高三生物動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體-精講版課件

專題二

細(xì)胞工程2.2動(dòng)物細(xì)胞工程

授課人：孫艷俠2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)問題討論1、某植物非常具有觀賞價(jià)值，你采取什么方法來繁殖后代，使它們繼承該植物的全部優(yōu)良性狀？２、1997年，美國威斯康星州的一個(gè)奶牛場有一頭名叫盧辛達(dá)的奶牛，年產(chǎn)奶量為30.8t，創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)量的最高記錄。目前世界各國高產(chǎn)牛奶場的奶牛，平均每年產(chǎn)量為十幾噸，而我國平均水平僅有3－4噸。你能想辦法繁殖盧辛達(dá)的后代，使年產(chǎn)奶量為30.8t嗎？1、什么是克隆?2、以前學(xué)習(xí)過動(dòng)物克隆的實(shí)例嗎？3、請簡述多莉克隆的過程？多莉羊

動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆就是無性繁殖，具體的說，是指從一個(gè)共同的祖先，通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細(xì)胞或個(gè)體。卵細(xì)胞蘇格蘭黑面母羊芬蘭白面母羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植早期胚胎另一頭母綿羊子宮胚胎移植多莉羊多莉羊的培育過程重組細(xì)胞

動(dòng)物體細(xì)胞核移植和克隆技術(shù)閱讀與思考以概念圖的形式表示體細(xì)胞核移植過程？取供體細(xì)胞取卵母細(xì)胞

供體細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)到MⅡ中期

卵母細(xì)胞去核

供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞

供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞

重組胚胎

代孕母牛

生出與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體請同學(xué)們歸納動(dòng)物體細(xì)胞核移植概念:

將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物

核移植胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植（難度高）受體細(xì)胞：MⅡ期的卵母細(xì)胞思考題1、在進(jìn)行體細(xì)胞核移植之前，為何要去掉受體卵母細(xì)胞的核？卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性得以表達(dá)；卵母細(xì)胞體積比較大，容易操作；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富，能為早期胚胎的形成提供營養(yǎng)。2、為什么選卵母細(xì)胞作核移植的受體細(xì)胞？為使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞。3.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，為什么？10代以內(nèi)的細(xì)胞一般保持正常二倍體的核型，未突變.思考題核型：是指染色體組在有絲分裂中期的表型，是染色體數(shù)目、大小、形態(tài)特征的總和思考題4.細(xì)胞核移植生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？不是，克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自供體細(xì)胞核，但核外還有少部分DNA（如線粒體DNA）來自受體卵母細(xì)胞.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景1）改良動(dòng)物品種2）保護(hù)瀕危動(dòng)物3）克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白4）異種移植的供體，用于組織器官的移植5）深入了解胚胎發(fā)育及衰老過程6）追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：成功率非常低絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問題對(duì)克隆動(dòng)物食品的安全性問題也存在爭議雜種植株融合的原生質(zhì)體AB再生壁脫分化愈傷組織再分化植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)方法？促進(jìn)融合的方法？融合完成的標(biāo)志植物細(xì)胞B植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過程原理？原理？專題二

細(xì)胞工程2.2動(dòng)物細(xì)胞工程

授課人：孫艷俠2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體一、動(dòng)物細(xì)胞融合過程:不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂請同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物細(xì)胞融合過程原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性概念：

動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞的過程。一、動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)方式物理法化學(xué)法生物法：滅活的病毒滅活的仙臺(tái)病毒喪失感染性（不感染細(xì)胞）保留融合活性（誘導(dǎo)細(xì)胞融合）方法：一、動(dòng)物細(xì)胞融合

突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體意義應(yīng)用主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）、滅活的病毒物理（離心、振動(dòng)、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較1、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是（）

A．細(xì)胞系B．細(xì)胞株

C．原代細(xì)胞D．傳代細(xì)胞2、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是（）

A.動(dòng)物細(xì)胞融合B.單克隆抗體

C.胚胎移植D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

AD練習(xí)3、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞（）

A.容易產(chǎn)生各種變異B．具有更強(qiáng)的全能性C.取材十分方便D．分裂增殖的能力強(qiáng)D4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于（）A.培養(yǎng)基不同B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株A1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？２.一個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)能分泌多種抗體嗎？３.簡述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？４.這種方法獲得的抗體有什么缺陷？二、單克隆抗體思考

抗原刺激漿細(xì)胞

抗體特異性差、純度低；產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏傳統(tǒng)血清抗體的制備途徑：二、單克隆抗體動(dòng)物體傳統(tǒng)血清抗體的制備的缺陷：一個(gè)B淋巴細(xì)胞－－只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞－－能無限增殖雜種細(xì)胞二、單克隆抗體制備過程：二、單克隆抗體1.注射抗原的目的是什么？2.誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？3.融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞？4.怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn)？5.為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，多次篩選？6.大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單抗的方法?單：克?。嚎贵w：單個(gè)細(xì)胞無性繁殖化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)二、單克隆抗體單克隆抗體的概念：由一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過