過剩。將終點法最后兩個吸光度值的差別（A）設(shè)置一個限值，如果后一點的吸光度比前一點低，表示已有抗原過剩，應(yīng)稀釋樣品后重測。4試劑空白吸光度范圍超過此設(shè)定范圍表示試劑已變質(zhì)，應(yīng)更換合格試劑。 第71頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四5試劑空白速率連續(xù)監(jiān)測法中使用，是試劑本身在監(jiān)測過程中沒有化學(xué)反應(yīng)時的變化速率。 6方法學(xué)補償系數(shù)用于校準不同分析方法間測定結(jié)果的

37、一致性，有斜率和截距兩個參數(shù)。7參考值范圍對超過此范圍的測定結(jié)果，儀器會打印出提示。 第72頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（三）某些參數(shù)的特殊意義 1最小樣品量一般分析儀的最小樣品量是2l，目前也有小至1.6l的。2最大試劑量 對方法靈敏度很高而線性上限低的檢測項目，很重要。 第73頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3彈性速率（flexrate） 在酶活性測定中，當酶活性太高，在連續(xù)監(jiān)測期中已不呈線性反應(yīng)時，有些儀器具有彈性速率功能，能自動選擇反應(yīng)曲線上連續(xù)監(jiān)測期中仍呈線性的吸光度數(shù)據(jù)計算結(jié)果，使酶活性測定的線性范圍得以擴大。如AST可從10

38、00U/L擴展至2000U/L，從而減少稀釋及重測次數(shù)、降低成本。 第74頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四4標本空白速率 以膽紅素干擾堿性苦味酸法測定肌酐為例：樣品中存在膽紅素時，膽紅素對堿性苦味酸速率法或兩點法測定肌酐有負干擾。因為膽紅素在肌酐檢測的波長505nm有較高光吸收，而且膽紅素在堿性環(huán)境中可被氧化轉(zhuǎn)變，因而在肌酐反應(yīng)過程中膽紅素的光吸收呈下降趨勢。第75頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四設(shè)置空白速率以消除膽紅素干擾 若在加入第一試劑后一段時間內(nèi)設(shè)置試劑空白速率，因為此段中苦味酸尚未與肌酐反應(yīng)，而膽紅素在第一試劑的堿性環(huán)境中已同樣被氧

39、化轉(zhuǎn)變，因而以第二試劑加入后的速率變化，減去試劑空白速率變化，便可消除膽紅素的負干擾，見圖4-8。 第76頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四空白速率法消除膽紅素對肌酐測定的干擾 圖4-8第77頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四二、單波長和雙波長方式 （一）概念 采用一個波長檢測物質(zhì)的光吸收強度的方式稱為單波長方式。當反應(yīng)液中含有一種組分，或在混合反應(yīng)液中待測組分的吸收峰與其它共存物質(zhì)的吸收波長無重疊時，可以選用。 使用一個主波長和一個次波長的稱雙波長方式。當反應(yīng)液中存在干擾物的較大吸收、從而影響測定結(jié)果的準確性時，采用雙波長方式更好。 第78頁，

40、共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（二）雙波長的作用消除噪音干擾;減少雜散光影響;減少樣品本身光吸收的干擾：當樣品中存在非化學(xué)反應(yīng)的干擾物如甘油三酯、血紅蛋白、膽紅素等時，會產(chǎn)生非特異性的光吸收，雙波長方式可以部分消除這類光吸收干擾。 第79頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（三）次波長的確定方法 當被測物的主波長確定之后，根據(jù)干擾物吸收光譜特征選擇次波長，使干擾物在主、次波長處有盡可能相同的光吸收值，而被測物在主、次波長處的光吸收值應(yīng)有較大的差異。 一般來說，次波長應(yīng)大于主波長100nm。以主波長與次波長吸光度差來計算結(jié)果。 第80頁，共139頁，

41、2022年，5月20日，17點6分，星期四三、單試劑和雙試劑方式 反應(yīng)過程中只加一次試劑稱單試劑方式，加兩次試劑便為雙試劑方式。 雙試劑方式分析的優(yōu)點是： 可提高試劑的保存穩(wěn)定性； 能設(shè)置兩點終點法； 在某些項目檢測時能消除非特異性化學(xué)反應(yīng) 干擾。 第81頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四雙試劑方式消除非特異性化學(xué)反應(yīng)干擾舉例 血清ALT測定時，血清中原有酮酸也可與試劑LDH起反應(yīng)，使結(jié)果偏高。若先加入缺乏-酮戊二酸的第一試劑，使原有酮酸與LDH反應(yīng)，之后加入含有-酮戊二酸的第二試劑，啟動ALT酶促反應(yīng)生成丙酮酸，這些丙酮酸與LDH反應(yīng)消耗的NAD能真正反映ALT活性，

42、從而消除以上副反應(yīng)的影響。 第82頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四四、測定過程的自動監(jiān)測 1試劑空白監(jiān)測 ：每瓶試劑在使用前先自動檢測試劑空白吸光度；每個樣品測定前均檢測試劑空白吸光度。為某些先加試劑后取樣品的分析儀所采用。 第83頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四2試劑空白變化速率監(jiān)測 設(shè)置此項監(jiān)測后，分析儀在結(jié)果計算時會自動減去試劑空白變化速率。在以監(jiān)測NAD（P）H減少為指示反應(yīng)的酶活性測定中，空白速率速率可監(jiān)測并消除由NADH自身氧化所造成的吸光度下降；在色素原為底物的酶活性測定中，空白速率可監(jiān)測并消除底物自身分解造成的吸光度升高。有關(guān)

43、空白速率監(jiān)測在膽紅素對堿性苦味酸速率法測定肌酐負干擾消除中的作用，已如前述。 第84頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3樣品信息監(jiān)測 由于樣品的溶血、脂濁、黃疸會對測定結(jié)果產(chǎn)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，用雙波長或多波長檢測其性質(zhì)和程度，一般是測定樣品在600nm570nm、700nm/660nm和505nm/480nm吸光度比值的大小來分別判斷樣品溶血、脂濁和黃疸程度。然后在結(jié)果計算時自動減去這部分干擾，這將有利于提高分析結(jié)果的可靠性。 第85頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四4結(jié)果可靠性監(jiān)測（1）終點監(jiān)測（2）線性期

44、監(jiān)測 將連續(xù)監(jiān)測到的各吸光度值進行線性回歸，計算出各點的方差，根據(jù)方差值的大小來判斷是否呈線性； 取連續(xù)監(jiān)測期開始若干點的變化速率與連續(xù)監(jiān)測期最后若干點的變化速率進行比較，來判斷是否為線性期。 第86頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四5底物消耗的監(jiān)測 在連續(xù)監(jiān)測法測定酶活性時，如果在監(jiān)測期內(nèi)吸光度上升或下降超過其底物耗盡值，則說明該樣品酶活性非常高，底物將被耗盡，監(jiān)測期的吸光度將偏離線性，使測定結(jié)果不可靠。此監(jiān)測對于采用負反應(yīng)分析酶活性的方法甚為重要。 第87頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四底物消耗監(jiān)測 圖4-9第88頁，共139頁，2022年

45、，5月20日，17點6分，星期四6方法線性范圍監(jiān)測 每種待測物分析都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過此范圍，分析儀將顯示測定結(jié)果超過線性范圍的提示，多數(shù)分析儀會自動將樣品減量或增量重新測定。 第89頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四四、分析參數(shù)設(shè)置舉例 以肌酸激酶測定為例。 1. 肌酸激酶試劑盒通用參數(shù) 樣品量50l，第一試劑1000l，37保溫5min，加第二試劑500l，延時2min在340nm讀第一點吸光度，連續(xù)監(jiān)測2min。 第90頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四2.某生化分析儀有關(guān)參數(shù)的設(shè)置范圍 樣品量235l，第一試劑量

46、20270l，第二試劑量20270l，總反應(yīng)容量180350，吸光度監(jiān)測周期18s，總反應(yīng)時間10min，各試劑可加入時間：1.5min，4.5min，9.5min。 第91頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3. 參數(shù)設(shè)置如下（1）按比例減少樣品量和各試劑量，使反應(yīng)液總?cè)萘吭诜治鰞x180350l范圍內(nèi)。選擇樣品量為10l，第一試劑200l，第二試劑100l，這時反應(yīng)液總?cè)萘渴?10l?；蛘哌x擇樣品量為8l，第一試劑160l，第二試劑80l，這時反應(yīng)液總?cè)萘渴?48l。 第92頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（2）確定第二試劑加入時間，根據(jù)通用參

47、數(shù)，應(yīng)選擇4.5min為第二試劑加入點。（3）確定各個吸光度選擇點，由于第二試劑加入時間4.5min，換算成監(jiān)測時間為第16，17點之間，加上2min延時，則在第24監(jiān)測點為第一點吸光度，并連續(xù)選擇24-31監(jiān)測點。 第93頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（4）計算K值：根據(jù)樣品量10l，第一試劑200l，第二試劑100l，代入計算公式 則K = = = 4984 也可以采用肌酸激酶的校準品，執(zhí)行校準程序來得到校準K值。 第94頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四4對新設(shè)置的反應(yīng)參數(shù)進行試運行 在開始運行時，分析儀會對各反應(yīng)參數(shù)之間的邏輯合法性進

48、行檢測，如果反應(yīng)參數(shù)中出現(xiàn)邏輯性錯誤，則分析儀會顯示錯誤信息并停機，這時可以根據(jù)提示信息對反應(yīng)參數(shù)進行修改。 第95頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四第四節(jié)自動生化分析儀 工作過程和操作方法 一、工作過程 在測定過程中所有機械步驟均由微處理器根據(jù)已設(shè)定的程序（procedure）進行工作。第96頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四1取樣加試劑和混勻樣品盤轉(zhuǎn)動使樣品進入待測位置 樣品針定量吸取樣品加入一反應(yīng)杯反應(yīng)盤旋轉(zhuǎn) 試劑轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)動使所需試劑瓶進入試劑吸取位置 試劑針定量吸取試劑加入反應(yīng)杯 攪拌機構(gòu)將反應(yīng)杯內(nèi)液體進行攪拌混勻第97頁，共139頁，20

49、22年，5月20日，17點6分，星期四2保溫反應(yīng)和吸光度檢測反應(yīng)盤旋轉(zhuǎn) 反應(yīng)杯內(nèi)液體在恒溫條件下進行化學(xué)反應(yīng)當該反應(yīng)杯通過檢測窗口時被檢測得到一個吸光度值按規(guī)定的間隔時間檢測吸光度值直至總反應(yīng)結(jié)束 總反應(yīng)時間一般為10min，如果18s為檢測吸光度的間隔時間（interval time），則10min得到34個吸光度值，若15s為間隔時間，則得到40個吸光度值。 第98頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3計算并顯示或打印結(jié)果 分析儀根據(jù)各測光點讀數(shù)對某一檢測項目進行結(jié)果計算，并顯示或打印出每個項目的報告，也可按標本顯示或打印出全部項目的累積。即待某樣品指定的項目測試完畢

50、，便顯示或打印檢測結(jié)果。 第99頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四二、操作方法 （一）操作前的各項檢查（1）正常開機以后，檢查沖洗用水裝置是否正常、各項分析試劑是否充足、各種清洗劑是否足夠，以及樣品針、試劑針和攪拌棒是否清潔。（2）確認要進行校準的項目，確認要做的質(zhì)控批號及項目，以及校準品、質(zhì)控品是否足夠。（3）進行光度計自檢來確認光路與檢測系統(tǒng)是否處于正常工作狀態(tài)。 第100頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（二）校準 分析儀在樣品分析之前都要對該分析項目進行校準（也稱定標），得出一個該項目的校準系數(shù)（K）。校準前首先必須在反應(yīng)程序里設(shè)定有關(guān)校

51、準的參數(shù)，如校準液的代碼、位置及濃度值等。執(zhí)行校準程序，檢測得到該校準品的吸光度值，再根據(jù)校準濃度計算校準系數(shù)（K=校準品濃度/校準品吸光度）。 第101頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四1校準方式 有單點校準、兩點校準和多點校準單點校準：校準曲線呈直線且通過原點，用單個濃度的校準液即可，兩點校準：若校準曲線呈直線但不通過原點，則需用兩個濃度的校準液做兩點校準；多點校準：當校準曲線不呈直線而為真正的曲線時，應(yīng)做多點校準，并按其線形選擇不同的曲線方程進行擬和，如雙曲線、拋物線、冪函數(shù)、指數(shù)函數(shù)、對數(shù)函數(shù)等方程等。 第102頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分

52、，星期四2對校準的要求 （1）選擇合適（配套）的校準品 （2）如有可能校準品應(yīng)溯源到參考方法或 參考物質(zhì)。 （3）確定校準的頻度。 第103頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（4）如有下列情況發(fā)生時，必須進行校準： 改變試劑的種類或批號； 儀器或者檢驗系統(tǒng)進行一次大的預(yù)防性維護 或者更換了重要部件； 質(zhì)控反映出異常的趨勢或偏移，或者超出了 實驗室規(guī)定的接受限。 第104頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（三）質(zhì)控品測定 質(zhì)控是保證檢測結(jié)果可靠性的一個重要手段，因此每批樣品的分析測定均應(yīng)該有質(zhì)控樣品同時監(jiān)測。關(guān)于分析儀的批測定，是指一批樣品從開始測

53、定到完成測定后停止的整個過程。其中如果進行了添加或更新試劑、進行了有可能改變吸光度的維護等操作，均應(yīng)進行一次質(zhì)控樣品的檢測，以便及時監(jiān)測到分析系統(tǒng)的改變。 第105頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 所有分析儀都已設(shè)定或固化了有關(guān)質(zhì)控的分析程序：設(shè)定有關(guān)質(zhì)控參數(shù)，如每個質(zhì)控品的批號、靶值和標準差；選擇質(zhì)控圖的方式，如均值標準差質(zhì)控圖；質(zhì)控結(jié)果的統(tǒng)計分析，分析儀會保存每次測定的質(zhì)控結(jié)果，并對其進行統(tǒng)計，以列表及質(zhì)控圖的形式在屏幕上顯示。第106頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 可根據(jù)質(zhì)控結(jié)果在質(zhì)控圖上的位置判斷其是否在控。如果判為失控則應(yīng)從試劑、

54、質(zhì)控品、校準品和分析儀等幾方面尋找原因。通過對質(zhì)控結(jié)果的分析，可以了解某項目的分析精密度和準確度的改變。第107頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（四）檢測項目的輸入與測定 1項目輸入（1）逐項輸入：每份樣品可以任選分析儀中已設(shè)置的且試劑室內(nèi)已預(yù)置試劑的項目中的一項、幾項或全部項目。第108頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（2）項目組合輸入：把與疾病相關(guān)的檢驗項目 組合在一起，進行組合檢驗，這有利于方便病人，有利于疾病的診斷和預(yù)后分析，同時也簡化了分析操作，提高分析效率。（3）批量輸入：對于有連續(xù)相同測定項目的樣品，可使用批量輸入的方法。 第1

55、09頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四 多數(shù)全自動分析儀的操作非常方便，在開始測定畫面，輸入該批第一個樣品的樣品號，分析儀即會自動逐個地對樣品進行測定。一般在開始畫面還可選擇： 是否需要對結(jié)果超過設(shè)定的線性范圍、超過允許的吸光度上限等的樣品自動進行重復(fù)測定； 測定結(jié)果是否需要按照已設(shè)定的打印格式自動打印與測定結(jié)果有關(guān)的選項。 2進行測定第110頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3急診檢驗 幾乎所有全自動生化分析儀都具備“急診優(yōu)先”的功能，儀器留有急診樣品的分析位置或?qū)Ｓ脴悠芳芤曰蚣痹\分析的專用編號。一旦在急診樣品位置上放置了樣品，并設(shè)定了急診檢驗

56、的項目，分析儀就會在常規(guī)樣品的測定過程中，優(yōu)先安排對該樣品進行分析測定。 第111頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（五）樣品的減量與預(yù)稀釋方式 樣品的預(yù)稀釋方式是指在分析過程中儀器首先對樣品做自動稀釋，然后進行測定。 操作過程:a.樣品針吸取一定量樣品，加入反應(yīng)杯，b.試劑針把稀釋液加入已取樣品的反應(yīng)杯，并攪拌混勻，c.由取樣針在已稀釋的反應(yīng)杯里吸取已稀釋的樣品，加至另一個反應(yīng)杯進行分析測定。 樣品預(yù)稀釋的優(yōu)點：稀釋過程自動化，能使用到高達100倍或更高的稀釋比例。缺點：需占用3個取樣周期(sampling cycle)。 第112頁，共139頁，2022年，5月20

57、日，17點6分，星期四（六）分析儀的維護 分析儀的常規(guī)維護(maintenanc)是保證分析儀能夠正常運行的重要手段。分析儀要嚴格根據(jù)操作手冊的要求進行維護。 每天維護 每周維護 不定期維護 第113頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（七）分析儀數(shù)據(jù)連網(wǎng) 分析儀的數(shù)據(jù)連網(wǎng)是指分析儀與實驗室電腦網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)之間分析數(shù)據(jù)的互傳與共享。連網(wǎng)的實現(xiàn)是通過分析儀的數(shù)據(jù)接口以及接口軟件來完成。通過連網(wǎng)，能使來自分析儀的結(jié)果數(shù)據(jù)在網(wǎng)絡(luò)軟件的強大功能下得到進一步的處理，如報告單的格式（形式）更加為醫(yī)生與患者所接受；患者的信息與對應(yīng)的檢驗結(jié)果能長期保存；結(jié)果的分析與管理更為完善。 第114頁

58、，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四三、自動化分析與手工操作的比較 （一）優(yōu)點 1. 檢測速度快 2. 檢測靈敏度高 3. 檢測準確度高 4. 檢測精密度高 5. 樣品和試劑用量減少 6. 其他 :能精確地控制反應(yīng)時間 ;能精確地 控制反應(yīng)溫度 ;能進行復(fù)雜的結(jié)果計算。 第115頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四（二）缺點 1. 選擇次波長較困難 2. 操作時間受限 3. 操作復(fù)雜性受限 :加試劑的次數(shù)受限制;無法做復(fù)雜的操作;選擇和改變反應(yīng)溫度困難 4. 樣品量/試劑量的比例受限制 5. 不適宜做參考方法 6. 儀器維護和保養(yǎng)較復(fù)雜 第116頁，共

59、139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四第五節(jié) 干片式生化分析儀簡介 一、儀器結(jié)構(gòu) （一）干片試劑 干片試劑的結(jié)構(gòu)從上到下一般分為展開層、試劑層、顯色層和支持層，見圖4-10。（二）檢測儀器 也有半自動和全自動之分 第117頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四干化學(xué)的原理（1）試劑結(jié)構(gòu)Sample散布層試劑層顯色層支持層第118頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四二、分析原理 （一）分析過程 1展開層待測樣品定量加到干片試劑，由展開層把樣品均勻展開，并且阻擋固體物質(zhì)如紅細胞和大分子物質(zhì)進入試劑層。展開層還能為反射光檢測提供一個具有反射的背

60、景。2試劑層樣品中的水分成為干式試劑的溶劑，試劑與待測物質(zhì)進行化學(xué)反應(yīng)。試劑層的結(jié)構(gòu)還能控制多步化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)次序。第119頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期四3顯色層化學(xué)反應(yīng)的產(chǎn)物在顯色層與顯色試劑起呈色反應(yīng)。支持層為一透明膠片，僅起支撐試劑干片的作用。4吸光度檢測整個過程經(jīng)過一個規(guī)定的時間，由反射光度計進行檢測分析。光度計的單色光透過支持層、顯色層、試劑層，一部分光線被吸收，另一部分光線則反射到接收器被檢測。待測物濃度越高，光線被吸收越多，檢測到的反射光越弱，因而待測物濃度與吸光度成正比。（圖4-10） 第120頁，共139頁，2022年，5月20日，17點6分，星期