全自動(dòng)生化分析儀基本知識(shí)與應(yīng)用-課件

1、南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院顧光煜全自動(dòng)生化分析儀基本知識(shí)與工作原理1-南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院顧光煜全自動(dòng)生化分析儀1一、自動(dòng)生化分析儀的分類 根據(jù)反應(yīng)裝置： 連續(xù)流動(dòng)式、離心式和分立式根據(jù)反應(yīng)介質(zhì)： 液相化學(xué)、干式化學(xué)根據(jù)反應(yīng)通道： 單通道、多通道根據(jù)自動(dòng)化程度： 全自動(dòng)、半自動(dòng) 根據(jù)儀器的復(fù)雜程度： 小型、中型和大型根據(jù)分析系統(tǒng)試劑開(kāi)放程度： 封閉系統(tǒng)、開(kāi)放系統(tǒng)2-一、自動(dòng)生化分析儀的分類 根據(jù)反應(yīng)裝置： 連續(xù)流動(dòng)式、離心1.連續(xù)流動(dòng)式生化分析儀比例泵空氣分段透析器管道式，攜帶污染3-1.連續(xù)流動(dòng)式生化分析儀比例泵3-4-4-2.離心式全自動(dòng)生化分析儀幾乎“同步分析”隨機(jī)任選式（早期的必

2、須按項(xiàng)目順序）比色杯人工清洗？（一次性）5-2.離心式全自動(dòng)生化分析儀5-3.分立式生化分析儀目前使用生化分析儀主要此種類型。比色杯 袋式儀器可以自動(dòng)制作比色杯 比色杯可以兼作反應(yīng)杯 比色杯不能作流動(dòng)比色池（半自動(dòng)）6-3.分立式生化分析儀目前使用生化分析儀主要此種類型。6-4.干式生化分析儀 干片分：擴(kuò)散層、試劑層、指示劑和支持層。利用“反射光度法”和“差式電位法”檢測(cè)。以液體樣品中的“水”為溶劑。理論基礎(chǔ)：KubelkaMunk理論。7-4.干式生化分析儀7-5.半自動(dòng)生化分析儀光源（石英鹵素?zé)簦┏Ｓ谩案缮鏋V光片”分光微量流動(dòng)比色池。終點(diǎn)法項(xiàng)目通常在“儀器”外孵育，時(shí)間和溫度的準(zhǔn)確性常影響

3、測(cè)定結(jié)果。8-5.半自動(dòng)生化分析儀光源（石英鹵素?zé)簦?-例1臨床上所指的封閉式全自動(dòng)生化分析儀主要是A 質(zhì)控物封閉B 試劑封閉C 環(huán)境封閉D 儀器封閉E 技術(shù)人員封閉9-例19-例2全自動(dòng)生化分析儀可分為小型、中型、大型，其依據(jù)是：A 單通道和多通道數(shù)量B 儀器可測(cè)定項(xiàng)目的多少C 測(cè)定程序可否改變D 儀器的復(fù)雜程度、功能和單位時(shí)間測(cè)試數(shù)量E 是否可以同步分析10-例210-例3全自動(dòng)與半自動(dòng)生化分析儀共同之處為A 取樣B 加試劑混合C 檢測(cè)波長(zhǎng)D 孵育反應(yīng)E 清洗系統(tǒng)11-例311-例4干化學(xué)式自動(dòng)生化分析儀所用的光學(xué)系統(tǒng)為A 分光光度計(jì)B 原子吸光儀C 反射比色計(jì)D 固定閃爍計(jì)數(shù)器E 免疫比

4、濁計(jì)12-例412-例5關(guān)于分立式全自動(dòng)生化分析儀的比色杯的闡述，錯(cuò)誤的是：A 比色杯可以是反應(yīng)杯B 比色杯可以自動(dòng)制作C 比色杯可以是流動(dòng)比色池D 比色杯可以是石英玻璃E 比色杯可以是硬質(zhì)塑料13-例513-二、自動(dòng)生化分析儀的安裝與準(zhǔn)備1.工作環(huán)境 空間、電源（UPS)、避免直射陽(yáng)光、環(huán)境溫度和濕度、電磁輻射、化學(xué)品。2.水 蒸餾水、去離子水、反滲透水。3.純水等級(jí)：一般二級(jí) 二級(jí)純水微生物含量： 最大每毫升菌落數(shù)103。14-二、自動(dòng)生化分析儀的安裝與準(zhǔn)備1.工作環(huán)境14-例6臨床生化實(shí)驗(yàn)室一般采用NCCLS所規(guī)定的二級(jí)純水，其微生物菌落（CFU/ml)應(yīng)低于A 1B 10C 100D

5、1000E 10000015-例615-例7臨床生化實(shí)驗(yàn)室用水一般采用：A 一級(jí)水B 二級(jí)水C 三級(jí)水D 次級(jí)水E 自來(lái)水16-例716-三、全自動(dòng)生化分析儀 基本結(jié)構(gòu)及工作原理1.樣品系統(tǒng) 專用樣品杯和直接用采血試管凝塊和氣泡檢出功能自動(dòng)沖洗功能樣品預(yù)稀釋、后稀釋、加倍、標(biāo)準(zhǔn)原液系列稀釋等不同的稀釋方式。17-三、全自動(dòng)生化分析儀 基本結(jié)構(gòu)及工作原理1.樣2.試劑系統(tǒng)冷藏功能液面感應(yīng)及氣泡檢出雙試劑與多試劑試劑瓶的防蒸發(fā)與死體積試劑條碼18-2.試劑系統(tǒng)18-3.條形碼系統(tǒng)三組成部分：掃描系統(tǒng)、信號(hào)整形、譯碼器黑條白空相間的條碼符號(hào)光電轉(zhuǎn)換元件常用條碼類型：Code39, Code128等1

6、9-3.條形碼系統(tǒng)19-4.反應(yīng)系統(tǒng)4.1 反應(yīng)盤(pán)4.2 混合裝置 多用特氟隆不沾涂層的攪拌棒4.3 溫控裝置 理想的溫度波動(dòng)應(yīng)小于0.13種方式：空氣浴、水浴、恒溫液間接加熱強(qiáng)生干化學(xué)儀用空氣浴恒溫20-4.反應(yīng)系統(tǒng)20-5.清洗系統(tǒng) 一般先用堿性液沖洗、再用酸性液沖洗、最后用去離子水沖洗。6.管路系統(tǒng) 管路系統(tǒng)的老化或長(zhǎng)期使用后反應(yīng)廢物的沉積阻塞常造成反應(yīng)結(jié)果的重復(fù)性差。21-5.清洗系統(tǒng) 一般先用堿性液沖洗、再用酸性液沖洗、最后用去7.比色系統(tǒng)7.1 光源 鹵素?zé)舨ㄩL(zhǎng)300800nm 氙燈 波長(zhǎng)285750nm使用壽命1000h左右，光源能量對(duì)340nm影響最大。7.2 比色杯 常用石英

7、、硬質(zhì)玻璃、優(yōu)質(zhì)塑料 光徑0.50.7cm。22-7.比色系統(tǒng)22-7.3 單色器 朗伯比爾定律 濾光片、棱鏡、光柵分光 多采用光柵分光 多采用后分光測(cè)量技術(shù)光源 比色杯 單色光器 檢測(cè)器7.4 檢測(cè)器 發(fā)光二極管8 程序控制系統(tǒng)23-7.3 單色器 朗伯比爾定律23-9. 攜帶污染常規(guī)清洗不能完全消除攜帶污染9.1 常見(jiàn)原因 共用系統(tǒng) 保養(yǎng)不當(dāng)（污垢、老化） 清洗液使用不當(dāng) 排列順序不合理9.2 計(jì)算 小于0.3%為正常9.3 常見(jiàn)組合24-9. 攜帶污染24-例8自動(dòng)生化分析儀比色分析常用的檢測(cè)器是A 固定閃爍計(jì)數(shù)器B 硒電池C 鎳氫電池D 二極管E 光電倍增管25-例825-例9自動(dòng)生化

8、分析儀的光源能量降低對(duì)單色光影響最大的波長(zhǎng)是A 340nmB 405nmC 450nmD 500nmE 630nm26-例926-例10自動(dòng)生化分析儀清洗加樣針主要為了A 提高分析精密度B 提高分析準(zhǔn)確度C 防止交叉污染D 提高反應(yīng)速度E 提高分析的靈敏度27-例1027-例11大多數(shù)全自動(dòng)生化分析儀比色杯的光徑是A 0.50.7cmB 0.81.0cmC 1.11.9cmD 2.03.9cmE 4.0cm28-例1128-例1229-例1229-例1330-例1330-例14全自動(dòng)生化分析儀比色杯的材料常采用A 光學(xué)玻璃或一般塑料B 普通玻璃或硬質(zhì)塑料C 隔熱玻璃或普通塑料D 石英玻璃或優(yōu)質(zhì)

9、塑料E 優(yōu)質(zhì)塑料或普通玻璃31-例1431-例15目前全自動(dòng)生化分析儀最常用的光柵分光方式為A 前分光B 中分光C 后分光D 前中后分光E 前后分光32-例1532-例16干式生化分析儀保持恒溫的方式是A 空氣式恒溫器加熱B 水浴式循環(huán)直接加熱C 恒溫液循環(huán)間接加熱D 金屬直接加熱E 反應(yīng)液直接加熱33-例1633-例17全自動(dòng)生化分析儀的試劑與樣品的混合裝置類型為A 攪拌棒B 加溫C 機(jī)械振蕩D 加樣針E 加混合液34-例1734-例18 某實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化分析儀近兩天發(fā)現(xiàn)部分結(jié)果明顯不穩(wěn)定，儀器自檢正常，測(cè)定過(guò)程沒(méi)有錯(cuò)誤報(bào)警，如果是交叉污染因素，首先應(yīng)考慮為A 清洗劑的類型是否正確B 清洗

10、用水是否符合要求C 管路沖洗是否徹底D 反應(yīng)杯是否需更新E 用校準(zhǔn)品對(duì)儀器進(jìn)行重新校正。35-例18 某實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化分析儀近兩天發(fā)現(xiàn)部分結(jié)果明顯不穩(wěn)例19 340nm波長(zhǎng)屬于A 可見(jiàn)光 B 紫外光C 紅外光D 近紅外光E 遠(yuǎn)紅外光36-例19 340nm波長(zhǎng)屬于36-例2037-例2037-例2138-例2138-四、全自動(dòng)生化分析儀常用分析技術(shù)1.光譜分析技術(shù)單波長(zhǎng)、雙波長(zhǎng)甚至多波長(zhǎng)主波長(zhǎng)，特有波長(zhǎng)；副波長(zhǎng)，為消除干擾而設(shè)單波長(zhǎng)易受溶血、黃疸、脂濁的干擾；雙波長(zhǎng)可消除上述干擾，減少雜散光、噪音干擾常用雙波長(zhǎng) 比濁 340/700nm； Hb 340/380；NADH 340/380、34

11、0/405； ALP 405/476；Trinder 520/600。39-四、全自動(dòng)生化分析儀常用分析技術(shù)1.光譜分析技術(shù)39-1.1 波長(zhǎng)選擇的三個(gè)條件待測(cè)物質(zhì)的光吸收最大吸收峰寬而鈍常見(jiàn)干擾物在該波長(zhǎng)下光吸收最小1.2 吸收光譜分析 Lambert-Beer定律40-1.1 波長(zhǎng)選擇的三個(gè)條件40-1.3 散射光譜分析散射光譜分析法 光線通過(guò)溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度的定律方法。透射比濁法散射比濁法 目前，全自動(dòng)生化分析儀主要采用透射比濁法。41-1.3 散射光譜分析41-2.電化學(xué)分析技術(shù)是利用物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì)，測(cè)定化學(xué)電池的電位、電流或電量的變化的分析方法?；竟剑耗芩固兀?/p>

12、Nernst)方程。測(cè)量電極與參比電極K+電極 頡氨霉素；Na+ 玻璃電極；Cl- 銀氯化銀電極；CO2 氣敏電極42-2.電化學(xué)分析技術(shù)42-例2243-例2243-例2344-例2344-例2445-例2445-例2546-例2546-例2647-例2647-例2748-例2748-例28鈉電極屬于A 晶體電極B 氣敏電極C 玻璃電極D 酶電極E 膜電極49-例2849-例29很多分析儀都采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)的光路技術(shù)，是為了減少A 試劑的干擾B 樣品中黃疸、溶血、脂血的干擾C 儀器光源的波動(dòng)D 批間差異E 批內(nèi)差異50-例2950-例3051-例3051-例3152-例3152-例3253

13、-例3253-五、全自動(dòng)生化分析儀常用測(cè)定項(xiàng)目的反應(yīng)原理終點(diǎn)分析法連續(xù)監(jiān)測(cè)法干化學(xué)分析法電化學(xué)分析法54-五、全自動(dòng)生化分析儀常用測(cè)定項(xiàng)目的反應(yīng)原理終點(diǎn)分析法54-1. 常用分析方法 連續(xù)監(jiān)測(cè)法的定義 終點(diǎn)法定義 零級(jí)反應(yīng)期 一級(jí)反應(yīng)期55-1. 常用分析方法55-2. NAD(P)H系統(tǒng)指示的反應(yīng)還原型NAD(P)H在340nm有吸收峰；氧化型NAD(P)則沒(méi)有。56-2. NAD(P)H系統(tǒng)指示的反應(yīng)56-2.1 利用NAD(P)HNAD，吸光度下降的： ALT AST LD-P UN K+酶法 TCO2酶法57-2.1 利用NAD(P)HNAD，吸光度下降的：57-2.2 利用NADNA

14、D(P)H，吸光度升高的：CKCK-MBTBALD-LGlu-HKTBA58-2.2 利用NADNAD(P)H，吸光度升高的：58-3. Trinder反應(yīng)Glu-GOD肌苷肌氨酸氧化酶法尿酸GPO-PAPT-Ch,HDL/LDL-Ch59-3. Trinder反應(yīng)59-4.苯衍生物指示反應(yīng)ALPGGTNAG60-4.苯衍生物指示反應(yīng)60-5.免疫透射比濁法型膠原TnIHs-CRP，LP(a)尿微量白蛋白，前白蛋白胱抑素C載脂蛋白61-5.免疫透射比濁法61-6. 離子選擇電極法K+Na+Cl-TCO262-6. 離子選擇電極法62-7. 常見(jiàn)受溶血影響較大的項(xiàng)目K+LDHCKASTALTMg

15、63-7. 常見(jiàn)受溶血影響較大的項(xiàng)目63-8.終點(diǎn)法反應(yīng)的項(xiàng)目Glu-GOD，肌苷肌氨酸氧化酶法，尿酸，TG-GPO-PAP，T-Ch，9.速率法反應(yīng)的項(xiàng)目ALT，AST，ALP，GGT，TBA，CK,LD，Glu-HK，UN，NAG，64-8.終點(diǎn)法反應(yīng)的項(xiàng)目64-9.其他9.1 反應(yīng)底物 ALT L丙氨酸-酮戊二酸 ALP 磷酸苯二鈉9.2 用全血標(biāo)本：糖化血紅蛋白65-9.其他65-例3366-例3366-例3467-例3467-例3568-例3568-例3669-例3669-例3770-例3770-例3871-例3871-例3972-例3972-例4073-例4073-例4174-例4

16、174-例4275-例4275-例4376-例4376-例4477-例4477-例4578-例4578-例4679-例4679-例47關(guān)于ALT測(cè)定中，敘述正確的是A L-丙氨酸與-酮戊二酸為反應(yīng)底物B NADH在氧化還原反應(yīng)中起作用C 第一步反應(yīng)中的L-丙氨酸將進(jìn)入下一步反應(yīng)D 在偶聯(lián)反應(yīng)中，生化儀將在455nm處檢測(cè)吸光度下降速率E LD主要作用于第一步反應(yīng)80-例4780-例48若遇到溶血標(biāo)本時(shí)，受影響較小的項(xiàng)目是A LDL-CB LDHC CKD ASTE ALT81-例4881-例49在下列反應(yīng)中，需要谷氨酸脫氫酶的是：A 酶速率法測(cè)定尿素B 葡萄糖氧化酶法測(cè)定C 肌苷酶法測(cè)定D 尿酸酶法測(cè)定E 膽固醇酶法測(cè)定82-例4982-例50血清前白蛋白測(cè)定，臨床上常用的方法是A 溴甲酚綠法B 凱氏定氮法C 雙縮脲法D 免疫比濁法E 磺柳酸法83-例5083-例51酶法測(cè)定甘油三酯常用的方法是A 終點(diǎn)法B 速率法C 免疫比濁法D 化學(xué)修飾法E 固定時(shí)間法84-例5184-例52自動(dòng)生化分析儀中連續(xù)監(jiān)測(cè)法的讀數(shù)方式A 在一定的時(shí)間范圍內(nèi)連續(xù)讀各吸光度值B 反應(yīng)尚未開(kāi)始和反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)各讀取吸光度值C 終點(diǎn)附近讀兩個(gè)檢測(cè)點(diǎn)取均值D 在終點(diǎn)附近讀取兩點(diǎn)，計(jì)算兩點(diǎn)吸光度的差值E 每經(jīng)過(guò)比色窗口即讀取一個(gè)吸光度85