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文檔簡介
1、-. z.農(nóng)藥殺蟲劑的種類1.1 按其成分及來源分無機(jī)殺蟲劑,如砷酸鉛、砷酸鈣、亞砷酸鹽、氟化鈉、氟硅酸鈉、硫磺、磷化鋅等。有機(jī)殺蟲劑。天然有機(jī)殺蟲劑可分為植物性類殺蟲劑如魚藤、除蟲菊、煙草、松脂、茴蒿素、楝素等和礦物性殺蟲劑如柴油乳劑、石油乳劑等。人工合成有機(jī)殺蟲劑有有機(jī)氯類殺蟲劑1、有機(jī)氯類殺蟲劑。有機(jī)氯類殺蟲劑主要分為兩大類,一類是以苯為原料,此類如使用最早、應(yīng)用最廣的殺蟲劑DDT、六六六以及殺螨劑三氯殺螨砜、三氯殺螨醇等;另一類是以環(huán)戊二烯為原料,如氯丹、七氯、艾氏劑等。此外,莰烯類殺蟲劑、毒殺芬和冰片基氯也屬于有機(jī)氯農(nóng)藥。此類化合物具有構(gòu)造穩(wěn)定、難氧化、難分解和毒性大等特點(diǎn),屬高效、
2、高毒、高殘留的農(nóng)藥,尤其是DDT 具有明顯的致癌性和遺傳毒性。高毒,根本已經(jīng)停頓使用、有機(jī)磷類殺蟲劑。近年來,高效低毒的品種開展很快,比方敵百蟲、敵敵畏、辛硫磷、樂果、馬拉硫磷、乙酰甲胺磷、三唑磷、毒死蜱、丙嗅磷、倍硫磷、殺螟硫磷、喹硫磷、噠臻硫磷、氯唑磷等、菊酯類殺蟲劑新煙堿類、多殺霉素、?,斁睾头鄣顾亍⑦吝蝾悮⑾x劑、茚蟲威、吡蚜酮等等。微生物殺蟲劑,如1云金桿菌殺蟲劑應(yīng)用最廣泛的、黃地老虎顆粒體病毒、棉鈴蟲顆粒體病毒、菜青蟲顆粒體病毒、菜蛾顆粒體病毒、白僵菌、綠僵菌、赤座霉菌等殺蟲劑的種類及作用機(jī)理雜環(huán)類殺蟲劑和昆蟲生長調(diào)節(jié)劑已逐步取代高毒有機(jī)磷農(nóng)藥而成為殺蟲劑的重要組成局部生物殺蟲劑
3、及生物工程技術(shù)日益受到人們的重視并得到了廣泛應(yīng)用2012 年,全球前十五大殺蟲劑同比上年既有位次上的變動,更有銷售額的起伏。具體排序?yàn)椋?煙堿類:噻蟲嗪11.40 億美元、吡蟲啉10.30 億美元、3雜環(huán)類:氯蟲苯甲酰胺9.15 億美元、氟蟲腈6.45 億美元、4有機(jī)磷類:毒死蜱6.25 億美元、高效氯氟氰菊酯5.30億美元、5菊酯類殺蟲劑新煙堿類:噻蟲胺5.10 億美元、阿維菌素3.60 億美元、溴氰菊酯3.40 億美元、乙酰甲胺磷3.05 億美元?dú)⑾x劑市場多姿多彩新煙堿類是繼有機(jī)磷、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯類殺蟲劑之后的一類重要?dú)⑾x劑,其主要作用于昆蟲的中樞神經(jīng)系統(tǒng),是煙堿型乙酰膽堿受體(
4、nAChRs) 的抑制劑12。由于昆蟲的nAChRs 與脊椎動物的nAChRs 具有一定的構(gòu)造差異,因此新煙堿類殺蟲劑中的藥效基團(tuán)( NNO2) 對昆蟲nAChRs 具有更高的親和力,從而導(dǎo)致了其對害蟲高效,而對高等動物低毒的高選擇性34。吡蟲啉和噻蟲嗪分別是具有氯吡啶構(gòu)造和氯噻唑構(gòu)造的第一和第二代新煙堿類殺蟲劑的代表性藥劑,均已在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上被廣泛用于種子、葉面和土壤中多種害蟲的防治新煙堿類殺蟲劑吡蟲啉和噻蟲嗪的代研究進(jìn)展銀君,史雪巖* ,高希武綜觀世界殺蟲劑工業(yè)的開展歷史, 可劃分為四個(gè)時(shí)代低.效殺蟲劑時(shí)代。以無機(jī)化合物為主, 作用單一, 用量大高效殺蟲劑時(shí)代。以有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯等
5、有機(jī)合成殺蟲劑為主高效殺蟲劑時(shí)代。以擬除蟲菊酯類、雜環(huán)類殺蟲劑為主, 單位面積用量大大降低, 對害蟲毒力卻顯著提高特異性殺蟲劑或非殺生性殺蟲劑時(shí)代。以昆蟲生長調(diào)節(jié)劑為代表, 這類殺蟲劑能改變害蟲生活習(xí)性、形態(tài)及生長繁殖等,從而控制害蟲。年代以來, 由于受可持續(xù)開展戰(zhàn)略的影響, 世界農(nóng)藥工業(yè)的構(gòu)造發(fā)生了前所未有的變化。有機(jī)氯殺蟲劑由于殘毒問題已根本上停頓使用, 有機(jī)磷殺蟲劑在世界上仍占有一定的地位, 但一些高毒品種已在許多國家禁用, 氨基甲酸酯類和擬除蟲菊酯類殺蟲劑開展緩慢并開場受到限制, 雜環(huán)類殺蟲劑和昆蟲生長調(diào)節(jié)劑已逐步取代高毒有機(jī)磷農(nóng)藥而成為殺蟲劑的重要組成部0世界殺蟲劑開展趨勢云金桿菌可
6、產(chǎn)生兩大類毒素,即毒素和外毒素,以毒素起主要作用,作用迅速,外毒素作用緩慢。原粉為黃褐色固體,屬好氣性蠟狀芽孢桿菌群,在芽孢爨,產(chǎn)生晶體,有12個(gè)血清型,17個(gè)變種。對人、畜低等毒性。對作物無藥害。云金桿菌對害蟲有很強(qiáng)毒殺能力,可用于防治菜青蟲、小菜蛾、稻苞蟲、稻縱卷葉螟、甘薯天蛾、煙青蟲、棉鈴蟲、燈蛾等多種害蟲。本藥劑可進(jìn)展噴霧、噴粉或制成顆粒劑、毒餌使用。也可在菌液中加少量化學(xué)農(nóng)藥使用,以提高防治效果。劑型為可濕性粉劑(每克含100億活芽孢)、乳劑(每毫升含100億活芽孢)。使用技術(shù)如下: (1)防治棉花害蟲:防治棉鈴蟲、小造橋蟲等,每畝用可濕性粉劑150200克,對水40-60公斤噴霧。
7、 (2)防治蔬菜害蟲:防治菜青蟲、小菜蛾等,每畝用可濕性粉劑100150克,對水5070公斤噴霧。 (3)防治玉米螟:每畝用可濕性粉劑150200克,拌細(xì)沙土35公斤,拌勻撒于心葉。(4)死蟲再利用:將被本藥毒死發(fā)黑變爛的蟲體,在水中揉搓,每50克蟲尸洗液加水50100公斤噴霧,對多種害蟲均有較好的防治效果噻蟲嗪的使用技術(shù):1、防治稻飛虱每畝用25%噻蟲嗪水分散粒劑1.63.2克有效成分0.40.8克,在假設(shè)蟲發(fā)生初盛期進(jìn)展噴霧,每畝噴液量3040升,直接噴在葉面上,可迅速傳導(dǎo)到水稻全株。 2、防治蘋果蚜蟲用25%噻蟲嗪500010000倍液或每100升水加25%噻蟲嗪1020毫升有效濃度25
8、50毫克/升,或每畝用510克有效成分1.252.5克進(jìn)展葉面噴霧。 3、防治瓜類白粉虱使用濃度為25005000倍,或每畝用1020克有效成分2.55克進(jìn)展噴霧。 4、防治棉花薊馬每畝用25%噻蟲嗪1326克有效成分3.256.5克進(jìn)展噴霧。 5、防治梨木虱用25%噻蟲嗪10000倍液或每100升水加10毫升有效濃度25毫克/升,或每畝果園用6克有效成分1.5克進(jìn)展噴霧。 6、防治柑橘潛葉蛾用25%噻蟲嗪30004000倍液或每100升水加2533毫升有效濃度62.583.3毫克/升,或每畝用15克有效成分3.75克進(jìn)展噴霧。噻蟲嗪使用本卷須知:不能與堿性藥劑混用。不要在低于10和高于35的
9、環(huán)境儲存。對蜜蜂有毒,用藥時(shí)要特別注意。本藥殺蟲活性很高,用藥時(shí)不要盲目加大用藥量。適宜作物為稻類作物、甜菜、油菜、馬鈴薯、棉花、菜豆、果樹、花生、向日葵、大豆、煙草和柑桔等。吡蟲啉的施用方法:主要用于防治刺吸式口器害蟲,如蚜蟲、飛虱、粉虱、葉蟬、薊馬;對鞘翅目、雙翅目和鱗翅目的*些害蟲,如稻象甲、稻負(fù)泥蟲、稻螟蟲、潛葉蛾等也有效。但對線蟲和紅蜘蛛無效。可用于水稻、小麥、玉米、棉花、馬鈴薯、蔬菜、甜菜、果樹等作物。由于它的優(yōu)良吸性,特別適于用種子處理和撒顆粒劑方式施藥。一般畝用有效成分310克,兌水噴霧或拌種。平安間隔期20天。施藥時(shí)注意防護(hù),防止接觸皮膚和吸入藥粉、藥液,用藥后要及時(shí)用清水洗
10、潔暴露部位。不要與堿性農(nóng)藥混用。不宜在強(qiáng)下噴霧,以免降低藥效。防治繡線菊蚜、蘋果瘤蚜、桃蚜、梨木虱、卷葉蛾、粉虱、斑潛蠅等害蟲,可用10%吡蟲啉40006000倍液噴霧,或用5%吡蟲啉乳油20003000倍液噴霧。防治蟑螂:可以選擇神農(nóng)2.1%滅蟑螂膠餌最近幾年的連續(xù)使用,造成了很高的抗性,在水稻上國家已經(jīng)制止使用。種子處理使用方法以600克/升/48%懸浮劑/懸浮種衣劑為例一:大粒作物1. 花生: 40毫升兌水100-150毫升包衣30-40斤種子1畝地種子。. 2. 玉米:40毫升兌水100 -150毫升包衣10-16斤種子2-3畝地種子。3. 小麥:40毫升兌水300-400 毫升包衣3
11、0-40斤種子1畝地種子。4. 大豆:40毫升兌水20-30毫升包衣8-12斤種子1畝地種子。5. 棉花:10毫升兌水50毫升包衣3斤種子1畝地種子6. 其他豆類:豌豆、豇豆、菜豆、四季豆等40毫升兌水20-50毫升包衣一畝地種子。7. 水稻:浸種10毫升每畝種量,露白后播種,盡量控制水量。二:小粒作物油菜、芝麻、菜籽等用40毫升兌水10-20毫升包衣2-3斤種子。三:地下結(jié)果、塊莖類作物土豆、大蒜、山藥等一般用40毫升兌水3-4斤分別包衣1畝地種子。四:移栽類作物紅薯、煙草及芹菜、蔥、黃瓜、番茄、辣椒等蔬菜類作物使用方法:1,帶營養(yǎng)土移栽的:40毫升,拌碎土30斤充分和營養(yǎng)土攪拌均勻。2,不
12、帶營養(yǎng)土移栽的:40毫升水以漫過作物根部為標(biāo)準(zhǔn)。移栽前浸泡2-4小時(shí)后用剩余的水兌碎土攪拌成稀泥,再蘸根移栽。4.氯蟲苯甲酰胺的施用方法:氯蟲苯甲酰胺5%懸浮劑對甘藍(lán)甜菜夜蛾、小菜蛾有較高的活性和防治效果,用藥量為有效成分/hm2折成5%懸浮劑商品量為30-55g/667m2,一般加水50L稀釋5.毒死蜱的施用方法:毒死蜱的方法從物理操作上來說分下面三種情況:一、噴霧。用48%的毒死蜱乳油對水稀釋后噴霧。用8001000倍液,防治美洲斑潛蠅、番茄斑潛蠅、豌豆?jié)撊~蠅、菜潛蠅等幼蟲。用1000倍液,防治菜青蟲、斜紋夜蛾幼蟲、燈蛾幼蟲、瓜絹螟等幼蟲及水生蔬菜螟蟲。用1500倍液,防治蔥斑潛蠅落地化蛹
13、幼蟲、茄黃斑螟幼蟲等。二、灌根。用48%毒死蜱乳油對水稀釋后灌根。在韭蛆產(chǎn)卵初盛期,用2000倍液光防治韭蛆,每畝用藥液500升。在4月上中旬大蒜灌第一水或第二水時(shí),每畝用乳油250375毫升,隨水施藥,防治根蛆。用2000倍液,澆淋植株根部,防治蚯蚓為害,每畝用藥液250300升。三、土壤處理。每畝用3%毒死蜱顆粒劑24千克,在播種前或定植前溝施、穴施或撒施,防治韭蛆、蠐螬、地老虎等。針對不同作物毒死蜱的使用方法大致如下水稻害蟲的防治稻縱卷葉螟、稻薊馬、稻癭蚊、稻飛虱、稻葉蟬每畝用40.7%乳油60-120毫升對水噴霧。 2小麥害蟲的防治粘蟲、蚜蟲每畝用40.7%乳油50-75毫升,對水40
14、-50千克噴霧。 3棉花害蟲的防治棉蚜每畝用40.7%樂斯本乳油50毫升,對水40千克噴霧。棉葉螨每畝用40.7%樂斯本乳油70-100毫升,對水40千克噴霧。棉鈴蟲、紅鈴蟲每畝用100-169毫升,對水噴霧。4蔬菜害蟲的防治菜青蟲、小菜蛾、豆野螟每畝用40.7%樂斯本乳油100-150毫升對水噴霧。 5大豆害蟲的防治大豆食心蟲、斜紋夜蛾每畝用40.7%乳油75-100毫升對水噴霧。 6果樹害蟲的防治柑橘潛葉蛾、紅蜘蛛用40.7%乳油1000-2000倍液噴霧。桃小食心蟲用400-500倍液噴霧,此劑量也可用于防治山楂紅蜘蛛、蘋果紅蜘蛛。7茶樹害蟲的防治茶尺蠖、茶細(xì)蛾、茶毛蟲、麗綠刺蛾、茶葉癭
15、螨、茶橙癭螨、茶短須螨用有效濃度300-400倍液噴霧。 8甘蔗害蟲的防治防治甘蔗綿蚜,每畝用40.7%乳油20毫升對水噴霧。9衛(wèi)生害蟲的防治蚊成蟲用100-200毫克/千克噴霧。孑孓用藥為水中含量15-20毫克/千克。蟑螂用200毫克/千克。跳蚤用400毫克/千克。家畜體表的微小牛蜱、蚤等用100-400毫克/千克涂抹或洗刷。噻蟲胺的施用方法:噻蟲胺的研究方法1.田間試驗(yàn)田間試驗(yàn)小區(qū)面積20m2,兩種施藥劑量按有效成份計(jì)分別為50g/hm2推薦量和200g/hm2,當(dāng)幼苗長至10cm左右時(shí)第一次噴藥,以后每隔2d噴一次,共噴施3次。另設(shè)一空白對照小區(qū)。最后一次施藥后的第0d、1d、3d、5d
16、、7d、10d、12d,用Z型法采集安康生長的全株小白菜進(jìn)展農(nóng)殘及生物標(biāo)志物分析,農(nóng)殘檢測增加了第15d的檢測。實(shí)驗(yàn)每天取樣測定時(shí)均設(shè)6個(gè)重復(fù),各取6個(gè)重復(fù)的平均值。2.噻蟲胺殘留測定采用丙酮提取,硅膠色譜柱凈化,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮,高效液相色譜LC-10Avp,ODS色譜柱法檢測其農(nóng)藥殘留量。3.生物標(biāo)志物檢測過氧化物酶POD活性測定采用愈創(chuàng)木酚法,多酚氧化酶PPO活性測定采用分光光度法,谷胱甘肽GSH含量測定采用Ellman法,丙二醛MDA含量測定采用硫代巴比妥酸法,超氧陰離子自由基O2-含量測定采用羥胺氧化反響法,可溶性蛋白質(zhì)的含量測定考馬斯亮藍(lán)法。研究結(jié)果1.噻蟲胺殘留動態(tài)噻蟲胺殘留檢測方
17、法的平均加標(biāo)回收率為93.02%94.4%n=6,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.3%5.4%n=6;殘留消解動態(tài)研究結(jié)果:低濃度處理組的半衰期T1/2為1.61d,殘留動態(tài)方程為CT=28.633e-4301T,相關(guān)系數(shù)r=0.9455n=6;高濃度處理組的半衰期T1/2為2.05d,殘留動態(tài)方程為CT=85.816e-0.3374T相關(guān)系數(shù)為r=0.9578n=6,10d后殘留量均低于5.0mg/kg。2.噻蟲胺脅迫對小白菜蛋白質(zhì)含量的影響處理組的蛋白質(zhì)含量均明顯低于對照組,濃度越高蛋白質(zhì)含量越低,低濃度組第5d到達(dá)最低值,此后逐漸增加,12d左右與對照組根本一致;高濃度組蛋白質(zhì)第1d后開場降低,第7d
18、到達(dá)最小值,12d時(shí)仍與對照組有顯著性差異。3.噻蟲胺脅迫對小白菜PPO活性的影響處理組的PPO活性均于噴灑農(nóng)藥當(dāng)天即開場明顯升高,低濃度組PPO活性于第5d到達(dá)最大值,此時(shí),PPO活性為對照組的1.17倍,此后逐漸降低;高濃度組PPO活性于第7d到達(dá)最大值,此時(shí)PPO活性是對照組的1.4倍,此后呈下降趨勢。4.噻蟲胺脅迫對小白菜GSH含量的影響在脅迫初期GSH含量急劇降低,低濃度處理組GSH含量在第5d下降到最低點(diǎn),高濃度處理組GSH含量在第7d下降到最低點(diǎn),此后逐漸升高,在第12d左右與對照組GSH含量根本到達(dá)一致。5.噻蟲胺脅迫對小白菜MDA含量的影響高、低濃度處理組MDA的含量較對照組
19、均顯著增高,且處理濃度越高,組織MDA含量越高,最后一次施藥當(dāng)天,高濃度處理組MDA含量即為對照組的3.3倍,低濃度處理組為對照組的1.8倍,且兩組MDA變化趨勢一樣,均為逐漸降低。6.噻蟲胺脅迫對小白菜POD活性的影響低濃度處理組POD活性在施藥后第5d到達(dá)最高值,而高濃度處理組在第7d達(dá)最高值,施藥后的第12d左右,處理組POD活性與對照組POD活性根本趨于一致。7.噻蟲胺脅迫對小白菜O2-含量的影響O2-含量與所遭受農(nóng)藥脅迫的濃度成正相關(guān),高濃度處理組O2-含量在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期均高于低濃度處理組,并且隨著時(shí)間推移含量逐漸降低。低濃度處理組在施用農(nóng)藥前5d O2-含量高于對照組,第5d后其含量
20、略低于對照組。結(jié)論1.本實(shí)驗(yàn)所采用的前處理及檢測方法簡化了操作步驟、縮短了提取時(shí)間和檢測時(shí)間,而且能保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性,適合蔬菜中煙堿類農(nóng)藥殘留的快速檢測。2.噻蟲胺農(nóng)藥在小白菜體降解比較迅速,按常規(guī)用量,施藥10d后采摘,噻蟲胺殘留可根本降解完全。3.POD、PPO、GSH、MDA、O2-、蛋白質(zhì)均可作為噻蟲胺污染蔬菜的早期敏感生物檢測指標(biāo),其中以蛋白質(zhì)及GSH最為敏感。更多復(fù)原噻蟲胺在小白菜中的殘留測定及其生物標(biāo)志物的研究研究目的吡蟲啉是一種新型氯代煙堿類吸性廣譜殺蟲劑,其胃毒與觸殺作用較為突出。吡蟲啉類殺蟲劑的作用機(jī)制與其他殺蟲劑不同,與其他殺蟲劑一般無交互抗性。由于它高效、低
21、毒、殺蟲譜廣、持效期長,吡蟲啉被大量廣泛的使用,結(jié)果造成對果蔬等農(nóng)作物和環(huán)境的污染。因此我們急需進(jìn)展果蔬等試樣中該農(nóng)藥的凈化及測定方法研究,建立一種簡單、快速、高效的吡蟲啉殘留監(jiān)測技術(shù),以便及時(shí)、準(zhǔn)確地對污染情況進(jìn)展分析、監(jiān)測,有效防止和減少對農(nóng)作物和環(huán)境的污染,并通過進(jìn)展不同濃度吡蟲啉脅迫對蔬菜體抗氧化酶活性、蛋白系統(tǒng)及谷胱甘肽的影響的研究,搞清不同濃度脅迫與蔬菜體上述活性物質(zhì)之間的劑量-效應(yīng)關(guān)系,搞清蔬菜中吡蟲啉殘留量與上述活性物質(zhì)之間劑量-效應(yīng)的關(guān)系,初步建立農(nóng)藥污染敏感指示生物標(biāo)志物的篩選過程,以期找到遭受該農(nóng)藥脅迫時(shí),植物體反響比較敏感的生物標(biāo)志物,作為該農(nóng)藥污染的早期診斷指標(biāo)。研究
22、方法1.種植玻璃生菜4個(gè)小區(qū),試驗(yàn)前不施肥,不噴藥。當(dāng)幼苗長至10cm時(shí)第1次噴藥,以后每隔2d噴1次,共噴施3次。三個(gè)小區(qū)施藥濃度分別為0.1%高、0.02%中、0.005%低推薦使用量,另設(shè)一不噴藥的空白對照小區(qū)。最后一次噴灑吡蟲啉后的第0d、1d、3d、5d、7d、9d、11d,按照算雙對角線法分別采取安康生長的玻璃生菜葉片。每次取樣時(shí),每個(gè)濃度取三個(gè)平行樣。取樣分別進(jìn)展吡蟲啉殘留測定和抗氧化物酶過氧化物酶、過氧化氫酶、超氧化物歧化酶活性、多酚氧化酶活性、谷胱甘肽和蛋白質(zhì)含量的測定。2.采用二氯甲烷提取、氧化鋁和硅鎂吸附劑層析柱凈化、石油醚淋洗、甲醇洗脫、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮、高效液相色譜法H
23、PLC檢測其含量。3.過氧化物酶POD活性、過氧化氫酶CAT活性、超氧化物歧化酶SOD活性、多酚氧化酶PPO活性、谷胱甘肽GSH含量、蛋白質(zhì)含量分別采用愈創(chuàng)木酚法、紫外吸收法、NBT光照復(fù)原法、分光光度法、Ellman法和考馬斯亮藍(lán)G-250染色法。結(jié)果1.吡蟲啉在生菜中的平均加標(biāo)回收率為97%100.4%,精細(xì)度為3.5%4.1%,最低檢出限為0.16ng。殘留消解動態(tài)研究結(jié)果為,低濃度處理組的降解方程y=687.89e-0.345*,半衰期為2.67天;中濃度組的降解方程y=1979.88e-0.379*,半衰期為2.43天;高濃度組的降解方程y=7233.81e-0.466*,半衰期為1
24、.53天。2.吡蟲啉對生菜的POD活性影響顯著,處理組POD活性明顯高于對照組,處理組濃度越高,POD活性最高。在實(shí)驗(yàn)的天數(shù),對照組與低、中、高濃度三個(gè)濃度處理組POD活性有顯著性差異p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.吡蟲啉對生菜CAT活性影響顯著,處理組CAT活性均高于對照組,對照組和處理組CAT活性有顯著性差異p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.噴灑農(nóng)藥吡蟲啉后,處理組中SOD活性顯著增高,低濃度組5d到達(dá)最大值,中、高濃度組7d到達(dá)最大值,出現(xiàn)峰值后又急劇下降,對照組和處理組SOD活性有顯著性差異p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5.高、低2個(gè)濃度處理組的PPO活性明顯高于對照組,低濃度組高于高濃度組,低
25、濃度組的PPO活性于噴灑農(nóng)藥當(dāng)天即開場明顯升高,第7d到達(dá)最大值,此時(shí),PPO活性為對照組的3.3倍,此后逐漸降低,11d時(shí)仍與對照組有顯著性差異p0.05;高濃度組PPO活性于噴灑農(nóng)藥當(dāng)天即開場升高,第5d到達(dá)最大值,此時(shí)PPO活性是對照組的1.9倍,11d左右與對照組根本一致。6.施用吡蟲啉后,高、低兩個(gè)濃度處理組的蛋白質(zhì)含量均明顯低于對照組,濃度越高,蛋白質(zhì)含量越低,低濃度組第5d到達(dá)最低值,此后逐漸增加,11d左右與對照組根本一致;高濃度組蛋白質(zhì)第1d后開場降低,第7d到達(dá)最小值,11d時(shí)仍與對照組有顯著性差異。7.高、低兩個(gè)濃度處理組GSH表現(xiàn)出相似的變化趨勢,即在脅迫初期GSH含量
26、急劇降低,低濃度處理組在第五天GSH下降到最低點(diǎn),高濃度處理組GSH在第7d下降到最低點(diǎn),此后兩組GSH含量逐漸開場升高,低濃度組在第11d左右無對照組根本到達(dá)一致。結(jié)論1.本實(shí)驗(yàn)所采用的前處理及檢測方法適合蔬菜中煙堿類農(nóng)藥殘留的快速檢測。2.吡蟲啉農(nóng)藥在生菜體降解迅速。3.POD、SOD、CAT、PPO、GSH、蛋白質(zhì)均可作為吡蟲啉脅迫生菜的生物標(biāo)志物。生菜中吡蟲啉的殘留測定及生物標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)研究目前,蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥剩余量的超標(biāo)問題仍然很嚴(yán)重。在食用前檢測蔬菜農(nóng)藥殘留量顯得十分必要。建立一套簡便、快速、準(zhǔn)確的檢測方法,進(jìn)展農(nóng)藥殘留檢驗(yàn),控制超毒蔬菜流入市場已成為急待解決的問題。甲胺磷是一種有
27、機(jī)磷殺蟲劑,通過抑制昆蟲乙酰膽堿酯酶來到達(dá)除蟲效果,對害蟲具有觸殺和胃毒作用,用在蔬菜病蟲害防治上效果明顯,但其殘留在葉片上的農(nóng)藥逐步滲入到蔬菜部,引起蔬菜氧自由基含量急劇升高,從而導(dǎo)致蔬菜細(xì)胞膜過氧化產(chǎn)生生物損傷,對機(jī)體產(chǎn)生極大的危害。本實(shí)驗(yàn)以小白菜為研究對象,噴灑一定濃度甲胺磷農(nóng)藥后,測定7天小白菜體可溶性蛋白質(zhì)、維生素CVitamin C、VitC、活性氧reactive o*ygen species,ROS的含量及各種抗氧化物如超氧化物歧化酶supero*ide dismutase,SOD、谷胱甘肽glutathione,GSH、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶glutathione-S-tran
28、sferase,GST、過氧化氫酶catalase,CAT、谷胱甘肽過氧化物酶glutathione pero*idase,GP*、蛋白酶Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase等的活性及總抗氧化能力total anti-o*ygen capacity的變化。結(jié)果說明,噴藥后第1天各種物質(zhì)含量相對與對照變化不大,第2-6天小白菜中蛋白質(zhì)、GSH、SOD、CAT都高于對照,而GP*、GST的含量低于對照,第7天都又復(fù)原到與對照接近。而Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase第1-4天與對照相差不大,第5、6天略高于對照;第七天各物質(zhì)都根本復(fù)原到與對照接近或持平。第1、5、6天小白菜中
29、維生素C的含量下降,而其余的幾天變化不大;活性氧、總抗氧化能力在第1-4天處理組的總趨勢是增大的,且都較對照組高,第5天總抗氧化能力處理組迅速下降,其后幾天各物質(zhì)的變化相近。說明有機(jī)磷農(nóng)藥噴灑后植物體產(chǎn)生了氧自由基,進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞防御活性氧自由基毒害的物質(zhì)產(chǎn)生,5-6天后機(jī)體恢復(fù)正常。本實(shí)驗(yàn)為食品衛(wèi)生檢驗(yàn)提供了一個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)甲胺磷農(nóng)藥對小白菜污染的生物標(biāo)志物研究1.3 按除草劑的構(gòu)造和作用分類1.3.1 苯酚類。五氯酚鈉是此類除草劑中常用的一種,它是一種非選擇性的觸殺型除草劑,在植物體不能傳導(dǎo)??梢栽诓シN前,先誘發(fā)雜草發(fā)芽,然后施用,殺死雜草,待藥劑毒性消失后,再播種育苗。用法:可濕性粉劑:80%
30、。噴灑法:510g/m2,配成1%2%溶液噴灑。浸殺法:估計(jì)釘螺孳生地水量,按1020g/m2,施藥。河邊鏟草皮浸殺法:沿河邊撤藥,1020g/m2,再將草皮和藥一起鏟入河邊水中,水上水下釘螺都可浸殺1.3.2 二苯醚類。除草醚是此類除草劑的代表。除草醚是觸殺型除草劑,對人畜毒性低。在水中的溶解度很低,容易被土壤吸附,在土壤表層形成毒土層,雜草幼芽接觸藥劑,便被殺死。其藥效可在土壤外表維持2030 d,對一年生雜草如稗草、莎草、堿草等雜草和多年生雜草牛毛氈均有顯著的殺傷作用,植株越小,效果越好1-2。但除草醚要在直接光照下才能發(fā)揮藥效。除草醚可除治一年生雜草,對多年生雜草只能抑制,不能致死。毒
31、殺部位是芽,不是根。對一年生雜草的種子胚芽、幼芽、幼苗均有很好的殺滅效果??煞莱薏荨ⅠR齒莧、馬唐草、三棱草、灰灰菜、野莧、蓼、堿草、牛毛草、鴨舌草、節(jié)節(jié)草、狗尾草等,最適合在芹菜、蕪荽、茴香、胡蘿卜等菜田使用。同時(shí)也適于萵苣、茼蒿、花椰菜、結(jié)球甘藍(lán)、苤藍(lán)、蘿卜、小蘿卜、大白菜、西紅柿、黃瓜、蕓豆、蓮藕等菜田上使用。l用于胡蘿卜、蘿卜、芹菜、蔥頭、蒜、大蔥、蕪荽、萵苣、豇豆、菜豆、甘藍(lán)、大白菜等直播田或育苗田,在播種后至出苗前,每畝用25%除草醚可濕性粉劑400克,或乳油500毫升,與50%撲草凈可濕性粉劑 50克混合使用,均兌水5075公斤噴霧處理土壤,或與20公斤細(xì)土混合均勻,撒施于土壤外
32、表。2用于芹菜、蔥頭、甘藍(lán)、花椰菜、西紅柿等移栽田,于移栽成活后,畝用25%除草酸可濕性粉劑500-700克,兌水4050公斤,定向噴霧,均勻施于外表。3用于水生蔬菜,如蓮藕田除草、在栽藕前放風(fēng)泡田,誘發(fā)雜草種子萌發(fā),畝用25%可濕性粉劑600750克,或25%乳油500毫升與50%撲草凈可濕性粉劑50克混合使用,均兌水40-50公斤噴霧。施藥后57天,田面保持水深35厘米,以后按常規(guī)管理。1.3.3 苯氧羧酸類。此類除草劑中,用量最多的是2,4-D 和2 甲4 氯。2,4-D 是發(fā)現(xiàn)最早的一類除草劑,含量在5001 000mg/kg 可使一些雙子葉植物致死,含量再高,對單子葉植物也會發(fā)生毒害
33、。它具有高度選擇性和傳導(dǎo)性,雜草受害后,葉片、葉柄和莖部彎曲,莖部變脆易斷,最后整個(gè)植株死亡。2 甲4 氯的性能與2,4-D 類似,對防除稻田雜草比2,4-D平安,可在苗期使用。揮發(fā)性、作用速度比2,4-D低且慢,二甲四氯對禾本科植物的幼苗期很敏感,3-4葉期后抗性逐漸增強(qiáng),分蘗末期最強(qiáng),而幼穗分化期敏感性又上升。在氣溫低于低于18時(shí)效果明顯變差,對未出土的雜草效果不好。通常用量每畝3060克有效成分。嚴(yán)禁用于雙子葉作物!常用劑型有13%、20%水劑,56%可濕性粉劑。小麥:小麥分蘗期至拔節(jié)前,每畝用20%二甲四氯水劑150200毫升,對水4050公斤噴霧,可防除大局部一年生闊葉雜草。水稻:水
34、稻栽插半月后,每畝用20%水劑200250毫升,對水50公斤噴霧,可防除大局部莎草科雜草及闊葉雜草。玉米:玉米播后苗前,每畝用20%水劑100毫升進(jìn)展土壤處理,也可在玉米45葉期,每畝用20%水劑200毫升,對水40公斤噴霧,防除玉米田莎草及闊葉雜草。在玉米生長期,每畝用20%水劑300400毫升定向噴霧,對生長較大的莎草也有很好的防除作用。河道清障:除滅河道水葫蘆宜在防汛前期的56月份日最低氣溫在15以上時(shí)進(jìn)展,對株高在30厘米以下的水葫蘆,可選晴天每畝用20%二甲四氯水劑750毫升加皂粉100200克,或用20%二甲四氯水劑500毫升加10%草甘膦水劑1000毫升加皂粉100200克,兌水
35、75千克噴霧;對株高30厘米以上的水葫蘆,采用上述除草劑兌水100千克噴霧。噴施上述除草劑后氣溫越高水葫蘆死亡越快,死亡率越高,氣溫越低效果越差。一般于施藥后1520天即全株枯死。1.3.4 酰胺類。敵稗就是此類除草劑的代表。敵稗是一種具有高度選擇性的觸殺型除草劑,其施入土壤易分解,只能對植物的地上局部噴霧,主要用于防治稻田稗草,對于旱地的狗尾草、馬齒莧也有防治效果。敵稗不能與有機(jī)磷農(nóng)藥混用。在秧田和直播田使用,用藥適期為稗草1葉1心至2葉1心期,噴藥前一天排水落干,噴藥后24小時(shí)灌水淹稗,保水層2天。每畝用藥量為20%乳油750-1000毫升,對水35公斤,對莖葉噴霧。1.3.5 取代脲類。
36、敵草隆是此類除草劑的代表。敵草隆是一種傳導(dǎo)型除草劑,對一年生和多年生雜草都有較好的殺傷效果,在大劑量使用時(shí),具有強(qiáng)烈的滅生性能。1.3.6 均三氮苯類。我國已經(jīng)生產(chǎn)使用的均三氮苯除草劑主要有西瑪津和阿特拉津2 種。此類藥劑都是高度選擇性傳導(dǎo)型除草劑,用于土壤處理,通過根系被植物吸收,隨蒸騰液流上升,傳遍全株。施藥后1020 d,雜草便可受到毒害作用。1.玉米、高粱、甘蔗地使用于播種后出苗前每畝用40%西馬津膠懸劑200-500毫升,對水40公斤,均勻噴霧土表。2.茶園、果園使用一般在4-5月份,田間雜草處于萌發(fā)盛期出土前,進(jìn)展土壤處理,每畝用40%膠懸劑185-310毫升,或50%可濕性粉劑1
37、50-250克,對水40公斤左右,均勻噴霧土表。1.3.7 氨基甲酸酯類。此類除草劑在林業(yè)上應(yīng)用的有滅草靈。滅草靈是傳導(dǎo)型選擇性除草劑,可用于防治多種雜草。滅草靈藥劑特性遇堿易分解,對酸性比較穩(wěn)定,在通常條件下化學(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定。對人畜低毒,對魚類毒性較高。滅草靈主要通過根部吸收,由下向上傳導(dǎo)到植物各部位,抑制生長點(diǎn)的細(xì)胞分裂,干擾代過程,從而殺死雜草。一般在施藥后58天以后雜草方開場出現(xiàn)生長停滯、莖葉腐爛、全株死亡等病癥。低溫條件下20以下施藥,防效差。主要劑型25%可濕性粉劑。防除對象及使用方法滅草靈可防除稗草、馬唐、馬齒莧、藜和當(dāng)年生三棱草等,蔬菜上主要用于防治百合科菜田雜草。1小蔥田除草,
38、于蔥長出以后,雜草萌芽初期,或翌年春子幼蔥返青后,畝用25%可濕性粉劑600克,兌水噴灑土壤。2大蒜田除草,于播蒜后雜草大量萌發(fā)時(shí),畝用25% 可濕性粉劑700克,兌水噴灑土表。3移栽蔥頭返青后,畝用25%可濕性粉劑800一1000克,兌水噴霧處理土壤。本卷須知1氣溫在20以下時(shí)不宜使用,以免降低藥效和產(chǎn)生藥害。2防止污染漁塘等養(yǎng)魚場所。保護(hù)酶體系1、超氧化物歧化酶supero*ide dismutase,SOD SOD是植物體去除自由基的最關(guān)鍵的酶類之一。2、過氧化物酶Pero*idase, POD3、過氧化氮酶catalase, CATSOD,POD,CAT以及其他酶類相互協(xié)調(diào),有效地去除
39、代過程產(chǎn)生的活性氧,使生物體活性氧維持在一個(gè)低水平上,從而防止了活性氧引起的膜脂過氧化及其他傷害過程??寡趸镔|(zhì)非酶促體系植物體還有多種能與活性氧作用的抗氧化劑,如抗壞血酸Asb、復(fù)原型谷胱甘肽GSH、維生素E(VE)、類胡蘿卜素Car、巰基乙醇MSH、甘露醇等。滲透調(diào)節(jié)活性氧去除逆境蛋白誘導(dǎo)酶促防御系統(tǒng)SOD CAT POD .過氧化物酶POD活性、過氧化氫酶CAT活性、超氧化物歧化酶SOD活性三者的活性協(xié)調(diào)一致,使活性氧維持在一個(gè)低水平三種酶為保護(hù)酶非酶促防御系統(tǒng)抗氧化劑VitC VitE GSH Car源激素變化1)ABA與植物的抗性逆境下 ABA迅速積累2)乙烯淹水干旱低溫高溫等逆境滲
40、透調(diào)節(jié)物質(zhì)無機(jī)離子 K+ cl-自身合成有機(jī)物脯氨酸甜菜堿、多酚氧化酶PPO活性、谷胱甘肽GSH含量、蛋白質(zhì)含量目前,化學(xué)防治法在植物的病蟲害防治中起著重要的作用。農(nóng)藥的大量使用,會影響植物的代。越來越多的研究說明,殺蟲劑作為植物的脅迫因子會干擾細(xì)胞的正常功能,進(jìn)而影響植物的生長發(fā)育。本實(shí)驗(yàn)選取生產(chǎn)中常用的五種殺蟲劑:5%阿維菌素,3%甲氨基阿維菌素微乳劑,10%吡蟲啉可濕性粉劑,25g/L溴氰菊酯乳油,40%氧樂果乳油。測試玉米幼苗在其脅迫下的生理生化指標(biāo)的變化,以期為合理使用農(nóng)藥提供一定的理論指導(dǎo),為合理評價(jià)農(nóng)藥生態(tài)平安性提供更科學(xué)的依據(jù)。本試驗(yàn)選用生產(chǎn)上常用濃度,用丙酮分別將五種殺蟲劑稀
41、釋500倍、1000倍和1500倍,待玉米幼苗長至三葉一心時(shí),通過微量進(jìn)樣器,均勻涂沫30l藥液到其第三個(gè)葉片上,藥后24h分別測定五種殺蟲劑脅迫下玉米幼苗的葉綠素含量、可溶性糖含量和游離氨基酸總量、可溶性蛋白含量、活性氧去除系統(tǒng)超氧化物歧化酶SOD、過氧化氫酶CAT、抗壞血酸過氧化物酶AP*、脫氫抗壞血酸復(fù)原酶DHAR和谷胱甘肽復(fù)原酶GR活性,以及抗壞血酸AsA和谷胱甘肽GSH含量和過氧化氫H2O2含量等指標(biāo)的變化情況。此外,我們還測定了玉米幼苗在氧樂果和溴氫菊酯脅迫下超微構(gòu)造的變化。結(jié)果顯示:1、施藥24h后,在五種殺蟲劑脅迫下,會造成玉米幼苗體脯氨酸含量的大幅上升,游離氨基酸和可溶性蛋白含量的下降,吡蟲啉脅迫下,玉米幼苗體葉綠素和可溶性糖含量會上升。2、阿維菌素、甲維鹽、溴氰菊酯和氧樂果處理的玉米幼苗體H2O2含量、O2-含量和丙二醛含量均大幅上升,與對照存在極顯著差異,吡蟲啉處理后玉米幼苗體H2O2含量和O2-含量上升,但丙二醛含量下降。3、施藥24h后,五種殺蟲劑脅迫下,玉米幼苗體超氧化物歧化酶SOD、過氧化物酶POD活性均上升;阿維菌素和氧樂果脅迫下,玉米幼苗抗壞血
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