胰島素測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

1、胰島素測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2018年）_胰島 素原檢測試劑盒教學(xué)摘要：胰島素測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對胰島素測定試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備和撰 寫，同時為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考，產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合體外診斷試劑注冊管理辦法（國家食品藥品 監(jiān)督管理總局令第5號）和關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2014年第9號）的相關(guān)規(guī)定，作為定量檢測試劑，應(yīng)主要包括以下性能指標(biāo)：夕卜觀、裝量、準(zhǔn)確度、線性、空白限、精密 度、特異性、穩(wěn)定性等附件4胰島素測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對胰島素

2、測定 試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備和撰寫，同時為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。本指導(dǎo)原則是對胰島素測定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否 適用，若不適用，需詳細(xì)闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并根據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料 的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。本指導(dǎo)原則是供申請人和審評人員使用的指導(dǎo)性文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為 法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和 驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制訂的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷 完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本

3、指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。一、適用范圍胰島素測定試劑是指利用抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)方法對人血清、血漿或其他體 液中的胰島素（Insulin，以下簡稱INS ）進(jìn)行體外定量檢測的試劑。本指導(dǎo)原則適用于以酶標(biāo) 記、（電）化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、（時間分辨）熒光標(biāo)記等標(biāo)記方法標(biāo)記抗體，以微孔板、管、磁顆 粒、微珠和塑料珠等為載體包被抗體，定量檢測人INS的免疫分析試劑，不適用于以膠體金 或其他方法標(biāo)記的定性或半定量測定的INS試劑、以放射性同位素標(biāo)記的各類INS放射免疫 或免疫放射測定試劑。依據(jù)體外診斷試劑注冊管理辦法（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和食品藥品監(jiān) 管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄

4、的通知（食藥監(jiān)械管2013242號），INS測 定試劑是用于激素檢測的試劑，管理類別為二類。本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行首次注冊申報和相關(guān) 許可事項變更的產(chǎn)品。二、注冊申報資料要求（一）綜述資料綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生 物安全性方面的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評價以及同類產(chǎn)品在國內(nèi)外上市情況介紹等內(nèi)容，其中 同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、申報注冊產(chǎn)品與目前市場上已獲 批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同方面進(jìn)行介紹。綜述資料應(yīng)符合體外診斷試劑注冊管理辦法（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn) 證明文件格式的公告（國家食品藥品監(jiān)督管理

5、總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。相 關(guān)描述應(yīng)至少包含如下內(nèi)容：1.產(chǎn)品預(yù)期用途及輔助診斷的臨床適應(yīng)證背景情況（1）胰島素 的生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)、功能，在體內(nèi)正常和病理狀態(tài)下的代謝途徑和具體存在形式等。胰島素 在正常和病理狀態(tài)下的水平特點(diǎn)，不同類型疾病、不同人群（如有，例如年齡、性別等）的胰 島素水平差異。詳細(xì)說明測定胰島素水平對相關(guān)疾病的臨床指導(dǎo)意義。（2）說明哪些因素（例如飲食、藥物、干擾物質(zhì)等）影響胰島素水平，對檢測造成的影響。（3）與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)證背景情況，如臨床相關(guān)疾病的發(fā)生、實驗室診斷方法等。產(chǎn)品描述包括產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理、主要原材料的來源、質(zhì)量控制及制備方法、主要

6、生產(chǎn) 工藝過程及關(guān)鍵控制點(diǎn)，質(zhì)控品定值、校準(zhǔn)品的制備方法及溯源情況。有關(guān)生物安全性方面的說明4.有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價5.同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準(zhǔn) 上市的情況，相關(guān)產(chǎn)品所采用的技術(shù)方法及臨床應(yīng)用情況，申請注冊產(chǎn)品與國內(nèi)外同類產(chǎn)品的 異同等。參考文獻(xiàn)。（二）主要原材料的研究資料（如需提供）1.測定試劑所用抗體的制備、篩選、純化以及鑒定 等詳細(xì)試驗資料。若抗體為申請人自制，則應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，申請人對該抗體 技術(shù)指標(biāo)的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價等），且其生產(chǎn)工藝必須相對穩(wěn)定，并對其 工藝有相關(guān)的驗證，同時確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；若為申請人外購，則 應(yīng)詳述

7、其名稱及生物學(xué)來源、克隆號（如有）、貨號（如有）、外購方名稱，提交外購方出具 的抗體性能指標(biāo)及檢驗證書，詳述申請人對該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請人確定該抗體作為 主要原材料的依據(jù)。供貨商應(yīng)相對固定，不得隨意更換。其他主要原輔料的選擇及驗證資料，如包被板、反應(yīng)緩沖液等。申請人應(yīng)詳述每一原輔料技 術(shù)指標(biāo)的要求并確定該原輔料作為主要原輔料的依據(jù)，確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。若為外購，應(yīng)提供外購 方名稱并提交外購方出具的檢驗報告。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品（如有）的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料。申請人應(yīng)根據(jù)GB/T 214152008/ISO 17511 : 2003體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物 質(zhì)賦

8、值的計量學(xué)溯源性提供校準(zhǔn)品的溯源性文件，校準(zhǔn)品應(yīng)溯源至現(xiàn)行的國家標(biāo)準(zhǔn)品或國際 標(biāo)準(zhǔn)品（如適用）。（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）生產(chǎn)工藝主要指各組分制備工藝的 研究，包括試劑的配方和工藝關(guān)鍵參數(shù)的確定依據(jù)等。反應(yīng)體系主要包括樣本采集及處理、樣 本要求、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件等確定的依據(jù)，以及校準(zhǔn)方法、質(zhì)控方法。主要生產(chǎn)工藝介紹，可以流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。產(chǎn)品反應(yīng)原理介紹。樣本采集及處理，樣本要求：應(yīng)充分考慮樣本的穩(wěn)定性等因素，提供樣本采集處理和樣本要 求的最佳條件?？贵w包被/標(biāo)記工藝研究：申請人應(yīng)考慮如包被緩沖液（類型、pH）及其添加量、抗體

9、濃度、 時間、穩(wěn)定性等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述指標(biāo)的最佳組合。體系反應(yīng)條件確定：申請人應(yīng)考慮反應(yīng)模式、反應(yīng)時間、反應(yīng)溫度、洗滌次數(shù)等條件對產(chǎn)品 性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。體系中樣本與試劑的加樣方式及其添加量確定：申請人應(yīng)考慮樣本加樣方式、加樣量以及試 劑添加順序、添加量對產(chǎn)品檢測結(jié)果的影響，通過試驗確定最佳的樣本與試劑的添加方式及其 添加量。若樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對可 用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法進(jìn)行研究，通過試驗確定樣本稀釋基質(zhì)或處理方法。確定反應(yīng) 所需其他試劑用量（校準(zhǔn)品、標(biāo)記物、底物等）的研究資料。不同適用機(jī)

10、型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別詳述。（四）分析性能評估資料企業(yè)應(yīng)提交產(chǎn)品研制階段進(jìn)行的所有性能驗證的研究資料，包括具 體研究方法、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)、實驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。建議選擇不少于3批產(chǎn)品對分析性 能指標(biāo)進(jìn)行研究：外觀、裝量（凍干組分可不包含該指標(biāo)）、空白限、準(zhǔn)確度、特異性、線性、 精密度等，具體研究方法建議參考美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會相關(guān)的批準(zhǔn)指南（CLSIEP）或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件。對于適用多個機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書適用儀器項中所列的所有型號儀器的性能評 估資料（主要性能）。若產(chǎn)品涉及不同包裝規(guī)格且不同包裝規(guī)格間存在性能差異，則需要提供 每個包裝規(guī)格在不同型號儀器上

11、的評估資料；如已驗證不同包裝規(guī)格之間不存在性能上的差異， 需要提交包裝規(guī)格間不存在性能差異的說明。準(zhǔn)確度（1）與國家標(biāo)準(zhǔn)品（或國際標(biāo)準(zhǔn)品）的比對分析準(zhǔn)確度的評價可采用與國家標(biāo)準(zhǔn)品 （或國際標(biāo)準(zhǔn)品）的比對分析。用試劑盒緩沖體系將胰島素國家（或國際）標(biāo)準(zhǔn)品配制成與試劑盒校準(zhǔn)品相應(yīng)的（一般應(yīng)不少于5個）濃度點(diǎn)，試劑盒校準(zhǔn)品與相應(yīng)的國家（或國際）標(biāo)準(zhǔn) 品同時進(jìn)行分析測定，每點(diǎn)平行測定不少于2次，用雙對數(shù)或其他適當(dāng)?shù)臄?shù)學(xué)模型擬合，計算 兩條劑量一反應(yīng)曲線的斜率和效價比，兩條劑量一反應(yīng)曲線應(yīng)不顯著偏離平行（t檢驗）；以 國家（或國際）標(biāo)準(zhǔn)品為對照品，試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)品的實測值與標(biāo)示值的效價比應(yīng)在0.900一

12、1.100之間。（2）與國家標(biāo)準(zhǔn)品（或國際標(biāo)準(zhǔn)品）的偏差分析在試劑盒的線性范圍內(nèi)，配制23個不同 濃度的國家標(biāo)準(zhǔn)品（或國際標(biāo)準(zhǔn)品）進(jìn)行復(fù)孔檢測，計算每個濃度測定值的平均值M，根據(jù) 公式：測量偏差二（M-理論值）/理論值X100%，分別計算各濃度的相對偏差，應(yīng)在15.0% 范圍內(nèi)。（3 ）與企業(yè)準(zhǔn)確度質(zhì)控品的偏差分析分析方法同（2）。空白限空白限的確定常使用同批號試劑對零濃度校準(zhǔn)品（或校準(zhǔn)品稀釋液）進(jìn)行至少10次 重復(fù)檢測，計算所得信號值均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），將（+2SD ）帶入劑量一反應(yīng)曲線，計 算出的濃度值即為空白限?？瞻紫迲?yīng)不高于2.0mIU/L。線性范圍與線性建立試劑線性范圍所用的樣

13、本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理 想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的 影響。建立一種定量測定方法的線性范圍時，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇711個濃度水平。 例如，將預(yù)期測定范圍加寬至130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實驗結(jié)果逐 漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，確定線性范圍。線性范圍的下限不高于5.0mIU/L，線性 范圍的上限不低于160mIU/L。線性可使用試劑盒校準(zhǔn)品進(jìn)行驗證，用雙對數(shù)或其他適當(dāng)?shù)臄?shù)學(xué)模型擬合，線性相關(guān)系數(shù)r應(yīng) 不低于0.9900。也可以取INS國家（或國際）標(biāo)準(zhǔn)品（或其他高濃度樣品），按照試劑盒說明書聲稱

14、的線性范圍，配制適當(dāng)?shù)模ㄒ话銘?yīng)不少于5個）濃度點(diǎn)，建立相應(yīng)的擬合曲線，其線 性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不低于0.9900。精密度精密度的評估應(yīng)使用23個濃度水平的質(zhì)控品或樣本進(jìn)行測定，濃度宜包括醫(yī)學(xué)決 定水平附近的濃度值。一般包括分析（批）內(nèi)精密度、批間精密度的評價。（1）分析內(nèi)精密度：同一批次的測定試劑對線性范圍內(nèi)的23個濃度的質(zhì)控品或樣本進(jìn)行重復(fù)測定不少于8次，計算測量結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），根據(jù)公式CV=SD/x100% 得出變異系數(shù)（CV），手工操作試劑盒質(zhì)控品或樣本測定結(jié)果的CV值應(yīng)不大于15.0%，全 自動免疫分析系統(tǒng)試劑盒質(zhì)控品或樣本測定結(jié)果的CV值應(yīng)不大于8.0%。（2 ）批間精

15、密度：用不少于3個批次的測定試劑對線性范圍內(nèi)23個濃度的質(zhì)控品或樣本 進(jìn)行獨(dú)立分析，計算3批測量結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），根據(jù)公式CV=SD/X100% 得出變異系數(shù)（CV）,CV值應(yīng)不大于20.0%。分析特異性（1）交叉反應(yīng)：易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他蛋白質(zhì)激素等的驗證情況，應(yīng)至少驗證 與胰島素原（Pro-Insulin ）和6肽（C-Peptide ）的交叉反應(yīng)情況，其中胰島素原濃度不低 于10ng/mL, C-肽濃度不低于20ng/mL,在胰島素測定試劑盒上的測定結(jié)果應(yīng)不高于 3.0mIU/L。（2）干擾物質(zhì)：樣本中常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，如對高脂、黃疸、溶血、類風(fēng)濕因 子、嗜異

16、性抗體等干擾因子的研究（結(jié)果應(yīng)量化表示，禁用輕度、嚴(yán)重等模糊表述）。鉤狀（Hook ）效應(yīng)（如適用）說明不會產(chǎn)生Hook 效的濃度上限或相關(guān)研究。每個濃度 重復(fù)3份，對Hook 效進(jìn)行合理的驗證。建議在產(chǎn)品說明書上明示對Hook 效的研究結(jié) 果?？鼓齽┑挠绊懀ㄈ邕m用）如果試劑盒適用樣本類型包括血漿樣本，應(yīng)采用各種適用抗凝劑抗 凝的血漿樣本分別與血清樣本進(jìn)行對比實驗研究。方法為對比線性范圍內(nèi)的同一病人的血清和 血漿樣本（不同抗凝劑至少20例），應(yīng)包含醫(yī)學(xué)決定水平以及低值濃度樣本進(jìn)行檢測以驗證 申報試劑對于血清和血漿樣本檢測結(jié)果的一致性。方法學(xué)比對（如適用）采用參考方法或國內(nèi)外普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已

17、上市同類試劑作為參比， 與擬申報試劑同時檢測同一批樣本（至少40例），從測定結(jié)果間的差異了解擬申報試劑與參 比方法間的偏倚。如果偏倚很小或在允許的誤差范圍內(nèi)，說明兩檢測系統(tǒng)對病人樣本測定結(jié)果 基本相符，擬申報試劑與參比方法相比，對同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋不會產(chǎn)生差異結(jié)果。在實施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報試劑和對比試劑進(jìn)行初步評估，只有在確認(rèn)兩者都分別 符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進(jìn)行比對試驗。方法學(xué)比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃 度分布范圍并對結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。性能指標(biāo)的評價方法并無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)可依，可根據(jù)不同的試劑特征進(jìn)行，前提是必須保證研究 的科學(xué)合理性。具體實驗方法可以參考相

18、關(guān)的CLSI-EP文件或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評 估的文件。（五）參考區(qū)間確定資料 指參考區(qū)間確定所采用的樣本來源、確定方法以及詳細(xì)的試驗資料。 樣本來源應(yīng)考慮不同年齡、性別等因素。建議參考CLSI EP28A3C。（六）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，即申報試劑的穩(wěn)定性研究和適 用樣本的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等研究， 如組分為凍干粉，應(yīng)有復(fù)溶穩(wěn)定性研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。 穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對 于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少3批樣品在實際儲存

19、條件下保存至成品有效期后的研究資料。后者主要包括室溫保存、冷藏和冷凍條件下的有效性驗證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度 點(diǎn)（溫度范圍），每間隔一定的時間段即對儲存樣本進(jìn)行穩(wěn)定性驗證，從而確認(rèn)不同類型樣本 的保存穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行評價。試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說明書儲存條件及有效期和樣本要 求兩項中分別進(jìn)行詳細(xì)說明。（七）臨床評價資料1.臨床試驗研究方法選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同 類產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行比較研究試驗， 證明本產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品等效。盡量選擇方法學(xué)相同、線性范圍和參考區(qū)間等

20、性能接近的同類 產(chǎn)品作為對比試劑。臨床試驗機(jī)構(gòu)的選擇（1 ）應(yīng)在至少兩家經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理總局備案的臨床試驗機(jī)構(gòu) 開展臨床試驗。（2）臨床試驗機(jī)構(gòu)應(yīng)有能力提供臨床試驗所需的各類樣本，實驗操作人員有足夠的時間熟悉 檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評價方案。在整個實驗中，考核 試劑和對比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，定期對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的 準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。臨床試驗方案臨床試驗實施前，研究人員應(yīng)從臨床醫(yī)學(xué)、檢驗醫(yī)學(xué)、統(tǒng)計學(xué)等多方面考慮， 設(shè)計科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床試驗機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個臨床試 驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可

21、隨意改動。整個試驗過程應(yīng)在臨床試驗機(jī)構(gòu)的實驗室內(nèi)并 由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干 涉實驗進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。試驗方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng) 記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結(jié)果時應(yīng)采用盲法及樣本隨機(jī)分配以 保證試驗結(jié)果的客觀性。臨床試驗中所涉及的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說明書一致，且每種樣本類型 例數(shù)的選擇應(yīng)符合基本的統(tǒng)計學(xué)要求。各臨床試驗機(jī)構(gòu)選用的對比試劑應(yīng)一致，對比試劑適用 機(jī)型的檢測結(jié)果經(jīng)評估如無明顯差異后選用，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。研究對象選擇4.1臨床試驗樣本

22、量的確定：申請人或臨床研究者應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的臨床預(yù)期用途 和該產(chǎn)品相關(guān)疾病的臨床發(fā)生率確定臨床試驗的樣本量。在符合指導(dǎo)原則有關(guān)最低樣本要求的 前提下，還應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。4.1.1臨床試驗應(yīng)選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。在建立病例納入標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)考慮 到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群。建議在臨床試驗中選擇部分含干擾物質(zhì)的標(biāo)本， 包括高脂、溶血、黃疸的樣本、類風(fēng)濕因子陽性樣本以及其他可能產(chǎn)生交叉的樣本等，以從臨 床角度驗證試劑的特異性。在進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群分別進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。 總體樣本數(shù)應(yīng)不少于200例。適用于多種樣本類型的產(chǎn)品，若樣本之間具有可比性，應(yīng)完成 一個樣本

23、類型不少于200例的臨床研究，同一受試者不同樣本類型之間的比較不少于100例， 并在至少2家（含2家）臨床試驗機(jī)構(gòu)完成。4.1.2應(yīng)考慮樣本量的分布，各臨床試驗機(jī)構(gòu)樣本量和樣本分布應(yīng)相對均衡。4.2樣本濃度應(yīng)覆蓋考核試劑檢測范圍，盡可能均勻分布。盡可能使不少于30%樣本的測定值 處于參考區(qū)間以外，如果超出線性范圍上限的，建議稀釋后再做。統(tǒng)計學(xué)分析對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關(guān)分析、線性回歸等。對于 對比實驗的等效性研究，最常用是對考核試劑和對比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析， 應(yīng)重點(diǎn)觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標(biāo)。 結(jié)合臨床

24、試驗數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，推薦統(tǒng)計學(xué)負(fù)責(zé)人選擇線性回歸分析，統(tǒng)計分析應(yīng)可 以證明兩種方法的檢測結(jié)果無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。臨床試驗總結(jié)報告撰寫根據(jù)關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告（國家 食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）的要求，臨床試驗報告應(yīng)該對試驗的整體設(shè)計 及各個關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行 條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。建議在臨床總結(jié)報告中對以下內(nèi) 容進(jìn)行詳述。6.1臨床試驗總體設(shè)計及方案描述6.1.1臨床試驗的整體管理情況、臨床試驗機(jī)構(gòu)選擇、主要 研究人員簡介等基本情況介紹。6.1.2樣本納入/

25、排除標(biāo)準(zhǔn)、不同年齡段人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)。6.1.3樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。6.1.4統(tǒng)計學(xué)方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。6.2具體的臨床試驗情況6.2.1考核試劑和對比試劑的名稱、批號、有效期及所用機(jī)型等信息。6.2.2對各臨床試驗機(jī)構(gòu)的病例數(shù)、病種分布情況進(jìn)行匯總，建議以列表或圖示方式給出具體 例數(shù)及百分比。6.2.3質(zhì)量控制，試驗人員培訓(xùn)、儀器日常維護(hù)、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控品運(yùn)行情況，對檢測精密度、 質(zhì)控品回收（或測量值）、抽查結(jié)果評估。6.2.4具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本長期保存、結(jié)果不一致樣本的復(fù)核等。6.3統(tǒng)計學(xué)分析6.3.1數(shù)據(jù)預(yù)處理、差異數(shù)據(jù)的重新檢

26、測或第三方驗證以及是否納入最終數(shù)據(jù) 統(tǒng)計、對異常值或缺失值的處理、試驗過程中是否涉及對方案的修改。6.3.2定量值相關(guān)性分析用回歸分析驗證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a + bx和R2的形式給 出回歸分析的擬合方程，其中y是考核試劑結(jié)果，x是對比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y 軸截距，R2是判定系數(shù)，同時應(yīng)給出b的95% （或99% ）置信區(qū)間，定量值結(jié)果應(yīng)無明顯 統(tǒng)計學(xué)差異。6.3.3討論和結(jié)論對總體結(jié)果進(jìn)行總結(jié)性描述并簡要分析試驗結(jié)果，對本次臨床試驗有無特別 說明，最后得出臨床試驗結(jié)論。（八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料根據(jù)YY/T 03162016醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用附 錄D對該產(chǎn)品已知

27、或可預(yù)見的風(fēng)險進(jìn)行判定，企業(yè)還應(yīng)根據(jù)自身產(chǎn)品特點(diǎn)確定其他危害。針 對產(chǎn)品的各項風(fēng)險，企業(yè)應(yīng)采取應(yīng)對措施，確保風(fēng)險降到可接受的程度。（九）產(chǎn)品技術(shù)要求產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合體外診斷試劑注冊管理辦法（國家食品藥品監(jiān) 督管理總局令第5號）和關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告（國家食品 藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關(guān)規(guī)定。下面就技術(shù)要求中涉及的產(chǎn)品適用的引 用文件和主要性能指標(biāo)等相關(guān)內(nèi)容作簡要敘述。產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)GB/T 1912008包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T 214152008體外診斷醫(yī) 療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性YY/T 03162016醫(yī)

28、療 器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用YY/T 0466.12009醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和 提供信息的符號第1部分：通用要求YY/T 12502014胰島素定量標(biāo)記免疫分析試劑盒注: 如標(biāo)準(zhǔn)有更新，以最新標(biāo)準(zhǔn)為準(zhǔn)。主要性能指標(biāo)作為定量檢測試劑，應(yīng)主要包括以下性能指標(biāo)：外觀、裝量、準(zhǔn)確度、線性、 空白限、精密度、特異性、穩(wěn)定性等。各性能指標(biāo)應(yīng)不低于YY/T 12502014胰島素定量 標(biāo)記免疫分析試劑盒的要求。（十）注冊檢驗報告根據(jù)關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的 公告（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的要求，應(yīng)提供具有相應(yīng)醫(yī)療器 械檢驗資質(zhì)和承檢范圍

29、的醫(yī)療器械檢驗機(jī)構(gòu)出具的產(chǎn)品注冊檢驗報告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意 見。（十一）產(chǎn)品說明書說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、樣本要求、檢驗方法、檢驗結(jié)果的解釋以 及注意事項等重要信息，是指導(dǎo)使用者正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的 重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的編寫 應(yīng)符合關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通 告2014年第17號）的要求。境外試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原 文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人 提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)

30、果保持一致，如某些內(nèi)容弓|用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格 式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。根據(jù)關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2014年第17號）的要求并結(jié)合胰島素本身的特點(diǎn)，對胰島素測定試劑說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn) 行詳細(xì)說明，以指導(dǎo)注冊申報人員更合理地完成說明書編制。預(yù)期用途產(chǎn)品的預(yù)期用途應(yīng)描述為：本產(chǎn)品用于體外定量檢測人血清或血漿或其他體液中胰 島素的濃度。適用的樣本類型應(yīng)結(jié)合實際的臨床研究情況進(jìn)行確認(rèn)。若用于特殊受試人群的檢 測，應(yīng)明確說明。簡要介紹胰島素和本產(chǎn)品評價胰島P細(xì)胞分泌功能的臨床意義。檢驗原理詳細(xì)說明檢驗原理、方法，必要時可采

31、用圖示方法描述。主要組成成分3.1說明產(chǎn)品包含試劑組分的名稱、數(shù)量等信息，涉及的英文縮寫應(yīng)全部以中 文表述。3.2對于多組分試劑，應(yīng)明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。3.3如試劑盒中包含耗材，應(yīng)列明耗材名稱、數(shù)量等信息，如塑料滴管、封板膜、自封袋等。3.4對于產(chǎn)品中未包含但對該試驗必需的試劑組分，應(yīng)列出此類試劑的名稱、純度，提供稀釋 或混合方法以及其他相關(guān)信息。3.5盒中如果包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，應(yīng)說明其主要組成成分及其生物學(xué)來源，并應(yīng)注明校準(zhǔn) 品的定值及其溯源性；注明質(zhì)控品的靶值范圍，如靶值范圍為批特異，可注明批特異性，并附 單獨(dú)的靶值單。儲存條件及有效期根據(jù)產(chǎn)品的實時穩(wěn)定性、開

32、瓶穩(wěn)定性等穩(wěn)定性研究結(jié)果，對產(chǎn)品的儲存條 件及有效期做以下說明：4.1說明產(chǎn)品的儲存條件及有效期，如：28。仁-181以下保存的 有效期限，避免/禁止冷凍等。如有其他影響穩(wěn)定性的條件如光線、濕度等也必須說明。4.2如果打開包裝后產(chǎn)品或組分的穩(wěn)定性不同于原包裝產(chǎn)品，則打開包裝后產(chǎn)品或組分的儲存條件及有效期也必須注明。適用儀器如適用儀器為酶標(biāo)儀則需給出對酶標(biāo)儀配置的要求，除酶標(biāo)儀以外的其他儀器則需 寫明其具體型號。樣本要求重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：6.1明確本產(chǎn)品適用的樣本類型，血液樣本應(yīng)當(dāng)說明對采血管 和抗凝劑的要求，其他樣本應(yīng)說明樣本采集、處理及保存方式。6.2說明在樣本采集過程中，采集時間點(diǎn)是否受臨

33、床癥狀、用藥情況等因素的影響，盡量減少 由于樣本采集或處理不當(dāng)對實驗造成的影響。6.3明確樣本處理方法、樣本的運(yùn)送和保存條件及保存期限（短期、長期）等，冷藏冷凍樣本 檢測前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)的要求。如有需要，應(yīng)對高于檢測范圍樣本的稀釋方法進(jìn)行 規(guī)定。檢驗方法詳細(xì)說明實驗操作的各個步驟。7.1實驗條件：實驗環(huán)境的溫度、濕度等注意事項，檢驗試劑及樣本復(fù)溫等要求。7.2試劑準(zhǔn)備及其配制方法、注意事項。7.3待測樣本的預(yù)處理方法、步驟以及注意事項。7.4明確樣本檢測的操作步驟。7.5校準(zhǔn)：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項、校準(zhǔn)曲線的繪制方法。對需專用儀器的產(chǎn)品，應(yīng)注 明推薦儀器的校準(zhǔn)周期。7.6質(zhì)量控

34、制：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。建議在本 部分注明如果質(zhì)控結(jié)果與預(yù)期不符，提示檢測結(jié)果不可靠，不應(yīng)出具檢測報告。如質(zhì)控不 合格應(yīng)采取糾正措施。7.7結(jié)果計算：說明校準(zhǔn)曲線擬合方式和結(jié)果計算方法。參考區(qū)間應(yīng)注明常用樣本類型的正常參考區(qū)間，簡單介紹設(shè)定該參考區(qū)間所選人群的區(qū)域特 征，建議注明由于地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間。檢驗結(jié)果的解釋對可能出現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行合理的解釋。9.1分析異常值出現(xiàn)的可能因素，明確說明何種情況下需要進(jìn)行重復(fù)檢測，詳述在重復(fù)檢測時 對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等。9.2超出檢測范圍的樣本怎樣報告結(jié)果，如要得到準(zhǔn)確

35、的結(jié)果需怎樣處理，如需稀釋，應(yīng)注明 稀釋方法、最佳或最大稀釋比例等。9.3由于方法學(xué)或抗體特異性等原因，使用不同生產(chǎn)商的試劑對同一份樣本進(jìn)行檢測可能會得 到不同的檢測結(jié)果，因而在監(jiān)測過程中，用不同試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造 成錯誤的醫(yī)學(xué)解釋。系列監(jiān)測中如果改變試劑類型，則應(yīng)進(jìn)行額外的連續(xù)性檢測并與原有試劑 結(jié)果進(jìn)行平行比較，以重新確定基線值。檢驗方法局限性對胰島素測定可能存在的限制性因素進(jìn)行說明或警示。10.1不得作為患者病情評價的唯一指標(biāo)，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他 實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。10.2接受胰島素治療的患者，可能會產(chǎn)生抗胰島素抗體，以及胰島素自身抗體陽性的患者， 其抗體會干擾胰島素的測定。10.3嗜異性抗體或類風(fēng)濕因子等