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專題2測評(時間:60分鐘,滿分:100分)一、選擇題(每小題2.5分,共50分)1.下圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟,下列說法錯誤的是()A.步驟①②③操作時需要在酒精燈火焰旁進行B.步驟①中待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.步驟③中,每次劃線前都需對接種環(huán)進行灼燒處理D.劃線接種結束后,將圖④平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)答案B2.“篩選”是分離微生物常用的手段,下列有關技術中不能篩選成功的是()A.在全營養(yǎng)的普通培養(yǎng)基中,篩選大腸桿菌B.在以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基中,篩選能夠分解尿素的微生物C.用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基,篩選能分解纖維素的微生物D.在培養(yǎng)基中加入不同濃度的氯化鈉,篩選抗鹽突變體植物答案A解析全營養(yǎng)的普通培養(yǎng)基上可生長多種細菌,篩選不到純的大腸桿菌。3.下列有關培養(yǎng)基和菌種鑒定的敘述,不正確的是()A.分離純化微生物常用的是固體培養(yǎng)基B.可利用固體培養(yǎng)基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型C.根據(jù)含剛果紅及纖維素的培養(yǎng)基上是否形成透明圈來篩選纖維素分解菌D.在無氮培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌答案D解析在以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌。4.平板劃線法和稀釋涂布平板法是純化微生物的兩種常用方法,下列相關敘述正確的是()A.都要將菌液進行一系列的梯度稀釋B.平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作C.稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)D.都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落答案D解析平板劃線法不需要進行梯度稀釋。平板劃線法是通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線操作,將聚集的菌種逐漸稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。5.下列有關培養(yǎng)基的敘述,正確的是()A.培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質B.培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時,可以形成肉眼可見的單個細菌答案A解析培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求,配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質。培養(yǎng)基的種類根據(jù)劃分依據(jù)的不同而不同,如根據(jù)化學成分可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基添加凝固劑形成的,其他成分均相同。單個的微生物形體微小,肉眼無法看到,必須借助儀器才能看到,在固體培養(yǎng)基上用肉眼觀察到的是一個菌落。6.下列對微生物培養(yǎng)中滅菌的理解,不正確的是()A.防止雜菌污染B.消滅雜菌C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設備都必須滅菌D.滅菌必須在接種前答案B解析滅菌的目的是防止雜菌污染,但實際操作中不可能只消滅雜菌,而是消滅全部微生物。與發(fā)酵有關的所有設備和物質都要滅菌;發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的,滅菌必須在接種前,如果接種后再滅菌就會把所接菌種也殺死。7.在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程中要加入瓊脂這一理想的凝固劑。下列關于瓊脂的說法,錯誤的是()A.不被所培養(yǎng)的微生物分解利用,對所培養(yǎng)的微生物無毒害作用B.在微生物生長溫度范圍內保持固體狀態(tài)C.瓊脂凝固點低,利于微生物的生長D.瓊脂在滅菌過程中不會被破壞,透明度好,凝固力強答案C解析瓊脂不會被微生物利用且對微生物無毒害作用,在滅菌過程中不會被破壞,透明度好,凝固力強,A、D兩項正確。瓊脂在水中加熱至95℃時開始溶化,溫度降至44℃以下時才開始凝固,微生物生長最適宜的溫度范圍一般為16~30℃,所以瓊脂在微生物生長溫度范圍內保持固體狀態(tài),B項正確。瓊脂的凝固點相對于微生物適宜生長的溫度較高,凝固劑的凝固點不能太低,否則不利于微生物的生長,C項錯誤。8.微生物體內將纖維素分解成纖維二糖的酶是()A.C1酶和CX酶 B.C1酶和葡萄糖苷酶C.CX酶和葡萄糖苷酶 D.C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶答案A9.某種細菌菌株需要亮氨酸才能生長,但此菌株對鏈霉素敏感。實驗者用誘變劑處理此菌株,想篩選出表格中細菌菌株類型,則配制相應選擇培養(yǎng)基類型正確的是()選項篩選出不需要亮氨酸的菌株篩選出抗鏈霉素的菌株篩選出不需要亮氨酸的抗鏈霉素的菌株AL+S+L-S-L+S-BL-S-L+S+L-S+CL-S+L+S+L-S-DL+S-L-S-L+S+注:“L”代表亮氨酸,“S”代表鏈霉素,“+”代表加入,“-”代表不加入答案B解析篩選不需要亮氨酸的菌株時培養(yǎng)基中不需要添加亮氨酸,同時也不應該添加鏈霉素,以免殺死該種細菌;篩選抗鏈霉素的菌株時需要向培養(yǎng)基中添加鏈霉素和亮氨酸;篩選不需要亮氨酸且抗鏈霉素的菌株時需要向培養(yǎng)基中添加鏈霉素,但不能添加亮氨酸。10.從土壤中分離分解尿素的細菌,對培養(yǎng)基的要求是()選項尿素瓊脂葡萄糖硝酸鹽水A+++++B----+C+++-+D+--++注:“+”表示加入,“-”表示不加答案C解析分離土壤中分解尿素的細菌,培養(yǎng)基中要有碳源,且以尿素作為唯一的氮源,不能添加硝酸鹽。11.欲從土壤中分離出能分解尿素的細菌,下列實驗操作不正確的是()A.將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋B.同一濃度的土壤稀釋液應至少涂布三個平板C.可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照D.用加入剛果紅溶液的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細菌答案D解析加入剛果紅的培養(yǎng)基用來篩選纖維素分解菌,D項錯誤。12.纖維素酶的測定方法一般是()A.對纖維素進行定量測定B.對纖維素酶分解纖維素后所產生的葡萄糖進行定量測定C.對纖維素酶分解纖維素后所產生的纖維二糖進行定量測定D.對纖維素分解菌進行定量測定答案B13.某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌B.轉換劃線角度后需灼燒接種環(huán)并冷卻后再進行劃線C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次答案B解析培養(yǎng)基滅菌應在分裝到培養(yǎng)皿之前進行,A項錯誤。劃線結束后,接種環(huán)上殘留菌種,必須灼燒接種環(huán),使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,B項正確。從有機廢水中分離的微生物是異養(yǎng)型生物,其培養(yǎng)不需要光照,C項錯誤。培養(yǎng)過程中應每隔12h或24h觀察一次,D項錯誤。14.利用農作物秸稈等纖維質原料生產的乙醇,經加工可制成燃料乙醇,從而減少了對石油資源的依賴。下圖為生產燃料乙醇的簡要流程,據(jù)圖分析錯誤的一項是()纖維質
原料可溶解
復合物乙醇燃料
乙醇A.要得到微生物A,最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣B.圖中②過程常用的微生物B是酵母菌C.微生物A和微生物B可利用的碳源相同D.可用纖維素酶制劑代替微生物A起作用答案C解析微生物A所用碳源為纖維素,微生物B所用碳源為纖維素水解產物(葡萄糖)。15.在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗時,甲組實驗用氮源只含尿素的培養(yǎng)基,乙組實驗用氮源除含尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基,其他成分都相同,在相同條件下操作、培養(yǎng)與觀察,則乙組實驗屬于()A.空白對照 B.自身對照C.相互對照 D.條件對照答案D解析本實驗甲組為實驗組,乙組為對照組,給實驗組某種處理,給對照組另一條件的處理,為條件對照。16.右圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為1、2、3、4、5。下列敘述正確的是()A.在五個區(qū)域中劃線前都要對接種環(huán)和培養(yǎng)基進行滅菌B.劃線操作時完全打開皿蓋,劃完立即蓋上C.接種時不能劃破培養(yǎng)基,否則難以達到分離單菌落的目的D.第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終要連接起來,以便比較前后的菌落數(shù)答案C解析在每次劃線前都要對接種環(huán)進行滅菌,而培養(yǎng)基的滅菌在接種之前;進行劃線操作時,左手將皿蓋打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內,劃三至五條平行線,蓋上皿蓋;注意接種時不能劃破培養(yǎng)基,否則難以達到分離單菌落的目的;第1區(qū)和第5區(qū)的劃線不能相連。17.若某一稀釋度下,平板上生長的平均菌落數(shù)為90,涂布平板時所用的稀釋液體積為0.1mL,稀釋液的稀釋倍數(shù)為105,則每克樣品中的菌株數(shù)為()A.9×108 B.9×107C.9×105 D.9×106答案B解析每克樣品中菌株數(shù)=(90÷0.1)×105=9×107。18.某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌的數(shù)量,并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是()A.利用平板劃線法對細菌進行計數(shù)B.用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選目的菌C.采用稀釋涂布平板法分離菌種D.稱取和稀釋土壤樣品時應在火焰旁答案A解析分離純化細菌常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法,但平板劃線法不能用于細菌的計數(shù);篩選能分解石油的細菌,要以石油作為培養(yǎng)基中唯一的碳源;篩選細菌的整個操作過程都需要在無菌條件下進行。19.某實驗小組欲從土壤中篩選出能分解淀粉的芽孢桿菌。下列敘述不正確的是()A.采樣與培養(yǎng):稱量1g土樣置于剛配制的液體培養(yǎng)基中,30℃振蕩培養(yǎng)B.接種:為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高,需經過系列稀釋后接種C.選擇:選用淀粉作唯一碳源的固體培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)D.篩選:將適量的碘液滴加到平板中的菌落周圍,出現(xiàn)透明圈說明此種菌能分解淀粉答案A解析為了確保分離出的目的菌來自土壤,所用培養(yǎng)液和儀器等都要嚴格滅菌,所以剛配制的培養(yǎng)基必須經高壓蒸汽滅菌處理才能使用。20.下列有關分解纖維素微生物的分離的敘述,不正確的是()A.纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵B.對分解纖維素的微生物進行了初步篩選后,無須再進行其他實驗C.纖維素酶的測定方法,一般是對所產生的葡萄糖進行定量的測定D.纖維素酶是一種復合酶答案B解析初步篩選只是分離純化的第一步,為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進行發(fā)酵產纖維素酶的實驗。二、非選擇題(共5個小題,50分)21.(8分)下圖是生物興趣小組為研究“某酸奶中乳酸菌種類及其耐藥情況”而繪制的流程圖。請分析回答下列問題。配制細菌培
養(yǎng)基并滅菌→乳酸菌分
離純化→乳酸菌耐藥性檢測(1)與酵母菌相比,乳酸菌在結構上的主要區(qū)別是,(填“有”或“無”)染色體。
(2)本研究使用的細菌培養(yǎng)基中特別加入了一定量的碳酸鈣,乳酸菌在(生理過程)中產生的乳酸能與不溶性的碳酸鈣生成可溶性的乳酸鈣,從而在菌落周圍形成溶鈣圈。從物理形態(tài)分析,本研究使用的培養(yǎng)基屬于(類型)。
(3)在利用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基滅菌時,把鍋內的水加熱煮沸,必須后,將鍋密閉,繼續(xù)加熱以保證鍋內氣壓上升,溫度達到121℃。滅菌后的培養(yǎng)基應適當冷卻,在附近倒平板。
(4)請完善“檢測乳酸菌對青霉素、四環(huán)素的耐藥性”實驗操作步驟。步驟1:分別取加入三組無菌培養(yǎng)皿中,再加入經過滅菌并冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基,立即混勻,靜置凝固成平板。
步驟2:向三組培養(yǎng)基中分別接種待檢測的乳酸菌菌種。步驟3:將接種后的三組培養(yǎng)基和一個都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天,觀察比較培養(yǎng)基中菌落的生長情況。
答案(1)細胞內沒有核膜包被的細胞核無(2)無氧呼吸固體培養(yǎng)基(3)將鍋內冷空氣徹底排除酒精燈火焰(4)等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水未接種的培養(yǎng)基解析(1)酵母菌屬于真核生物,乳酸菌屬于原核生物,兩者區(qū)別在于乳酸菌細胞內沒有核膜包被的細胞核,無染色體。(2)培養(yǎng)基中特別加入了一定量的碳酸鈣,乳酸菌在無氧呼吸中產生的乳酸能與不溶性的碳酸鈣生成可溶性的乳酸鈣,從而在菌落周圍形成溶鈣圈。從物理形態(tài)分析,本研究使用的培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。(3)在利用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基滅菌時,把鍋內的水加熱煮沸,必須將鍋內冷空氣徹底排除后,將鍋密閉,繼續(xù)加熱以保證鍋內氣壓上升,溫度達到121℃。滅菌后的培養(yǎng)基應適當冷卻,在酒精燈火焰附近倒平板。(4)步驟1中分別取等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水加入三組無菌培養(yǎng)皿中,再加入經過滅菌并冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基,立即混勻,靜置凝固成平板。步驟3中將接種后的三組培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天,觀察比較培養(yǎng)基中菌落的生長情況。22.(9分)醋酸菌和纖維素分解菌是工業(yè)中常用的微生物。請分析回答下列問題。(1)在和糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇氧化為,進而生成醋酸。
(2)為了從某細菌樣品中篩選出纖維素分解菌,可采用染色法進行篩選。如果樣品中細菌濃度較低,可以通過培養(yǎng)來增加纖維素分解菌的濃度,該過程所用的培養(yǎng)基為(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。為了純化纖維素分解菌,某同學采用平板劃線法進行接種,在做第二次以及其后的劃線操作時,應該從上一次劃線的開始劃線。為了避免環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應在附近進行。
(3)將菌種進行臨時保存時,可在低溫下使用試管斜面保存,但該方法除保存時間短外,菌種還易;若需較長時間保存菌種,可用的方法是。
答案(1)氧氣乙醛(2)剛果紅選擇液體末端酒精燈火焰(3)被污染或產生變異甘油管藏法23.(10分)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?;卮鹣铝袉栴}。(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由多種組分組成的復合酶,其中的葡萄糖苷酶可將分解成。
(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時,CR可與纖維素形成色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的。
(3)為了從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)。培養(yǎng)基酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水甲++++-++乙+++-+++注:“+”表示有,“-”表示無據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是;培養(yǎng)基乙(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是。
答案(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能培養(yǎng)基中的淀粉會干擾實驗,且液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素,不會形成CR-纖維素紅色復合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌解析(1)纖維素酶是復合酶,葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)CR可與纖維素形成紅色復合物。用含有CR及纖維素的培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,菌落存在部位的纖維素被分解,不會形成紅色復合物,因此培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌落為中心的透明圈。(3)培養(yǎng)基甲中有淀粉,纖維素不是主要的碳源,且無瓊脂,是液體培養(yǎng)基,不能用于分離和鑒別纖維素分解菌。培養(yǎng)基乙中無纖維素粉,即使出現(xiàn)單菌落,也不能確定為纖維素分解菌,所以不能用于分離和鑒別纖維素分解菌。24.(13分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題。(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。
(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應隨轉接次數(shù)增加而逐漸,以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集,應進一步,以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質外,還必須添加。
(3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。
(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應,下表中1~5號比色管的苯酚濃度應分別為。
管號123456苯酚濃度/(mg·L-1)1如果廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋(填序號:①5②10③20)倍后,再進行比色。
答案(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③解析(1)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質一般都包括水、無機鹽、碳源、氮源,蛋白胨和苯酚中含有碳元素,可作為碳源。(2)要富集該菌,應提高營養(yǎng)物質含量。若菌落過于密集,說明稀釋倍數(shù)不夠,應進一步稀釋,然后再涂布平板。制備固體培養(yǎng)基時需加入凝固劑瓊脂。(3)用平板劃線法接種菌體,隨劃線次數(shù)的增加,菌體數(shù)量逐漸減少,故③區(qū)域更易獲得單菌落。(4)題中已給出6號比色管中的苯酚濃度為1mg/L,根據(jù)濃度梯度的設計原則和空白對照原則,1~5號比色管中的苯酚濃度應依次為0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。廢水中苯酚的濃度為50mg/L,降解后約有21%的苯酚殘留,則降解后廢水中苯酚的濃度為50×21%=10.5(mg/L),因為比色管中苯酚的濃度范圍為0~1mg/L,若將降解后的廢水稀釋5倍或1
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