微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)-5 酵母菌裝片的制作及觀察;霉菌裝片的制作及觀察課件

1、實(shí)驗(yàn)九酵母菌裝片的制作及觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)原理 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果 注意事項(xiàng) 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 思考題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)-51. 觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式，學(xué)習(xí)并掌握區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法。2. 掌握酵母菌的一般形態(tài)特征及其與細(xì)菌的區(qū)別。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?酵母菌是不運(yùn)動的單細(xì)胞真核微生物，其大小通常比常見細(xì)菌大幾倍甚至十幾倍。大多數(shù)酵母以出芽方式進(jìn)行無性繁殖，有性繁殖是通過接合產(chǎn)生子囊孢子。本實(shí)驗(yàn)通過美藍(lán)染液水浸片來觀察酵母的形態(tài)和出芽生殖方式。美藍(lán)是一種無毒性的染料，它的氧化型呈藍(lán)色，還原型無色。用美藍(lán)對酵母的活細(xì)胞進(jìn)行染色時，由于細(xì)胞的新陳代謝作用，細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力，能使美藍(lán)由藍(lán)

2、色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型。因此，具有還原能力的酵母活細(xì)胞是無色的、而死細(xì)胞或代謝作用微弱的衰老細(xì)胞則呈藍(lán)色或淡藍(lán)色，借此即可對酵母菌的死細(xì)胞和活細(xì)胞進(jìn)行鑒別。 實(shí)驗(yàn)原理 在載玻片中央加一滴0.l呂氏堿性美藍(lán)染色液，然后按無菌操作用接種環(huán)挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均勻。染液不宜過多或過少，否則，在蓋上蓋被片時，菌液會溢出或出現(xiàn)大量氣泡而影響觀察。 用鑷子取一塊蓋玻片，先將一邊與菌液接觸，然后慢慢將蓋玻片放下使其蓋在菌液上。蓋玻片不宜平著放下，以免產(chǎn)生氣泡影響觀察。 實(shí)驗(yàn)方法美藍(lán)浸片的觀察 將制片放置約3 min后鏡檢，先用低倍鏡然后用高倍鏡觀察酵母的形態(tài)和出芽情況，并根據(jù)顏色來區(qū)別死活細(xì)

3、胞。 染色約30min后再次進(jìn)行觀察，注意死細(xì)胞數(shù)量是否增加。 注意事項(xiàng)1. 染液不宜過多或過少，否則，在蓋上蓋被片時，菌液會溢出或出現(xiàn)大量氣泡而影響觀 察。 2. 蓋玻片不宜平著放下，以免產(chǎn)生氣泡影響觀察。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)報(bào)告Saccharomyces cerevisiae 1040醪糟中的酵母菌 1040死亡率= 100死細(xì)胞總數(shù)死活細(xì)胞總數(shù)思考題：醪糟中為何有這麼多的酵母菌？學(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法。了解常見霉菌的基本形態(tài)特征。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?霉菌可產(chǎn)生復(fù)雜分枝的菌絲體，分基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體（尤其是繁殖菌絲）及孢

4、子的形態(tài)特征是識別不同種類霉菌的重要依據(jù)。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。觀察霉菌的形態(tài)常用插片法。 實(shí)驗(yàn)原理 高倍下鏡檢加蓋玻片取棉蘭乳酚油染色液一滴，置于載玻片中央 實(shí)驗(yàn)方法棉蘭乳酚油浸片的觀察用接種針挑取少許菌絲與染色液混勻 實(shí)驗(yàn)結(jié)果青霉（1040）Fungal Mycelium with Spores, Penicillium sp. (SEM x3,220) 青霉 青霉的帚狀枝 帚狀分枝小梗 分生孢子分生孢子梗曲霉（1040）曲 霉曲霉的足細(xì)胞根霉（104）根霉毛霉（1040） 注意事項(xiàng)1. 制片時要細(xì)心，盡可能保持霉菌自然生長狀態(tài)。2.制片時要挑取盡可能少的菌絲，并用解剖針小心分散。3.浮載劑棉蘭乳酚油用量要適中，蓋上蓋玻片時，應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡。 實(shí)驗(yàn)報(bào)告Penicillum sp. 1010Aspergillus sp. 1040R