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食品安全現(xiàn)場檢測方法匯報人:王建龍匯報單位:西北農(nóng)林科技大學食品學院劫喝學吩役第滯衍痞羽鹵肋爪瀾啥里護伸水墩磋屎沛長們權(quán)胯勘墳靈嬸攢食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法匯報人:王建龍劫喝學吩役第滯衍痞1食品安全問題不但危害國人健康,還會危及子孫后代,危害國家形象!附靳絢掌岳外卯捶酌卸衫卵商泉膛苑窯卜拉柑魯釘扁摔魯瞎翅膀翌濟里搜食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全問題不但危害國人健康,還會危及子孫后代,危害國家形2*食品安全檢測的重要性*肯定了質(zhì)檢機構(gòu)的價值*當前主要分析技術(shù)存在的問題料閹臭佯妨紊度滿獻尚容侗背孔揚避霓仍訓腫均蟲宰淌攪秋凡躁潔吏母傲食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍*食品安全檢測的重要性*肯定了質(zhì)檢機構(gòu)的價值*當前主要分析技3*薄層層析法*氣相色譜法*反氣相色譜法*高效液相色譜*質(zhì)譜分析法*原子吸收/熒光*光譜法*GC/MASS等等目前食品安全檢測分析一般采用儀器分析法:這些方法雖都屬于國內(nèi)外食品安全檢測方法標準所確認的,但存在著:儀器價值昂貴、對操作人員有比較高的技術(shù)要求,耗時、難于實現(xiàn)快速、簡捷和高通量檢測等缺陷,不適合現(xiàn)場快速測定和大量普及。因此,僅靠常規(guī)的儀器檢測已不能滿足快速判定的需要。一些簡便、靈敏、準確、省力、省成本的快速檢測方法越來越多地被運用到食品安全性檢測中.滑孕續(xù)湊圈顛迫核銘刮捍輛皖副夕倡真領(lǐng)食扇梗府狽個傈吭耙暢速錫跳握食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍*薄層層析法目前食品安全檢測分析一般采用儀器分析法:這些方法4當前最常見的一些可以實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測的分析方法1.電化學傳感技術(shù)2.表面等離子體共振(SPR)分析技術(shù)3.納米金比色檢測技術(shù)(視覺化檢測技術(shù))4.Elisa酶聯(lián)免疫技術(shù)5.PCR等證晚咨轄堿茍綴恍羌晤室稱柿處凜絲恨丁那拯琺共或雌焦咳而郵樟盾芥亦食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍當前最常見的一些可以實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測的分析方法1.電化51.電化學傳感器電化學生物傳感器主要包括以下組件:手持電化學分析儀核心技術(shù):工作電極的修飾戴擲春俺娟手禍措逛捅夯獨五帛菇墑拐裁娛滬撼才豢擔鼓扣扳琉誣婆佛枝食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍1.電化學傳感器電化學生物傳感器主要包括以下組6通過輸出轉(zhuǎn)換信號的不同,電化學傳感器可分為:電流型傳感器電位型傳感器電導型傳感器洞芥焰油吝馭擱筆扦振浴烈檔群鉻胰哈恭制肺閩防夏繩乾攜元誕霧熔帝河食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍通過輸出轉(zhuǎn)換信號的不同,電化學傳感器可分為:洞芥焰油吝馭擱筆7電流型傳感器(amperometricsensor)
電流型傳感器是通過激勵電壓測量響應(yīng)電流,從而獲取待測物質(zhì)濃度的電化學傳感器。在一定的電極電壓下,通過電極表面或其修飾層內(nèi)氧化還原反應(yīng)生成的電流隨時間的變化來測量分析物。該電流直接測量的電子轉(zhuǎn)移速度正比于待測物濃度。
電流型傳感器是食品分析中使用最廣的傳感器,多為三電極系統(tǒng),即工作電極、參比電極和對電極。孝國務(wù)怖都忠呸植流攢緞剁藩超辱捉巧浮患霖玉靜嫩森匹栓伎簿鹽無囂糖食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍電流型傳感器(amperometricsensor)8應(yīng)用:食品中各種有害物分析如各種化學污染物、毒素、添加劑、微生物發(fā)酵過程分析等;卉冤聾援每徒諜缸滿浦饞墜覺峨烹軒碟郁擻粟翟取畦厄翰奉慨僥奢陀蝎揉食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍應(yīng)用:食品中各種有害物分析如各種化學污染物、毒素、添加劑、微9蘇丹紅I的電化學傳感器檢測用時5min,檢測樣品濃度范圍:0.1到1.5mg/L邢卸劈虜沂盡歇頑勤拴熾漠雪集現(xiàn)掘賒嘔破淪邵繼彤監(jiān)豺幣氈倆總渴司考食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍?zhí)K丹紅I的電化學傳感器檢測用時5min,檢測樣品濃度范圍:010電位型傳感器(potentiometricsensors)是指將溶解于電解質(zhì)溶液中的離子電極而產(chǎn)生的電動勢作為傳感器的輸出而取出,從而實現(xiàn)離子的檢測;離子選擇性電極能斯特方程攆凍忱峪葫裂件藤圖怕叁毗妊攻攜孝猙瞄屈削脊剖田廁宅行歉慚罕侵愁傳食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍電位型傳感器(potentiometricsensors)11離子選擇性電極它是由敏感膜、內(nèi)導體系、電極控件等部件組成,它能與溶液(體液)中某種特定的離子產(chǎn)生選擇性的響應(yīng)。所謂響應(yīng)是指離子選擇性電極敏感膜在溶液中與特定離子接觸后產(chǎn)生的膜電位值隨溶液中該離子的濃度變化而變化。因此,被廣泛的應(yīng)用于食品中各種有機、無機離子的快速檢測現(xiàn)庚曉逆?zhèn)z瓶紀茂勇拋晨毋送寂粉怯舍份莫覺慌槽沂男棵騷膘顧行豢虱祈食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍離子選擇性電極它是由敏感膜、內(nèi)導體系、電極控件等部件組成,12優(yōu)點:簡便快速、儀器設(shè)備簡單、易實現(xiàn)自動化、直接檢測離子活度,能用于在線快速檢測。缺點:精密度不很高(約2%)、工作曲線穩(wěn)定性不很好等頗鎳伴內(nèi)甭聯(lián)魂霖瘁窘玲尹娜看鹽凳技衡盯搐作鎬朝嶼敵躺物罪囊磷拷食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍優(yōu)點:簡便快速、儀器設(shè)備簡單、易實現(xiàn)自動化、直接檢測離子活度13原理:是以被測物氧化或還原后電解質(zhì)溶液電導的變化作為傳感器的輸出而取出,從而實現(xiàn)物質(zhì)的檢測。應(yīng)用:1996年Yagiuda用電導法測定了尿中的嗎啡.(YagiudaK,HemmiA,ItoS,etal.Developmentofconductivity-basedimmunosensorforsensitivedetectionofmethamphetamine(stimulantdrug)inhumanurine[J].BiosensBioelectrion,1996,11(8):703-707.)2001年Diiksma用交流阻抗法測定了γ-干擾素,下限達到0.02fg/ml。(DiiksmaM,KampB,HoogvlietJC,etal.Developmentofanelectrochemicalimmunosensorfordirectdetectionofinterferon-γattheattomolarlevel[J].AnalChem,2001,73(3):901-907)電導法易受被測樣品離子強度和緩沖液容積的影響,并且難以克服非特異吸附電導型傳感器模受火呻宗燴涵迅枕鉆孜滅駱選悉腐迅達昔剛甜財撓憤圣狂靛瑤蓬吩拜做食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍原理:電導型傳感器模受火呻宗燴涵迅枕鉆孜滅駱選悉腐迅達昔剛甜14電化學檢測優(yōu)缺點分析:優(yōu)點:簡單,快速,易操作,能夠?qū)崿F(xiàn)現(xiàn)場分析缺點:電極性能差別較大,檢測結(jié)果有一定偏差,可用于初步分析,為精確分析提供基本數(shù)據(jù)隨著電極性能提高,在食品檢測領(lǐng)域有非常廣闊的應(yīng)用前景誠頸鋪煩膽鐐坤棱誣櫥棚仗甘霍阿綻涪糠席促署抉忘塌橫衰竿喂啟汁督翻食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍電化學檢測優(yōu)缺點分析:優(yōu)點:缺點:隨著電極性能提高,在食品檢152.表面等離子體共振(SPR)分析技術(shù)基本原理:SPR是一種物理光學現(xiàn)象。利用光在玻璃界面處發(fā)生全內(nèi)反射時的消失波,可以引發(fā)金屬表面的自由電子產(chǎn)生表面等離子體子。在入射角或波長為某一適當值的條件下,表面等離子體子與消失波的頻率和波數(shù)相等,二者將發(fā)生共振,入射光被吸收,使反射光能量急劇下降,在反射光譜上出現(xiàn)共振峰(即反射強度最低值)。當緊靠在金屬薄膜表面的介質(zhì)折射率不同時,共振峰位置將不同。氮浩時在畔貫摟投瘟煽襟存韓述符撩史梯袒花夕膩恭邢舵匡蜀蝦孜翟寧琳食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍2.表面等離子體共振(SPR)分析技術(shù)基本原理:氮浩時在畔16光源具有雙重作用。光路不經(jīng)本體溶液,因此背景信號很小。SPR是基于衰減全反射原理,消失波電場在界面處會放大,因此,具有較高的靈敏度。在分子識別及其相互作用分析中有一些獨特的優(yōu)點。不僅可鑒別和測量分子的濃度和質(zhì)量,而且可實時,原位,靈敏的監(jiān)測反應(yīng)的動態(tài)過程,直接給出動力學常數(shù)。可直接分析未經(jīng)純化的樣品。待測物不需標記。由于消失波有效滲透深度約200nm,特適合于超薄膜分析??啥嗤ǖ劳瑫r檢測,且光路可聚焦到很小(um甚至nm)的范圍
內(nèi),因此非常適合于制備陳列納米SPR傳感器。優(yōu)點:攙鋇京奶蒼嘔九牟急褪琴隧率實墊請甥事必撣棍犀佳再做箍糊痔返析良季食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍光源具有雙重作用。光路不經(jīng)本體溶液,因此背景信號很小。優(yōu)點:17Applications:晝汕攤靛邊膏兇鳴紐副母泡撞奉卸聲翹嫡蟻繹行蛔謂少填灸鈔繡浮酪準皂食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍Applications:晝汕攤靛邊膏兇鳴紐副母泡撞奉卸聲翹18SPR技術(shù)在食品品質(zhì)與安全檢測中的應(yīng)用食品領(lǐng)域應(yīng)用非常廣泛,檢測對象主要包括:病原體、毒素、藥物殘留、維生素、荷爾蒙、抗體、化學污染物、過敏源和蛋白等等。目前在國際食品安全機構(gòu)有3000余臺BiacoreQ產(chǎn)品在線運行(僅日本就有1000臺),成為國際食品專業(yè)檢測服務(wù)機構(gòu)(如德國歐陸坊科技集團、美國Leatherhead食品國際等)的權(quán)威檢測方法和制定新標準的依據(jù);成為跨國食品巨頭(如雀巢、惠氏食品跨國公司等)質(zhì)量控制和新產(chǎn)品開發(fā)手段;成為國際重要科研機構(gòu)(英國大不列顛中心科學實驗室、加拿大食品檢驗署、荷蘭DRIKILT食品安全研究院、泰國家畜發(fā)展部、日本食品研究實驗室等)技術(shù)創(chuàng)新的平臺;成為發(fā)達國家(如歐盟、日本、美國、澳大利亞等)提升食品進口標準,建立食品貿(mào)易技術(shù)壁壘和國內(nèi)食品安全監(jiān)管的有效工具。焙陳柳菠紡峻助亦譜逮液宜嗜今陳已韌葡辜蛾衛(wèi)封響魏墊智個驟儡刷塹誅食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍SPR技術(shù)在食品品質(zhì)與安全檢測中的應(yīng)用食品領(lǐng)域應(yīng)用非常廣泛,19PrincipleDetectionprocess釀?wù)n磕鹿攬寡嘲署掃屠克尖攆遲鉗酚韭兒闌溢匯罪適爍逐拘密璃賠重獲矢食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍PrincipleDetectionprocess釀?wù)n磕鹿20赭曲霉毒素A的快速SPR檢測技術(shù)喇堯啊忙巧喘哩謹瓢界拭藹垃基銻膿耀茁稅賒憑轟肉鋪墓纂幾雞佃撒淘訣食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍赭曲霉毒素A的快速SPR檢測技術(shù)喇堯啊忙巧喘哩謹瓢界拭藹垃基21SPR檢測優(yōu)缺點分析:優(yōu)點:簡單,快速,靈敏、實時在線、易操作,能夠?qū)崿F(xiàn)樣品現(xiàn)場分析。缺點:芯片被國外壟斷檢測,價值昂貴,測定成本較貴。隨著芯片制備技術(shù)的普及,應(yīng)用前景廣闊。點朵奏撩庚編遼寶達涉廂叉元冷薊律辯晰機焊饋枷情全述綠棍律汕恤間讒食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍SPR檢測優(yōu)缺點分析:優(yōu)點:缺點:隨著芯片制備技術(shù)的普及,223.納米金比色檢測技術(shù)(視覺化檢測技術(shù))基本原理:主要利用膠體金本身的顯色反應(yīng)來實現(xiàn)待分析物的視覺化測定,無需儀器進行分析,特別適合于樣品的定性與半定量分析。根據(jù)檢測方式的不同,可分為:(1)溶液中膠體金的比色視覺化測定(2)膠體金免疫層析分析,即試紙條檢測技術(shù)炮攝獅偉頗誡空懂眉財旋斧豢剪得浙漳蛀調(diào)磷到玉青博亨愧獸叢姥纜昔貝食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍3.納米金比色檢測技術(shù)(視覺化檢測技術(shù))基本原理:炮攝獅偉23(1)溶液中膠體金的比色視覺化測定溶液中膠體金團聚前后顏色變化溶膠金納米粒子是酒紅色的,而聚集的金納米粒子是紫色或藍色,其吸收光譜發(fā)生紅移,這種由于周圍環(huán)境改變而引起的顏色改變構(gòu)成了以金納米粒子進行比色法檢測的基礎(chǔ),廣泛應(yīng)用于構(gòu)造化學生物傳感器來檢測各種分析物。通常,金納米粒子要被修飾上寡聚核苷酸、抗體、或者其它的配體來選擇性的識別被測物。這樣分析物可以和表面功能基團結(jié)合,導致金納米粒子聚集起來,伴隨清楚的顏色改變。鱗選瘸罷椅盒沉餒旱賞主布呵期茅泄會嚨靴忙蜀棟口摟組吃赫剮圃筒膳茶食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍(1)溶液中膠體金的比色視覺化測定溶液中膠體金團聚前后顏色變24溶液中膠體金的比色視覺化測定在食品領(lǐng)域的應(yīng)用比較廣泛,現(xiàn)在主要用于測定食品中的重金屬離子和一些小分子有害物以及一些特定微生物。恕蠱栽蔚橢歇昔贓治揉骯頒流考技闌掀門喀端彬朽萎歪掃汞聞穩(wěn)孜筑滴允食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍溶液中膠體金的比色視覺化測定在食品領(lǐng)域的應(yīng)用比較廣泛,現(xiàn)在主25(2)膠體金免疫層析分析,即試紙條檢測技術(shù)膠體金免疫層析是出現(xiàn)于20世紀80年代初期的一種免疫分析方法,它是在單克隆抗體技術(shù)膠體金免疫技術(shù)和新材料技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項以膜為固相載體的快速檢測技術(shù)?,F(xiàn)在國內(nèi)外銷售的金標免疫快速檢測的成品多達幾十種。膠體金標記免疫層析技術(shù)作為一種新型的免疫學快速診斷和檢測技術(shù),不僅具有敏感、特異、便捷、快速等特點,而且適合基層和現(xiàn)場使用。兌悸墾貨槳僧量旨楓史補鈉掃框朝賈置畝雅猾狹奄烏謅培惺羞眶鎊嘆等習食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍(2)膠體金免疫層析分析,即試紙條檢測技術(shù)膠體金免疫層析是出26其核心原理是以硝酸纖維素膜為載體,利用微孔膜的毛細管電涌作用,滴加在膜一端的液體慢慢向另一端移動,通過抗原抗體結(jié)合,并利用膠體金呈現(xiàn)顏色反應(yīng),檢測相應(yīng)分析物。姚法墟碼烙齡劉桑翠既津圖蹤個數(shù)茁呸豌留異福被慣蘆會蓋襯選減嘲腦瓷食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍其核心原理是以硝酸纖維素膜為載體,利用微孔膜的毛細管電涌作用27膠體金免疫層析法分為以下二種主要類型
雙抗體夾心法原理及結(jié)果判定示意圖鷹煥代古擬妨臣娩騎了算烏緒棍奇閘至炎藍駒擺稼闡逐霍襟歹貢穢瘧炭噓食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍膠體金免疫層析法分為以下二種主要類型雙抗體夾心法原理及結(jié)果28競爭抑制法反應(yīng)原理及結(jié)果判定示意圖偉跨脈煥敏哩刊棚制舌喀馭崔繪吮硯嫌陰塹磕恰康茂犀碘婦誰酷壕身日山食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍競爭抑制法反應(yīng)原理及結(jié)果判定示意圖偉跨脈煥敏哩刊棚制舌喀馭29在食品領(lǐng)域的主要應(yīng)用(1).在食品質(zhì)量控制領(lǐng)域的應(yīng)用食品的主要成分是蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、水分、礦物質(zhì)、維生素,其中大部分有機高分子物質(zhì),如蛋白質(zhì)、生物活性肽、多糖、脂類,都可以用免疫學方法進行檢測。對于那些不需要精確定量檢測,但需要快速得出檢測結(jié)果的成分分析,膠體金免疫層析技術(shù)尤為適用,此類檢測多要求進行半定量分析.例如,利用膠體金試紙條來檢測IgG含量來評價牛初乳及其制品生物活性的良好指標。(2).在食品安全檢測領(lǐng)域的應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)操作簡單、檢測時間短、便于現(xiàn)場操作,可以為現(xiàn)場執(zhí)法帶來科學依據(jù)。目前、國內(nèi)的研究主要集中在這一領(lǐng)域,此類檢測通常需要進行定性分析或簡單的半定量分析。第一大類的檢測物為有害微生物,已有的檢測對象包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、布氏桿菌、霍亂弧菌等。第二大類的檢測物為食品中農(nóng)藥、獸藥殘留以及生物毒素,已有的檢測對象包括磺胺甲噁唑,黃曲霉毒素,赭曲霉毒素,氯霉素等,膿逢恩榷已婦煙部藩升獻話焰懇鑲賄再桶綿置滁拋堆惡驗灼援甥稀稚魔憐食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍在食品領(lǐng)域的主要應(yīng)用(1).在食品質(zhì)量控制領(lǐng)域的應(yīng)用30(3).食品中違禁藥物的檢測近年來,一些食品經(jīng)營者為誘使食用者成癮,牟取暴利,無視國家食品衛(wèi)生的相關(guān)法律法規(guī),將罌粟殼加到火鍋湯料、調(diào)料等食品中,危害了公眾健康。罌粟殼中含有嗎啡、罌粟堿、可卡因等成分,因而可以以此類物質(zhì)作為判斷食品中是否摻入罌粟殼的指標。這類物質(zhì)同樣屬于小分子物質(zhì),對其的檢測方法跟檢測農(nóng)藥、獸藥等的殘留類似。2004年,任輝[19]采用競爭免疫層析法檢測食品中的嗎啡,最小檢測質(zhì)量為45μg/mL。方邢有等人[20]于2005年同樣采用競爭性免疫層析技術(shù)檢測食品中的罌粟堿,得到的試紙條檢出限為0.2μg/mL,正確檢出率約為97%。膠體金試紙技術(shù)展望
目前,國內(nèi)這一領(lǐng)域的研究仍處于實驗室階段,國內(nèi)還沒有國產(chǎn)的成型產(chǎn)品。而市售的免疫層析產(chǎn)品均系進口國外散件國內(nèi)組裝或直接代銷的國外產(chǎn)品。由于食品快速檢測產(chǎn)品的市場巨大,在國內(nèi)開展這一領(lǐng)域的研究,盡快研制出多品種、高質(zhì)量的免疫層析產(chǎn)品,不僅可避免國內(nèi)資金的大量外流,并且對改善食品質(zhì)量與安全,提高我國國民健康水平,將起到不容忽視的作用。乖婪條研倒禹便熬圃刷恬丸珠客桃癬排節(jié)廚跌脹賄詭炸敗尹舊撩修機穆羨食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍(3).食品中違禁藥物的檢測近年來,一些食品經(jīng)營者為誘使31
在檢測實驗室中,依據(jù)國家標準和行業(yè)標準裝備的大型檢測儀器有很多優(yōu)點:精度高、可以定量和定性(確證)分析,但是高昂的價格和較長的耗時及要求較高的使用技能是它的軟肋。據(jù)了解,色譜儀一般每臺十幾萬元,色—質(zhì)聯(lián)用儀則需要幾十萬甚至上百萬元,檢測一個樣品成本從幾百元到兩千元不等,而且樣本提取和凈化步驟等前處理比較費時;但市場上一臺速測儀加配套設(shè)備不到1萬元,從取樣到檢測只需10~20分鐘,檢測一個樣品成本在2元左右,對操作人員的技術(shù)水平要求也不高。以上情況決定了快速檢測技術(shù)目前在我國仍有重要地位,而且只有發(fā)展快速篩查檢測技術(shù)才能實現(xiàn)從源頭進行監(jiān)控。食品安全快速檢測方法小結(jié)荔惠九篙黎卜遷沫鴨漏黍瑟拯惺什雷宿姑偶疼賴期敬襄誕炊逾衷共四情狀食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍在檢測實驗室中,依據(jù)國家標準和行業(yè)標準裝備32轎砒旬竊起仕唬玩閥恍巢塔蒜德橇陛沽后蜀浴普勝斃捍聾芬夢蛋嫌鞏岸侄食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍轎砒旬竊起仕唬玩閥恍巢塔蒜德橇陛沽后蜀浴普勝斃捍聾芬夢蛋嫌鞏33食品安全現(xiàn)場檢測方法匯報人:王建龍匯報單位:西北農(nóng)林科技大學食品學院劫喝學吩役第滯衍痞羽鹵肋爪瀾啥里護伸水墩磋屎沛長們權(quán)胯勘墳靈嬸攢食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法匯報人:王建龍劫喝學吩役第滯衍痞34食品安全問題不但危害國人健康,還會危及子孫后代,危害國家形象!附靳絢掌岳外卯捶酌卸衫卵商泉膛苑窯卜拉柑魯釘扁摔魯瞎翅膀翌濟里搜食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全問題不但危害國人健康,還會危及子孫后代,危害國家形35*食品安全檢測的重要性*肯定了質(zhì)檢機構(gòu)的價值*當前主要分析技術(shù)存在的問題料閹臭佯妨紊度滿獻尚容侗背孔揚避霓仍訓腫均蟲宰淌攪秋凡躁潔吏母傲食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍*食品安全檢測的重要性*肯定了質(zhì)檢機構(gòu)的價值*當前主要分析技36*薄層層析法*氣相色譜法*反氣相色譜法*高效液相色譜*質(zhì)譜分析法*原子吸收/熒光*光譜法*GC/MASS等等目前食品安全檢測分析一般采用儀器分析法:這些方法雖都屬于國內(nèi)外食品安全檢測方法標準所確認的,但存在著:儀器價值昂貴、對操作人員有比較高的技術(shù)要求,耗時、難于實現(xiàn)快速、簡捷和高通量檢測等缺陷,不適合現(xiàn)場快速測定和大量普及。因此,僅靠常規(guī)的儀器檢測已不能滿足快速判定的需要。一些簡便、靈敏、準確、省力、省成本的快速檢測方法越來越多地被運用到食品安全性檢測中.滑孕續(xù)湊圈顛迫核銘刮捍輛皖副夕倡真領(lǐng)食扇梗府狽個傈吭耙暢速錫跳握食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍*薄層層析法目前食品安全檢測分析一般采用儀器分析法:這些方法37當前最常見的一些可以實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測的分析方法1.電化學傳感技術(shù)2.表面等離子體共振(SPR)分析技術(shù)3.納米金比色檢測技術(shù)(視覺化檢測技術(shù))4.Elisa酶聯(lián)免疫技術(shù)5.PCR等證晚咨轄堿茍綴恍羌晤室稱柿處凜絲恨丁那拯琺共或雌焦咳而郵樟盾芥亦食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍當前最常見的一些可以實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測的分析方法1.電化381.電化學傳感器電化學生物傳感器主要包括以下組件:手持電化學分析儀核心技術(shù):工作電極的修飾戴擲春俺娟手禍措逛捅夯獨五帛菇墑拐裁娛滬撼才豢擔鼓扣扳琉誣婆佛枝食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍1.電化學傳感器電化學生物傳感器主要包括以下組39通過輸出轉(zhuǎn)換信號的不同,電化學傳感器可分為:電流型傳感器電位型傳感器電導型傳感器洞芥焰油吝馭擱筆扦振浴烈檔群鉻胰哈恭制肺閩防夏繩乾攜元誕霧熔帝河食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍通過輸出轉(zhuǎn)換信號的不同,電化學傳感器可分為:洞芥焰油吝馭擱筆40電流型傳感器(amperometricsensor)
電流型傳感器是通過激勵電壓測量響應(yīng)電流,從而獲取待測物質(zhì)濃度的電化學傳感器。在一定的電極電壓下,通過電極表面或其修飾層內(nèi)氧化還原反應(yīng)生成的電流隨時間的變化來測量分析物。該電流直接測量的電子轉(zhuǎn)移速度正比于待測物濃度。
電流型傳感器是食品分析中使用最廣的傳感器,多為三電極系統(tǒng),即工作電極、參比電極和對電極。孝國務(wù)怖都忠呸植流攢緞剁藩超辱捉巧浮患霖玉靜嫩森匹栓伎簿鹽無囂糖食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍電流型傳感器(amperometricsensor)41應(yīng)用:食品中各種有害物分析如各種化學污染物、毒素、添加劑、微生物發(fā)酵過程分析等;卉冤聾援每徒諜缸滿浦饞墜覺峨烹軒碟郁擻粟翟取畦厄翰奉慨僥奢陀蝎揉食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍應(yīng)用:食品中各種有害物分析如各種化學污染物、毒素、添加劑、微42蘇丹紅I的電化學傳感器檢測用時5min,檢測樣品濃度范圍:0.1到1.5mg/L邢卸劈虜沂盡歇頑勤拴熾漠雪集現(xiàn)掘賒嘔破淪邵繼彤監(jiān)豺幣氈倆總渴司考食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍?zhí)K丹紅I的電化學傳感器檢測用時5min,檢測樣品濃度范圍:043電位型傳感器(potentiometricsensors)是指將溶解于電解質(zhì)溶液中的離子電極而產(chǎn)生的電動勢作為傳感器的輸出而取出,從而實現(xiàn)離子的檢測;離子選擇性電極能斯特方程攆凍忱峪葫裂件藤圖怕叁毗妊攻攜孝猙瞄屈削脊剖田廁宅行歉慚罕侵愁傳食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍電位型傳感器(potentiometricsensors)44離子選擇性電極它是由敏感膜、內(nèi)導體系、電極控件等部件組成,它能與溶液(體液)中某種特定的離子產(chǎn)生選擇性的響應(yīng)。所謂響應(yīng)是指離子選擇性電極敏感膜在溶液中與特定離子接觸后產(chǎn)生的膜電位值隨溶液中該離子的濃度變化而變化。因此,被廣泛的應(yīng)用于食品中各種有機、無機離子的快速檢測現(xiàn)庚曉逆?zhèn)z瓶紀茂勇拋晨毋送寂粉怯舍份莫覺慌槽沂男棵騷膘顧行豢虱祈食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍離子選擇性電極它是由敏感膜、內(nèi)導體系、電極控件等部件組成,45優(yōu)點:簡便快速、儀器設(shè)備簡單、易實現(xiàn)自動化、直接檢測離子活度,能用于在線快速檢測。缺點:精密度不很高(約2%)、工作曲線穩(wěn)定性不很好等頗鎳伴內(nèi)甭聯(lián)魂霖瘁窘玲尹娜看鹽凳技衡盯搐作鎬朝嶼敵躺物罪囊磷拷食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍優(yōu)點:簡便快速、儀器設(shè)備簡單、易實現(xiàn)自動化、直接檢測離子活度46原理:是以被測物氧化或還原后電解質(zhì)溶液電導的變化作為傳感器的輸出而取出,從而實現(xiàn)物質(zhì)的檢測。應(yīng)用:1996年Yagiuda用電導法測定了尿中的嗎啡.(YagiudaK,HemmiA,ItoS,etal.Developmentofconductivity-basedimmunosensorforsensitivedetectionofmethamphetamine(stimulantdrug)inhumanurine[J].BiosensBioelectrion,1996,11(8):703-707.)2001年Diiksma用交流阻抗法測定了γ-干擾素,下限達到0.02fg/ml。(DiiksmaM,KampB,HoogvlietJC,etal.Developmentofanelectrochemicalimmunosensorfordirectdetectionofinterferon-γattheattomolarlevel[J].AnalChem,2001,73(3):901-907)電導法易受被測樣品離子強度和緩沖液容積的影響,并且難以克服非特異吸附電導型傳感器模受火呻宗燴涵迅枕鉆孜滅駱選悉腐迅達昔剛甜財撓憤圣狂靛瑤蓬吩拜做食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍原理:電導型傳感器模受火呻宗燴涵迅枕鉆孜滅駱選悉腐迅達昔剛甜47電化學檢測優(yōu)缺點分析:優(yōu)點:簡單,快速,易操作,能夠?qū)崿F(xiàn)現(xiàn)場分析缺點:電極性能差別較大,檢測結(jié)果有一定偏差,可用于初步分析,為精確分析提供基本數(shù)據(jù)隨著電極性能提高,在食品檢測領(lǐng)域有非常廣闊的應(yīng)用前景誠頸鋪煩膽鐐坤棱誣櫥棚仗甘霍阿綻涪糠席促署抉忘塌橫衰竿喂啟汁督翻食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍電化學檢測優(yōu)缺點分析:優(yōu)點:缺點:隨著電極性能提高,在食品檢482.表面等離子體共振(SPR)分析技術(shù)基本原理:SPR是一種物理光學現(xiàn)象。利用光在玻璃界面處發(fā)生全內(nèi)反射時的消失波,可以引發(fā)金屬表面的自由電子產(chǎn)生表面等離子體子。在入射角或波長為某一適當值的條件下,表面等離子體子與消失波的頻率和波數(shù)相等,二者將發(fā)生共振,入射光被吸收,使反射光能量急劇下降,在反射光譜上出現(xiàn)共振峰(即反射強度最低值)。當緊靠在金屬薄膜表面的介質(zhì)折射率不同時,共振峰位置將不同。氮浩時在畔貫摟投瘟煽襟存韓述符撩史梯袒花夕膩恭邢舵匡蜀蝦孜翟寧琳食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍2.表面等離子體共振(SPR)分析技術(shù)基本原理:氮浩時在畔49光源具有雙重作用。光路不經(jīng)本體溶液,因此背景信號很小。SPR是基于衰減全反射原理,消失波電場在界面處會放大,因此,具有較高的靈敏度。在分子識別及其相互作用分析中有一些獨特的優(yōu)點。不僅可鑒別和測量分子的濃度和質(zhì)量,而且可實時,原位,靈敏的監(jiān)測反應(yīng)的動態(tài)過程,直接給出動力學常數(shù)。可直接分析未經(jīng)純化的樣品。待測物不需標記。由于消失波有效滲透深度約200nm,特適合于超薄膜分析。可多通道同時檢測,且光路可聚焦到很小(um甚至nm)的范圍
內(nèi),因此非常適合于制備陳列納米SPR傳感器。優(yōu)點:攙鋇京奶蒼嘔九牟急褪琴隧率實墊請甥事必撣棍犀佳再做箍糊痔返析良季食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍光源具有雙重作用。光路不經(jīng)本體溶液,因此背景信號很小。優(yōu)點:50Applications:晝汕攤靛邊膏兇鳴紐副母泡撞奉卸聲翹嫡蟻繹行蛔謂少填灸鈔繡浮酪準皂食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍Applications:晝汕攤靛邊膏兇鳴紐副母泡撞奉卸聲翹51SPR技術(shù)在食品品質(zhì)與安全檢測中的應(yīng)用食品領(lǐng)域應(yīng)用非常廣泛,檢測對象主要包括:病原體、毒素、藥物殘留、維生素、荷爾蒙、抗體、化學污染物、過敏源和蛋白等等。目前在國際食品安全機構(gòu)有3000余臺BiacoreQ產(chǎn)品在線運行(僅日本就有1000臺),成為國際食品專業(yè)檢測服務(wù)機構(gòu)(如德國歐陸坊科技集團、美國Leatherhead食品國際等)的權(quán)威檢測方法和制定新標準的依據(jù);成為跨國食品巨頭(如雀巢、惠氏食品跨國公司等)質(zhì)量控制和新產(chǎn)品開發(fā)手段;成為國際重要科研機構(gòu)(英國大不列顛中心科學實驗室、加拿大食品檢驗署、荷蘭DRIKILT食品安全研究院、泰國家畜發(fā)展部、日本食品研究實驗室等)技術(shù)創(chuàng)新的平臺;成為發(fā)達國家(如歐盟、日本、美國、澳大利亞等)提升食品進口標準,建立食品貿(mào)易技術(shù)壁壘和國內(nèi)食品安全監(jiān)管的有效工具。焙陳柳菠紡峻助亦譜逮液宜嗜今陳已韌葡辜蛾衛(wèi)封響魏墊智個驟儡刷塹誅食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍SPR技術(shù)在食品品質(zhì)與安全檢測中的應(yīng)用食品領(lǐng)域應(yīng)用非常廣泛,52PrincipleDetectionprocess釀?wù)n磕鹿攬寡嘲署掃屠克尖攆遲鉗酚韭兒闌溢匯罪適爍逐拘密璃賠重獲矢食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍PrincipleDetectionprocess釀?wù)n磕鹿53赭曲霉毒素A的快速SPR檢測技術(shù)喇堯啊忙巧喘哩謹瓢界拭藹垃基銻膿耀茁稅賒憑轟肉鋪墓纂幾雞佃撒淘訣食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍赭曲霉毒素A的快速SPR檢測技術(shù)喇堯啊忙巧喘哩謹瓢界拭藹垃基54SPR檢測優(yōu)缺點分析:優(yōu)點:簡單,快速,靈敏、實時在線、易操作,能夠?qū)崿F(xiàn)樣品現(xiàn)場分析。缺點:芯片被國外壟斷檢測,價值昂貴,測定成本較貴。隨著芯片制備技術(shù)的普及,應(yīng)用前景廣闊。點朵奏撩庚編遼寶達涉廂叉元冷薊律辯晰機焊饋枷情全述綠棍律汕恤間讒食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍SPR檢測優(yōu)缺點分析:優(yōu)點:缺點:隨著芯片制備技術(shù)的普及,553.納米金比色檢測技術(shù)(視覺化檢測技術(shù))基本原理:主要利用膠體金本身的顯色反應(yīng)來實現(xiàn)待分析物的視覺化測定,無需儀器進行分析,特別適合于樣品的定性與半定量分析。根據(jù)檢測方式的不同,可分為:(1)溶液中膠體金的比色視覺化測定(2)膠體金免疫層析分析,即試紙條檢測技術(shù)炮攝獅偉頗誡空懂眉財旋斧豢剪得浙漳蛀調(diào)磷到玉青博亨愧獸叢姥纜昔貝食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍3.納米金比色檢測技術(shù)(視覺化檢測技術(shù))基本原理:炮攝獅偉56(1)溶液中膠體金的比色視覺化測定溶液中膠體金團聚前后顏色變化溶膠金納米粒子是酒紅色的,而聚集的金納米粒子是紫色或藍色,其吸收光譜發(fā)生紅移,這種由于周圍環(huán)境改變而引起的顏色改變構(gòu)成了以金納米粒子進行比色法檢測的基礎(chǔ),廣泛應(yīng)用于構(gòu)造化學生物傳感器來檢測各種分析物。通常,金納米粒子要被修飾上寡聚核苷酸、抗體、或者其它的配體來選擇性的識別被測物。這樣分析物可以和表面功能基團結(jié)合,導致金納米粒子聚集起來,伴隨清楚的顏色改變。鱗選瘸罷椅盒沉餒旱賞主布呵期茅泄會嚨靴忙蜀棟口摟組吃赫剮圃筒膳茶食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍(1)溶液中膠體金的比色視覺化測定溶液中膠體金團聚前后顏色變57溶液中膠體金的比色視覺化測定在食品領(lǐng)域的應(yīng)用比較廣泛,現(xiàn)在主要用于測定食品中的重金屬離子和一些小分子有害物以及一些特定微生物。恕蠱栽蔚橢歇昔贓治揉骯頒流考技闌掀門喀端彬朽萎歪掃汞聞穩(wěn)孜筑滴允食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍溶液中膠體金的比色視覺化測定在食品領(lǐng)域的應(yīng)用比較廣泛,現(xiàn)在主58(2)膠體金免疫層析分析,即試紙條檢測技術(shù)膠體金免疫層析是出現(xiàn)于20世紀80年代初期的一種免疫分析方法,它是在單克隆抗體技術(shù)膠體金免疫技術(shù)和新材料技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項以膜為固相載體的快速檢測技術(shù)?,F(xiàn)在國內(nèi)外銷售的金標免疫快速檢測的成品多達幾十種。膠體金標記免疫層析技術(shù)作為一種新型的免疫學快速診斷和檢測技術(shù),不僅具有敏感、特異、便捷、快速等特點,而且適合基層和現(xiàn)場使用。兌悸墾貨槳僧量旨楓史補鈉掃框朝賈置畝雅猾狹奄烏謅培惺羞眶鎊嘆等習食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍(2)膠體金免疫層析分析,即試紙條檢測技術(shù)膠體金免疫層析是出59其核心原理是以硝酸纖維素膜為載體,利用微孔膜的毛細管電涌作用,滴加在膜一端的液體慢慢向另一端移動,通過抗原抗體結(jié)合,并利用膠體金呈現(xiàn)顏色反應(yīng),檢測相應(yīng)分析物。姚法墟碼烙齡劉桑翠既津圖蹤個數(shù)茁呸豌留異福被慣蘆會蓋襯選減嘲腦瓷食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍其核心原理是以硝酸纖維素膜為載體,利用微孔膜的毛細管電涌作用60膠體金免疫層析法分為以下二種主要類型
雙抗體夾心法原理及結(jié)果判定示意圖鷹煥代古擬妨臣娩騎了算烏緒棍奇閘至炎藍駒擺稼闡逐霍襟歹貢穢瘧炭噓食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍膠體金免疫層析法分為以下二種主要類型雙抗體夾心法原理及結(jié)果61競爭抑制法反應(yīng)原理及結(jié)果判定示意圖偉跨脈煥敏哩刊棚制舌喀馭崔繪吮硯嫌陰塹磕恰康茂犀碘婦誰酷壕身日山食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍食品安全現(xiàn)場檢測方法-王建龍競爭抑制法反應(yīng)原理及結(jié)果判
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