從百合中提取分離秋水仙素的研究進(jìn)展

1、5/5從百合中提取分離秋水仙素的研究進(jìn)展應(yīng)化1班 U20101305 楊杰摘要：秋水仙素是從百合科植物秋水仙球莖中提取出的一種天然生物堿，其代謝產(chǎn)物為去甲秋水仙素，為高效抗痛風(fēng)藥，臨床應(yīng)用已有0年歷史,用于治療關(guān)節(jié)疼痛和痛風(fēng)。目前，秋水仙素及其衍生物除作為抗痛風(fēng)、抗肝炎、抗腫瘤等新藥外2，在農(nóng)業(yè)培育及生物研究中也有較多的應(yīng)用。從百合中提取分離秋水仙素的方法有：有機(jī)溶劑萃取法、回流提取法、超臨界二氧化碳流體萃取法、超聲波提取法等。本文就以上方法進(jìn)行了較為詳細(xì)的討論。關(guān)鍵詞:百合;秋水仙素；提取分離方法百合及秋水仙素的簡(jiǎn)介1百合簡(jiǎn)介:百合,是百合科(iliaeae)百合屬(Lilium）所有種的總

2、稱,是多年生草本植物,大多都具有根狀莖、塊莖或者是鱗莖，少數(shù)種為喬木、半灌木或灌木3。主要分布在亞洲東部、歐洲、北美洲等北半球溫帶地區(qū)。全球已發(fā)現(xiàn)有百多個(gè)品種，中國(guó)是其最主要的起源地。賀世洪等4利用極譜法,采用二階導(dǎo)數(shù)直接測(cè)定了百合中秋水仙堿的含量.1. 秋水仙素簡(jiǎn)介：秋水仙素，又名秋水仙堿,是一種生物堿，因最初從百合科植物秋水仙中提取出來(lái)，故名，結(jié)構(gòu)式如圖1.純秋水仙素呈黃色針狀結(jié)晶,熔點(diǎn)57。易溶于水、乙醇和氯仿.味苦,有劇毒。秋水仙素能抑制有絲分裂,破壞紡錘體,使染色體停滯在分裂中期5。圖1 秋水仙素的結(jié)構(gòu)式1.2.1。秋水仙素在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用1）秋水仙素對(duì)原發(fā)性痛風(fēng)有特異作用，可在1h內(nèi)

3、減輕炎癥并迅速止痛。2）秋水仙素是抑制細(xì)胞有絲分裂的一個(gè)典型代表，可抑制的合成。由于秋水仙素能抑制癌細(xì)胞的增長(zhǎng)，所以臨床上廣泛用于治療癌癥，特別對(duì)乳腺癌療效明顯，對(duì)皮膚癌、肝癌、白血病和何杰金氏病等亦有一定作用。1。22 秋水仙素在科研中的應(yīng)用秋水仙素具有獨(dú)特的性質(zhì)，能阻礙細(xì)胞分裂中紡錘體的形成，故可使植物細(xì)胞染色體倍增。因此，秋水仙素在農(nóng)業(yè)上被廣泛用于制備有二倍染色體的三倍體、四倍體種子。借此方法，農(nóng)業(yè)專家可做出無(wú)籽西瓜、大番茄、葡萄以及維生素含量更豐富的蔬菜等農(nóng)作物7。2。提取分離方法秋水仙素的提取方法有：有機(jī)溶劑萃取法、回流提取法、超臨界二氧化碳流體萃取法、超聲波提取法等。.有機(jī)溶劑萃取

4、法方法1:秋水仙素是極性分子，與百合中的酸性成分結(jié)合而以鹽的形式存在,因此,在提取前需對(duì)百合粉進(jìn)行堿化.可以選用氨水做為堿化試劑。將百合去根，剝片，洗凈后于50烘烤約h至干,粉碎,過(guò)篩得百合粉。稱取百合粉2g,包好后用0l氨水充分堿化，然后用提取劑提?。ň唧w操作見下）。將提取液過(guò)濾,濃縮,再將濃縮液用% SO4調(diào)pH至2,每次用10l氯仿進(jìn)行萃取，共萃取3次.再將萃取液合并，減壓濃縮，干燥,得粗提物。稱取適量粗提物，溶解,準(zhǔn)確定容至50ml，再用孔徑為0。45m的濾膜過(guò)濾，用高效液相色譜儀(檢測(cè)波長(zhǎng)220nm）測(cè)定濾液中秋水仙素的含量.21。1提取劑種類對(duì)提取效果的影響分別選用甲醇,乙醇,丙酮

5、,氯仿作提取劑,用索氏提取器提取，結(jié)果如表1所示,由表可知乙醇是最好的提取劑。這是因?yàn)橐掖季哂休^強(qiáng)的滲透力，且乙醇與秋水仙素之間可以以氫鍵結(jié)合.表 不同溶劑的提取結(jié)果加%乙醇20mL，水浴回流次，溫度0，每次1。5h9。在最佳組合條件下進(jìn)行萃取,粗提物含秋水仙素0。49。方法2:10將新鮮百合球莖一一撕開,洗去泥土，自然晾干后在0左右烘至全干,然后打碎過(guò)篩備用。稱取百合粉120，經(jīng)乙醇(09）浸泡過(guò)夜,于70下回流約h,濃縮制得浸膏;浸膏用去離子水(060下)溶解，常溫減壓過(guò)濾除去不溶物；水提取液用石油醚（50l3)萃取，去掉蠟質(zhì)物得到石油醚部分A;水溶液再用乙醚(50m3）萃取，乙醚萃取物濃

6、縮得乙醚部分；而后，水溶液用12SO4調(diào)節(jié)p約為5，此酸性水溶液用氯仿（4ml3)萃取，濃縮得酸性氯仿提取物部分C;酸性水溶液用5氨水調(diào)節(jié)H約為9,過(guò)濾，濾液用氯仿(30l3)萃取濃縮而得堿性氯仿提取物部分D(堿性生物堿部分）.其分離過(guò)程見圖。圖2 百合提取液的分離過(guò)程該方法的優(yōu)缺點(diǎn)：所用儀器和設(shè)備簡(jiǎn)單，一般實(shí)驗(yàn)室均可進(jìn)行,但操作很繁瑣復(fù)雜。2。2回流提取法112.1一種富含秋水仙素的黃花（百合類的一種植物）提取物的提取方法，包括以下步驟:取g黃花清洗干凈，加入85095%的乙醇，浸提，在805下回流提取3-5小時(shí)，取出上清液，剩下的殘?jiān)瑯佑蒙厦娴姆椒ㄔ俅芜M(jìn)行回流提取，取出上清液，合并兩次上

7、清液,過(guò)濾，回收乙醇至無(wú)醇味,在7075下干燥12小時(shí),得富含秋水仙素的黃花提取物。.。2優(yōu)點(diǎn)：適合富含秋水仙素的百合類植物，工藝方法簡(jiǎn)單,最后提取物中不含有毒的有機(jī)溶劑，且易操作，投資小,避免了化學(xué)合成工藝中常見的污染問(wèn)題，環(huán)保節(jié)能。2.3 超臨界二氧化碳流體萃取法12。1超臨界二氧化碳流體萃取百合中的秋水仙素1先將百合干片粉碎過(guò).75mm篩備用.稱取百合粉5g,在30m氨水中充分浸泡3min,風(fēng)干后裝入500mL的不銹鋼萃取釜中,開啟主泵,在40和1MPa時(shí)，以00mL9乙醇為提攜劑將百合靜態(tài)萃取min，再開啟小泵動(dòng)態(tài)萃取h，得萃取物270m。3.萃取物中秋水仙素的含量測(cè)定13將所得萃取物

8、除去溶劑并干燥后即得萃取粗品38mg.萃取物粗品用甲醇定容至0mL,用高效液相色譜法（外標(biāo)法）測(cè)定其中秋水仙堿含量（檢測(cè)波長(zhǎng)22m)。2.3.3 萃取條件的選擇李新社等研究了提攜劑、萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間等條件對(duì)萃取效果的影響。最后得出最佳的萃取條件為：提攜劑為乙醇，萃取壓力1Ma，萃取溫度40，萃取時(shí)間2h.在最佳條件下，從百合中提取秋水仙素的含量為0。043%.。3。4超臨界流體萃取法的優(yōu)點(diǎn)超臨界流體萃取法具有萃取溫度低，萃取效率高,萃取選擇性好等優(yōu)點(diǎn),并能使有效成分不被破壞,比較適合中草藥的提取與分離。24 超聲波提取法241秋水仙堿提取工藝14原料預(yù)處理提取濃縮定容測(cè)定計(jì)算提取率

9、2。.2預(yù)處理將百合原料洗凈后0下烘干粉碎過(guò)篩備用。2。4.3 提取依次稱取上述樣品1000，放入50mL三角瓶中，加入0%（體積濃度)2l的乙醇，在38、10W超聲提取0in5,將反應(yīng)后的溶液放入離心機(jī)中30r/mi離心5min，取上清液。2.4。4真空濃縮取樣品上清液，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，在60下回收乙醇并濃縮提取物,濃縮制得浸膏,浸膏用去離子水溶解過(guò)濾除去不溶物；提取液用石油醚、乙醚、氯仿萃取后除去溶劑干燥即得秋水仙堿粗提物,將濃縮液用提取劑定容至5mL。取一定溶液備用，再利用高效液相色譜檢測(cè)定粗品中秋水仙堿的含量。在最佳提取條件下，百合中秋水仙堿的提取率為00122。2.4.5超聲波提取法

10、的優(yōu)點(diǎn)15百合經(jīng)超聲處理后，細(xì)胞膜破碎,促進(jìn)了有效成份的溶出,因此超聲波法提取秋水仙堿具有很大優(yōu)越性。該方法與傳統(tǒng)方法相比,具有省時(shí)、高效、節(jié)能、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),是一種比較理想的提取方法?？偨Y(jié)與展望以百合為原料，采用有機(jī)溶劑萃取法、回流提取法、超臨界二氧化碳流體萃取法16、超聲波提取法等方法都具有萃取溫度低,萃取效率高,萃取選擇性等優(yōu)點(diǎn)。但前兩種方法操作起來(lái)較為麻煩,后兩種方法操作簡(jiǎn)便.第三種方法需要增加額外的儀器設(shè)備，成本較高。第四種方法相對(duì)較好。第二種和第三種方法提取產(chǎn)物不含有毒的有機(jī)溶劑，較為安全.我們可以根據(jù)不同的要求和設(shè)備條件選取不同的提取分離方法。4.參考文獻(xiàn)：1Nl E，cher

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