藥物分析第六章芳酸及其酯類詳解演示文稿

1、藥物分析第六章芳酸及其酯類詳解演示文稿第一頁，共四十五頁。（優(yōu)選）藥物分析第六章芳酸及其酯類第二頁，共四十五頁。苯甲酸類羥苯乙酯ethylparoben丙磺舒 probenecid苯甲酸benzoic acid甲芬那酸 mefenamic acidsodium benzoate第三頁，共四十五頁。其他芳酸類氯貝丁酯clofibrate布洛芬ibuprofen第四頁，共四十五頁。特點均有苯環(huán)、羧酸或其酯水楊酸類和苯甲酸類結(jié)構(gòu)中的羧基直接與苯環(huán)相連除了酸性基團(tuán)外，各自具有本身的官能團(tuán)分子中苯環(huán)、羧酸和取代基的相互影響，使芳酸的酸性強度各有不同第五頁，共四十五頁。紫堇色赭色米黃色pH5.06.0T.

2、S.FeCl3pH46中性溶液鑒別三氯化鐵反應(yīng)第六頁，共四十五頁。堿式苯甲酸鐵鹽（赭色沉淀）加稀HCl，沉淀分解，生成游離白色第七頁，共四十五頁。布洛芬第八頁，共四十五頁。重氮化偶合反應(yīng)具體方法見芳香胺類藥物的鑒別氧化反應(yīng)異羥肟酸鐵反應(yīng)甲芬那酸H2SO4深藍(lán)色黃色并產(chǎn)生綠色熒光隨即變?yōu)樽鼐G色第九頁，共四十五頁。Fe/3紫色第十頁，共四十五頁。水解產(chǎn)物的反應(yīng)分解產(chǎn)物的反應(yīng)UV特征吸收IR吸收光譜第十一頁，共四十五頁。特殊雜質(zhì)的由來與方法檢查Acetyl Salicylic Acid副產(chǎn)物SAASAAspirin生產(chǎn)工藝第十二頁，共四十五頁。SA溶液的澄清度酚類和酯類其他副反應(yīng)產(chǎn)生酯類第十三頁，共

3、四十五頁。易碳化物熾灼殘渣重金屬第十四頁，共四十五頁。PAS-Na間氨基酚Ch.P 樣品3.0g用乙醚提取，加入H2O，用HCl滴定液（0.02mol/L)滴定，生成雜質(zhì)HCl（轉(zhuǎn)溶入H2O相，甲基橙指示劑）。滴定液不得過0.30mlUSP HPLC法 C18 NaH2PO4(0.05mol/L)-Na2HPO4(0.05mol/L)-CH3OH(含氫氧化四丁基銨1.9g)(425：425：150)254nm檢測內(nèi)標(biāo)：磺胺 第十五頁，共四十五頁。 羥苯乙酯 供試品自身對照法BP（1998）反相TLC 高低濃度對比法 取羥苯乙酯丙酮液1.0%和0.01%，2ul，254nm查熒光，前一個任何第二

4、個斑點的大小和強度不應(yīng)超過后一個。第十六頁，共四十五頁。 a. 雜質(zhì)對照品法 方法：供試品供試品溶液雜質(zhì)對照品對照品溶液 第十七頁，共四十五頁。供試品對照品第十八頁，共四十五頁。 判斷：供試品中所含雜質(zhì)斑點不得超過相應(yīng)的雜質(zhì)對照斑點。 優(yōu)點：同一物質(zhì)，同一Rf值比較，準(zhǔn)確度高、直觀性強。 缺點：需要雜質(zhì)對照品。 第十九頁，共四十五頁。 b.高低濃度對比法 方法： 第二十頁，共四十五頁。供試品對照品第二十一頁，共四十五頁。 判斷： 供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點不得深于對照溶液的主斑點（或熒光強度） 控制雜質(zhì)斑點個數(shù)，控制雜質(zhì)種類第二十二頁，共四十五頁。氯貝丁酯對氯酚（0.0025%）揮發(fā)性雜質(zhì)（0.5

5、%）GC法5%SE-30 2m160， N2FID 雜質(zhì)以歸一化法求得第二十三頁，共四十五頁。含量測定酸堿滴定法 Acid-base titration method 以ASA及其制劑為例苯甲酸pKa 4.20 水楊酸pKa 2.98酸性較強羧酸鄰位-OH，吸電子基團(tuán)，使酸性增加；并有氫鍵，更增加了其極性因此，可采取直接滴定法第二十四頁，共四十五頁。直接滴定法pKa 36 的藥物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定pKa 69 的藥物要用非水溶液滴定法中性乙醇：對指示劑(酚酞)而言為中性， 可消除滴定誤差乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶 液中滴定過程易水解本法特點：簡單注意點：若SA不合格，

6、不宜采用本法Aspirin 丙磺舒(Ch.P. BP. JP等) 苯甲酸(Ch.P等)均采用本法第二十五頁，共四十五頁。水解后剩余滴定法 Residual titration after hydrolysisUSP23方法：取本品約1.5g，精密稱定，準(zhǔn)確加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞為指示劑，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相當(dāng)于45.04mg的C9H9O4第二十六頁，共四十五頁。剩余滴定時消耗酸量 V(ml)同時做空白試驗，消耗酸量 V0(ml)Ch.

7、P 00羥苯乙酯的Assay亦采用bBaA第二十七頁，共四十五頁。反應(yīng)物質(zhì)之間的化學(xué)計量關(guān)系aA+bBcC+dD被測物滴定液毫摩爾數(shù)第二十八頁，共四十五頁。滴定度計算0.5規(guī)定的硫酸濃度為0.25mol/LT毫摩爾質(zhì)量第二十九頁，共四十五頁。兩步滴定法 Two-step titration用于Aspirin片測定片劑中有穩(wěn)定劑水解產(chǎn)物水楊酸SAHAc枸櫞酸Citric acid酒石酸Trataric acid為了避免這些酸類的干擾，采用兩步滴定法第三十頁，共四十五頁。Ch.P. 阿司匹林片 取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于阿司匹林0.3g)，置錐形瓶中，加中性乙醇(對酚酞指

8、示劑顯中性)20ml，振搖使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至顯粉紅色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱15min，并時時振搖，迅速放冷至室溫，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4第三十一頁，共四十五頁。第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc第二步放冷后，用H2SO4滴定液滴定剩余的NaOH V； 空白滴定消耗H2SO4 V0 ；(V0-V) H2SO4則為用于中和水解ASA所需的 NaOH第三十二頁，共

9、四十五頁。計算：稱取10片重 1.8240gCNaOH 0.1032mol/L片粉重 0.5312gC 0.05120mol/L 標(biāo)示量 0.1g V 3.02ml V0 20.18ml第三十三頁，共四十五頁。 直接水解后 兩步 滴定法 剩余滴定法 滴定法 優(yōu)點 操作簡便 水楊酸干擾少 結(jié)果準(zhǔn)確， 避免了游離 SA以及片劑 中穩(wěn)定劑的 干擾缺點 游離水楊酸 不能完全 不合格時結(jié) 排除干擾 果偏高Ch.P 氯貝丁酯的Assay采用兩步滴定法第三十四頁，共四十五頁。雙相滴定法 Titrimetry in two phases Ch.P 2005用于苯甲酸鈉的測定 苯甲酸鈉為芳酸堿金屬鹽，易溶于水；

10、苯甲酸不溶于水，不利于終點的正確判斷 因此，利用苯甲酸能溶于有機溶劑的性質(zhì)，采用雙相滴定法第三十五頁，共四十五頁。HCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸鈉)0.5mol/L25ml1.5g50ml2d甲基橙 橙紅色分出H2O層，置具塞錐形瓶，乙醚層用H2O 5ml洗滌，洗液并入錐形瓶，加乙醚20ml，繼續(xù)用HCl滴定，至水層顯持續(xù)的橙紅色第三十六頁，共四十五頁。柱分配色譜-紫外分光光度法Column Partition Chromatogr. ASA capsule 等制劑除用上述兩步滴定法外，最好用色譜法，可以分離酸性雜質(zhì)和輔料以及穩(wěn)定劑等，經(jīng)分離后同時測定ASA與SA 如USP用柱分配色譜-U

11、V測定ASA Capsule第三十七頁，共四十五頁。Column Partition Chromatography, CPC擔(dān) 體：硅藻土(Celite 545)固定相：一定pH的緩沖水溶液流動相：與水不相混溶的有機溶劑 (洗脫前必須先用水飽和)200300mm60mm4mm22mm層析柱玻棉壓榨棒350mm21mm第三十八頁，共四十五頁。CPC-UV法測定ASA Capsule SA測定供試液制備用CHCl3 50ml洗滌，棄去(洗去ASA)10ml冰HAc-水飽和乙醚液(110)(使紫色配位化合物被分解，SA析出)洗脫液收集于已盛有10ml甲醇和2滴HCl的50ml量瓶中，繼用30mlCH

12、Cl3洗，并稀釋至刻度SA對照品溶液：75g/ml，取10ml 50ml量瓶中盛有： 10ml甲醇，2滴HCl和10ml冰HAc-水飽和乙醚液(110)，CHCl3至刻度第三十九頁，共四十五頁。測定：306nm測定供試液和SA對照品液SA與試劑生成紫色水楊酸鐵配位化合物，在柱上移動慢，帶窄，色澤較深若有Fe3+洗下，黃色影響測定結(jié)果 消除干擾方法：迂底部拌有磷酸的硅藻土，生成不溶解的FePO4A供試液 A對照品液L=75(g/ml)10m 100mg1000 100%0.75%第四十頁，共四十五頁。ASA+SA測定供試液制備洗脫 5,25mlCHCl3 ，棄去CHCl3洗脫 10ml冰HAc-

13、CHCl3(110)*；85ml冰HAc-CHCl3(1100)，并稀釋至100ml對照品溶液50g/ml 冰HAc-CHCl3(1100)CPC-UV法測定ASA Capsule 第四十一頁，共四十五頁。測定：280nm 空白：CHCl3 NaHCO3使ASA和SA成鹽保留于柱上 用CHCl3洗脫的目的： 去除中性或堿性雜質(zhì)冰HAc酸化的目的： 使ASA游離，易被 CHCl3洗脫第四十二頁，共四十五頁。含量測定計算公式所取膠囊細(xì)粉中ASA(mg)供試品溶液吸收度對照品溶液吸收度第四十三頁，共四十五頁。CPC技術(shù)的類型利用固定相酸堿性的不同進(jìn)行分離利用藥物和固定相起化學(xué)反應(yīng)而進(jìn)行分離利用生成離子對進(jìn)行層析分離單純靠選擇流動相進(jìn)行分離第