DB44-T 2340.1-2021諸氏鯔蝦虎魚 毒理學(xué)評價 第1部分：急性毒性-（高清現(xiàn)行）

ICS13.020.40CCSZ10ICS13.020.40CCSZ10廣 東 省 地 方 標 準DB44/T2340.1—20211MugilogobiuschulaeMugilogobiuschulae—Toxicologyevaluation—Part1:Acutetoxicity2021101820220118廣東省市場監(jiān)督管理局發(fā)布目 次前言 II112范引文件 13語定義 14253637價驟 48量制 69果報告 610氏蝦魚樂死 6附錄A（料）諸鯔蝦魚附錄A（料）諸鯔蝦魚育法 7附錄B（范）諸鯔蝦魚養(yǎng)法 8附錄C（料）96h諸氏蝦魚性性價原記表 9前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。DB44/T2340《諸氏鯔蝦虎魚毒理學(xué)評價》分為四個部分：1234本文件是DB44/T2340的第1部分。本文件由廣東省實驗動物標準化技術(shù)委員會（GD/TC93）歸口。本文件起草單位：廣東省實驗動物監(jiān)測所。本文件主要起草人：李建軍、黃韌、朱才毅、余露軍、賴素群、林忠婷、陳小曲、曾進、蔡磊。諸氏鯔蝦虎魚毒理學(xué)評價第1部分：急性毒性范圍本文件適用于直接或間接排入海洋、入海河口的污染物及受納水體的急性毒性評價。（GB17378.3海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運輸GB17378.5海洋監(jiān)測規(guī)范第5部分：沉積物分析GB/T39649實驗動物實驗魚質(zhì)量控制HJ91.1污水監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ493水質(zhì)樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定NY5052無公害食品海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)GB/T39649實驗動物實驗魚質(zhì)量控制HJ91.1污水監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ493水質(zhì)樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定NY5052無公害食品海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)SN/T3592實驗室化學(xué)藥品和樣品廢棄物處理的標準指南3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1.1實驗諸氏鯔蝦虎魚LaboratoryMugilogobiuschulae經(jīng)人工繁育，對其攜帶的病原微生物及寄生蟲進行控制，遺傳背景明確或來源清楚，用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定及其他科學(xué)實驗的諸氏鯔蝦虎魚。中文名：諸氏鯔蝦虎魚，學(xué)名：Mugilogobiuschulae。3.1.2仔魚larvafish從孵出開始至各鰭鰭條發(fā)育完整，鱗片開始出現(xiàn)為止。3.1.3日齡daysofage自受精始，以日為單位表述的實驗魚年齡。3.1.4馴養(yǎng)domestication試驗前對實驗生物進行的環(huán)境適應(yīng)性養(yǎng)殖。受試物3.2.1污水sewage指在生產(chǎn)與生活活動中排放的水的總稱。[來源：GB8978-1996，3.1]3.2.2marinesedimentsGB/T30740-2014，3.1]3.2.3疏浚物dredgedmaterials[來源：GB30980-2014，3.2]3.3.1急性毒性acutetoxicity機體接觸外源物質(zhì)后在短期內(nèi)所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)。3.3.2靜態(tài)毒性試驗statictoxicitytest試驗期間內(nèi)不更換試驗溶液，進行觀察、測定生物異常或死亡效應(yīng)的試驗。3.3.3半靜態(tài)毒性試驗semi-statictoxicitytest以定期（如24h）更換試驗溶液的方式進行的試驗。3.3.4流水毒性試驗flow-throughtoxicitytest以整個試驗過程中試驗溶液自動、持續(xù)地被更換的方式進行的試驗。3.3.5半數(shù)致死濃度halflethalconcentration,LC5050GB/T18420.2－2009，3.3]4原理方法分為靜態(tài)毒性試驗、半靜態(tài)毒性試驗和流水毒性試驗。試驗期間受試物實測濃度與配制濃度偏差超過20%，宜采用半靜態(tài)毒性試驗或流水毒性試驗。當受試物穩(wěn)定性不明確時，仔魚推薦采用靜態(tài)毒性試驗，成魚采用半靜態(tài)毒性試驗或流水毒性試驗。器材pH質(zhì)量應(yīng)符合GB/T39649的規(guī)定。繁育方法見附錄A。試驗前應(yīng)馴養(yǎng)合格。諸氏鯔蝦虎魚的馴養(yǎng)應(yīng)符合附錄B的規(guī)定。規(guī)格質(zhì)量應(yīng)符合GB/T39649的規(guī)定。繁育方法見附錄A。試驗前應(yīng)馴養(yǎng)合格。諸氏鯔蝦虎魚的馴養(yǎng)應(yīng)符合附錄B的規(guī)定。規(guī)格表1餌料褶皺臂尾輪蟲，質(zhì)量應(yīng)符合GB/T39649中7.3.2的規(guī)定。鹵蟲無節(jié)幼體，質(zhì)量應(yīng)符合GB/T39649中7.3.2的規(guī)定。試驗方法日齡d體長mm靜態(tài)毒性試驗8～142.15±0.35靜態(tài)毒性試驗、半靜態(tài)毒性試驗或流水毒性試驗>12025±5受試物HJ91.1HJ493GB17378.3GB17378.5GB30980分析純或以上等級的十二烷基硫酸鈉（Sodiumdodecylsulfate，SDS）。麻醉劑MS-222溶液，間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽（MS-222）與碳酸氫鈉(NaHCO3)按1∶1質(zhì)量比混合，溶于水配制成一定濃度的溶液，密封避光保存于陰涼處，保存時間不超過一個月。稀釋水宜使用天然海水，也可使用人工配制海水。水質(zhì)應(yīng)符合NY5052的規(guī)定，pH7.0～8.5。（30±2）r/min15min，低水溶性物質(zhì)可采用超聲波或其他適當?shù)奈锢矸椒ǚ稚?，也可采用對諸氏鯔蝦虎魚低毒或無毒的（GB30980-2014中8.2.12000r/min～3000r/min30min，5min，靜置60min如貯備液pH值超出7.0～8.5，則宜采用HCl或NaOH溶液調(diào)節(jié)貯備液pH值至該范圍。預(yù)試驗設(shè)置1～1024h（或48h、96h）當預(yù)試驗結(jié)果受試物LC50高于100mg/L、原水樣或受試物在試驗條件下最大飽和濃度時，可相應(yīng)進行濃度為100mg/L、原水樣或受試物在試驗條件下最大飽和濃度的限度試驗。設(shè)置1331030min同馴養(yǎng)環(huán)境條件，見附錄B中的表B.1。50300.2mL。靜態(tài)毒性試驗不更換試驗溶液。241/4～1/2流水毒性試驗應(yīng)根據(jù)受試物的穩(wěn)定性，每4h～12h更換一次貯備液。一個試驗容器24h的流量至少為該容器內(nèi)試驗溶液體積的5倍。試驗期間流速變幅不大于10%。pH2424h24hC.1。124124h有效的試驗應(yīng)符合以下條件：——試驗結(jié)束時，對照組（包括空白對照組和溶劑對照組）諸氏鯔蝦虎魚死亡率不超過10%；23.0℃～27.0（SDS）8～1424hLC500.6mg/L～2.4mg/L24hLC501.8mg/L～4.6mg/L——原始記錄應(yīng)完整，包括樣品名稱、編號、試驗時間、評價依據(jù)、馴養(yǎng)及質(zhì)量控制記錄等。按照GB/T18420.2-2009中規(guī)定的方法計算LC50及其95%置信限。評價報告應(yīng)包括以下內(nèi)容：pHpH96hLC509510諸氏鯔蝦虎魚安樂死MS-222100mg/L～500樂死。MS-222溶液的配制方法見6.5。11實驗室廢棄物處理按SN/T3592的規(guī)定執(zhí)行。附錄A（資料性）諸氏鯔蝦虎魚繁育方法5.04000a)第一背鰭下的頸背部有斜行帶狀條紋，尾鰭基部有兩個垂直排列的圓形或橢圓形斑點；b)鰭式為圖A.1）圖A.1諸氏鯔蝦虎魚形態(tài)特征（模式圖引自伍漢霖，2008）諸氏鯔蝦虎魚培育用水可采用天然海水或海鹽配制水，水質(zhì)應(yīng)符合NY5052的要求。適宜環(huán)境因子范圍為：水溫22.0℃～30.0℃，鹽度10‰～30‰，溶解氧≥4.0mg/L，pH7.0～8.5，自然光照或明暗時間比約為14h:10h，水面照度54lx～324lx。選擇諸氏鯔蝦虎魚120日齡～360日齡健康親魚。配對產(chǎn)卵后，宜及時移走親本。24.0℃～26.010‰～20≥4.0mg/L、pH7.0～8.5200lx同一批收集的仔魚孵出時間間隔不超過24h。210個～20605min～10min2附錄B（規(guī)范性）諸氏鯔蝦虎魚馴養(yǎng)方法馴養(yǎng)魚應(yīng)來源于人工繁育、同一批次、大小一致的諸氏鯔蝦虎魚群體。表B.1諸氏鯔蝦虎魚的馴養(yǎng)環(huán)境條件項目要求水溫23.0℃～27.0℃，變化范圍不宜超過2.0℃鹽度10‰～30‰，與試驗用稀釋水變化范圍不宜超過2‰pH7.0～8.5，變化范圍不宜超過0.4溶解氧不低于5.0mg/L光照室內(nèi)自然光照或明暗時間比約為14h:10h，水面照度54lx～324lx養(yǎng)殖密度成魚或親魚每升水體不超過5尾；仔魚每升水體不超過200尾幼成魚應(yīng)馴養(yǎng)14d以上；仔魚孵出時開始馴養(yǎng)，至毒性試驗開始時結(jié)束馴養(yǎng)。投喂按照A.4執(zhí)行。幼成魚應(yīng)馴養(yǎng)14d以上；仔魚孵出時開始馴養(yǎng)，至毒性試驗開始時結(jié)束馴養(yǎng)。投喂按照A.4執(zhí)行。試驗前5h～24h停止喂食。馴養(yǎng)魚不進行疾病處理。幼成魚馴養(yǎng)48h后，開始記錄死亡率，并按下述方法處理：——7d內(nèi)死亡率大于10%，舍棄全組魚。7d5%-10%dd5——7d內(nèi)死亡率小于5%，接受該組魚。仔魚馴養(yǎng)5d后，開始記錄死亡率，3d內(nèi)死亡率大于10%，舍棄全組魚。否則接受該組魚。附錄C（資料性）96h諸氏鯔蝦虎魚急性毒性評價原始記錄表C.196h見表C.1。表C.196h諸氏鯔蝦虎魚急性毒性評價原始記錄表（a）（b）（c）（d）組別存活數(shù)鹽度‰pHDOmg/L水溫℃流速L/s毒性效應(yīng)對照組ABC組1：mg/LABC組2： mg/LABC組3： mg/LABC組4： mg/LABC組5： mg/