常用細菌生化反應(yīng)試驗公開課一等獎省優(yōu)質(zhì)課大賽獲獎?wù)n件

慣用細菌生化反應(yīng)試驗糖醇類代謝試驗糖發(fā)酵試驗甲基紅試驗V-P試驗葡萄糖氧化／發(fā)酵試驗（O/F試驗）七葉苷水解試驗Β－半乳糖苷滲透酶試驗糖發(fā)酵試驗原理多糖－→單糖－→丙酮酸－→酸性產(chǎn)物(或產(chǎn)酸產(chǎn)氣)－→pH↓－→指示劑呈酸性變色(若產(chǎn)氣者有氣泡出現(xiàn))培養(yǎng)基：糖發(fā)酵管、半固體發(fā)酵管、微量發(fā)酵管試劑：酚紅、溴甲酚紫等結(jié)果:培養(yǎng)基呈酸性變色應(yīng)用：觀察細菌對糖度分解情況，慣用于腸道桿菌判定糖發(fā)酵試驗結(jié)果判斷反應(yīng)現(xiàn)象結(jié)果描述酸性變色、有氣泡分解××糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣酸性變色、無氣泡分解××糖產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣培養(yǎng)基不變色不分解××糖甲基紅試驗原理：細菌分解糖，產(chǎn)生丙酮酸，深入生成大量混合酸，使培養(yǎng)基pH維持在4.4以下，加入甲基紅后，使甲基紅展現(xiàn)紅色反應(yīng)。此為甲基紅試驗陽性。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水試劑：甲基紅試劑結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基展現(xiàn)紅色：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：是腸道桿菌慣用生化反應(yīng)試驗，主要用于區(qū)分大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌伏－普試驗（V-P試驗）原理：細菌發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸脫羧生成乙酰甲基甲醇，在堿性環(huán)境中乙酰甲基甲醇被氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中精氨酸所含胍基結(jié)合，生成紅色化合物。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基展現(xiàn)紅色：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：是腸道桿菌慣用生化反應(yīng)試驗，主要用于區(qū)分大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅甲基紅試驗葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅V－P試驗脫酸葡萄糖發(fā)酵形成丙酮酸后不一樣代謝路徑葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅脫酸蛋白質(zhì)類代謝試驗靛基質(zhì)試驗硫化氫試驗苯丙氨酸脫氨試驗?zāi)蛩孛冈囼灥寤|(zhì)試驗原理：細菌產(chǎn)生色氨酸酶，可分解蛋白胨中色氨酸，生成靛基質(zhì)（吲哚），靛基質(zhì)與試劑對二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基質(zhì)。培養(yǎng)基：蛋白胨水試劑：靛基質(zhì)試劑（含對二甲基氨基苯甲醛）結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基出現(xiàn)紅色液面：+培養(yǎng)基液面為黃色：－應(yīng)用：用于腸道桿菌判定靛基質(zhì)試驗原理色氨酸酶色氨酸靛基質(zhì)（吲哚）

玫瑰靛基質(zhì)（玫瑰吲哚）對二甲基氨基苯甲醛硫化氫試驗原理：細菌分解蛋白質(zhì)中含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫與培養(yǎng)基中鐵鹽或鉛鹽結(jié)合生成黑色絡(luò)合物。培養(yǎng)基：含硫酸亞鐵或醋酸鉛培養(yǎng)基結(jié)果：培養(yǎng)基變黑

為陽性，不變黑為陰性應(yīng)用：慣用于腸道桿菌判定苯丙氨酸脫氨試驗原理：細菌含有苯丙氨酸脫氨酶，可使培養(yǎng)基中苯丙氨酸脫氨，形成苯丙酮酸，后者與三氯化鐵作用，形成綠色化合物。培養(yǎng)基：苯丙氨酸瓊脂試劑：10％三氯化鐵結(jié)果：加入試劑后培養(yǎng)基展現(xiàn)綠色為陽性應(yīng)用：多用于腸道桿菌判定苯丙氨酸脫氨試驗原理苯丙氨酸苯丙氨酸脫氨酶苯丙酮酸10％三氯化鐵綠色化合物尿素酶試驗原理：產(chǎn)生脲酶細菌，能水解尿素生成氨和CO2，氨使培養(yǎng)基呈堿性變色。培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基試劑：酚紅指示劑結(jié)果：培養(yǎng)基變紅：+培養(yǎng)基不變色－應(yīng)用：腸桿菌科屬間判定尿素酶試驗原理尿素尿素酶氨+CO2培養(yǎng)基pH升高酚紅呈堿性變色枸櫞酸鹽利用試驗原理：一些細菌能力利用培養(yǎng)基中枸櫞酸鹽作為唯一碳源，也能利用其中銨鹽作為唯一碳源，細菌生長過程中分解枸櫞酸鹽產(chǎn)生碳酸鹽和分解銨鹽生成氨，使培養(yǎng)基變堿，是指示劑呈堿性反應(yīng)。培養(yǎng)基：枸鹽酸鹽培養(yǎng)基試劑：溴麝香草酚藍（pH6.0以下呈黃色，pH7.6以上呈藍色）結(jié)果：培養(yǎng)基變藍：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：腸桿菌科屬間判別枸櫞酸鹽利用試驗原理枸櫞酸鹽銨鹽碳酸鹽氨培養(yǎng)基pH下降溴麝香草酚藍呈堿性變色培養(yǎng)基變藍培養(yǎng)基糖發(fā)酵試驗甲基紅試驗靛基質(zhì)試驗血清學(xué)試驗血清學(xué)判定：用已知抗體判定未知細菌或標本中抗原血清學(xué)診療：用已知抗原檢測血清中特異性抗體血清學(xué)判定試劑（診療血清）：含抗體檢測對象：特異性抗原方法：直接凝集試驗（玻片法）、莢膜腫脹試驗