授課免疫耐受

免疫耐受是指機(jī)體免疫系統(tǒng)接觸抗原后導(dǎo)致的特異性免疫無應(yīng)答性和低應(yīng)答性。不同于免疫缺陷和藥物對免疫系統(tǒng)的普遍抑制。免疫耐受的基本概念第一頁，共四十五頁。一、免疫耐受概述免疫耐受：是指免疫活性細(xì)胞接觸抗原時所表現(xiàn)的對該抗原的特異性免疫無應(yīng)答或低應(yīng)答狀態(tài)。即抗原不能有效激活T、B淋巴細(xì)胞，完成免疫應(yīng)答，產(chǎn)生免疫效應(yīng)。負(fù)免疫應(yīng)答抗原特異性、記憶性、可轉(zhuǎn)移性和非遺傳性固有免疫耐受和獲得性免疫耐受第二頁，共四十五頁。1、胚胎期及新生期接觸抗原所致免疫耐受

----天然免疫耐受現(xiàn)象

不成熟T、B接觸自身和外來Ag發(fā)生耐受，終生2、后天接觸抗原導(dǎo)致的免疫耐受

----獲得性免疫耐受現(xiàn)象

T、B因多種因素對原本應(yīng)答的Ag發(fā)生耐受，非終生免疫耐受的表現(xiàn)第三頁，共四十五頁。Owen的觀察1945年異卵雙生牛：血型嵌合體(chimeras)，皮片移植互不排斥，無關(guān)牛皮片排斥第四頁，共四十五頁。1945年Owen免疫耐受的研究簡史天然免疫耐受第五頁，共四十五頁。Medawar等的實驗證實---實驗性免疫耐受

1953年，Medawar：獲得性免疫耐受

第六頁，共四十五頁。Medawar胚胎誘導(dǎo)耐受實驗(1953年)人工免疫耐受第七頁，共四十五頁。Medawar的人工免疫耐受實驗第八頁，共四十五頁。免疫原耐受原免疫原耐受原免疫反應(yīng)+++4-6周4-6周7-14天7-14天免疫正應(yīng)答免疫負(fù)應(yīng)答第九頁，共四十五頁。免疫正應(yīng)答和免疫耐受的異同

免疫正應(yīng)答免疫耐受抗原刺激需要需要潛伏期有有抗原特異性++免疫記憶++免疫反應(yīng)強(qiáng)無或弱效應(yīng)排斥異己保護(hù)自身

第十頁，共四十五頁。自身耐受兩個技術(shù)問題一、不可能通過功能分析來鑒定自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞，因為自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞或被清除或是無反應(yīng)性；二、在正常動物和人類非常困難或不可能知道自身抗原的性質(zhì)、分布及表達(dá)水平，特別是那些和T細(xì)胞相關(guān)的MHC抗原肽。第十一頁，共四十五頁。

過去研究免疫耐受的方法將抗原或外來細(xì)胞植入動物體內(nèi)，觀察在不同情況下，T、B細(xì)胞的反應(yīng)情況。這些方法主要用于研究人工誘導(dǎo)的免疫耐受，但不完全適用于闡明自身免疫耐受現(xiàn)象。第十二頁，共四十五頁。

轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究自身耐受

將重排的抗原受體基因轉(zhuǎn)入小鼠，在小鼠的T、B淋巴細(xì)胞中表達(dá)，由于等位基因排斥的作用，轉(zhuǎn)入的抗原受體基因就會抑制內(nèi)源性基因的重組，從而在轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)就有很大一部分T、B淋巴細(xì)胞表達(dá)導(dǎo)入的由轉(zhuǎn)基因編碼的抗原受體，因此就可對那些已知特異性的淋巴細(xì)胞進(jìn)行檢測和定量分析。

轉(zhuǎn)基因技術(shù)的另一應(yīng)用是在不同組織中表達(dá)已知蛋白，這些轉(zhuǎn)基因編碼的抗原在動物一生中均存在，因而這些抗原對小鼠來說是有效的自身抗原。第十三頁，共四十五頁。二、免疫耐受形成和維持的因素

一、抗原方面1.抗原的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)耐受原：小分子、可溶性、單體免疫原：大分子、顆粒性、聚合體2.抗原劑量TI抗原：高劑量B細(xì)胞耐受TD抗原：高劑量T、B細(xì)胞耐受（高帶耐受）

低劑量T細(xì)胞耐受（低帶耐受）第十四頁，共四十五頁。T細(xì)胞耐受易于誘導(dǎo)，所需抗原量低，耐受持續(xù)時間長（數(shù)月~數(shù)年）B細(xì)胞耐受的誘導(dǎo)，需要較大劑量的抗原，B細(xì)胞耐受持續(xù)時間短（數(shù)周）T細(xì)胞耐受和B細(xì)胞耐受第十五頁，共四十五頁。第十六頁，共四十五頁。3.抗原免疫途徑靜脈注射/口服>腹腔注射>皮下/肌肉注射4.其他因素用佐劑：刺激輔助性T細(xì)胞，促進(jìn)引起免疫應(yīng)答無佐劑：無免疫原性或耐受原性，促進(jìn)引起免疫

耐受一、抗原方面第十七頁，共四十五頁。二、機(jī)體方面*免疫系統(tǒng)的成熟程度（年齡）胚胎期＞新生期＞成年期*動物的種屬和品系（遺傳）大鼠、小鼠＞兔、有蹄類、靈長類*機(jī)體生理狀態(tài)用免疫抑制劑破壞成熟淋巴細(xì)胞，造成類似新生期免疫不成熟狀態(tài)，有利于誘導(dǎo)免疫耐受。第十八頁，共四十五頁。*中樞免疫耐受

胚胎期免疫系統(tǒng)未成熟的T、B細(xì)胞在中樞

免疫器官接觸抗原所形成的免疫耐受。*外周免疫耐受

成熟的T、B細(xì)胞在外周淋巴器官接觸

抗原所形成的免疫耐受。三、免疫耐受的機(jī)制第十九頁，共四十五頁。T細(xì)胞免疫耐受（一）中樞耐受（二）外周耐受第二十頁，共四十五頁。免疫耐受機(jī)制的克隆清除學(xué)說（一）T細(xì)胞中樞免疫耐受第二十一頁，共四十五頁。（一）T細(xì)胞中樞免疫耐受第二十二頁，共四十五頁。（二）T細(xì)胞外周免疫耐受*自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞克隆清除*自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞克隆無能*自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞克隆忽視*自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞克隆抑制第二十三頁，共四十五頁。1、克隆清除

Clonaldeletion

Activation-inducedcelldeath(AICD)第二十四頁，共四十五頁。2、克隆無能Clonalanergy第二十五頁，共四十五頁。

T細(xì)胞無能反應(yīng)a.缺乏第二信號CD28-B7或信號弱b.增殖活化信號傳遞受阻c.抗原濃度低不能激活免疫細(xì)胞第二十六頁，共四十五頁。T細(xì)胞活化T細(xì)胞失能MHC-IIMHC-IITCRTCR共刺激信號APCAPCT細(xì)胞T細(xì)胞克隆失能的機(jī)制第二十七頁，共四十五頁。3、克隆忽視ClonalignoranceT細(xì)胞克隆的TCR對組織特異性自身抗原的親和力低,或這類自身抗原濃度很低,經(jīng)APC提呈,不足以活化相應(yīng)的初始T細(xì)胞,這種自身應(yīng)答T細(xì)胞克隆與相應(yīng)組織特異性抗原并存,在正常情況下,不引起自身免疫病的發(fā)生,稱為克隆忽視。

第二十八頁，共四十五頁。4、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的作用第二十九頁，共四十五頁。細(xì)胞因子在抑制細(xì)胞免疫應(yīng)答中的作用第三十頁，共四十五頁。B細(xì)胞免疫耐受（一）中樞耐受（二）外周耐受第三十一頁，共四十五頁。（一）中樞免疫耐受1、克隆清除機(jī)制（陰性選擇）自身反應(yīng)性B細(xì)胞在骨髓發(fā)育過程中，其BCR與微環(huán)境基質(zhì)細(xì)胞表面表達(dá)的多價自身抗原結(jié)合，使SmIg發(fā)生交聯(lián)，導(dǎo)致未成熟B細(xì)胞凋亡。第三十二頁，共四十五頁。2、克隆無能骨髓中未成熟Ｂ細(xì)胞之BCR與可溶性自身抗原的親和力低，不足以引起克隆清除，而轉(zhuǎn)變?yōu)椤盁o能”Ｂ細(xì)胞，不表達(dá)SmIgM，雖能表達(dá)正常水平SmIgD，但由于存在信號傳導(dǎo)障礙，也不能誘導(dǎo)B細(xì)胞激活。第三十三頁，共四十五頁。第三十四頁，共四十五頁。（二）外周免疫耐受1、未進(jìn)入淋巴濾泡而凋亡2、缺少刺激信號而凋亡3、AICD致B細(xì)胞凋亡4、成熟B細(xì)胞處于無能狀態(tài)第三十五頁，共四十五頁。1、未進(jìn)入淋巴濾泡而凋亡Cyster等提出B細(xì)胞競爭進(jìn)入淋巴濾泡的概念：只有進(jìn)入淋巴濾泡的B細(xì)胞才能繼續(xù)分化成抗體生成細(xì)胞和記憶性細(xì)胞。當(dāng)B細(xì)胞在外周淋巴器官與自身抗原相遇時，失去進(jìn)入淋巴濾泡的能力，而不能產(chǎn)生針對自身抗原的抗體。未進(jìn)入的B細(xì)胞只能在胸腺依賴區(qū)停留1-3天，然后死亡。第三十六頁，共四十五頁。2、缺少刺激信號而凋亡無能B細(xì)胞在缺少細(xì)胞因子

（如IL-2、IL-4）或CD4+T細(xì)胞

提供的CD40L協(xié)同刺激信號時，

則發(fā)生凋亡。第三十七頁，共四十五頁。3、AICD致B細(xì)胞凋亡活化的CD4+T細(xì)胞能表達(dá)FasL，

與B細(xì)胞上的Fas分子結(jié)合，

啟動了B細(xì)胞凋亡信號第三十八頁，共四十五頁。4、成熟B細(xì)胞處于無能狀態(tài)成熟B細(xì)胞與大量可溶性自身抗原

接觸后，可導(dǎo)致SmIgM表達(dá)的下調(diào)，

成為“無能”B細(xì)胞?！盁o能”B細(xì)胞對抗原－抗原受體

信號的傳遞能力顯著下降。第三十九頁，共四十五頁。T細(xì)胞耐受與B細(xì)胞耐受的區(qū)別T細(xì)胞耐受B細(xì)胞耐受誘導(dǎo)耐受的

胸腺；外周骨髓；外周主要部位對耐受敏感

CD4+CD8+雙陽性胸腺細(xì)胞未成熟B細(xì)胞（IgM+

IgD-）的成熟階段耐受誘導(dǎo)中樞：在胸腺對抗原的高親和力識別中樞：在骨髓對多價抗原的高親和力識別刺激外周：APC提呈抗原缺乏共刺激分子外周：抗原識別時缺乏T細(xì)胞輔助自身抗原反復(fù)刺激耐受的主要機(jī)制中樞耐受：克隆清除（凋亡）中樞耐受：克隆清除（凋亡），克隆無能外周耐受：克隆無能，AICD，抑制外周耐受：克隆無能，未進(jìn)入淋巴濾泡第四十頁，共四十五頁。*誘導(dǎo)口服耐受*阻斷免疫應(yīng)答誘導(dǎo)免疫耐受*移植骨髓及胸腺,建立或恢復(fù)免疫耐受免疫耐受與臨床醫(yī)學(xué)(一)建立免疫耐受第四十一頁，共四十五頁。第四十二頁，共四十五頁。*誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞*耐受性DC*基因改造第四十三頁，共四十五頁。*主動免疫激發(fā)和增強(qiáng)免疫應(yīng)答*細(xì)胞因子的合理使用(二)打破免疫耐受第四