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1、 4/4日常實驗室操作中培養(yǎng)基如何選?。颗囵B(yǎng)基的定義用于微生物生長(包括/未包括一些微生物的抑制)、鑒別和保存的天然和/或合成成分的液體、半固體或固體形式的物質(zhì)。微生物學(xué)稱為微生物培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的前世今生16世紀末簡易的顯微鏡在荷蘭誕生,為人類與微生物的相識創(chuàng)造條件。17世紀80年代列文虎克用自制顯微鏡觀察雨水、污水、血液、腐敗物質(zhì)、牙垢等,發(fā)現(xiàn)許多“活的小動物”并對其具體形態(tài)進行觀察和詳細描述,將結(jié)果發(fā)表在皇家學(xué)會哲學(xué)學(xué)報,從此打開人類對微生物研究的大門。1859年巴斯德巧妙設(shè)計了著名的曲頸瓶實驗,有力反駁了“自然發(fā)生說”,證明微生物在腐敗食品并非自發(fā)產(chǎn)生。實驗使用的有機物水浸液,成為世界首
2、個天然培養(yǎng)基。隨后產(chǎn)生的含糖培養(yǎng)基,又有所改進。1881年科赫發(fā)明固體培養(yǎng)基劃線分離純種法,解決了液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌時各種細菌混合生長難以分離的問題,使得多種傳染病病原菌相繼被發(fā)現(xiàn)。后來,柯赫助手的妻子提出:用瓊脂作凝固劑,比明膠理化性能更好,凝固的瓊脂硬而透明,因此瓊脂成為配制固體培養(yǎng)基最理想的材料,而取代了明膠并沿用至今。19世紀末到20世紀中葉培養(yǎng)基學(xué)科快速發(fā)展。近年來,國內(nèi)外相繼使用微生物自動化鑒定系統(tǒng)、微量生化系統(tǒng)、數(shù)碼分析系統(tǒng)和快速顯色培養(yǎng),明顯縮短微生物鑒定時間,增加鑒定準確度,提高效率和能力,標志著培養(yǎng)基學(xué)科已達到基本成熟階段。我國培養(yǎng)基研究工作起步較晚,于20世紀50年代開始
3、才有少量培養(yǎng)基原料和產(chǎn)品供應(yīng)市場。但到了80年代中期,國內(nèi)已有多種干燥培養(yǎng)基生產(chǎn),近20年來,我國培養(yǎng)基事業(yè)有了飛速發(fā)展,大大縮短與發(fā)達國家差距。商品培養(yǎng)基正逐步被微生物學(xué)工作者所接受,如生物制品、疾病控制、醫(yī)藥生產(chǎn)、臨床及衛(wèi)生檢驗等,大部分已使用商品培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的分類由于各類微生物對營養(yǎng)的要求不同、科學(xué)研究目的或生產(chǎn)實踐需要不同,因而培養(yǎng)基種類繁多,整理分類如下培養(yǎng)基的選擇技巧目前為止,培養(yǎng)基的選擇尚無固定標準,使用何種培養(yǎng)基培養(yǎng)怎樣的細胞系,主要還需根據(jù)數(shù)據(jù)、文獻和經(jīng)驗酌情而定。久順總結(jié)案例經(jīng)驗,提供以下方法供參考:A細胞采購自ATCC或其他的細胞庫,直接咨詢供應(yīng)商即可,或查閱相關(guān)文獻作為參考。B借鑒其他實驗室常用的培養(yǎng)基,許多培養(yǎng)基可適用于多種細胞培養(yǎng)。C使用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞,并觀察其生長狀態(tài),可用生長曲線、集落形成率等指標判斷,根據(jù)實驗結(jié)
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