微生物及人員衛(wèi)生基本知識(shí)培訓(xùn)課件

微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)張明2016-04-22微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)張明1一、什么是微生物二、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)三、微生物的分布及特點(diǎn)四、微生物的益處與危害五、藥品微生物的控制六、滅菌方法主要內(nèi)容一、什么是微生物主要內(nèi)容2什么是微生物微生物是一類形體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、進(jìn)化低級(jí)、肉眼直接看不見或看不清，必須借助于顯微鏡才能觀察到的微小生物。它們對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求非常低。它們是一類繁殖非常快的生物。它們非常容易發(fā)生變異。它們無處不在。大多數(shù)微生物對(duì)人類有益。有些微生物對(duì)人類有害。

什么是微生物微生物是一類形體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、進(jìn)化低級(jí)、肉眼直3微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（一）細(xì)菌：是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛，主要有球狀、桿狀和螺旋狀三種形態(tài)。葡萄球菌棒狀桿菌螺旋菌微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（一）細(xì)菌：是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞4微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（二）真菌：是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（二）真菌：是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生5微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（三）病毒：屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質(zhì)。病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75％是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（三）6愛滋病病毒愛滋病病毒7微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（四）菌落形成單位（cfu）菌落：就是在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）以母細(xì)胞為中心而形成的一堆肉眼可見的，具有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)，常以cfu（菌落形成單位）為計(jì)數(shù)單位。微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（四）8微生物特點(diǎn)微生物分布廣種類多體積小繁殖快易變異代謝強(qiáng)微生物特點(diǎn)微生物分布廣種類多體積小繁殖快易變異代謝強(qiáng)9特征1.種類繁多

微生物的數(shù)量和種類是十分驚人的。一滴水，一顆土粒往往都是一個(gè)微生物“社會(huì)”。自然界已知的微生物就有10萬(wàn)種左右。有人估計(jì)，這個(gè)數(shù)僅占自然界微生物種類的1/10。特征1.種類繁多10特征以土壤內(nèi)的生存密度最大，1克較肥活的土壤常含有幾億到幾十億個(gè)微生物；貧瘠土壤每克也含有幾百萬(wàn)到幾千萬(wàn)個(gè)，一只骯臟的蒼蠅，全身能攜帶5億多個(gè)細(xì)菌，三對(duì)足能粘附700萬(wàn)至1000萬(wàn)個(gè)細(xì)菌，可見微生物的密集度之大。特征以土壤內(nèi)的生存密度最大，1克較肥活的土壤常含有幾億到幾十11特征2.分布廣泛

微生物是地球上分布最廣泛的一類生物。在遼闊的自然界中，無論土壤、水域、空氣以及動(dòng)物、植物、人體內(nèi)外都有大量微生物存在。從炎熱的赤道，到酷寒的極地；從陽(yáng)光強(qiáng)烈的萬(wàn)米高空，到終年不見陽(yáng)光的萬(wàn)米海底；從綠色無邊的平原，到荒蕪人煙的沙漠；從冰雪高山到泥濘沼澤，到處都有微生物的蹤跡。特征2.分布廣泛12特征3.繁殖迅速

微生物的繁殖速度也是同樣驚人的，比高等動(dòng)植物快得多，有些細(xì)菌，在適宜條件下每20分鐘就可以繁殖一次，例如大腸桿菌，1個(gè)細(xì)菌經(jīng)20分鐘就分裂成2個(gè)，每小時(shí)可分裂3次，這樣，1個(gè)細(xì)菌繁殖3代就產(chǎn)生8個(gè)細(xì)菌。特征3.繁殖迅速13特征1小時(shí)

=8個(gè)

2小時(shí)

8×23=64個(gè)

3小時(shí)

64×23=512個(gè)

4小時(shí)

512×23=4096個(gè)

24小時(shí)

1×2=4.7*10

2172特征1小時(shí)

=8個(gè)

2小時(shí)

14特征4.代謝旺盛物體分割得越細(xì)，其單位體積所占有的表面積值就越大。微生物的個(gè)體雖然微小，但卻有很大的表面積與體積的比值，能迅速地和周圍環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換。特征4.代謝旺盛15特征5.容易變異由于微生物的個(gè)體小，對(duì)外界環(huán)境條件直接接觸而表面特別敏感，因此，當(dāng)環(huán)境劇烈變化時(shí)，多數(shù)個(gè)體容易死亡而被淘汰，少數(shù)個(gè)體則發(fā)生變異而適應(yīng)新的環(huán)境。這種易變性，從利用微生物的角度講，既有利又不利。特征5.容易變異16微生物的作用絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的，有些還是必不可少的。微生物已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè)，發(fā)揮了越來越重要的作用?？股?、酸奶、疫苗、酒類等等；微生物的作用絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的，有些還是必不可17微生物的危害微生物中也有一部分能引起人或動(dòng)植物病害，這些具有治病性的微生物，稱為病原微生物。如人類的許多傳染?。ㄈ绺忻啊?、痢疾、結(jié)核、脊髄灰質(zhì)炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。從藥品生產(chǎn)的衛(wèi)生學(xué)而言，微生物對(duì)藥品原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格、直接或間接對(duì)人類造成危害的重要因素。

微生物的危害微生物中也有一部分能引起人或動(dòng)植物病害，這些具有18藥品微生物的控制為什么要對(duì)藥品生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？（1）有些微生物可以致病。（2）微生物對(duì)藥物的影響藥物物理形狀的改變：藥物的物理形狀可因染菌而

改變。藥物化學(xué)成份的變化。造成藥品的污染和交叉污染。藥品微生物的控制為什么要對(duì)藥品生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？19潔凈車間內(nèi)微生物在哪里？空氣表面水設(shè)備原輔料人潔凈車間內(nèi)微生物在哪里？20污染介質(zhì)（一）潔凈區(qū)的主要污染源：空氣由于人們的生產(chǎn)和生活活動(dòng)，使空氣中存在某些微生物，包括一些病原微生物，使其附著于空氣中的塵埃、飛沫上進(jìn)入人體或藥品而引起疾病和污染。潔凈度測(cè)定包括：懸浮粒子微生物-浮游菌-沉降菌-表面微生物污染介質(zhì)（一）潔凈區(qū)的主要污染源：空氣21污染介質(zhì)（一）懸浮粒子：泛指懸浮在氣體當(dāng)中的微細(xì)固體或液體粒子（直徑小于100μm的顆粒物）。在環(huán)境科學(xué)中，懸浮粒子特指懸浮在空氣當(dāng)中的微細(xì)污染物，為空氣污染的其中一個(gè)主要來源。懸浮粒子計(jì)數(shù)器污染介質(zhì)（一）懸浮粒子：懸浮粒子計(jì)數(shù)器22污染介質(zhì)（一）微生物沉降菌：是收集到的活微生物粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適宜的生長(zhǎng)條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。本測(cè)試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。污染介質(zhì)（一）微生物23污染介質(zhì)（一）浮游菌：即懸浮在空氣中的活微生物粒子。本測(cè)試方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過收集懸浮在空氣中的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長(zhǎng)條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評(píng)定潔凈室(區(qū))的潔凈度。浮游菌采樣器污染介質(zhì)（一）浮游菌：即懸浮在空氣中的活微生物粒子。浮游菌24污染介質(zhì)（一）10版GMP污染介質(zhì)（一）10版GMP25污染介質(zhì)（二）表面微生物：包括設(shè)備、車間、人員、包裝材料等表面微生物。本測(cè)試方法采用接觸碟法和棉簽擦拭法。棉簽接觸碟污染介質(zhì)（二）表面微生物：包括設(shè)備、車間、人員、包裝材料等表26污染介質(zhì)（三）潔凈區(qū)的主要污染源：水工藝用水在制藥企業(yè)防止污染及作為制藥用水方面至關(guān)重要。因?yàn)樗粌H作為產(chǎn)品的一個(gè)成分，而且需用其洗滌或冷卻。藥品的微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)在于工藝用水，因?yàn)樗俏⑸锷L(zhǎng)代謝的一個(gè)必要成分。

措施：對(duì)工藝用水系統(tǒng)采用濕熱滅菌。污染介質(zhì)（三）潔凈區(qū)的主要污染源：水27污染介質(zhì)（四）潔凈區(qū)主要的污染源：設(shè)備幾乎沒有細(xì)菌不“吃”的東西，設(shè)備表面、容器內(nèi)外表面等，都可能是微生物寄存的地方。設(shè)備和器具與藥品直接接觸

設(shè)備和器具的清洗清潔程序必須經(jīng)過驗(yàn)證按清洗周期清洗清洗和存放設(shè)備、器具處應(yīng)與生產(chǎn)區(qū)域潔凈等級(jí)相同污染介質(zhì)（四）潔凈區(qū)主要的污染源：設(shè)備28污染介質(zhì)（五）潔凈區(qū)的主要污染源：原輔料原輔料可能將大量的微生物帶入到藥物制劑中。因此，選用符合標(biāo)準(zhǔn)的原輔料，將有助于控制藥品和環(huán)境的污染水平。措施：原輔料在貯藏過程中必須注意環(huán)境條件；清潔或消毒處理，進(jìn)行合理封裝。

污染介質(zhì)（五）潔凈區(qū)的主要污染源：原輔料29污染介質(zhì)（六）潔凈區(qū)的主要污染源：人員人體散發(fā)的塵粒數(shù)（萬(wàn)個(gè)/每分鐘）:

1050100-250污染介質(zhì)（六）潔凈區(qū)的主要污染源：人員1050100-25030污染介質(zhì)（六）人員不良行為所產(chǎn)生的污染:當(dāng)有如下行為時(shí)將相應(yīng)增加微粒的產(chǎn)生量:吸煙者的呼吸500%噴嚏2000%搓手200%行走200%跺腳5000%靜止時(shí)散發(fā)的塵粒數(shù)最少。污染介質(zhì)（六）人員不良行為所產(chǎn)生的污染:31在潔凈室內(nèi)當(dāng)操作人員穿無菌服時(shí)發(fā)菌量：在潔凈室內(nèi)當(dāng)操作人員穿無菌服時(shí)發(fā)菌量：32微生物的污染途徑自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染。接觸污染：由于和非無菌的用具、器械或人的接觸而污染。空氣污染：由于空氣中所含微生物的沉降、附著或被吸入而污染。其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染。微生物的污染途徑自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染33微生物的控制控制微生物污染的措施事前控制（1）人員條件：體檢（直接接觸藥品人員每年至少體檢一次，傳染病患者，體表有傷口者，皮膚病患者、藥物過敏者不得從事直接接觸藥品生產(chǎn)）、人員培訓(xùn)；（2）生產(chǎn)過程風(fēng)險(xiǎn)分析與評(píng)估；（3）過程設(shè)計(jì)：滅菌工藝設(shè)計(jì)、工藝審查；（4）檢驗(yàn)方法：設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)室控制；（5）設(shè)施、設(shè)備設(shè)計(jì)、安裝與驗(yàn)證：潔凈等級(jí)、在線清洗與滅菌裝置、驗(yàn)證（工藝、公用系統(tǒng)、檢驗(yàn)方法驗(yàn)證）；微生物的控制控制微生物污染的措施34微生物的控制事中控制（1）人員衛(wèi)生a.衛(wèi)生習(xí)慣在生產(chǎn)區(qū)內(nèi)做到三個(gè)嚴(yán)禁：禁止吃東西、禁止喧嘩、禁止吸煙。勤洗手；不得戴手表、飾品和化妝；b.人員著裝人員進(jìn)入潔凈區(qū)嚴(yán)格按照SOP（正確的更衣、洗手、消毒程序）來執(zhí)行，盡量避免人為帶入污染；c.口罩按要求帶好口罩，口罩要遮住口、鼻；口罩要經(jīng)常清洗、消毒或換新；盡量使用一次性性口罩；微生物的控制事中控制35微生物的控制（2）工藝衛(wèi)生按工藝要求進(jìn)行消毒、滅菌；控制進(jìn)入潔凈區(qū)的人數(shù)，包括進(jìn)入房間的人數(shù)。（3）環(huán)境衛(wèi)生定期做好壓差、溫濕度、風(fēng)速、塵埃粒子、沉降菌、浮游菌等空氣凈化潔凈度的監(jiān)測(cè)。有效地阻止室外的污染侵入室內(nèi)。（空氣過濾、壓差）迅速有效地排除潔凈區(qū)內(nèi)已發(fā)生的污染。[滅菌（濕熱滅菌：衣服）、清潔、消毒（甲醛消毒最徹底，臭氧和紫外輔助）]控制污染源，減少污染發(fā)生量（人、物）。微生物的控制（2）工藝衛(wèi)生36微生物的控制（4）物料制定合理的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，購(gòu)進(jìn)物料必須符合質(zhì)量要求；按規(guī)定取樣，取樣過程不得污染物料；做好物料微生物檢驗(yàn)；（5）質(zhì)量控制與記錄：嚴(yán)格按清潔操作規(guī)程操作、做好清潔記錄；（6）包裝、儲(chǔ)存和運(yùn)輸要有適宜的儲(chǔ)存條件，防止儲(chǔ)存過程質(zhì)變或外界污染，物料包裝要密封；進(jìn)入潔凈區(qū)的物料要脫包或消毒處理；運(yùn)輸過程確保產(chǎn)品受到污染；微生物的控制（4）物料37微生物的控制事后控制（1）質(zhì)量調(diào)查；（2）污染菌種的判定；（3）污染產(chǎn)品處理。微生物的控制事后控制38滅菌方法滅菌法是指殺死或除去所有微生物及其芽孢的方法。一般可分為物理滅菌法和化學(xué)滅菌法。物理滅菌法：指采用加熱、過濾、照射等物理手段達(dá)到滅菌目的的方法。滅菌方法滅菌法是指殺死或除去所有微生物及其芽孢的方法。一般可39滅菌方法1.1加熱滅菌法

加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸，導(dǎo)致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下，濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時(shí)，有水分存在，蛋白質(zhì)容易變性。水分又易使微生物膜壁潤(rùn)濕，濕熱的穿透力比干熱大。滅菌方法1.1加熱滅菌法

加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸40滅菌方法1.2濾過除菌法

系指使藥液通過除菌濾器中的適宜濾材，機(jī)械濾除（阻擋）活的或死的細(xì)菌，而得到不含細(xì)菌藥液的方法。主要用于對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水的除菌。供滅菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液順暢地由濾器通過，濾液中不落入任何不需要的物質(zhì)，濾器容易清洗，操作簡(jiǎn)便。

滅菌方法1.2濾過除菌法

系指使藥液通過除菌濾器中的適宜濾材41滅菌方法1.3紫外線滅菌法

是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長(zhǎng)是200~300nm，滅菌力最強(qiáng)的波長(zhǎng)是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性，同時(shí)空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。滅菌方法1.3紫外線滅菌法

是指用紫外線照射殺滅微生物的方法42滅菌方法2.化學(xué)滅菌法：指用化學(xué)藥品殺滅微生物的方法。同一種化學(xué)藥品的低濃度時(shí)呈現(xiàn)抑菌作用，而在高濃度時(shí)則能起殺菌作用。殺菌機(jī)理：能使微生物蛋白質(zhì)變性死亡，或與酶系統(tǒng)結(jié)合影響代謝，或改變膜壁通透性使微生物死亡等。常用的方法有消毒劑消毒法和化學(xué)氣體滅菌法等。

滅菌方法2.化學(xué)滅菌法：指用化學(xué)藥品殺滅微生物的方法。43滅菌方法2.1消毒劑消毒法

消毒是指殺死病原微生物的方法?；瘜W(xué)消毒劑大多僅能殺死微生物的繁殖體而不能殺死芽孢，能控制一定范圍的無菌狀態(tài)?？蓪⑾緞┡涑蛇m宜濃度，采用噴淋、涂擦或浸泡等方法對(duì)物料、環(huán)境、器具等進(jìn)行消毒。滅菌方法2.1消毒劑消毒法

消毒是指殺死病原微生物的方法。44滅菌方法常用的化學(xué)消毒劑有0.1%～0.2%苯扎溴銨溶液、0.1%～0.2%新潔爾滅溶液、75%乙醇等。注意：a.濃度不要過高，以防止化學(xué)腐蝕作用。b.潔凈室的墻面、天花板、門窗、機(jī)器設(shè)備、儀器、操作臺(tái)、車、桌、椅等表面以及人體雙手（手套）在環(huán)境驗(yàn)證及日常生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)定期清潔并用消毒劑噴灑。滅菌方法常用的化學(xué)消毒劑有0.1%～0.2%苯扎溴銨溶液、045滅菌方法2.2化學(xué)氣體滅菌法

系指利用化學(xué)藥品的氣體或產(chǎn)生的蒸汽進(jìn)行殺滅微生物的方法。a.甲醛等蒸汽熏蒸法

采用甲醛、丙二醇或過氧醋酸等化學(xué)品，通過加熱產(chǎn)生蒸汽進(jìn)行空氣環(huán)境滅菌。滅菌方法2.2化學(xué)氣體滅菌法

系指利用化學(xué)藥品的氣體或產(chǎn)生的46滅菌方法b.臭氧消毒法

臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O2）和單個(gè)氧原子（O），后者具有很強(qiáng)的活性，對(duì)細(xì)菌有極強(qiáng)的氧化作用，臭氧氧化分解了細(xì)菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將其殺死。多余的氧原子則會(huì)自行重新結(jié)合成為普遍氧分子（O2），不存在任何有害殘留物，故稱為無污染消毒劑。對(duì)種種細(xì)菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強(qiáng)的殺滅能力，而且對(duì)霉菌也很有效。滅菌方法b.臭氧消毒法

臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常溫47滅菌方法c.環(huán)氧乙烷滅菌法

環(huán)氧乙烷滅菌法是利用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行殺菌的方法。它是一種傳統(tǒng)的滅菌方法，可應(yīng)用于工衣滅菌、不耐加熱滅菌的藥品、醫(yī)用器具、設(shè)施、設(shè)備等的滅菌。滅菌方法c.環(huán)氧乙烷滅菌法

48日常工作生產(chǎn)前開啟紫外燈滅菌；生產(chǎn)結(jié)束后崗位人員的工作：徹底清潔生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)和設(shè)備表面；生產(chǎn)結(jié)束后滅菌人員的工作：用消毒劑擦拭頂（包括高效送風(fēng)口）、墻壁、地面等，并開啟紫外燈；每月定期進(jìn)行一次大消毒。日常工作生產(chǎn)前開啟紫外燈滅菌；49微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)張明2016-04-22微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)張明50一、什么是微生物二、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)三、微生物的分布及特點(diǎn)四、微生物的益處與危害五、藥品微生物的控制六、滅菌方法主要內(nèi)容一、什么是微生物主要內(nèi)容51什么是微生物微生物是一類形體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、進(jìn)化低級(jí)、肉眼直接看不見或看不清，必須借助于顯微鏡才能觀察到的微小生物。它們對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求非常低。它們是一類繁殖非?？斓纳?。它們非常容易發(fā)生變異。它們無處不在。大多數(shù)微生物對(duì)人類有益。有些微生物對(duì)人類有害。

什么是微生物微生物是一類形體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、進(jìn)化低級(jí)、肉眼直52微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（一）細(xì)菌：是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛，主要有球狀、桿狀和螺旋狀三種形態(tài)。葡萄球菌棒狀桿菌螺旋菌微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（一）細(xì)菌：是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞53微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（二）真菌：是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（二）真菌：是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生54微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（三）病毒：屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質(zhì)。病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75％是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（三）55愛滋病病毒愛滋病病毒56微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（四）菌落形成單位（cfu）菌落：就是在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）以母細(xì)胞為中心而形成的一堆肉眼可見的，具有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)，常以cfu（菌落形成單位）為計(jì)數(shù)單位。微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（四）57微生物特點(diǎn)微生物分布廣種類多體積小繁殖快易變異代謝強(qiáng)微生物特點(diǎn)微生物分布廣種類多體積小繁殖快易變異代謝強(qiáng)58特征1.種類繁多

微生物的數(shù)量和種類是十分驚人的。一滴水，一顆土粒往往都是一個(gè)微生物“社會(huì)”。自然界已知的微生物就有10萬(wàn)種左右。有人估計(jì)，這個(gè)數(shù)僅占自然界微生物種類的1/10。特征1.種類繁多59特征以土壤內(nèi)的生存密度最大，1克較肥活的土壤常含有幾億到幾十億個(gè)微生物；貧瘠土壤每克也含有幾百萬(wàn)到幾千萬(wàn)個(gè)，一只骯臟的蒼蠅，全身能攜帶5億多個(gè)細(xì)菌，三對(duì)足能粘附700萬(wàn)至1000萬(wàn)個(gè)細(xì)菌，可見微生物的密集度之大。特征以土壤內(nèi)的生存密度最大，1克較肥活的土壤常含有幾億到幾十60特征2.分布廣泛

微生物是地球上分布最廣泛的一類生物。在遼闊的自然界中，無論土壤、水域、空氣以及動(dòng)物、植物、人體內(nèi)外都有大量微生物存在。從炎熱的赤道，到酷寒的極地；從陽(yáng)光強(qiáng)烈的萬(wàn)米高空，到終年不見陽(yáng)光的萬(wàn)米海底；從綠色無邊的平原，到荒蕪人煙的沙漠；從冰雪高山到泥濘沼澤，到處都有微生物的蹤跡。特征2.分布廣泛61特征3.繁殖迅速

微生物的繁殖速度也是同樣驚人的，比高等動(dòng)植物快得多，有些細(xì)菌，在適宜條件下每20分鐘就可以繁殖一次，例如大腸桿菌，1個(gè)細(xì)菌經(jīng)20分鐘就分裂成2個(gè)，每小時(shí)可分裂3次，這樣，1個(gè)細(xì)菌繁殖3代就產(chǎn)生8個(gè)細(xì)菌。特征3.繁殖迅速62特征1小時(shí)

=8個(gè)

2小時(shí)

8×23=64個(gè)

3小時(shí)

64×23=512個(gè)

4小時(shí)

512×23=4096個(gè)

24小時(shí)

1×2=4.7*10

2172特征1小時(shí)

=8個(gè)

2小時(shí)

63特征4.代謝旺盛物體分割得越細(xì)，其單位體積所占有的表面積值就越大。微生物的個(gè)體雖然微小，但卻有很大的表面積與體積的比值，能迅速地和周圍環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換。特征4.代謝旺盛64特征5.容易變異由于微生物的個(gè)體小，對(duì)外界環(huán)境條件直接接觸而表面特別敏感，因此，當(dāng)環(huán)境劇烈變化時(shí)，多數(shù)個(gè)體容易死亡而被淘汰，少數(shù)個(gè)體則發(fā)生變異而適應(yīng)新的環(huán)境。這種易變性，從利用微生物的角度講，既有利又不利。特征5.容易變異65微生物的作用絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的，有些還是必不可少的。微生物已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè)，發(fā)揮了越來越重要的作用?？股?、酸奶、疫苗、酒類等等；微生物的作用絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的，有些還是必不可66微生物的危害微生物中也有一部分能引起人或動(dòng)植物病害，這些具有治病性的微生物，稱為病原微生物。如人類的許多傳染?。ㄈ绺忻?、傷寒、痢疾、結(jié)核、脊髄灰質(zhì)炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。從藥品生產(chǎn)的衛(wèi)生學(xué)而言，微生物對(duì)藥品原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格、直接或間接對(duì)人類造成危害的重要因素。

微生物的危害微生物中也有一部分能引起人或動(dòng)植物病害，這些具有67藥品微生物的控制為什么要對(duì)藥品生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？（1）有些微生物可以致病。（2）微生物對(duì)藥物的影響藥物物理形狀的改變：藥物的物理形狀可因染菌而

改變。藥物化學(xué)成份的變化。造成藥品的污染和交叉污染。藥品微生物的控制為什么要對(duì)藥品生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？68潔凈車間內(nèi)微生物在哪里？空氣表面水設(shè)備原輔料人潔凈車間內(nèi)微生物在哪里？69污染介質(zhì)（一）潔凈區(qū)的主要污染源：空氣由于人們的生產(chǎn)和生活活動(dòng)，使空氣中存在某些微生物，包括一些病原微生物，使其附著于空氣中的塵埃、飛沫上進(jìn)入人體或藥品而引起疾病和污染。潔凈度測(cè)定包括：懸浮粒子微生物-浮游菌-沉降菌-表面微生物污染介質(zhì)（一）潔凈區(qū)的主要污染源：空氣70污染介質(zhì)（一）懸浮粒子：泛指懸浮在氣體當(dāng)中的微細(xì)固體或液體粒子（直徑小于100μm的顆粒物）。在環(huán)境科學(xué)中，懸浮粒子特指懸浮在空氣當(dāng)中的微細(xì)污染物，為空氣污染的其中一個(gè)主要來源。懸浮粒子計(jì)數(shù)器污染介質(zhì)（一）懸浮粒子：懸浮粒子計(jì)數(shù)器71污染介質(zhì)（一）微生物沉降菌：是收集到的活微生物粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適宜的生長(zhǎng)條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。本測(cè)試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。污染介質(zhì)（一）微生物72污染介質(zhì)（一）浮游菌：即懸浮在空氣中的活微生物粒子。本測(cè)試方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過收集懸浮在空氣中的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長(zhǎng)條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評(píng)定潔凈室(區(qū))的潔凈度。浮游菌采樣器污染介質(zhì)（一）浮游菌：即懸浮在空氣中的活微生物粒子。浮游菌73污染介質(zhì)（一）10版GMP污染介質(zhì)（一）10版GMP74污染介質(zhì)（二）表面微生物：包括設(shè)備、車間、人員、包裝材料等表面微生物。本測(cè)試方法采用接觸碟法和棉簽擦拭法。棉簽接觸碟污染介質(zhì)（二）表面微生物：包括設(shè)備、車間、人員、包裝材料等表75污染介質(zhì)（三）潔凈區(qū)的主要污染源：水工藝用水在制藥企業(yè)防止污染及作為制藥用水方面至關(guān)重要。因?yàn)樗粌H作為產(chǎn)品的一個(gè)成分，而且需用其洗滌或冷卻。藥品的微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)在于工藝用水，因?yàn)樗俏⑸锷L(zhǎng)代謝的一個(gè)必要成分。

措施：對(duì)工藝用水系統(tǒng)采用濕熱滅菌。污染介質(zhì)（三）潔凈區(qū)的主要污染源：水76污染介質(zhì)（四）潔凈區(qū)主要的污染源：設(shè)備幾乎沒有細(xì)菌不“吃”的東西，設(shè)備表面、容器內(nèi)外表面等，都可能是微生物寄存的地方。設(shè)備和器具與藥品直接接觸

設(shè)備和器具的清洗清潔程序必須經(jīng)過驗(yàn)證按清洗周期清洗清洗和存放設(shè)備、器具處應(yīng)與生產(chǎn)區(qū)域潔凈等級(jí)相同污染介質(zhì)（四）潔凈區(qū)主要的污染源：設(shè)備77污染介質(zhì)（五）潔凈區(qū)的主要污染源：原輔料原輔料可能將大量的微生物帶入到藥物制劑中。因此，選用符合標(biāo)準(zhǔn)的原輔料，將有助于控制藥品和環(huán)境的污染水平。措施：原輔料在貯藏過程中必須注意環(huán)境條件；清潔或消毒處理，進(jìn)行合理封裝。

污染介質(zhì)（五）潔凈區(qū)的主要污染源：原輔料78污染介質(zhì)（六）潔凈區(qū)的主要污染源：人員人體散發(fā)的塵粒數(shù)（萬(wàn)個(gè)/每分鐘）:

1050100-250污染介質(zhì)（六）潔凈區(qū)的主要污染源：人員1050100-25079污染介質(zhì)（六）人員不良行為所產(chǎn)生的污染:當(dāng)有如下行為時(shí)將相應(yīng)增加微粒的產(chǎn)生量:吸煙者的呼吸500%噴嚏2000%搓手200%行走200%跺腳5000%靜止時(shí)散發(fā)的塵粒數(shù)最少。污染介質(zhì)（六）人員不良行為所產(chǎn)生的污染:80在潔凈室內(nèi)當(dāng)操作人員穿無菌服時(shí)發(fā)菌量：在潔凈室內(nèi)當(dāng)操作人員穿無菌服時(shí)發(fā)菌量：81微生物的污染途徑自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染。接觸污染：由于和非無菌的用具、器械或人的接觸而污染?？諝馕廴荆河捎诳諝庵兴⑸锏某两?、附著或被吸入而污染。其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染。微生物的污染途徑自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染82微生物的控制控制微生物污染的措施事前控制（1）人員條件：體檢（直接接觸藥品人員每年至少體檢一次，傳染病患者，體表有傷口者，皮膚病患者、藥物過敏者不得從事直接接觸藥品生產(chǎn)）、人員培訓(xùn)；（2）生產(chǎn)過程風(fēng)險(xiǎn)分析與評(píng)估；（3）過程設(shè)計(jì)：滅菌工藝設(shè)計(jì)、工藝審查；（4）檢驗(yàn)方法：設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)室控制；（5）設(shè)施、設(shè)備設(shè)計(jì)、安裝與驗(yàn)證：潔凈等級(jí)、在線清洗與滅菌裝置、驗(yàn)證（工藝、公用系統(tǒng)、檢驗(yàn)方法驗(yàn)證）；微生物的控制控制微生物污染的措施83微生物的控制事中控制（1）人員衛(wèi)生a.衛(wèi)生習(xí)慣在生產(chǎn)區(qū)內(nèi)做到三個(gè)嚴(yán)禁：禁止吃東西、禁止喧嘩、禁止吸煙。勤洗手；不得戴手表、飾品和化妝；b.人員著裝人員進(jìn)入潔凈區(qū)嚴(yán)格按照SOP（正確的更衣、洗手、消毒程序）來執(zhí)行，盡量避免人為帶入污染；c.口罩按要求帶好口罩，口罩要遮住口、鼻；口罩要經(jīng)常清洗、消毒或換新；盡量使用一次性性口罩；微生物的控制事中控制84微生物的控制（2）工藝衛(wèi)生按工藝要求進(jìn)行消毒、滅菌；控制進(jìn)入潔凈區(qū)的人數(shù)，包括進(jìn)入房間的人數(shù)。（3）環(huán)境衛(wèi)生定期做好壓差、溫濕度、風(fēng)速、塵埃粒子、沉降菌、浮游菌等空氣凈化潔凈度的監(jiān)測(cè)。有效地阻止室外的污染侵入室內(nèi)。（空氣過濾、壓差）迅速有效地排除潔凈區(qū)內(nèi)已發(fā)生的污染。[滅菌（濕熱滅菌：衣服）、清潔、消毒（甲醛消毒最徹底，臭氧和紫外輔助）]控制污染源，減少污染發(fā)生量（人、物）。微生物的控制（2）工藝衛(wèi)生85微生物的控制（4）物料制定合理的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，購(gòu)進(jìn)物料必須符合質(zhì)量要求；按規(guī)定取樣，取樣過程不得污染物料；做好物料微生物檢驗(yàn)；（5）質(zhì)量控制與記錄：嚴(yán)格按清潔操作規(guī)程操作、做好清潔記錄；（6）包裝、儲(chǔ)存和運(yùn)輸要有適宜的儲(chǔ)存條件，防止儲(chǔ)存過程質(zhì)變或外界污染，物料包裝要密封；進(jìn)入潔凈區(qū)的物料要脫包或消毒處理；運(yùn)輸過程確保產(chǎn)品受到污染；微生物的控制（4）物料86微生物的控制事后控制（1）質(zhì)量調(diào)查；（2）污染菌種的判定；（3）污染產(chǎn)品處理。微生物的控制事后控制87滅菌方法滅菌法是指殺死或除去所有微生物及其芽孢的方法。一般可分為物理滅菌法和化學(xué)滅菌法。物理滅菌法：指采用加熱、過濾、照射等物理手段達(dá)到滅菌目的的方法。滅菌方法滅菌法是指殺死或除去所有微生物及其芽孢的方法。一般可88滅菌方法1.1加熱滅菌法

加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸，導(dǎo)致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下，濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時(shí)，有水分存在，蛋白質(zhì)容易變性。水分又易使微生物膜壁潤(rùn)濕，濕熱的穿透力比干熱大。滅菌方法1.1加熱滅菌法

加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸89滅菌方法1.2濾過除菌法

系指使藥液通過除菌濾器中的適宜濾材，機(jī)械濾除（阻擋）活的或死的細(xì)菌，而得到不含細(xì)菌藥液的方法。主要用于對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水的除菌。供滅菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液順暢地由濾器通過