子宮內(nèi)膜癌血管內(nèi)皮生長因子及微血管密度表達(dá)的分析

1、子宮內(nèi)膜癌血管內(nèi)皮生長因子及微血管密度表達(dá)的分析【摘要】目的討論子宮內(nèi)膜癌血管內(nèi)皮生長因子(vegf)的表達(dá)、微血管生成及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。方法采用s-p免疫組化染色法檢測50例子宮內(nèi)膜癌及10例正常子宮內(nèi)膜中vegf的表達(dá)及計數(shù)微血管密度(vd)。結(jié)果子宮內(nèi)膜癌中vegf表達(dá)陽性率(92%)、vd(46.04.5)顯著高于正常子宮內(nèi)膜的表達(dá)率(30%、vd14.01.7,p0.01。43例子宮內(nèi)膜癌浸潤深度1/2肌層,其vegf表達(dá)率為90.7%,7例肌層浸潤深度1/2,vegf全部陽性表達(dá)，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異無統(tǒng)計學(xué)意義，腫瘤浸潤深度1/2肌層組vd69.916.8顯著高于浸潤深度1/

2、2肌層組42.84.4，差異有統(tǒng)計學(xué)意義p0.05。vegf表達(dá)率、vd與其他臨床病理因素不相關(guān)。結(jié)論vegf、vd在子宮內(nèi)膜癌中高表達(dá)，說明vegf、vd與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生有關(guān)。vd可作為子宮膜癌判斷預(yù)后的參考指標(biāo)?！娟P(guān)鍵詞】血管內(nèi)皮生長因子;子宮腫瘤;血管生成素血管生成對腫瘤增殖和進(jìn)展非常重要。在很多種人類腫瘤中，檢測間質(zhì)的血管生成都是重要的預(yù)后因素。但在子宮內(nèi)膜癌中，關(guān)于血管生成的研究報道很少。血管生成因素在子宮內(nèi)膜癌中的重要性目前尚未完全明了，血管內(nèi)皮生長因子vegf作為一種多功能的細(xì)胞因子，是腫瘤血管生成的重要調(diào)節(jié)因子1。vegf、微血管密度vd在多種腫瘤中的表達(dá)研究曾有很多報道，但

3、國內(nèi)尚無關(guān)于子宮內(nèi)膜癌vegf、vd的研究報道。筆者應(yīng)用免疫組化方法，觀察50例子宮內(nèi)膜腺癌和10例正常子宮內(nèi)膜中vd及vegf的表達(dá)，并研究其與臨床、病理因素的相關(guān)性。1資料與方法1.1一般資料選取我院19972001年間手術(shù)切除的子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本50例，年齡3070歲，平均54.53.5歲，全部經(jīng)病理證實為子宮內(nèi)膜癌。按fig臨床分期標(biāo)準(zhǔn)及子宮內(nèi)膜癌的病理分級標(biāo)準(zhǔn)，其中期43例，期7例；級26例，級24例。腫瘤浸潤深度1/2肌層43例，腫瘤浸潤深度1/2肌層7例。選取10例正常子宮內(nèi)膜標(biāo)本。1.2試劑與方法兔抗人vegf多克隆抗體rab-0243、兔抗人因子相關(guān)抗原r：ag多克隆抗體rab-

4、0070、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶免疫組化超敏試劑盒s-p均購自福州邁新公司。標(biāo)本經(jīng)中性福爾馬林固定，梯度酒精脫水，石蠟包埋，切片厚4，脫蠟，水化后，s-p法免疫組化操作按試劑盒說明書染色步驟進(jìn)展，后經(jīng)蘇木素復(fù)染、封片、觀察。1.3結(jié)果斷定染色陽性者呈棕色顆粒。vegf表達(dá)陽性物質(zhì)位于胞漿內(nèi)，vegf陽性表達(dá)于腫瘤細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞。結(jié)果斷定按照vl2報道的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展，根據(jù)以下兩方面的總分進(jìn)展判斷。1選染色均勻的陽性表達(dá)腫瘤區(qū)域，以著色細(xì)胞占視野細(xì)胞總數(shù)的多少分級。0：無陽性細(xì)胞；1：陽性細(xì)胞數(shù)25%；2：陽性細(xì)胞數(shù)26%50%；3：陽性細(xì)胞數(shù)50%。2按著色細(xì)胞染色強弱分：0：陰性；1

5、：弱，淡黃色；2：中等，棕黃色；3：強，棕褐色。按1、2的數(shù)值相加判斷結(jié)果，02為陰性-；34為弱陽性+；56為強陽性+。vd計數(shù)參照aeda等3和veidner等4報道的方法，由兩個對患者情況不理解的醫(yī)生背對背分別計數(shù)，取其平均值。先在低倍鏡100下全面觀察切片以確定腫瘤內(nèi)血管密度最高處，再在高倍鏡200下計數(shù)3個視野最高數(shù)目的微血管，取其平均數(shù)。凡呈現(xiàn)棕色單個內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞群者均作為一個血管計數(shù)，但肌層較厚及管腔直徑8個紅細(xì)胞直徑的血管不計數(shù)。1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用2檢驗和t檢驗進(jìn)展統(tǒng)計學(xué)分析。2結(jié)果2.1子宮內(nèi)膜癌vegf表達(dá)及其與臨床病理分級的關(guān)系50例子宮內(nèi)膜癌中“+16例，“+3

6、0例，“-4例，10例正常子宮內(nèi)膜中“+3例，“-7例。50例子宮內(nèi)膜癌組織vegf表達(dá)陽性率為92%，明顯高于正常子宮內(nèi)膜中vegf的陽性率30%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義2=17.5，p0.01。vegf的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的臨床分期及病理分級無關(guān)p0.05。腫瘤浸潤深度1/2肌層組vegf陽性率高于腫瘤浸潤深度1/2組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義p0.05。2.2子宮內(nèi)膜癌微血管定量及其與臨床病理分級的關(guān)系子宮內(nèi)膜癌和正常子宮內(nèi)膜組織的微血管經(jīng)因子相關(guān)抗原染色均呈陽性表現(xiàn)，癌組織中vd明顯高于正常子宮內(nèi)膜t=2.0，p0.05。子宮內(nèi)膜癌組織中vd與臨床分期、病理分級無關(guān)t值分別為1.21、0.63；均p

7、0.05。vd計數(shù)在腫瘤浸潤深度1/2肌層組高于腫瘤浸潤深度1/2組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義t=2.03，p0.05。vegf表達(dá)和vd與病理分級、臨床分期、肌層浸潤的關(guān)系見表1。表1vegf表達(dá)、vd與子宮內(nèi)膜癌分期分級和肌層浸潤的關(guān)系略3討論血管內(nèi)皮生長因子是一種由兩個亞基以二硫鍵相連而成的二聚體糖蛋白，相對分子量3442103。其主要作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，誘導(dǎo)新生血管的生成，并可顯著水解基底膜，增加微血管的通透性5。yshihit等6在子宮內(nèi)膜癌的研究中發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞不僅表達(dá)vegf，而且同樣表達(dá)受體，因此推斷vegf的分泌機制不僅存在旁分泌，同時也存在自分泌機制。腫瘤組

8、織內(nèi)的新生血管是腫瘤細(xì)胞生長、侵襲和轉(zhuǎn)移的根底7。目前，vegf在卵巢癌、宮頸癌、胃腸道等癌組織中呈高表達(dá)。vegf表達(dá)和vd與多種腫瘤的生物學(xué)行為相關(guān)。本實驗50例子宮內(nèi)膜癌組織中，vegf陽性46例，陽性率92%；vd46.64.5，vegf陽性率及vd在子宮內(nèi)膜癌中明顯高于正常子宮內(nèi)膜陽性率30%，vd14.01.7，差異具有非常顯著性p0.01。這與國外報道的vegf在子宮內(nèi)膜癌及正常子宮內(nèi)膜中的表達(dá)率結(jié)果相近，說明子宮內(nèi)膜癌組織中存在vegf高表達(dá)及vd明顯增高。vegf生成增多使血管生成增多，從而促進(jìn)癌細(xì)胞生長，在子宮內(nèi)膜癌的開展中起重要作用。本實驗中肌層浸潤1/2組中vegf表達(dá)

9、比浸潤深度1/2組有增高趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義，vd在腫瘤浸潤深度1/2肌層組中69.916.8高于肌層浸潤1/2組42.84.4，說明vegf表達(dá)及vd與子宮內(nèi)膜癌肌層浸潤的程度有關(guān)，這與yshihit等6的報道一樣。由于vegf是促進(jìn)腫瘤血管生成、生長、轉(zhuǎn)移的潛在因子，抑制vegf及其與受體的結(jié)合可作為治療腫瘤的打破點。盡管vegf可反映多種腫瘤的進(jìn)展和侵襲性，但vegf對子宮內(nèi)膜癌預(yù)后的預(yù)測作用那么較有限，vegf的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的生物學(xué)行為無關(guān)。有實驗已證實在子宮內(nèi)膜癌中vegf受體flt-4的過度表達(dá)可作為判斷其預(yù)后的獨立因素7。子宮內(nèi)膜癌據(jù)其浸潤和轉(zhuǎn)移情況進(jìn)展分期。腫瘤肌層浸潤的深

10、度是指示預(yù)后的重要指標(biāo)8。因此可以推斷計數(shù)子宮內(nèi)膜癌vd可作為判斷其預(yù)后的一個重要因素?？傊緦嶒炚f明vegf、vd是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的重要因素，子宮內(nèi)膜癌組織中vd明顯增高，可作為判斷子宮內(nèi)膜癌預(yù)后的重要因素之一?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】4：775-82.2vl，kagir，janer，1997，74：64-68.4veidnern，flkanj，pzzaf，etal.turangigenesis：anesignifiantandindependentprgnstiindiatrinearly-stagebreastarina.jnatl