細(xì)菌與噬菌體的遺傳重組分析

關(guān)于細(xì)菌與噬菌體的遺傳重組分析第1頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五

細(xì)菌和病毒在遺傳研究中的優(yōu)越性第2頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五

第3頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五

第4頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五第一節(jié)細(xì)菌的遺傳分析一、細(xì)菌遺傳的研究方法二、遺傳分析轉(zhuǎn)化（Transformation）接合（Conjunction）性導(dǎo)（Sexduction）轉(zhuǎn)導(dǎo)（Transduction）第5頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五一、細(xì)菌遺傳的研究方法

理化誘變：1、合成代謝功能的突變型（營養(yǎng)缺陷型）：

ade＋ade－

his

＋his－2、分解代謝功能的突變型：

lac＋lac－（乳糖）gal＋gal－（半乳糖）3、抗性突變型：3.1抗藥性：str＋str－(鏈霉素)azi＋azi－(疊氮化物)3.2抗噬菌體：T2s(+)T2r(-)tonAs

tonAr

(T1)第6頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五第7頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五細(xì)菌生活條件：基本培養(yǎng)基（BasalMedium）：無機(jī)鹽：SO42-、NO3-、

Ca2+、Mg2+

糖：葡萄糖、蔗糖維生素：生物素、Vbs

僅能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養(yǎng)基

完全培養(yǎng)基：

BM＋全部營養(yǎng)物質(zhì)凡可滿足一切營養(yǎng)缺陷型菌株?duì)I養(yǎng)需要的天然或者半天然培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基：

凡是只能滿足相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型生長需要的組合培養(yǎng)基原養(yǎng)型、營養(yǎng)突變型、條件致死突變型p206

第8頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五

試驗(yàn)方法：

Lederbergetal.1952

第9頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五二、遺傳分析（1）發(fā)現(xiàn)：

1928，Griffith：肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)

1944，Avery：轉(zhuǎn)化子－DNA

轉(zhuǎn)化是細(xì)菌基因重組的方法之一。（2）概念：

細(xì)菌吸附游離態(tài)的外源雙鏈DNA，將單鏈DNA分子吸收進(jìn)入細(xì)胞后，不經(jīng)過復(fù)制整合到細(xì)菌染色體中，并發(fā)生遺傳重組的過程。

1、轉(zhuǎn)化（Transformation）p213第10頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（3）轉(zhuǎn)化DNA（轉(zhuǎn)化子）的特點(diǎn)：

a.DNA濃度與轉(zhuǎn)化子數(shù)目的關(guān)系飽和：50/cell,原因：在細(xì)菌的細(xì)胞壁或細(xì)胞膜上有固定數(shù)量的DNA接受座位，故一般細(xì)菌攝取的DNA分子數(shù)小于10個(gè)。

b.DNA片段大?。翰荒芴。悍窝纂p球菌轉(zhuǎn)化：DNA片斷至少有800個(gè)堿基對；枯草桿菌的轉(zhuǎn)化：DNA片斷至少有16000個(gè)堿基對。

c.雙鏈吸附：單鏈DNA不被轉(zhuǎn)化

d.單鏈進(jìn)入細(xì)菌。DNA濃度轉(zhuǎn)化子數(shù)目第11頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（4）受體細(xì)胞的特點(diǎn)

a.感受態(tài)：

DNA合成剛剛停止、蛋白質(zhì)合成繼續(xù)活躍，活躍合成的蛋白質(zhì)可使細(xì)菌細(xì)胞壁易于接受轉(zhuǎn)化DNA。只有感受態(tài)的受體細(xì)胞才能攝取并轉(zhuǎn)化外源DNA，而這種感受態(tài)也只能發(fā)生在細(xì)菌生長周期的某一時(shí)間范圍內(nèi)。

b.感受態(tài)的本質(zhì)：部分原生質(zhì)化：10/cell

酶受體：

第12頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（5）轉(zhuǎn)化過程：①．雙鏈結(jié)合與單鏈穿入：

雙鏈DNA分子結(jié)合在接受座位上?？赡?，可被DNA酶降解，接受座位飽和性；單鏈DNA攝取，不可逆，不受DNA酶破壞。穿入后，由外切酶或DNA移位酶降解其中一條鏈。②．聯(lián)會：

DNA片段與細(xì)菌染色體部分聯(lián)會。親緣關(guān)系越遠(yuǎn)，聯(lián)會越小、轉(zhuǎn)化可能性越小。③．整合(重組)：單鏈的轉(zhuǎn)化DNA與受體DNA對應(yīng)位點(diǎn)的置換，從而穩(wěn)定地參入到受體DNA中。第13頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（6）轉(zhuǎn)化成功：感受態(tài)、吸附、整合。（7）轉(zhuǎn)化與基因重組作圖：

第14頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五2、接合（Conjugation）（1）概念：在原核生物中，遺傳物質(zhì)從供體-“雄性”轉(zhuǎn)移到受體-“雌性”的過程。

♂

♀

DNA接觸（供體donor）（受體receptor）第15頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（2）發(fā)現(xiàn)與證實(shí)：a.發(fā)現(xiàn)：LederbergTatum（1946營養(yǎng)缺陷型）第16頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五b.證實(shí)轉(zhuǎn)化作用的排除：

A（殺死）＋B或者A＋B（殺死）（無）DavisU型管試驗(yàn)（無）DNase處理（有）回復(fù)突變突變的排除：

單個(gè)基因回復(fù)突變頻率＝10-6

兩個(gè)基因同時(shí)回復(fù)突變的頻率＝10-6×10-6＝10-12<10-7兩個(gè)菌株間需要直接接觸才能形成原養(yǎng)型！

Lederberg和Tatum根據(jù)實(shí)驗(yàn)作解釋，認(rèn)為上述原養(yǎng)型是兩個(gè)親本品系基因的重組體。在E.coli中基因重組經(jīng)一系列步驟進(jìn)行：（1）細(xì)胞融合；（2）親本細(xì)胞的遺傳物質(zhì)經(jīng)過融合形成二倍體合子；（3）遺傳物質(zhì)發(fā)生交換的合子經(jīng)過減數(shù)分裂產(chǎn)生了帶有重組基因的子代細(xì)菌。第17頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五

上述的解釋雖然比較正確，但其中有一點(diǎn)卻被Hayes的一個(gè)意外發(fā)現(xiàn)所否定。Lederbery和Tatum認(rèn)為兩個(gè)親本細(xì)菌在基因重組過程中起著同等作用－E.coli的性系統(tǒng)是同宗配合（homothallic）。

Hayes則證明：E.coli遺傳物質(zhì)的傳遞方式與具有典型減數(shù)分裂的生物不同。例如：兩個(gè)親本類型對后代的遺傳貢獻(xiàn)并不相等，有些親本基因的組合會在后代出現(xiàn)，有一些則不會出現(xiàn)，而且所有后代中出現(xiàn)的基因都是連鎖的，因此，E.coli的有性過程應(yīng)該是異宗配合的（heterothallic）。c.本質(zhì)（E.coli）遺傳物質(zhì)的單方向（one-way）轉(zhuǎn)移

第18頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五Hayes做了一個(gè)雜交實(shí)驗(yàn)，用的品系與Lederbery和Tatum用的相似，即：

品系A(chǔ)：met-thr+Leu+thi+

品系B：met+thr-Leu-thi-

在雜交前，將品系A(chǔ)用高劑量的鏈霉素處理（鏈霉素并不立即殺死它們，只是阻礙細(xì)胞的分裂）①Streptomycin處理A×B

基本培養(yǎng)基（BM）

原養(yǎng)型重組體②對照A×BBM

原養(yǎng)型重組體

③A×streptomycin處理BBM無原養(yǎng)型重組體第19頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（3）F因子：a.發(fā)現(xiàn)1952年：

W.Hayes試驗(yàn)證明：接合過程中，遺傳物質(zhì)單向轉(zhuǎn)移，供體（donor）－♂A菌株受體（receptor）－♀B菌株1953年：

Hayes，Leaderberg&Cavalli：♂有F因子♀無F因子第20頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五b.F因子的遺傳結(jié)構(gòu)質(zhì)粒：舊稱附加體，是指獨(dú)立于細(xì)菌染色體的可以獨(dú)立、整合、環(huán)出、丟失含有少量基因的雙鏈DNA環(huán)狀分子F

因子(致育因子、性因子)：是一種感染性質(zhì)粒，由于F因子存在與否決定是否接合，又稱為致育因子。F因子的遺傳結(jié)構(gòu)：圖7-12根據(jù)F因子存在的方式，E.Coli可以分為4種菌株第21頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五F＋HfrF＋整合準(zhǔn)確環(huán)出配對、交換準(zhǔn)確環(huán)出丟失不準(zhǔn)確環(huán)出F’F－攜帶1個(gè)基因～半條染色體第22頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五c.接合過程F+×F－F++F+Hfr×F－Hfr+F－復(fù)制：滾環(huán)模式第23頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五d.部分二倍體、交換與遺傳重組cb+a+c+ba單交換I降解第24頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（4）高頻重組(highfrequenceyof

recombination,Hfr)第25頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五abdhgfce

1

2

3cdefghabI

1

2

3cdefghabefghabcdII

3

2

1ghabcdeffedcbahgF＋HfrIII第26頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五細(xì)菌基因重組的特點(diǎn):(1)F-細(xì)胞得到的只是供體細(xì)胞染色體的一部分，而F因子并沒有發(fā)生轉(zhuǎn)移；

(2)細(xì)菌基因重組是在部分二倍體中進(jìn)行，只有偶數(shù)交換才產(chǎn)生有活性的重組體;

(3)相反的重組體不出現(xiàn).第27頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（a）.E.coli染色體的中斷雜交和遺傳作圖Wollman和Jacob的中斷雜交試驗(yàn)

Hfr細(xì)菌的基因是按一定時(shí)間順序依次地出現(xiàn)在受體細(xì)胞，因?yàn)榛蛭挥谌旧w上，即Hfr染色體以線性方式進(jìn)入細(xì)胞中。Hfr：thr+leu+azirtonrlac+gal+strsF-

：thr-leu-azistonslac-gal-strr每隔一段時(shí)間取樣，人為中斷雜交稀釋菌液，防止再度配對涂布在含有str的基本培養(yǎng)基上HfrF-通氣混合培養(yǎng)第28頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五將其影印培養(yǎng)到若干不同的選擇培養(yǎng)基上，以分析Hfr菌株染色體上非選擇標(biāo)記基因進(jìn)入F-細(xì)菌的順序和所需時(shí)間

時(shí)間（分鐘）基因頻率Thr+8100（選擇標(biāo)記）leu+8100（選擇標(biāo)記）azir990tonr1170lac+1840gal+2525

同一個(gè)Hfr菌株的轉(zhuǎn)移起始點(diǎn)和轉(zhuǎn)移順序在不同的雜交試驗(yàn)中都是一樣的。該轉(zhuǎn)移起始點(diǎn)稱為原點(diǎn)（origin，O）第29頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五Oazitonlacgal09111825minO09111825120azitonlacgalFmin2、中斷雜交技術(shù)（interruptedmatingtechnique）

根據(jù)供體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的順序和時(shí)間繪制連鎖圖的技術(shù)。第30頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五

用不同的Hfr菌株進(jìn)行中斷雜交實(shí)驗(yàn)，都可做成連鎖圖，基因轉(zhuǎn)移的順序、轉(zhuǎn)移起點(diǎn)和轉(zhuǎn)移方向很不相同。

根據(jù)上圖，可以得到直線連鎖圖；Hfr菌株足夠多，可以獲得整個(gè)E.coli染色體連鎖圖。例子：O

thithrprolacpurgalhisglythithrprolacpurOOOO第31頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五小結(jié)（作圖步驟）：（1）作直線連鎖圖，確定基因間距離及其染色體全長（分鐘）。（2）畫圓，根據(jù)染色體全長標(biāo)示刻度，按照基因間距離標(biāo)示基因。（3）標(biāo)示Hfr起點(diǎn)、終點(diǎn)、菌株號。HfrAB312第32頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五b.重組作圖法：

兩基因轉(zhuǎn)移時(shí)間間距小于2分鐘時(shí)，中斷雜交法的圖距不精確，應(yīng)采用傳統(tǒng)的重組作圖法。

利用Hfr菌與F-菌株雜交后，在部分二倍體中，若兩基因相距越近，在重組體中同時(shí)出現(xiàn)的機(jī)會越多；兩基因相距越遠(yuǎn)，在重組體中同時(shí)出現(xiàn)的機(jī)會越少。根據(jù)重組體中某一性狀單獨(dú)出現(xiàn)的頻率作為兩基因間的交換率，就可以進(jìn)行基因定位。

例：緊密連鎖二基因:

lac-(乳糖不發(fā)酵)ade-(腺嘌呤缺陷型)第33頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五Hfr：lac+ade+

strsF-

：lac-ade-strr在含有str無ade的基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)選擇ade+

strr的重組子HfrF-混合培養(yǎng)60min再在EMB培養(yǎng)基上選擇哪些ade+strr的重組子為lac+

，哪些為lac-為何不用lac作為選擇標(biāo)記？第34頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五=交換型重組體數(shù)交換型重組體數(shù)+未交換型重組體數(shù)100%=lac-ade+

(lac+ade+)+(lac-ade+)100%請注意與計(jì)算真核生物重組值的區(qū)別某一性狀單獨(dú)出現(xiàn)的菌落數(shù)重組體總菌落數(shù)100%兩基因間的交換率=兩個(gè)位點(diǎn)間的時(shí)間約為1分鐘，大約相當(dāng)于20%的重組值=20%第35頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五lac-ade間發(fā)生交換l-a+srl+a+a-l-srsslac-ade間未發(fā)生交換l+a+a-l-srl+a+sr1、Hfr片段不能獨(dú)立復(fù)制，未整合進(jìn)入F-基因組中去則隨細(xì)胞分裂而丟失；2、無ade的完全培養(yǎng)基上篩選出的菌落為lac+ade+

和lac-ade+，其中前者為兩基因外雙交換產(chǎn)物，lac和ade

基因并未發(fā)生重組，后者為兩基因間重組產(chǎn)物；3、另一交換產(chǎn)物lac+ade-在上述培養(yǎng)基中不能篩選出，即便篩出也沒意義，因?yàn)閘ac基因先于ade基因進(jìn)入，而ade基因未進(jìn)入而形成的交換產(chǎn)物，不能真實(shí)反映兩基因間的交換頻率；這也是為何選擇ade為篩選基因的原因！4、只有在缺乏ade基因的完全培養(yǎng)基中篩選出的lac-ade+才是重組子；第36頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五第37頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五3.性導(dǎo)（Sexduction）概念：接合以F’因子為媒介將供體菌染色體DNA轉(zhuǎn)移到受體細(xì)菌，形成部分二倍體的過程。第38頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五F’菌株的突出特點(diǎn)：

⑴F’因子轉(zhuǎn)移基因的比率極高，如同F(xiàn)+因子的轉(zhuǎn)移比率；

⑵F’因子的自然整合率極高，但是整合不是隨機(jī)的，需要

經(jīng)過配對整合到特定的座位上。第39頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五應(yīng)用：（1）確定基因的顯隱性關(guān)系（上圖）。（2）繪連鎖遺傳圖：原理：F+

不同的Hfr不同的F’距離近的基因容易環(huán)出到同一個(gè)F’因子上“并發(fā)性導(dǎo)”詳盡的連鎖圖.

方法：同“并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)”第40頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五性別細(xì)菌狀態(tài)F因子狀態(tài)♀F-無F因子♂F+F因子為游離狀態(tài)♂HfrF因子整合到宿主染色體上♂F帶有部分宿主染色體的F因子，為游離狀態(tài)1、細(xì)菌細(xì)胞的兩種性別、四種狀態(tài)：小結(jié)第41頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五2、F+、F-、Hfr、F'的關(guān)系轉(zhuǎn)變關(guān)系F+F-丟失雜交F+Hfr整合到E.coli

染色體規(guī)則脫離E.coli

染色體F'Hfr

回復(fù)到Hfr染色體不規(guī)則脫離E.coli

染色體第42頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五F+×F-

低頻重組Hfr×F+

高頻重組F′×F+

一般為低頻重組，但對所攜帶的基因是高頻重組。3、重組頻率區(qū)別第43頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五4.轉(zhuǎn)導(dǎo)（Transduction）（1）概念：轉(zhuǎn)導(dǎo)：是指以噬菌體為媒介將供體細(xì)菌DNA導(dǎo)入到受體細(xì)菌并發(fā)生遺傳重組的過程。1/1000第44頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒：溶菌噬菌體末期，噬菌體裝配過程中，外殼蛋白識別一定長度的DNA分子，形成成熟的子代噬菌體時(shí)，把寄主細(xì)菌的DNA片段“錯誤”地組裝到外殼蛋白中而形成。由于感染細(xì)菌的能力決定于噬菌體外殼蛋白，所以轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒具有和正常噬菌體相同的侵染能力。轉(zhuǎn)導(dǎo)體：轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒將供體細(xì)菌的染色體片段轉(zhuǎn)移到受體細(xì)菌，重組后的受體細(xì)菌叫作轉(zhuǎn)導(dǎo)體。第45頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五

黎德伯格（Leaderburg）與津德（Zinder）（1951）發(fā)現(xiàn)：鼠傷寒沙門氏菌中轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象：將兩個(gè)沙門氏菌的營養(yǎng)缺陷型進(jìn)行雜交：

phe-try-tyr-met+his+×phe+try+tyr+met-his-

混合培養(yǎng)

phe+try+tyr+met+his+

基本培養(yǎng)基（10－5）

證實(shí)：a.10－5>10－12

（10－6×10－6）排除回復(fù)突變。

b.戴維斯U型管試驗(yàn)(防止細(xì)胞直接接觸)也獲得野生型重組體。排除由于接合或性導(dǎo)

c.DNase處理重組體。排除轉(zhuǎn)化。

推測：某種過濾性因子（FA）可以穿過DavisU型管濾片。抗血清可以抑制重組體出現(xiàn)。P22噬菌體。（2）發(fā)現(xiàn)與證實(shí)：第46頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（3）普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)：概念供體細(xì)菌染色體組的任何部分都可以組裝到轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒中，從而可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)菌中。（P1）第47頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五b.并發(fā)性導(dǎo)（co-transduction）與細(xì)菌作圖合轉(zhuǎn)導(dǎo)（并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)、共轉(zhuǎn)導(dǎo)）：兩個(gè)基因同時(shí)被包裝到一個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒，從而一起重組到受體細(xì)菌的染色體上。二因子作圖：供體受體合轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率

a+

b+

a-

b-30%ab近

a+

c+

a-

c-35%ac近a在bc之間

b+

c+b-

c-3%bc遠(yuǎn)三因子作圖：供體受體合轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率

leu+

thr+

azi+

leu-

thr-

azi-第48頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五實(shí)驗(yàn)1：

leuazithrazileuthr實(shí)驗(yàn)2：

azileuthr實(shí)驗(yàn)3：最大轉(zhuǎn)導(dǎo)片段p227第49頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五

根據(jù)合轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率推導(dǎo)基因之間的物理距離d－基因之間的物理距離（bp，kbp）L－轉(zhuǎn)導(dǎo)DNA的平均長度（bp，kbp）X－兩個(gè)基因合轉(zhuǎn)導(dǎo)的頻率第50頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（4）特殊性轉(zhuǎn)導(dǎo)（局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)）attatt溫和性噬菌體進(jìn)行的轉(zhuǎn)導(dǎo)，只能轉(zhuǎn)導(dǎo)部分基因。第51頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五NRJANRAJNRRAJNRAJJARNJARNdgalbio+I

噬菌體DNA特異性整合到細(xì)菌染色體。II噬菌體DNA準(zhǔn)確環(huán)出。III噬菌體DNA不準(zhǔn)確環(huán)出特殊性轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的形成。

dgal/dbio第52頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五dgal＋E.coliUV50%+50%dgal（5）高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)（HFT）NRAJNRJNRAJNRA第53頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五第二節(jié)噬菌體的遺傳分析一、噬菌體是一類病毒病毒（Virus）：超顯微、無細(xì)胞、活細(xì)胞專性寄生的大分子（微生物）特點(diǎn)：個(gè)體?。和ㄟ^Davis濾器專性寄生：脫離活體無生命，無代謝無細(xì)胞：蛋白質(zhì)＋DNA（RNA）繁殖方式簡單第54頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五2.分類：動物：球形、卵圓形寄主：植物：桿狀、絲狀細(xì)菌：蝌蚪狀

雙鏈DNA：λ，T2、4、6

單鏈DNA：ΦX類，動物病毒、噬菌體

單鏈RNA

雙鏈RNA

植物病毒、艾滋病毒遺傳物質(zhì)：第55頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五煙草花葉病毒腺病毒T4噬菌體愛滋病病毒

RNADNADANRNA第56頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五二、噬菌體分類概念：原指細(xì)菌為寄主，后來推廣到真菌的病毒。烈性噬菌體：P2、P4、P6、T系列（T1-T7）

2.溫和性噬菌體：λ和P1第57頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五1.烈性噬菌體（1）形態(tài)結(jié)構(gòu)（T偶列）第58頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（2）.繁殖和感染周期

（營養(yǎng)繁殖：噬菌體DNA不整合；150噬菌體/Cell）吸附細(xì)菌裂解釋放出子代噬菌體顆粒細(xì)菌染色體降解蛋白質(zhì)外殼包裝DNA成子代噬菌體顆粒第59頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五2.溫和噬菌體:（1）形態(tài)結(jié)構(gòu)第60頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（2）繁殖和感染周期:吸附溶菌周期UV誘導(dǎo)細(xì)菌裂解溶源周期噬菌體（原噬菌體）P1噬菌體第61頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五幾個(gè)相關(guān)的概念溶原性：噬菌體外殼蛋白的合成以及溶菌功能受到抑制。溶原性細(xì)菌：“攜帶”原噬菌體的細(xì)菌。原噬菌體：溶原性細(xì)菌中的噬菌體DNA分子。無外殼；無侵染能力。第62頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五λ噬菌體DNA的插入attλ第63頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五三、噬菌體遺傳的研究方法獲得突變株：處理營養(yǎng)期細(xì)菌或者游離噬菌體四類突變株：

1）寄主范圍突變株（hostrangemutant）

2）噬菌斑（plaquemutant）

3）溫度敏感性：野生型：37C、43C

均可繁殖

突變型：43ts：僅37C

繁殖

4）溶菌酶：e＋e第64頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五1）寄主范圍突變株（hostrangemutant）寄主范圍：指噬菌體感染和裂解的菌株范圍。某種噬菌體只能侵染某一種菌的個(gè)別菌系，突變后寄主范圍變寬或變窄。

T2：h+

噬菌體：只侵染E.coli

B株；

h突變株：

E.coliB&B/2第65頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五2）噬菌斑突變株（plaquemutant）噬菌斑形狀：噬菌斑的大小、邊緣清晰度、透明程度。例如：T噬菌體

rAr1r＋r（rapidlysis）

rBr13（噬菌斑小、邊緣模糊）（速溶型，噬菌斑大、邊緣清晰）rCr7m＋m小型（minute）

c＋c透明（clear）

t＋t半透明（turbid）第66頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五2、雜交試驗(yàn)－雙重感染

第67頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五（1）E.ColiBE.ColiB＋B/2

二點(diǎn)測驗(yàn)第68頁，共84頁，2022年，5月20日，23點(diǎn)40分，星期五基因型噬菌斑h(yuǎn)+r+半透明、小h-r-

透明、大h+r-

半透明、大h-r+透明、小重組值＝