Agilent 1260高效液相色譜儀操作規(guī)程

主題Agilent1260高效液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號(hào)：SOP-04起草者：審核者：第1版第0次修訂批準(zhǔn)者：執(zhí)行日期：頁(yè)號(hào)：1OF41、 目的確保Agilent1260高效液相色譜儀的正確使用及管理。2、 范圍研發(fā)分析中心實(shí)驗(yàn)室Agilent1260高效液相色譜儀。3、 責(zé)任儀器使用者對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施負(fù)責(zé)。4、 內(nèi)容4.1開機(jī)4.1.1打開計(jì)算機(jī)，進(jìn)入Windows畫面。4.1.2自下而上打開1260LC各模塊電源，待各模塊自檢完成后，雙擊電腦桌面上LC1260-1(Online)圖標(biāo)，化學(xué)工作站自動(dòng)與1260LC通訊，進(jìn)入工作站畫面。4.1.3單擊【View】菜單選擇【MethodandRuncontro1】項(xiàng)，也可單擊工作站畫面左下角【MethodandRuncontrol］項(xiàng)，進(jìn)入方法和運(yùn)行控制窗口。4.2安裝色譜柱正確安裝實(shí)驗(yàn)所需的色譜柱，注意色譜柱流速箭頭方向，試驗(yàn)過程中需檢查是否存在漏液。4.3溶劑瓶體積設(shè)置把事先配好的流動(dòng)相倒入相應(yīng)的溶劑瓶中，單擊【instrument】菜單，選擇【MoreQuatPump】項(xiàng)下【Bottlefilling】，在參數(shù)設(shè)置處輸入各溶劑瓶(A、B、C、D)內(nèi)溶液實(shí)際體積和停泵體積，單擊【OK】鍵，即可。4.4^MCSealwash］單擊【instrument】菜單，選擇【MoreQuatPump］項(xiàng)下“control”，在sealwash這欄中選擇“On”，清洗功能開始運(yùn)行，并設(shè)置清洗時(shí)間，每隔5min清洗0.1min。主題Agilent1260高效液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號(hào)：SOP-04起草者：審核者：第1版第0次修訂批準(zhǔn)者：執(zhí)行日期：頁(yè)號(hào)：2OF44.4脫氣逆時(shí)針旋開Purge閥，單擊【instrument】菜單，選擇【MoreQuatPump】項(xiàng)下“control”,在“pump"這欄中選擇“On”,泵開始運(yùn)行。設(shè)置“solvents”一欄中相應(yīng)參數(shù)，將試驗(yàn)中所用到的管道逐一脫氣，直至管內(nèi)（由溶劑瓶到泵入口）無氣泡為止所需時(shí)間，3ml/min沖洗大約需5min?10min,，完成后選擇“off”，單擊OK鍵關(guān)泵，順時(shí)針旋緊Purge閥。4.5平衡色譜柱單擊【instrument】菜單，選擇【SetupInstrumentMethod］項(xiàng)下“QuatPump”，在“solvents”一欄將試驗(yàn)中要用到的有機(jī)相通道（甲醇/乙臘）設(shè)置為100%，并將“Flow”從低流速逐級(jí)設(shè)為1ml/min，在“pump”這欄中選擇“On”，泵開始運(yùn)行，沖洗約10min鐘后，設(shè)定與測(cè)試方法相同的柱流速和流動(dòng)相比例平衡色譜柱（梯度采用起始流動(dòng)相比例），沖洗色譜柱，直至基線走平，一般需要30min?60min。若測(cè)試方法用到緩沖鹽作為流動(dòng)相，還需10%甲醇或乙臘水溶液沖洗過渡色譜柱，約30min，再設(shè)置為流動(dòng)相得比例，平衡色譜柱。4.5方法編輯4.5.1進(jìn)樣體積設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣：?jiǎn)螕簟緄nstrument】菜單，選擇【SetupInstrumentMethod］，在此窗口上方選擇“Sampler”模塊，在“InjectionVolume”處輸入進(jìn)樣體積，選擇“StandardInjection”方式，單擊OK鍵即可。帶洗針進(jìn)樣：?jiǎn)螕簟緄nstrument】菜單，選擇【SetupInstrumentMethod】，在此窗口上方選擇“Sampler”模塊，在“InjectionVolume”處輸入進(jìn)樣體積，選擇“Injectionwithneedlewash”方式，單擊OK鍵即可。此方式進(jìn)樣后會(huì)在事先放置的洗瓶中洗針，減少樣品殘留此種方式比較，比較適合4.5.2柱溫設(shè)定單擊【instrument】菜單，選擇【SetupInstrumentMethod］，此窗口上方選擇“column”模塊,輸入柱溫，左右兩邊柱溫要保持一致。主題Agilent1260高效液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號(hào)：SOP-04起草者：審核者：第1版第0次修訂批準(zhǔn)者：執(zhí)行日期：頁(yè)號(hào)：3OF44.5.3泵參數(shù)設(shè)定單擊［instrument］菜單，選擇【SetupInstrumentMethod】，在此窗口上方選擇“QuatPump”模塊，在“Flow"處輸入所需的流速，在“solvents"處輸入各通道的溶液比例，若實(shí)驗(yàn)為梯度洗脫程序，則需在“Timetable”下編輯，輸入相應(yīng)的時(shí)間和流動(dòng)相比例。“Stoptime”為運(yùn)行停止時(shí)間，“Posttime”指的是兩次運(yùn)行之間流動(dòng)相的平衡時(shí)間，一般剃度洗脫需設(shè)置這一項(xiàng)。4.5.4檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定單擊【instrument】菜單，選擇【SetupInstrumentMethod］,在此窗口上方選擇“DAD”模塊,輸入檢測(cè)波長(zhǎng)和帶寬，一般帶寬設(shè)置為4nm，參比波長(zhǎng)視情況設(shè)定，一般不需要設(shè)定。4.5.5樣品信息設(shè)定單針進(jìn)樣：?jiǎn)螕簟綬uncontro1】菜單，選擇【Sampleinfo］,在彈出窗口“Path”處輸圖譜保存路徑；“subdirectory"處輸入文件夾；“prefix/counter”處輸入圖譜編號(hào)；“prefix”為前綴，輸入年月曰"counter，為計(jì)數(shù)，從“00001”開始；“Sampleparameters”下的“l(fā)ocation"處輸入進(jìn)樣瓶放置位置；“Samplename”處輸入樣品名稱。序列進(jìn)樣:單擊LSequence］菜單，選擇LSequenceparameters］，在彈出窗口“DataFile”下“Path”處輸入圖譜保存路徑，“subdirectory"處輸入文件夾，“prefix/counter”處輸入圖譜編號(hào)，“prefix”為前綴，輸入年月日，“counter”為計(jì)數(shù)，從“00001”開始。保存路徑設(shè)置好后，單擊ISequence］菜單，選擇ISequenceTable］，在“Vial”輸入進(jìn)樣瓶位置；"Samplename”輸入樣品名稱，“Methodname”輸入方法名稱，“inj/vial”輸入進(jìn)樣次數(shù)，【Cut］刪掉所選中行，點(diǎn)擊【OK］，退出當(dāng)前界面，待基線系統(tǒng)穩(wěn)定后，再點(diǎn)擊運(yùn)行界面上【Sequence］，儀器則開始按照當(dāng)前設(shè)置好的系列進(jìn)行樣品檢測(cè)。4.5.6方法保存主題Agilent1260高效液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號(hào)：SOP-04起草者：審核者：第1版第0次修訂批準(zhǔn)者：執(zhí)行日期：頁(yè)號(hào)：4OF4單擊【Method】菜單，選擇【SaveMethod］，即可保存當(dāng)前方法；選擇【SaveMethodas】，即可另存方法。4.6方法運(yùn)行單針進(jìn)樣：?jiǎn)螕簟綬uncontrol］菜單，選擇【RunMethod】。序列進(jìn)樣：?jiǎn)螕簟綬uncontrol］菜單，選擇【RunSequence］o4.7圖譜處理（不詳細(xì)說明）4.8關(guān)機(jī)4.8.1沖洗色譜柱做完試驗(yàn),及時(shí)用適當(dāng)溶劑沖洗柱子，特別是流動(dòng)相中含有緩沖鹽，一定要用足量的水沖洗徹底洗凈其中的鹽類，如先用甲醇或乙臘10%的水溶液沖洗不少于30分鐘，再用100%甲醇或乙臘沖洗沖洗系統(tǒng)約30分鐘，然后關(guān)泵,盡量保存在乙臘中（適用反相色譜柱）。4.8.2關(guān)閉計(jì)算機(jī)退出化學(xué)工作站，用shutdown關(guān)閉計(jì)算機(jī)。4.9維護(hù)保養(yǎng)4.9.1旋開【Purge】閥脫氣時(shí)，查看柱前壓力，