DB15T 2431-2021荒漠藻擴(kuò)繁培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSICS65.020.20CCSB05內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)DB15/T2431—2021荒漠藻擴(kuò)繁培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程Technicalregulationforthepropagationandcultivationofdesertalgae2021-11-152021-11-152021-12-15內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)林業(yè)和草原局提出并歸口。引 言本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)提請注意，聲明符合本文件時(shí)，可能涉及到荒漠藻相關(guān)專利（專利號：ZL200410012931.X、ZL201510522936.5）的使用。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)對于該專利的真實(shí)性、有效性和范圍無任何立場。專利持有人姓名：中國科學(xué)院水生生物研究所，李敦海地址：湖北省武漢市武昌東湖南路7號任?；哪鍞U(kuò)繁培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了荒漠藻樣品采集，藻種的制備、營養(yǎng)基配制、規(guī)?；囵B(yǎng)及質(zhì)量評價(jià)等技術(shù)要求。本文件適用于荒漠藻的擴(kuò)繁與規(guī)?；囵B(yǎng)。（GB/T36197土壤質(zhì)量土壤采樣技術(shù)指南DB15/T2083人工荒漠藻土壤結(jié)皮治沙技術(shù)規(guī)程下列術(shù)語和定義適用于本文件。下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1荒漠生物土壤結(jié)皮desertbiologicalsoilcrust（DBSC）3.2荒漠藻desertalgae（Microcoleusvaginatus（Phormidiumtenue(Menegh.)Gom.）（Scytonemajavanicum（Kutz.）BornetFlah）。3.3光生物反應(yīng)器photobioreactor4培養(yǎng)基及配制4.1培養(yǎng)基種類表2BG110培養(yǎng)基的成分及配比表單位為毫克每升表2BG110培養(yǎng)基的成分及配比表單位為毫克每升配制滅菌對培養(yǎng)基配制時(shí)所用設(shè)備用高壓滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理。B111B1l0，表1BG11單位為毫克每升營養(yǎng)鹽A5的成分成分濃度成分濃度NaNO31500H3BO32.86MgSO4·7H2O75MnCl2·4H2O1.81K2HPO4·3H2O40Na2MoO4·2H2O0.252EDTA-Na21ZnSO4·7H2O0.222CaCl2·2H2O36CuSO4·5H2O0.079檸檬酸6檸檬酸鐵銨6A51mL/LNa2CO320注：營養(yǎng)鹽純度要求化學(xué)純及以上，下同。營養(yǎng)鹽A5的成分成分濃度成分濃度MgSO4·7H2O75H3BO32.86K2HPO4·3H2O40MnCl2·4H2O1.81EDTA-Na21Na2MoO4·2H2O0.252CaCl2·2H2O36ZnSO4·7H2O0.222檸檬酸6CuSO4·5H2O0.079檸檬酸鐵銨6A51mL/LNa2CO320BG11NaNO31.5gMgSO4·7H2O0.075gK2HPO4·3H2O0.04gEDTA-Na20.001g、CaCl2·2H2O0.0360.0060.006、A51mL、Na2CO30.02。BG110NaNO3BG11將土樣研磨，經(jīng)過0.1mm篩，加適量無菌水浸泡2d后，直接接種于液體培養(yǎng)基進(jìn)行加富培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光強(qiáng)70μE/(m2·s)、溫度28℃～32℃。觀察記錄直至有大量藻體出現(xiàn)。純化鑒定在顯微鏡下觀察其形態(tài)特征并鑒定。保藏150mL～200mL1.5L/min～3.5L/min條件下通氣培養(yǎng)，氣流經(jīng)過棉塞或細(xì)菌過濾濾膜進(jìn)行無菌處理；光強(qiáng)控制在85μE(·s28℃～20.2g/L時(shí)5～10d500mL～1000mL2.5L/min～5L/min75μE/(m2?s)～95μE/(m2·s28℃～3202gL時(shí)（5～10d5L～10L3L/min～6L/min7μE/2?s～00μE(·s)28～32.2/L（5d1050t藻液濃度評價(jià)采用干質(zhì)量測定法，取新鮮藻液于8000r/min下離心6min，棄上清液，然后用蒸餾水洗滌再離心，重復(fù)以上步驟2次，將藻泥完全移至表面皿上，涂勻后放入-40℃冰箱預(yù)凍。采用冷凍真空干燥12h～20h，取出立即稱其質(zhì)量。在冷凍干燥前要將藻泥厚度均勻的攤在干燥器皿上(可打孔成蜂窩狀)，且不應(yīng)堆積過厚，保證微藻的干燥時(shí)間均勻。規(guī)?；囵B(yǎng)的合格藻液濃度為0.2g/L，野外使用的合格藻液生物量為7g?dw/m2～10g?dw/m2。規(guī)?；囵B(yǎng)溫室宜建在平坦的場地，建成后關(guān)閉門窗，利用福爾馬林的揮發(fā)性對溫室進(jìn)行熏蒸除菌（24h），以防止外來污染；同時(shí)控制溫度為22℃～35℃、光照為120μE/(m2?s)～180μE/(m2·s)、通氣為3L/min～6L/min，抑制某些喜高溫和高強(qiáng)光的土著綠藻的生長。培養(yǎng)過程的記錄應(yīng)遵守附錄A的規(guī)定，此外還應(yīng)注意：0.2g/L～0.5g/L1d～2d儲備60℃～85℃下干燥5h～8需要接種時(shí)，將干藻與沙土一起混勻，直接撒播到地表，也可培養(yǎng)好的藻液可以直接接種到沙地。附錄A（規(guī)范性）荒漠藻擴(kuò)繁培養(yǎng)日程記錄表荒漠藻擴(kuò)繁培養(yǎng)日