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1、結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素試驗(yàn) (一)定義:由人工培養(yǎng)的結(jié)核桿菌的培養(yǎng)濾液制成的一種生物制品,其有效成份為結(jié)核蛋白。 (二)使用:3月的嬰幼兒接種卡介苗前篩選。測(cè)試卡介苗接種后是否有效,于接種后12周進(jìn)行,陽性者表示接種成功。(其她略) (三)品種:OT、PPD(TB-PPD、BCG-PPD等)。 (四)規(guī)格:1ml/支、10人份,每毫升含PPD 1g,相當(dāng)于50個(gè)國際結(jié)素單位。 一、結(jié)核菌素(Tuberculin) (一)定義:由人工培養(yǎng)的結(jié)核桿菌的培養(yǎng)濾液制成的一種生物 1、舊結(jié)素(Old Tuberculin OT):以Koch最初方法制成的結(jié)素。由于其制作簡(jiǎn)易,性質(zhì)穩(wěn)定,因此在較長時(shí)間內(nèi)一直

2、使用。缺點(diǎn)是含雜質(zhì)多,不易標(biāo)準(zhǔn)化,不同生產(chǎn)單位或同一單位生產(chǎn)的各批效價(jià)不一。 2、純蛋白衍化物(Pure Protein Derivatine PPD):用化學(xué)方法從結(jié)核菌培養(yǎng)液中提取出較純結(jié)核蛋白而制成的一種固體狀結(jié)素。其純度高,特異性強(qiáng),能夠標(biāo)準(zhǔn)化,因此逐步取代了舊結(jié)素。 1、舊結(jié)素(Old Tuberculin OT):以Ko (一)方法;皮內(nèi)注射法(Mantoux法),最大優(yōu)點(diǎn)是劑量與結(jié)果都較準(zhǔn)確。 (二)部位:左前臂掌側(cè)中間。如有疤痕、血管瘤等無法注射時(shí),可換臂,但需注明。 (三)劑量:0、1ml/人次。 (四)觀察:72小時(shí)。 二、皮試 (一)方法;皮內(nèi)注射法(Mantoux法),

3、最大優(yōu)點(diǎn)是劑 結(jié)素反應(yīng)屬于細(xì)胞介導(dǎo)的遲發(fā)型()變態(tài)反應(yīng),是由結(jié)核蛋白與攜帶免疫信息的小淋巴細(xì)胞(致敏T淋巴細(xì)胞)接觸后產(chǎn)生的變態(tài)反應(yīng)。結(jié)核蛋白在生產(chǎn)提取過程中發(fā)生部分變性,抗原成份已不完整,是半抗原,其本身不能使動(dòng)物致敏,只有加上臘質(zhì)丁(Wax D)才能使動(dòng)物致敏,而臘質(zhì)丁正是結(jié)核菌外殼的組成成份。故只有當(dāng)機(jī)體受到結(jié)核菌或卡介苗感染后方能形成致敏T淋巴細(xì)胞而對(duì)結(jié)素產(chǎn)生反應(yīng),而非感染者不對(duì)結(jié)素產(chǎn)生反應(yīng)。 三、反應(yīng)機(jī)制 結(jié)素反應(yīng)屬于細(xì)胞介導(dǎo)的遲發(fā)型()變態(tài)反應(yīng),是由結(jié)核 結(jié)素反應(yīng)共有二個(gè)時(shí)期,第一個(gè)時(shí)期是特異性時(shí)期。當(dāng)結(jié)素進(jìn)入致敏機(jī)體后,與循環(huán)中的致敏T淋巴細(xì)胞接觸,刺激T淋巴細(xì)胞釋放大量免疫活性

4、物質(zhì)淋巴因子,如巨噬細(xì)胞游走抑制因子、轉(zhuǎn)移因子、皮膚反應(yīng)因子、趨化因子、巨噬細(xì)胞凝集因子、淋巴毒素等。第二個(gè)時(shí)期是非特異性時(shí)期。釋放出的這些活性物質(zhì)能夠促使巨噬細(xì)胞向有反應(yīng)原的地方游走、聚集、發(fā)育、繁殖,能夠使局部血管擴(kuò)張,通透性增加,導(dǎo)致局部充血、滲出, 結(jié)素反應(yīng)共有二個(gè)時(shí)期,第一個(gè)時(shí)期是特異性時(shí)期。當(dāng)結(jié)素 更多的細(xì)胞從血管向外浸潤,在24小時(shí)后局部出現(xiàn)紅暈與硬結(jié),4872小時(shí)達(dá)到高峰,形成肉眼可見的局部皮膚反應(yīng),反應(yīng)強(qiáng)烈者可出現(xiàn)水泡、潰瘍,嚴(yán)重者可見前臂腫脹,疼痛、發(fā)熱、周身不適等。 紅暈是局部血管擴(kuò)張所致,對(duì)判斷機(jī)體致敏無意義,而硬結(jié)是水腫加巨噬細(xì)胞浸潤所致,是判斷機(jī)體致敏的依據(jù)。 更多

5、的細(xì)胞從血管向外浸潤,在24小時(shí)后局部出現(xiàn)紅暈與硬結(jié)1、發(fā)熱(T37、5)2、各種傳染病及恢復(fù)期。3、各種器質(zhì)性疾病如心臟、血管系統(tǒng)、腎臟、肝臟與胃腸等疾病急性期。4、身體極度虛弱者。5、患有局部或全身性皮膚病。6、防御機(jī)制不健全者,如免疫缺陷,丙種球蛋白缺乏者。7、其她預(yù)防接種不到二周者。8、本人或家屬有過敏史或變態(tài)反應(yīng)史。9、神經(jīng)及精神不正常,易出現(xiàn)暈厥、休克、癲癇等情況者。四、禁忌癥1、發(fā)熱(T37、5)四、禁忌癥 1、試驗(yàn)前先核對(duì)藥名、劑量、有效期及嬰幼兒,如有沉淀、安瓿破損及過期者不得使用。 2、用75%酒精消毒皮膚。 3、應(yīng)用一次性注射器,刻度與針孔斜面一致向上與皮膚平行刺入皮內(nèi),

6、緩慢準(zhǔn)確地注射0、1ml(含5U PPD)呈直徑約為6-10mm大小白色隆起,不要揉搓,會(huì)自行消退,不要用酒精棉球(簽)按壓針眼。 五、操作 1、試驗(yàn)前先核對(duì)藥名、劑量、有效期及嬰幼兒,如有沉淀 4、干擾因素: a、光線:直截了當(dāng)日光照射10分鐘,結(jié)素效價(jià)減少80%。1955年WHO曾做過如此的研究,用光照射過的結(jié)素為接種卡介苗的學(xué)生做測(cè)定,同時(shí)設(shè)對(duì)比組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)光照組90%以上反應(yīng)減弱,較對(duì)比組相差最大達(dá)8mm。 b、溫度:保存溫度偏高可使結(jié)核蛋白變性而降低效價(jià),時(shí)間長了則結(jié)素會(huì)完全失效。 c、技術(shù):注射劑量不足,未搖均勻,注射較深、驗(yàn)看不認(rèn)真不熟練等。 4、干擾因素: 1、時(shí)間:72小時(shí)。

7、 2、方法:一看、二摸、三量。看局部有無紅暈、雙圈、水泡等。對(duì)衣袖較緊者,擼起袖子時(shí)要稍等片刻再觀察,否則會(huì)誤為陰性。用手指上下、左右輕輕來回觸摸,不能擠捏,容易造成疼痛與假陽性。觸摸后用尺測(cè)量硬結(jié)邊緣,依照手臂的縱橫徑垂直交叉各測(cè)量一次,以毫米為單位記錄,如1012mm。 3、計(jì)算記錄硬結(jié)平均直徑:橫徑+縱徑/2。 六、觀察 1、時(shí)間:72小時(shí)。六、觀察 4、結(jié)果標(biāo)準(zhǔn): 我國現(xiàn)將結(jié)素試驗(yàn)反應(yīng)結(jié)果分為三類: 陰性:無硬結(jié)或硬結(jié)平均直徑5mm; 陽性:硬結(jié)平均直徑5-19mm; 強(qiáng)陽性:硬結(jié)平均直徑15mm(成年人為20mm),或有雙圈、水泡、潰瘍、皮疹等。如無20 mm,但有雙圈、水泡、潰瘍、皮疹等也為強(qiáng)陽性。 4、結(jié)果標(biāo)準(zhǔn): 結(jié)素試驗(yàn)結(jié)果定性與定量之間的關(guān)系: “” 硬結(jié)平均直徑5mm或無硬結(jié); “” 硬結(jié)平均直徑5-9mm; “” 硬結(jié)平均直徑10-14mm; “” 硬結(jié)平均直徑15-19mm; “” 硬結(jié)平均直徑20mm,或有水泡等。 結(jié)素試驗(yàn)結(jié)果定性與定量之間的關(guān)系:結(jié)核菌素試驗(yàn)-課件結(jié)核菌素試驗(yàn)-課件結(jié)核菌素試驗(yàn)-課件結(jié)核菌素試驗(yàn)-課件結(jié)核菌素試驗(yàn)-課件 1、2-8冷藏,避光保存,不能直截了當(dāng)放在冰上,不與其她藥物混放。 2、安瓿打開后1小時(shí)內(nèi)用完。 3、試驗(yàn)應(yīng)在室內(nèi)進(jìn)行,幸免陽光直射。 4、注射時(shí)或注射后出現(xiàn)暈厥、癔癥反應(yīng)、

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