《體外分析技術(shù)》課件

1、體 外 分 析 技 術(shù) 體外分析技術(shù)In vitro analysis techniques：是指離體的組織、血液或體液等作為生物樣本，在人體外進(jìn)行的、分析樣本成分或其含量的檢測(cè)技術(shù)。特點(diǎn)：超微量分析的靈敏度，高強(qiáng)度的特異性以及簡(jiǎn)便快速的方法領(lǐng)先于其他定量分析技術(shù)。非放射免疫分析 3重點(diǎn)講述體外分析技術(shù)臨床應(yīng)用4放射免疫分析 1免疫放射分析 2第一節(jié) 放射免疫分析免疫技術(shù)：以抗原-抗體反應(yīng)原理為基礎(chǔ)，對(duì)樣品中相應(yīng)抗原或抗體進(jìn)行檢測(cè)。標(biāo)記技術(shù)：將可被探測(cè)的示蹤物質(zhì)用化學(xué)方法與化合物連接。標(biāo)記免疫分析：用可微量或超微量檢測(cè)的示蹤劑標(biāo)記抗原、抗體，檢測(cè)免疫反應(yīng)結(jié)果并確定待檢物。第一節(jié) 放射免疫分析基

2、本原理標(biāo)記抗原（Ag*）和非標(biāo)記抗原（Ag）與限量抗體(Ab)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合。Ag*和Ag與Ab親和力相同。基本原理以Ag*Ab復(fù)合物為B，未結(jié)合的Ag*為F，則B/F或B/(BF)與Ag的量變存在著函數(shù)關(guān)系，由此可的制作該反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線 。第一節(jié) 放射免疫分析基本試劑抗體親和力特異性滴度標(biāo)記 抗原比活度放射性化學(xué)純度免疫活性標(biāo)準(zhǔn)品與被測(cè)物免疫活性相同放射化學(xué)純度高定量精確抗原抗體復(fù)合物分離方法雙抗體法沉淀法雙抗+沉淀吸附法固相分離法第一節(jié) 放射免疫分析室內(nèi)質(zhì)量控制1.零標(biāo)準(zhǔn)管結(jié)合率2.非特異性結(jié)合率3.最低濃度管和最高濃度管差4.標(biāo)準(zhǔn)曲線連線回歸的參數(shù)5.E25、E50、E756.質(zhì)控品7.質(zhì)控

3、圖第一節(jié) 放射免疫分析 RIA質(zhì)量控制常用指標(biāo)靈敏度精密度特異性準(zhǔn)確度穩(wěn)定性健全性多次重復(fù)測(cè)定結(jié)果的一致性最小可檢出量測(cè)定值與真實(shí)值符合程度抗體特異性，交叉反應(yīng)少有效期保持原有性能不變?cè)u(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)品與被測(cè)物的免疫活性第一節(jié) 放射免疫分析第二節(jié) 免疫放射分析基本原理將過(guò)量的標(biāo)記抗體與抗原結(jié)合，分離結(jié)合的標(biāo)記抗體與未結(jié)合的多余的標(biāo)記抗體，測(cè)定復(fù)合物的放射性，其活度與待測(cè)抗原的量呈正相關(guān)。RIAIRMA原理檢測(cè)范圍特異性標(biāo)準(zhǔn)曲線靈敏度標(biāo)記物抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合相對(duì)低窄差結(jié)合率與測(cè)值成反比抗體非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合高寬1-2數(shù)量級(jí)優(yōu)結(jié)合率與測(cè)值成正比第二節(jié) 免疫放射分析第三節(jié) 非放射性免疫分析熒光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析酶

4、標(biāo)免疫分析電化學(xué)發(fā)光分析第三節(jié) 非放射性免疫分析基本原理:以熒光素標(biāo)記抗體或抗原作為示蹤劑的一種新的免疫分析技術(shù)，其原理與ELISA相似。該法既可對(duì)液體中的抗原和抗體定量，也可對(duì)組織切片中的抗原、抗體進(jìn)行定性和定量。一般以鑭系元素作為熒光標(biāo)記（示蹤劑）。熒光免疫分析（FIA）第三節(jié) 非放射性免疫分析基本原理：利用化學(xué)或生物發(fā)光系統(tǒng)作為抗原抗體反應(yīng)的指示系統(tǒng)，借以定量檢測(cè)抗原或抗體的方法，發(fā)光物質(zhì)可直接作為抗原抗體的標(biāo)記物，也可以游離形式用于催化劑（酶）和輔助劑標(biāo)記的抗原或抗體的發(fā)光反應(yīng)中?；瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)（CLIA ）第三節(jié) 非放射性免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)（CLIA ）第三節(jié) 非放射性免疫分析第三節(jié) 非放射性免疫分析ECLIA 是目前最先進(jìn)的標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)，是繼RIA、ELISA、FIA、CLIA以后的新一代標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)，具有敏感、快速和穩(wěn)定的特點(diǎn)。直接以Ru(bpy)32+標(biāo)記，反應(yīng)時(shí)標(biāo)記物直接發(fā)光，ECLIA 與普通化學(xué)發(fā)光的主要差異在于是電啟動(dòng)發(fā)光反應(yīng)，循環(huán)及多次發(fā)光，因此ECLIA反應(yīng)易精確控制，重復(fù)性極好。電化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)（ECLIA ）第三節(jié) 非放射性免疫分析第四節(jié) 體外分析技術(shù)臨床應(yīng)用第四節(jié) 體外