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醫(yī)院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程目錄第一節(jié)全自動血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程第四節(jié)半自動生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié)血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第六節(jié)尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第七節(jié)肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程第八節(jié)腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程第九節(jié)血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程第十節(jié)血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程第十一節(jié)凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程第十二節(jié)AB0血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程第一節(jié)全自動血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準(zhǔn)備開機(jī)前的檢查、準(zhǔn)備在開啟分析儀電源之前,操作者須按以下要求進(jìn)行檢查:檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足,有無過期;試劑管路是否彎折,連接是否可靠。1.1.2電源線是否正確連接。1.1.3廢液桶是否清空。UPS電是否足夠,打印紙安裝是否正確,是否足夠。確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。1.2.開機(jī)打開分析儀后面的電源開關(guān),電源指示燈亮,屏幕上顯示Initializing…122分析儀進(jìn)行初始化,整個初始化過程持續(xù)約47分鐘。初始化過程結(jié)束后,系統(tǒng)自動進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。1.3動物類型選擇按[菜單]鍵,移動光標(biāo),選擇“動物”,按[確認(rèn)]進(jìn)入“動物”界面。操作者根據(jù)測量的動物類型,選擇需要分析的動物類型。按[菜單]鍵,選擇“計(jì)數(shù)”,進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按[模式]鍵,將當(dāng)前模式設(shè)置為“全血”模式。確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒”,工作模式為“全血”將準(zhǔn)備好的全血樣本放到采樣針下,使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。按計(jì)數(shù)鍵,啟動樣本分析過程。此時,狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。采樣針自動吸取13ul的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開樣本。2.1.6分析完成后,按[F4]鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按[F9]鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下,按[F8]鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換,輸入樣本信息,輸入完成后,點(diǎn)擊“確認(rèn)”,保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。按[打?。萱I打印樣本分析報告。按照此操作過程進(jìn)行其余樣本的分析。2.2預(yù)稀釋樣本分析按[菜單]鍵,選擇“計(jì)數(shù)”,進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按[模式]鍵,將當(dāng)前模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”模式。按[稀釋]鍵,屏幕彈出“加稀釋液”對話框,取一個干凈的樣本杯放在采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中,避免產(chǎn)生氣泡或?yàn)R出。加完稀釋液后,按[確認(rèn)]鍵,“加稀釋液”對話框關(guān)閉,分析儀自動清洗采樣針。采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒”,工作模式為“預(yù)稀釋”。將準(zhǔn)備好的預(yù)稀釋樣本放到采樣針下,使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。按計(jì)數(shù)鍵,啟動樣本分析過程。此時,狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。采樣針自動吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開樣本。分析完成后,按[F4]鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按[F9]鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下,按[F8]鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換,輸入樣本信息,輸入完成后,點(diǎn)擊“確認(rèn)”,保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。按[打?。萱I打印樣本分析報告。按照此操作過程進(jìn)行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后按[菜單]鍵,彈出系統(tǒng)菜單,選擇“關(guān)機(jī)”。界面彈出“關(guān)機(jī)”對話框,點(diǎn)擊“確認(rèn)”進(jìn)入關(guān)機(jī)界面。將E-Z清洗液放到采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,采樣針將自動吸取E-Z清洗液,執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。按照界面提示信息,將E-Z清洗液放到采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,采樣針將再次自動吸取E-Z清洗液,執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。執(zhí)行完成后,界面提示“請關(guān)閉電源”是,關(guān)閉分析儀的電源開關(guān)。關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏,并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程本測試儀是一項(xiàng)精密儀器,為了更好的維護(hù)和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連,接通電源,先打開電腦,再打開分析儀;儀器啟動,風(fēng)扇轉(zhuǎn)動,推進(jìn)器移動,屏幕顯示“系統(tǒng)正在測試……”,此時系統(tǒng)正在自檢,顯示屏顯示主菜單,工作臺檢條區(qū)有紅色光交替閃爍,用戶可以開始測試點(diǎn)擊電腦桌面尿液分析軟件;將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出,將試紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液;將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū),確保試紙同工作臺前壁接觸;儀器檢測到試紙存在后,推進(jìn)器將試紙推到測試區(qū)進(jìn)行測試;當(dāng)推進(jìn)器退回原位,放下一條試紙……,這樣實(shí)現(xiàn)連續(xù)測試;當(dāng)工作臺上所有的試紙條測試完畢,打印結(jié)果輸出結(jié)束后,按菜單鍵進(jìn)入儀器設(shè)置,將電源開關(guān)撥到“斷(O)”位置,關(guān)閉儀器電源。二、儀器維護(hù)不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器;不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機(jī)溶劑擦拭儀器;不要用水清洗液晶屏,不要用任何會擦傷工作臺和白基準(zhǔn)的物質(zhì)擦拭工作臺;不要用任何溶劑清潔白基準(zhǔn),如果白基準(zhǔn)有明顯劃痕或損壞,請與供應(yīng)商聯(lián)系;用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器,保持儀器清潔;用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏;為使儀器正常運(yùn)行并提供準(zhǔn)確的測試結(jié)果,必須定期從儀器中取下推進(jìn)器、工作臺、步進(jìn)板、用清水沖洗,用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。三、注意事項(xiàng)測試時不要將儀器放置在陽光直射的地方,以免影響測試精度;請?jiān)跍y試前核對尿液分析試紙型號,避免因使用的尿液分析試紙型號不正確而導(dǎo)致測試結(jié)果錯誤;請勿使用過有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙;尿樣本中血的濃度高時,可影響測試的準(zhǔn)確性,儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出“結(jié)果無效”的提示;必須在推進(jìn)器動作前,將待測試紙條放好;在放置試紙條時應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺前壁;如果儀器測試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運(yùn)行受阻。關(guān)掉儀器,拉出工作臺,取出受阻試紙條后,重新安裝工作臺。開機(jī)自檢后,對未得出結(jié)果的樣本重測。第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作打開電源開關(guān)前的檢查。檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過低請用蒸餾水或去離子水將罐充滿。清空廢液瓶。管道連接檢查各種管線的連接。確保沒有管子脫落或扭結(jié),電源線被安全的插入交流插座。確保打印機(jī)中有足夠的紙張以供打印當(dāng)天所需處理的所有樣本結(jié)果。補(bǔ)充反應(yīng)杯丟棄用過的反應(yīng)杯,加入適量的干凈的反應(yīng)杯。打開電源開機(jī)順序:打印機(jī)f壓力單元f電源單元和主單元(右側(cè))。打開電源后,儀器自動進(jìn)入自檢。將病人樣本,質(zhì)控與試劑分別按要求準(zhǔn)備就緒,進(jìn)入分析過程:試劑準(zhǔn)備fSetReagentf輸入確認(rèn)試劑體積f補(bǔ)充反應(yīng)杯f安放樣本架1.3樣本分析:WorkListfIDNo.Entryf輸入樣本號fENTERf選擇所需檢測的項(xiàng)目(—變?yōu)镺),確認(rèn)所有的設(shè)置結(jié)束后fENTERf按屏幕右上方“Start”鍵,執(zhí)行分析。分析完畢,儀器進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài)。1.4關(guān)機(jī)前的工作每日清潔所有樣本針和試劑針:在主菜單屏上按下【Rinseprobe]鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【Excute】鍵。1.5關(guān)機(jī)關(guān)閉電源。2.儀器保養(yǎng)每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗(yàn)都必須清洗樣品針,主要是預(yù)防堵針,執(zhí)行[RinseProbe]f[Excute]清空垃圾箱清空廢液查看儀器后面防逆流瓶TrapChamber有無水,防止因?yàn)橛兴鴮?dǎo)致真空泵不能抽真空在洗液瓶中注蒸餾水,最高不要超過上面的凹槽,防止因水過滿,工作時水回流到壓力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。每周保養(yǎng)做一次管路清潔,執(zhí)行[SpecialOperate]f[Rinse&Prepare]清潔儀器2.4每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶內(nèi)部,清洗洗液瓶出水管上的過濾網(wǎng)一次。每三或六個月保養(yǎng)清潔傳動滑軌(X軸、Y軸)并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運(yùn)行不到位,向下扎錯位置造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié)半自動生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】開機(jī)之前檢查電源線是否連接無誤,電源要求接地良好;連接打印機(jī)電源線,接通打印機(jī)電源開關(guān);將廢液管插入廢液容器內(nèi);接通顯示器開關(guān)及主機(jī)背部電源開關(guān)。2開機(jī)f自檢后f鍵入Enter,確定已設(shè)定測試參數(shù)f鍵入Enter,進(jìn)入編制工作表-在設(shè)置欄,開啟聯(lián)機(jī)打印-儀器預(yù)熱20分鐘后,調(diào)用已設(shè)定測試項(xiàng)目進(jìn)行樣品測定f打印結(jié)果f清洗儀器f關(guān)機(jī)。吸液口由不銹鋼保護(hù)管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成,應(yīng)注意保護(hù),不要碰彎。切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?!緝x器的保養(yǎng)與維護(hù)】1.日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動比色皿,每天工作結(jié)束后,要用蒸餾水清洗。具體方法如下:將吸液管插入蒸餾水中,向上扳動吸液開關(guān),反復(fù)沖洗流動比色皿,直到蒸餾水的吸光度值正常為止。每周要用專門的清洗劑清洗一次流動比色皿,清洗時,讓清洗劑停留在比色皿中約半小時,然后排掉,再用蒸餾水沖洗干凈,最后注入蒸餾水。不使用儀器時,流動比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸餾水。更換打印機(jī)色帶時,嚴(yán)格遵照打印機(jī)操作手冊,避免不規(guī)范操作。光源燈更換時一定要先切斷儀器的電源,手不可觸摸光源燈的玻璃部分,萬一光源燈的玻璃部分弄臟了,可用無水乙醇將污物除去。更換的蠕動泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致,如不一致則要重新調(diào)整吸液量。第五節(jié)血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程【標(biāo)本】抗凝靜脈血(有些儀器也可用末梢血)?!痉椒ā垦杭?xì)胞自動分析儀測定法?!驹噭垦杭?xì)胞自動分析儀配套試劑?!静僮鳌吭斠娧杭?xì)胞自動分析儀使用手冊。【附注】血常規(guī)包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度、細(xì)胞比積血小板計(jì)數(shù)等項(xiàng)目。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)資料。半自動及全自動血液細(xì)胞分析儀從設(shè)計(jì)上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點(diǎn)為(1)靜脈血能正確地反映病人實(shí)際情況,重復(fù)性好;(2)利于延長儀器的使用壽命;(3)解決了采血盤的交叉感染問題等。血細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用EDTA?K2:為抗凝齊EDTA?K2?2H201.52.2mg可抗凝1ml血)。貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管??鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)不超過6h;如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)完成。5.測定前必須將EDTA?K2抗凝血充分混勻。6.血細(xì)胞分析儀測定最適溫度為1822C,氐于15C或高于30C,均可使細(xì)胞體積發(fā)生改變,影響各參數(shù)的結(jié)果。血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類只能當(dāng)作一種過篩手段,當(dāng)白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板的任何一項(xiàng)有明顯升高或降低;白細(xì)胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果(中間細(xì)胞群百分率》8.0%);紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況,須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié)尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程【標(biāo)本】新鮮尿液。【方法】化學(xué)試帶法?!驹圐R】各型號尿液化學(xué)分析儀配套試帶?!静僮鳌吭斠娔蛞夯瘜W(xué)分析儀使用手冊?!靖阶ⅰ磕虺R?guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀,目前能進(jìn)行810項(xiàng)檢測(PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細(xì)胞)。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)資料。必須了解所用試帶各膜塊注意事項(xiàng)、藥物干擾。要注意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果與手工法的差異,必要時用手工法復(fù)查。尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個過篩手段,當(dāng)?shù)鞍?、隱血、白細(xì)胞等出現(xiàn)異常結(jié)果(如尿蛋白“+”或以上)時,應(yīng)進(jìn)行鏡檢。尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應(yīng)報告。第七節(jié)肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程血清總膽紅素(TBIL)和結(jié)合膽紅素(DBIL)測定改良J~G法【試劑】參照書刊文獻(xiàn)(如《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第二版)自配,配制標(biāo)準(zhǔn)液的膽紅素應(yīng)符合如下標(biāo)準(zhǔn),純膽紅素的氯仿溶液在25C當(dāng)光徑1-000±O.OOICm,波長453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在60700±1600范圍內(nèi),偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380±866范圍內(nèi),配制標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋劑須含白蛋白,可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存,在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高?!静僮鳌堪丛噭┖姓f明書或相應(yīng)書刊文獻(xiàn)規(guī)程手工操作,比色測定,波長600nm制作準(zhǔn)曲線。血樣測定,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求TBIL及DBIL的含量以umo1/L報告。也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入,用自動生化分析儀測定。【標(biāo)本】血清,空腹血為宜,脂血、脂溶性色素及嚴(yán)重溶血干擾此測定,暫不能測定的標(biāo)本應(yīng)避光保存,室溫可穩(wěn)定8h,28C可保存48h。含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測定膽紅素。膽紅素氧化酶(BOD)法試劑】市售成套試劑。BOD試劑復(fù)溶后2~8C可保存一周?!静僮鳌堪磸S家提供的試劑及儀器說明書要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動生化分析儀測定。波長450或460nm?!緲?biāo)本】血清要求與改良J—G法相似。二甲亞楓(DMSO)法【試劑】市售現(xiàn)成試劑。【操作】按試劑盒說明書手工操作比色測定或用自動生化儀測定。波長560nm?!緲?biāo)本】血清、輕度脂血,溶血標(biāo)本對結(jié)果無明顯影響、重度脂血、溶血標(biāo)本須作標(biāo)本空白進(jìn)行較正。血氨測定【方法】酶兩點(diǎn)法?!驹噭渴惺鄢商自噭?。【操作】按試劑及儀器使用說明書要求,設(shè)入相應(yīng)的程序及各項(xiàng)參數(shù)、用自動生化分析儀測定。波長340nm?!緲?biāo)本】EDTA.Na2抗凝血漿。靜脈采血后與EDTA.Na2混勻,立即置冰水中盡快分離出血漿,加塞置2?4C保存,在2?3h內(nèi)分析,-20C可穩(wěn)定24ho溶血標(biāo)本第八節(jié)腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程尿素氮檢測目的:檢測血清、血漿或尿液中尿素的含量,為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果,以及對健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測提供重要的參考價值。標(biāo)本要求:2.1病人準(zhǔn)備:空腹12小時。2.2標(biāo)本類型:血清、肝素化的血漿或24小時尿。設(shè)備和試劑:儀器設(shè)備:邁瑞半自動生化分析儀3.2試劑材料:試劑3.3試劑的貯存:28C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。開蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定30天。變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值<1.000時,不能繼續(xù)使用。注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗,必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。試劑準(zhǔn)備:即開即用的,無需特殊準(zhǔn)備。操作步驟:見生化分析儀操作流程。5.質(zhì)量控制:5.1質(zhì)控物:RANDOX多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施:室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進(jìn)行。室間質(zhì)控:參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。干擾因素:總膽紅素w40mg/dL,血紅蛋白w450mg/dL,抗壞血酸w400mg/dL對本法無干擾。參考區(qū)間及可報區(qū)間:參考范圍:血清/血漿2.868.20mmol/L24小時尿1535g/24h7.2可報范圍:0.0035.00mmol/L。樣品Urea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。異常結(jié)果處理:結(jié)果異常、與臨床診斷不符,應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。肌酐1.檢測目的:檢測血清、血漿或尿液中肌酐的含量,為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果,以及對健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測提供重要的參考價值。標(biāo)本要求:3.1病人準(zhǔn)備:空腹12小時。3.2標(biāo)本類型:血清、肝素化的血漿或尿液。設(shè)備和試劑:4.1儀器設(shè)備:邁瑞半自動生化分析儀4.2試劑材料:試劑4.3試劑的貯存:28C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。4.3.2開蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定30天。變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值>0.050時,不能繼續(xù)使用。注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗,必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。試劑準(zhǔn)備:即開即用的,無需特殊準(zhǔn)備。5.操作步驟:見半自動生化分析儀操作流程。6.質(zhì)量控制:質(zhì)控物:RANDOX多項(xiàng)人基質(zhì)血清6.2質(zhì)控措施:室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進(jìn)行。室間質(zhì)控:參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評。7.干擾因素:直接膽紅素w257卩mol/L,血紅蛋白w0.5g/L,抗壞血酸w3mmol/L,甘油三酯w15.0mmol/L,肝素w50KU/L,枸櫞酸鈉w10g/L對本法無干擾。參考區(qū)間及可報區(qū)間:8.1參考范圍:血清/血漿53.0123.0卩mol/L(男性)44.0106.0卩mol/L(女性)首次晨尿153015320卩mol/L24小時尿6.615.0mmol/24h8.2可報范圍:0.08840.0卩mol/L。樣品Crea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。異常結(jié)果處理:結(jié)果異常、與臨床診斷不符,應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。危急值及處理方法:>177卩mol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。實(shí)驗(yàn)室解釋:增高:嚴(yán)重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低:營養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié)血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程標(biāo)本采集與處理1.受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣,近期體重穩(wěn)定無外傷,手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥,B-受體阻滯劑,免疫抑制劑,激素藥物等,則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測??崭钩檠琓G,脂蛋白,載脂蛋白測定應(yīng)至少禁食12小時(僅作膽固醇測定不必強(qiáng)求空腹)24小時內(nèi)不作劇烈運(yùn)動。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時止血帶使用不可超過1分鐘。3.標(biāo)本用血清,也可用肝素或EDTA.Na2抗凝之血漿。EDTA.Na2濃度不宜太高4.血標(biāo)本室溫放置不得超過3h,放置30~45分鐘后應(yīng)即時分離出血清(漿)蓋封於4C冰箱中可穩(wěn)定至少4天,如需長期保存,應(yīng)於-70C中冰凍存放,不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇(TC)測定酶法(CHOD~PAP法)試劑】市售現(xiàn)成試劑?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說明書要求設(shè)定程序,輸入?yún)?shù)用自動或半自動生化分析儀測定(速率法)終點(diǎn)法可手工操作,用普通分光光度計(jì)比色測定。波長500nm或520nm?!緲?biāo)本】血清(漿)參看本節(jié)的標(biāo)本采集與處理?!靖阶ⅰ勘痉橹腥A醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)學(xué)會推薦的TC測定常規(guī)方法(中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1995、18:185)。膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液以定值參考血清為宜,而不宜用Chol的水溶液作標(biāo)準(zhǔn)。Chol定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標(biāo)準(zhǔn)液。主要技術(shù)指標(biāo):終點(diǎn)法批內(nèi)CV<1.5%、批間CVW2.5%。靈敏度:顯色劑用酚時,TC5.2mmo1/L(200mg/dl)時的吸光度(A500nm)約0.30~0.35,故A500nm=0.005時TC濃度約為0.08mmo1/L(3mg/dL)。測定范圍:當(dāng)血清與試劑用量之比為1:100時其測定的上界為13mmo1/L(500ng/dL)。血清甘油三酯(TG)測定酶法(GPO~PAP法)【試劑】市售現(xiàn)成試劑。有兩種。一步酶法單一試劑,二步酶法雙試劑。標(biāo)準(zhǔn)液(參考物)一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液,也可用甘油,但甘油不適用於二步酶法?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說明書要求設(shè)定程序和參數(shù),用自動或半自動生化分析儀測定,終點(diǎn)法可用普通分光光度計(jì)手工操作,比色測定。波長500nm?!緲?biāo)本】血清(漿)參看本節(jié)標(biāo)本采集與處理?!靖阶ⅰ勘痉ㄔ诓僮鞒绦蛏戏譃橐徊矫阜ㄅc二步酶法,二步酶法為中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會的推薦方法(中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志1995、18:249)?,F(xiàn)階段允許二法并存,要求逐步過渡到統(tǒng)一采用二步酶法,在方法尚未統(tǒng)一前,實(shí)驗(yàn)室報告TG測定結(jié)果時應(yīng)注明“除FG值”或“未除FG值”。主要枝術(shù)指標(biāo):酶試劑用緩沖液配制后,20?25C應(yīng)穩(wěn)定1天,4C可穩(wěn)定3?7天,試劑空白為A500nm<0.05;顯色后穩(wěn)定》30min:測定上界11.3mmo1/L(100mg/dL);精密度:批內(nèi)CVW3%,批間CVw5%:靈敏度:2mmo1/LTGA500nm>0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測定磷鎢酸鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑,沉淀劑,酶試劑(同TG測定)。【操作】按試劑盒說明書操作。1.沉淀含apoB的脂蛋白。2?測定上清液(只含HDL)的膽固醇含量(方法同酶法TC測定)?!緲?biāo)本】血清(漿)。硫酸葡聚糖一鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑:總HDL試劑,HDL3試劑,酶試劑(同TC試劑)?!静僮鳌堪丛噭┱f明書操作:1沉淀含apoB的脂蛋白,(總HDL試劑);2?沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2(HDL3試劑);3?測定總HDL?C及HDL3?C(同酶法TC測定),并計(jì)算出HDL2?C量。標(biāo)本】血清(漿)血樣在室溫中不宜久放,應(yīng)即時測定,原則應(yīng)低溫保存。直接HDL~C測定法【試劑】市售專門的試劑,無沉淀劑。酶試劑同TC測定。(如日本第一化學(xué)藥品株式會社的產(chǎn)品)?!静僮鳌堪丛噭┖屑皟x器使用說明書要求設(shè)置程序,輸入?yún)?shù)直接用自動或半自動生化分析儀測定,無須沉淀離心分離出HDL步驟?!緲?biāo)本】血清(漿)。血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測定1Friedwald工式計(jì)算法:1)LDL-C=TC—HDL-C—TG/5(以mg/dl為單位計(jì));(2)LDL-C=TC—HDL-C—TG/2.2(以mmo1/L為單位計(jì));(3)只有當(dāng)血TGv4.52mmo/L結(jié)果才較準(zhǔn)確;(4)只有TC、TG、HDL-C三項(xiàng)測定都準(zhǔn)確且符合標(biāo)準(zhǔn)化要求時,才可計(jì)算出LDL-C的近似值。2.聚乙烯硫酸沉淀法【試劑】沉淀劑市售,酶試劑同TC測定。【操作】1.TC測定。2.選擇性沉淀血清中LDL,測定上清液之HDL-C與VLDL-C之和的量,(同TC測定)。3.計(jì)算出LDL-C的含量?!緲?biāo)本】血清。血清載脂蛋白A1(apoAl)測定免疫透射比濁法。波長340nm,本法批間CVV5%?!驹噭渴惺墼噭┖校噭?8C保存,不同批號試劑不能混合使用,抗血清效價不應(yīng)低於16?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說明書要求,設(shè)定程序和參數(shù)用自動生化分析儀測定,也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測定,或用含340nm的分光光度計(jì)手工操作測定?!緲?biāo)本】血清。血清載脂蛋白B(apoB)測定免疫透射比濁法。波長340nm,本法批間CVV5%?!驹噭渴惺墼噭?,2~8C保存,不同批號試劑不能混合使用,抗血清效價不應(yīng)低於1:128?!静僮鳌繀⒖碼poA1測定?!緲?biāo)本】血清。第十節(jié)血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程檢測目的:檢測血清或血漿中葡萄糖的含量,為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果,以及對健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測提供重要的參考價值。標(biāo)本要求:3.1病人準(zhǔn)備:空腹12小時。3.2標(biāo)本類型:血清或NaF抗凝的血漿。采血后及時分離,以避免血清或血漿中葡萄糖被細(xì)胞利用而降低。設(shè)備和試劑:4.1儀器設(shè)備:奧林巴斯AU600生化分析儀試劑材料:四川邁克公司試劑參與反應(yīng)成份:只1:酚(12.0mmol/L)R2:GOD(>35KU/L)、POD(>5KU/L)、4-AAP(1.20mmol/L)4.3試劑的貯存:28C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。4.3.2開蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定30天。4.3.3變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值>0.150時,不能繼續(xù)使4.4注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗,必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準(zhǔn)備:即開即用的,無需特殊準(zhǔn)備。5質(zhì)量控制:質(zhì)控物:RANDOX多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施:室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進(jìn)行。室間質(zhì)控:參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。參考區(qū)間及可報區(qū)間:參考范圍:空腹3.896.11mmol/L餐后1小時7.788.89mmol/L餐后2小時3.897.78mmol/L6.2可報范圍:0.0022.30mmol/L。樣品GLU含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)危急值及處理方法:<2.5mmol/L或>10mmol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié)凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程全血凝固時間檢驗(yàn)(CT)標(biāo)本】靜脈取血3ml。方法與操作】試管法、硅管法操作參見《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》【附第二版)注】第二版)靜脈取血要一針見血,盡量減少組織液和空氣混入水浴箱溫度要恒定,過高或過低,可影響結(jié)果?;罨糠帜蠲笗r間測定(APTT)【標(biāo)本】自靜脈取血,用109mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝?!驹噭渴惺鄢商自噭??!痉椒ㄅc操作】按試劑及有關(guān)儀器說明書要求進(jìn)行?!靖阶ⅰ?.標(biāo)本應(yīng)及時檢測,最遲不超過2h。2.分離血漿應(yīng)在3000r/min,離心10min。本試驗(yàn)較試管法全血凝血時間敏感,能檢出因子?。盒脱巡?。血漿凝血酶原時間測定(PT,—期法)【標(biāo)本】Cv25%靜脈血1?8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉0?2ml抗凝。'【試劑】
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