從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報告

從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報告Experimentreportonextractingchlorophyllfromspinach（ 實(shí)驗(yàn)報告 ）姓名： 單位： 日期： 編號：YB-BH-054197實(shí)驗(yàn)報告從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報告說明：工作報告是范文中的一種形式。它是指使用的群體按照有關(guān)規(guī)定，定期或不定期地向上級或?qū)ο髨蟾婀ぷ?。報告的?nèi)容包括近一段的工作情況和下一段工作部署。本內(nèi)容可以放心修改調(diào)整或直接使用。從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報告一【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、 通過綠色植物色素的提取和分離，了解天然物質(zhì)的分離提純與方法。2、 通過薄層色譜分離操作，加深了解微量有機(jī)物色譜分離鑒定的原理?！緦?shí)驗(yàn)原理】葉綠色存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素a{C55H77O5N4Mg}和葉綠素b(C55H70O6N4Mg};胡蘿卜素是具有長鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯，有三種異構(gòu)體；葉黃素C40H56O2是胡蘿卜素的羥基衍生物。當(dāng)提取時，從上到下顏色依次為：黃綠色，藍(lán)綠色，黃色和橙色?！緦?shí)驗(yàn)儀器】研缽，色譜柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化鋁，菠菜葉，燒杯，漏斗，玻璃棒，濾紙，剪刀，脫脂棉，紗布?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1、 稱取30g洗凈后用濾紙喜感的新鮮菠菜葉，用剪刀剪碎，放入研缽中研磨，研磨時放入少量碳酸鈣，防止研磨過猛破壞葉綠素結(jié)構(gòu)，研磨至爛。2、 將研磨碎的菠菜葉轉(zhuǎn)入小燒杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，蓋實(shí)驗(yàn)報告上表面皿，防止有機(jī)溶劑蒸發(fā)。按小組成員分別浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分鐘。3、 浸泡期間，填充色譜柱，在最下面墊入脫脂棉，再蓋上一個小濾紙片，裝入氧化鋁至4/5處，再蓋上一層濾紙片。4、 將燒杯中的菠菜葉連帶著有機(jī)溶劑用紗布擠入漏斗中，轉(zhuǎn)入分液漏斗，加入10mL水洗滌，除去水層（下層），再用10mL水洗滌一次。5、 將分頁漏斗中的溶液慢慢倒入色譜柱中，加幾滴丙酮既可以看到顏色變化。6、 洗凈儀器，收拾實(shí)驗(yàn)室，打掃衛(wèi)生?！緦?shí)驗(yàn)記錄】雖然分層現(xiàn)象不是非常明顯，但是還是可以看得見分層現(xiàn)象?！窘Y(jié)果與討論】1、 做這個實(shí)驗(yàn)的時候，我覺得不應(yīng)該用紗布擠干，因?yàn)閭€人感覺很多色素都被紗布吸走了，導(dǎo)致后來的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象沒有很明顯，經(jīng)過對比，沒用紗布直接過濾的同學(xué)做出的現(xiàn)象比用紗布做的現(xiàn)象要明顯的多。2、 有機(jī)溶劑往往比較容易揮發(fā)，所以加入后要蓋上表面皿。3、 此實(shí)驗(yàn)浸泡15分鐘以后現(xiàn)象就可以很明顯，因此以后在課堂上給學(xué)生演示的時候浸泡的時間不是越長越好的，15分鐘足矣。4、 若最后顏色沒有明顯的分層，可以加入幾滴丙酮幫助分層。從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報告二綠色植物如菠菜葉中含有葉綠素（綠）、胡蘿卜素（橙）和葉黃素（黃）等實(shí)驗(yàn)報告多種天然色素。葉綠素存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素a（C55H72O5N4Mg）和葉綠素b（C55H70O6N4Mg）），差別僅是a中一個甲基被b中的甲?；〈?。它們都是吡咯衍生物與金屬鎂的絡(luò)合物，是植物進(jìn)行光合作用所必需的催化劑，也是食用的綠色色素，可用于糕點(diǎn)、飲料水等中，添加于膠姆糖中還可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。盡管葉綠素分子中含有一些極性基團(tuán)，但大的烴基結(jié)構(gòu)使它易溶于石油醚等一些非極性溶劑。胡蘿卜素（C40H56）是具有長鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯。它有三種異構(gòu)體a一,和丫一胡蘿卜素，其中B一異構(gòu)體含量最多，也最重要。生長期較長的綠色植物中，異構(gòu)體中B一的含量多達(dá)90%。B一具有維生素A的生理活性，其結(jié)構(gòu)是兩分子維生素A在鏈端失去兩分子水結(jié)合而成。生物體內(nèi)，B一體受酶催化氧化即形成維生素入。目前，B-體可作為維生素A使用，也可作為食品工業(yè)的色素，3一胡蘿卜素還有防癌功能。葉黃素（C40H56O2）是胡蘿卜素的羥基衍生物，在光合作用中能起收集光能的作用。在綠葉中通常是胡蘿卜素的兩倍。較易溶于醇而在石油醚中溶解度較小。由此可見，葉綠素等天然色素有廣泛的用途，對于色素的提取與分離就顯得很重要了本實(shí)驗(yàn)就提取和分離做了相關(guān)的研究。1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器與試劑儀器：研缽、分液漏斗、顯微載玻片、毛細(xì)管、層析柱（20X10cm）、UV-240紫外分光光度計試劑：石油醚、乙醇（95%）、菠菜葉、丙酮（化學(xué)純）、乙酸乙酯（化學(xué)純）、無實(shí)驗(yàn)報告水硫酸鈉、硅膠G、中性氧化鋁（150目160目）1.2提取與分離1.2.1浸泡法提取色素在研缽中放入20g新鮮的菠菜葉，加入20mL3:2（體積比）石油醚一乙醇混合液，適當(dāng)研磨（不要研成糊狀，否則會給分離造成困難），用傾析法將提取液轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，每次用10ml水洗滌兩次，以除去萃取液中的乙醇。洗滌時要輕輕旋蕩，以防乳化。棄去水乙醇層，石油醚層用無水硫酸鈉干燥，干燥后濾入小圓底燒瓶，在水浴上蒸發(fā)濃縮至大約 ImLo1.2.2薄層層析取四塊顯微載玻片，硅膠G經(jīng)0.5%羧甲基纖維素鈉調(diào)制后制板， 在室溫下晾干后在110°C活化1h。選取效果最好的一塊進(jìn)行點(diǎn)樣。展開劑：（1）石油醚一丙酮=8:2（體積比）（2）石油醚一乙酸乙酯=6:4（體積比）取活化后的層析板，點(diǎn)樣，放入預(yù)先選定展開劑的廣口瓶。瓶的內(nèi)壁貼一張局5cm，繞周長4/5的濾紙，下部浸入展開劑中，蓋上瓶蓋。待展開劑上升至規(guī)定高度時，取出層析板，晾干，做出標(biāo)記。分別用兩種展開劑展開，比較不同展開劑的展開效果。觀察斑點(diǎn)在板上的位置并排列出胡蘿卜素、葉綠素和葉黃素的Rf值的大小。注意更換展開劑時，需干燥層析瓶，不允許前一種展開劑帶入后一系統(tǒng)。1.2.3柱層析取少量脫脂棉在小燒杯中用石油醚浸潤后，擠壓除去氣泡，放在層析柱底部。實(shí)驗(yàn)報告在層析柱中加15cm石油醚。加入中性氧化鋁8克，打開柱下活塞，保持石油醚高度不變，氧化鋁在柱子中堆積。裝完后，打開下端活塞，放出溶劑，直到氧化鋁表面剩下1—2mm高為止（不能使氧化鋁表面露出液面）。將濃縮液用滴管加到柱頂部，打開下端活塞，讓液面下降到柱面以下1mm,關(guān)閉活塞，加數(shù)滴石油醚，打開活塞，使液面下降，幾次反復(fù)，使色素全部進(jìn)入柱體。在柱頂加1.5cm洗脫劑一一9:1（體積比）石油醚一丙酮。打開活塞，用錐形瓶收集。當(dāng)?shù)谝粋€有色成分即將滴出時，取另一錐形瓶收集，得橙黃色溶液，即胡蘿卜素。結(jié)果與討論2.1提取由于甲醇與乙醇的極性相近，但是乙醇易得、無毒，所以用 3:2的石油醚一乙醇通過浸泡的方法提取菠菜色素，而不是用石油醚一甲醇。2.2分離薄層層析薄層層析又叫薄層色譜，是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，屬固一液吸附色譜，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，可以用于少量樣品（幾到幾微克，甚至0.01微克）的分離。實(shí)驗(yàn)中涉及的菠菜色素的比移值（Rf）（薄層色譜法中原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心的距離與原點(diǎn)到溶劑前沿的距離的比值）列表如下：在一定的色譜條件下，特定化合物的Rf值是一個常數(shù)，因此有可能根據(jù)化合物的Rf值鑒定化合物。實(shí)驗(yàn)報告菠菜色素中各種色素的比移值Rf大小為：胡蘿b素〉葉黃素>葉綠素，按此順序它們的非極性依次減弱。物質(zhì)極性的判斷為柱層析中洗脫劑的選擇提供了參考價值。柱層析胡蘿卜素極性最小，因此胡蘿卜素的洗脫劑用極性較小的9:1的石油醚-丙酮溶劑效果較好。但要收集其他幾種色素得換用其他的洗脫劑，因?yàn)樯氐臉O性各不相同，且有一定差別。如用7：3石油醚-丙酮分離葉黃素分離出胡蘿卜素和葉黃素后，可加大溶劑極性以較快速度洗脫葉綠素用 3:1:1的丁醇-乙醇-水洗脫劑洗脫葉綠素。3.結(jié)論采用浸泡法提取色素比抽濾法更好。在薄層層析時，用石油醚-丙酮=8:2時，能更明顯的看到分層。在柱色譜洗脫劑的選擇上，基于薄層分析的極性判斷選擇了石油醚-丙酮=9:1的溶劑作為洗脫劑，取得了非常好的效果。通過實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步認(rèn)識到洗脫劑在柱層析中的重要性。從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報告三【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、通過綠色植物色素的提取和分離，了解天然物質(zhì)的分離提純與方法。2、通過薄層色譜分離操作，加深了解微量有機(jī)物色譜分離鑒定的原理?！緦?shí)驗(yàn)原理】葉綠色存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素A(C55H77O5N4Mg)和葉綠素B實(shí)驗(yàn)報告(C55H70O6N4Mg)胡蘿卜素是具有長鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯，有三種異構(gòu)體；葉黃素(C40H56O2)是胡蘿卜素的羥基衍生物。是胡蘿卜素的羥基衍生物。當(dāng)提取時，從上到下顏色依次為：黃綠色，藍(lán)綠色，黃色和橙色?！緦?shí)驗(yàn)儀器】研缽，色譜柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化鋁，菠菜葉，燒杯，漏斗，玻璃棒，濾紙，剪刀，脫脂棉，紗布?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1、 稱取30g洗凈后用濾紙喜感的新鮮菠菜葉，用剪刀剪碎，放入研缽中研磨，研磨時放入少量碳酸鈣，防止研磨過猛破壞葉綠素結(jié)構(gòu)，研磨至爛。2、 將研磨碎的菠菜葉轉(zhuǎn)入小燒杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，蓋上表面皿，防止有機(jī)溶劑蒸發(fā)。按小組成員分別浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分鐘。3、 浸泡期間，填充色譜柱，在最下面墊入脫脂棉，再蓋上一個小濾紙片，裝入氧化鋁至4/5處，再蓋上一層濾紙片。4、 將燒杯中的菠菜葉連帶著有機(jī)溶劑用紗布擠入漏斗中，轉(zhuǎn)入分液漏斗，加入10mL水洗滌，除去水層(下層)，再用10mL水洗滌一次。5、 將分頁漏斗中的溶液慢慢倒入色譜柱