生化室作業(yè)指導(dǎo)書

生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH-01~69第A版編制：呂剛審核：呂剛徐桂榮批準(zhǔn)：房建英生效日期：2016111日北票計生站檢驗室北票計生站檢驗室北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書主題內(nèi)容目錄文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第2頁共69頁目 錄序號 主題內(nèi)容血清總膽紅素測定血清丙氨酸氨基測定血清天門冬氨酸氨基測定血清葡萄糖氧化酶法測定血清尿素氮谷氨酸測定血清肌酐酶法測定血清總膽固醇酶試劑法測定血清甘油三酯酶試劑法測定血清高密度脂蛋白膽固醇測定血清低密度脂蛋白膽固醇測定血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶速率法測定復(fù)合質(zhì)控品復(fù)合校準(zhǔn)品高、低密度脂蛋白膽固醇校準(zhǔn)品15QS-RO90純水機(jī)操作維護(hù)規(guī)程16TBA-40FR生化分析儀操作維護(hù)規(guī)程17洗板機(jī)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序18科華酶標(biāo)儀KHBST-360酶標(biāo)儀操作程序19血清總蛋白液體雙縮脲法測定20血清白蛋白溴甲酚綠法測定21血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定22血清尿酸測定

代號 頁號BPJSZ-3-SH-01 5BPJSZ-3-SH-02 6BPJSZ-3-SH-03 11BPJSZ-3-SH-04 14BPJSZ-3-SH-05 17BPJSZ-3-SH-06 21BPJSZ-3-SH-07 24BPJSZ-3-SH-08 27BPJSZ-3-SH-09 30BPJSZ-3-SH-10 34BPJSZ-3-SH-11 38BPJSZ-3-SH-12 43BPJSZ-3-SH-13 45BPJSZ-3-SH-14 47BPJSZ-3-SH-15 49BPJSZ-3-SH-16 51BPJSZ-3-SH-17 56BPJSZ-3-SH-18 57BPJSZ-3-SH-19 62BPJSZ-3-SH-20 64BPJSZ-3-SH-21 66BPJSZ-3-SH-22 68北票計生站檢驗室 生化室作業(yè)指導(dǎo)主題內(nèi)容 修訂頁修訂頁

文件編號：BPJSZ-3-SH版本/修訂號：A/3第369頁序號文件編號頁碼需更改的內(nèi)容更改內(nèi)容批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期1BPJSZ-3-SH62增加血清總蛋白液體雙房建英20160111縮脲法測定2BPJSZ-3-SH64增加血清白蛋白溴甲酚房建英20160111綠法測定3BPJSZ-3-SH68增加血清尿酸測定房建英201601114567891011121314151617181920北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第569頁血清總膽紅素(T-BIL)測定主題內(nèi)容血清總膽紅素(T-BIL)測定實驗原理血清中總膽紅素在PH為3.0的緩沖液中在釩酸鹽作用下氧化成膽綠素。通過測定釩酸鹽作用前后吸光度差異，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)液比較，即可求得總膽紅素的含量。標(biāo)本：病人準(zhǔn)備：無特殊要求。最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。類型：血清、肝素或EDTA血漿，應(yīng)避光保存。標(biāo)本存放：2～87-203標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下避光保存運(yùn)輸，在2～8℃7標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、脂血、非避光保存運(yùn)輸?shù)臉?biāo)本。實驗材料試劑：英科新創(chuàng)總膽紅素試劑盒（12）試劑組成試劑1240試劑2120試劑1與試劑2混合后含有下列物質(zhì)：磷酸緩沖液 釩酸鹽 0.8mol/L表面活性劑,穩(wěn)定劑 適量注：本試劑為成熟產(chǎn)品，各批次產(chǎn)品成分相同，完全可以混合使用。試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存試劑避光保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個月。試劑2必需避光保存。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。注意事項：此試劑為體外診斷用，不要入口，毒性還末確定；警告！腐蝕劑！不要入口；避免和眼睛，皮膚或衣服接觸，如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘，接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護(hù)。校準(zhǔn)品：朗道校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件質(zhì)控品：參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件。儀器操作步驟：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件。檢驗結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每周定期標(biāo)本中作定值血清水平質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以RANDOX復(fù)合校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果無需手工計算，以μmol/L報告。手工測定計算方法為：樣本A2-樣本A1總膽紅素(μmol/L)= ×校準(zhǔn)液濃度校準(zhǔn)A2-校準(zhǔn)A1參考值范圍：嬰兒：出生24小時內(nèi) ＜150μmol/L出生第2天 22-193μmol/L出生第3天 12-217μmol/L出生第4～6天 1.7-216μmol/L兒童：＞一個月 3.4-17μmol/L成年人： 1.7-21μmol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。臨床意義：膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。游離膽紅素非極性很強(qiáng)，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復(fù)合物由脾臟向肝臟運(yùn)輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。溶血（肝前黃疸、實質(zhì)的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會導(dǎo)致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見先天性慢性高膽紅素血癥，稱為Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細(xì)胞破碎增多，使60～70%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測方法能檢測總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測定主要檢測水溶性的結(jié)合膽紅素，因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來估計游離膽紅素的含量。操作性能線性范圍：0～600μmol/L精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法

TBA-40FR批內(nèi)精密度小于3%SD0.07，總精密度小于5%SD0.10。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為600μmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2病危報警值的處理當(dāng)新生兒血清標(biāo)本測定結(jié)果總膽紅素〉340μmol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。方法局限性本法線性上限為600μmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度≤1704μmol/L，血紅蛋白濃度≤5.00g/L，甘油三酯濃度≤22.6mmol/L 時沒有觀察到干擾。補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)Thomas Led.Clinical Laboratory Diagnostics. 1sted.Frankfurt:THVerlagsgesellschaft;1998.p.192-202.TolmanKG,RejR.Liverfunction.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry. 3rded.Philadelphia: W.B.SaundersCompany;P.1125-77.RandRN,diPasquaA.Anewdiazomethodforthedeterminationofbilirubin.ClinChem1962;6:570-8.20.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第669頁血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定主題內(nèi)容血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶IFCC推薦方法測定實驗原理國際臨床化學(xué)學(xué)會(IFCC)推薦的紫外連續(xù)監(jiān)測法。ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H

LDH（乳酸脫氫酶）

L-乳酸+NAD+

+HO2加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是為了穩(wěn)定ALT活性，避免樣品中因內(nèi)源性磷酸吡哆醛不足造成測定結(jié)果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特別監(jiān)護(hù)病人的結(jié)果)1標(biāo)本：病人準(zhǔn)備：12小時禁食。類型：血清，肝素或EDTA血漿。3.標(biāo)本存放：3天內(nèi)的活性損失：2～8<10%15～25<17%；標(biāo)本穩(wěn)定性：-20℃保存至少可穩(wěn)定4周。標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染的標(biāo)本。實驗材料試劑英科新創(chuàng)ALT測定試劑盒（12*45ML21*18ML）試劑組成試劑1（R1：Tris緩沖液 pH7.5 L-丙氨酸 500mmol/LLDH（乳酸脫氫酶試劑2（R2：

≥1200U/La-酮戊二酸 15mmol/LNADH 試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。注意事項：試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。校準(zhǔn)品：使用英科新創(chuàng)公司提供的RADOX校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每周定期標(biāo)本中作定值血清水平質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以RANDOX復(fù)合校準(zhǔn)品ALT校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以U/L報告。參考值范圍4不含磷酸吡哆醛女性7-40U/L男性9-50U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。臨床意義[1,2]：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）舊稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）舊稱谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT。它們是氨基轉(zhuǎn)移酶類的典型代表。氨基轉(zhuǎn)移酶催化氨基從氨基酸轉(zhuǎn)移給-酮酸的反應(yīng)。ALT是肝臟的特異性酶，僅在肝膽疾病時顯著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌損傷，以及肝組織損害等都有關(guān)。因此同時進(jìn)行ALT和AST的檢測，可用于鑒別肝損傷和心肌或骨骼肌損傷。AST/ALT比率用于肝病的鑒別診斷。比率<1預(yù)示中度的肝損傷；比率>1和嚴(yán)重肝病有關(guān)，常見慢性肝病。操作性能線性范圍0～600U/L精密度：批內(nèi)變異系數(shù)：＜5%10%靈敏度：本試劑的檢測限為4U/L病人結(jié)果可報告范圍超出范圍結(jié)果處理本法對ALT活力檢測的最大ΔA/min在340334nm為0.16,在365nm為0.08。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作19稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10病危報警值的處理方法局限性本法對ALT活力檢測的最大ΔA/min在340334nm為0.16,在365nm為0.08樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作19稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度4.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)ThomasL.AlanineaminotranSMerase(ALT),AspartateaminotranSMerase(AST).In:ThomasL,editor. Clinical Laboratory Diagnostics. 1sVerlagsgesellschaft;1998.p.55-65.

ed.Frankfurt: TH-BooksMossDW,HendersonAR.Clinicalenzymology. In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry. 3r1999.P.617-721.

ed.Philadelphia: W.B.SaundersCompany;BergmeyerHU,HorderM,RejR.InternationalFederationofClinicalChemistry(IFCC)ScientificCommittee,Analyticalsection:appr ovedrecommendationonIFCCmethodsforthemeasurementofcatalyticconcentrationofenzymes.PartIFCC method for alanine aminotranSMerase(L-alanine: aminotranSMerase,EC).JClinChemClinBiochem1986;24:481 -95.LorentzK,RohleG,SiekmannL.EinfuhrungderneuenStandardmethoden1994zurBestimmungderkatalytischenEnzymkonzentrationenbei37 ℃.DGKlinischeMitteilungen1995;26:190-2.20.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第PAGE1369頁血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定主題內(nèi)容血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶IFCC推薦方法測定實驗原理：國際臨床化學(xué)學(xué)會(IFCC)推薦的紫外連續(xù)監(jiān)測法。L-天門冬氨酸+ -酮戊二酸 AST 草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+H標(biāo)本：

+ MDH

L-蘋果酸+NAD

++HO2病人準(zhǔn)備：12小時禁食。類型：血清，肝素或EDTA血漿。3.標(biāo)本存放：3天內(nèi)的活性損失：2～8<8%15～25<10%；標(biāo)本穩(wěn)定性：-20℃保存至少可穩(wěn)定3個月。標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染的標(biāo)本。實驗材料6.1試劑：英科新創(chuàng)AST測定試劑盒（貨號：141260171701 試劑1：6×64ml；試劑2：6×16ml）試劑組成試劑1（R1：Tris緩沖液pH7.880mmol/LL-天門冬氨酸240mmol/LMDH(蘋果酸脫氫酶)≥600U/LLDH(乳酸脫氫酶)≥600U/L試劑2(R2)：a-酮戊二酸12mmol/LNADH0.18mmol/L磷酸吡哆醛試劑：Good’s緩沖液pH9.60.7mmol/L磷酸吡哆醛0.09mmol/L試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。注意事項：試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。校準(zhǔn)品：使用英科新創(chuàng)公司提供的RANDOX校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本定值血清質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以RANDOX復(fù)合校準(zhǔn)品AST校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果。不使用校準(zhǔn)品進(jìn)行AST活力檢測，可以直接使用ΔA/min均值乘以計算因子得到結(jié)果，但是這樣所得結(jié)果的可靠性不如使用校準(zhǔn)品。計算ALT活力的計算因子見下表：ΔA/min×因子=AST活力[U/L]底物起始的反應(yīng)（37℃） 樣品起始的反應(yīng)（37℃340nm 2143 1745334nm 2184 1780365nm 3971 3235參考值范圍4不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛女性 13-35U/L 10～35U/L男性 15-40U/L 10～50U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義12丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）舊稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）舊稱谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT。它們是氨基轉(zhuǎn)移酶類的典型代表。氨基轉(zhuǎn)移酶催化氨基從氨基酸轉(zhuǎn)移給-酮酸的反應(yīng)。ALT是肝臟的特異性酶，僅在肝膽疾病時顯著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌損傷，以及肝組織損害等都有關(guān)。因此同時進(jìn)行ALT和AST的檢測用于鑒別肝損傷和心肌或骨骼肌損傷。AST/ALT比率可用于肝病的鑒別診斷。比率<1預(yù)示中度的肝損傷；比率>1和嚴(yán)重肝病有關(guān)，常見慢性肝病。操作性能線性范圍2-800U/L。精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，批內(nèi)精密度小于3%總精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛靈敏度：本試劑的檢測限為2U/L病人結(jié)果可報告范圍2-800U/L。超出范圍結(jié)果處理：本法對AST活力檢測的最大ΔA/min在340334nm為0.16為0.08。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10病危報警值的處理無。方法局限性本法對AST活力檢測的最大ΔA/min在340334nm為0.16,在365nm為0.08品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。紅細(xì)胞內(nèi)富含AST，因此溶血血清檢測結(jié)果明顯偏高。補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)：ThomasL.AlanineaminotranSMerase(ALT),Aspartateaminotran SMerase(AST).In：ThomasL,editor.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1stVerlagsgesellschaft;1998.p.55-65.

ed.Frankfurt：TH-BooksMossDW,HendersonAR.Clinicalenzymology. In：BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rd1999.P.617-721.

ed.Philadelphia：W.B.SaundersCompany;BergmeyerHU,HorderM,RejR.InternationalFederationofClinicalChemistry(IFCC)Scientific Committee, Analytical section：approvedrecommendation onIFCCmethodsforthemeasurementofcatalyticconcentrationofenzymes.PartIFCC method for alanine aminotranSMerase(L-alanine ： aminotranSMerase,EC).JClinChemClinBiochem1986;24 ：481-95.LorentzK,RohleG,SiekmannL.EinfuhrungderneuenStandardmethoden1994zurBestimmungderkatalytischenEnzymkonzentrationenbei37 ℃.DGKlinischeMitteilungen1995;26 ：190-220.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第PAGE1669頁血清葡萄糖氧化酶測定法主題內(nèi)容血清葡萄糖（GLU）氧化酶終點測定法實驗原理標(biāo)本：病人準(zhǔn)備：12小時禁食。類型：血清或血漿（EDTA，肝素或氟化鈉，標(biāo)本最好不要溶血。迅速分離血清或血漿，減少紅細(xì)胞糖酵解時葡萄糖的損失。隨機(jī)收集尿樣。標(biāo)本存放：血清、血漿應(yīng)在血液采集1小時內(nèi)，盡早分離。加入糖分解抑制劑（NaF）后的穩(wěn)定性：15～25℃保存可穩(wěn)定1天,4～8℃保存可穩(wěn)定7天。血清中的葡萄糖，無溶血，無細(xì)菌污染，沒有添加的防腐劑，在25℃下可穩(wěn)定8個小時，在472小時。尿樣應(yīng)保存在2～8℃下并盡快進(jìn)行分析。腦脊髓液如果避免蒸發(fā)可在2～8定至少55天內(nèi)不檢驗的標(biāo)本應(yīng)在收集后立即儲存在-20℃的條件下。標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染、超時送檢的的標(biāo)本。實驗材料試劑英科新創(chuàng)血糖測定試劑盒（試劑440ml）試劑組成試劑1Tris緩沖液 pH7.8 100mmol/L苯酚 4mmol/L4-氨基安替吡啉 0.2mmol/L葡萄糖氧化酶 15U/L過氧化物酶 1.2U/L試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。注意事項：校準(zhǔn)品：RANDOX校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每周定期標(biāo)本中作定值血清水平質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以RANDOX復(fù)合校準(zhǔn)品血糖校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以mmol/L報告。手工測定計算方法為：Au葡萄糖濃度（mmol/L）＝ ×校準(zhǔn)液濃度As參考值范圍（mmol/L新生兒臍帶血3.5～8.81小時2.0～5.52小時2.2～4.95～14小時1.9～4.310～28小時2.6～4.544～52小時2.7～4.4兒童（空腹）1～6歲 4.1～7.07～19歲 3.9～5.9成人（空腹） 3.9～6.1參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。臨床意義：檢測血清或血漿中葡萄糖主要用于糖尿病的診斷和治療監(jiān)視，還可用于檢出新生兒低血糖癥、排除胰島細(xì)胞癌以及評估各種疾病碳水化合物代謝狀況。血清葡萄糖水平可能會異常高（高血糖）或異常低（低血糖。葡萄糖測量用于診斷和治療碳水化合物代謝紊亂，包括糖尿病，新生兒低血糖，自發(fā)性低血糖，郎格罕氏島細(xì)胞癌等。葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，懷孕的婦女中很常見。妊?葡糖尿的最主要的特征就是每天之間或一天之中有一個顯著的變化。腦脊髓液（CSM）葡萄糖的測定幫助區(qū)別病毒性腦膜炎與細(xì)菌性腦膜炎；細(xì)菌性腦膜炎和結(jié)核性腦膜炎中的葡萄糖值通常很低（不到的40%至50%血清葡萄糖，病毒性腦膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性腦膜炎（腫瘤細(xì)胞在腦膜中廣泛滲透）也使CSM葡萄糖值在正常值以下。操作性能線性范圍：0～25mmol/L精密度：批內(nèi)變異系數(shù)：＜5%10%超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為25mmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:10稀釋，重新測定，結(jié)果乘以11病危報警值的處理：女性及嬰兒的血糖測定值<2.2mmo/L 或者>22.2mmol/L；男性的血糖測定值<2.7mmo/L或>22.2mmol/L新生兒的血糖測定值<1.6mmo/L或>16.6mmol/L 時在經(jīng)過復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。方法局限性本法線性上限為25mmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:10稀釋，重新測定，結(jié)果乘以11干擾物質(zhì)：使用試劑起始法，當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L 時沒有觀察到干擾。補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)Thomas L.Clinical Laboratory Diagnostics. 1sVerlagsgesellschaft;1998.p.131-7.

ed. Frankfurt: TH-BooksSacksDB.Carbohydrates.In:BurtisCA,Ash woodER.editors.TietzTextbookofClinical Chemistry. 3r750-808.

ed.Philadelphia: W.B.Saunders Company; 1999.p.20.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第PAGE2069頁血清尿素氮谷氨酸脫氫酶測定法主題內(nèi)容血清尿素氮（BUN）谷氨酸脫氫酶測定法1.實驗原理脲酶-谷氨酸脫氫酶（Urease-GLDH）連續(xù)監(jiān)測法。尿素被脲酶水解產(chǎn)氨。在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反應(yīng)生成谷氨酸，NADH同時被氧化成NAD。NADH的減少和樣品中尿素濃度成正比。本法是連續(xù)監(jiān)測法。脲酶尿素+2HO 2NH2 4

+2HCO－3谷氨酸脫氫酶NH＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD4標(biāo)本：病人準(zhǔn)備：血清無特殊要求。要留取24小時尿樣。

＋+HO2類型：血清、血漿（不可使用肝素銨、新鮮尿液。無溶血和凝塊的血清，如果必須使用血漿，建議使用無銨離子的抗凝血劑，如EDTA和肝素鈉。用新鮮尿液作樣品時，用蒸餾水作1:100稀釋。標(biāo)本存放：血清或血漿穩(wěn)定性：4～25℃保存可穩(wěn)定7-20℃保存可穩(wěn)定1液穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定24～8℃保存可穩(wěn)定7-20℃保存可穩(wěn)定1個月。標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的標(biāo)本。實驗材料6.1試劑：英科新創(chuàng)尿素測定試劑盒試劑1：6×64ml＋試劑2：616ml）試劑組成試劑1Tris緩沖液α-酮戊二酸pH7.8120mmol/L7mmol/LADP0.6mmol/L谷氨酸脫氫酶≥1000U/L脲酶≥6000U/L試劑2NADH0.25mmol/L試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存試劑保存于2～25℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。注意事項：此試劑為體外診斷用。不要入口，吞下有害。保護(hù)劑為疊氮鈉，避免接觸皮膚及粘膜，與下水管中的鉛反應(yīng)形成爆炸性化合物，即使只含有少量的疊氮鈉，如果排向下水道請用大量的水沖洗。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。校準(zhǔn)品：使用英科新創(chuàng)公司提供的RANDOX校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本定值血清質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以RANDOX復(fù)合校準(zhǔn)品尿素氮校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以mmol/L報告。將尿素量乘以系數(shù)2.8可以換算成尿素氮量；將尿素氮量乘以系數(shù)0.357可以換算成尿素量。手工測定計算方法為：Au尿素氮濃度（mmol/L）＝ ×校準(zhǔn)液濃度As參考值范圍血清/1成人（mmol/L）全球2.8～7.2女性<50歲2.6～6.7女性>50歲3.5～7.5男性<50歲3.2～7.3男性>50歲 3.0～9.2兒童1～3歲 1.8～6.04～13歲 2.5～6.014～19歲 2.9～7.5尿素/肌酐比率[1] 25～40[(mmol/L)/(mmol/L)]尿液2

0.43～0.72mol/d（注：各實驗室應(yīng)有自己的參考范圍。）參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。臨床意義：尿素是蛋白質(zhì)分解代謝的含氮終產(chǎn)物。高尿素血癥或氮血癥表現(xiàn)為血液中尿素水平升高。鑒別腎前和腎后氮血癥時可以同時檢測尿素和肌酐。因脫水、蛋白質(zhì)代謝增加、皮質(zhì)醇治療或腎臟灌注減少等引起的腎前氮血癥，表現(xiàn)為尿素水平升高而肌酐水平正常。由泌尿管道阻塞引起的腎后氮血癥，表現(xiàn)為尿素和肌酐水平都升高，但肌酐升高程度較小。發(fā)生腎病時，腎小球濾過作用明顯下降或蛋白質(zhì)攝入量大于200g/天都會導(dǎo)致尿素濃度升高。尿素氮的檢測用于診斷和治療某些腎臟疾病和代謝紊亂。尿素氮大約占血液中非蛋白氮的75%。它通過肝臟中的氨進(jìn)行合成，是蛋白質(zhì)脫氨作用的產(chǎn)物。通過腎小球從血液中過濾尿素到尿中，是消除體內(nèi)多余氮的主要方法。血液尿素氮（BUN）水平是腎功能以及腎前狀態(tài)和腎后狀態(tài)的度量標(biāo)準(zhǔn)，腎前因素引起的BUN的升高包括心臟代償失調(diào)，缺水或增加的蛋白質(zhì)分解代謝。水平增加的腎臟因素有急性腎小球腎炎，慢性腎炎，多囊腎，腎纖維化和腎小管壞死。任何類型的泌尿道的梗塞受阻是BUN水平升高的腎后因素1。腎小球清除尿素和肌酸酐，但是，尿素隨后部分地被腎小管重吸收，然而肌酸酐卻不會。因此，血清尿素氮和血清肌酸酐測定經(jīng)常同時用于腎功能的不同診斷中。操作性能線性范圍：0.3～50mmol/L精密度：批內(nèi)變異系數(shù)：＜5%10%靈敏度：本試劑的檢測限為0.3mmol/L。病人結(jié)果可報告范圍：0.3～50mmol/L超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限血清/血漿為50mmol/L、尿液為5mol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%的氯化鈉溶液作1:2稀釋，重新測定，結(jié)果乘以3病危報警值的處理：當(dāng)尿素氮測定值>36mmol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。方法局限性本法線性上限血清/血漿為50mmol/L、尿液為5mol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%的氯化鈉溶液作1:2稀釋，重新測定，結(jié)果乘以3干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。銨離子會影響檢測結(jié)果，因此收集血漿時勿用肝素銨抗凝！補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)ThomasL,editor.Clinicallaboratorydiagnostics.Verlagsgesellschaft;1998.p.374-7.

sted.Frankfurt:TH-BooksBurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.1838.

rded.TalkH,Schubert GE.Enzymatische Harstoff bestimmung inBlutundSerumoptischenTestnachWarburg(EnzymaticdeterminationofureainbloodandserumwiththeopticaltestaccordingtoWarburg).KlinWschr1965;43:174-5.20.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第PAGE2369頁血清肌酐酶法測定主題內(nèi)容血清肌酐（Creatine）酶法測定實驗原理標(biāo)本采集病人準(zhǔn)備：早晨空腹采血（空腹12小時左右，靜脈采血。類型：血清，肝素血漿，尿液。標(biāo)本存放：血清、血漿的穩(wěn)定性：4～25℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存至少可穩(wěn)定3個月。尿液的穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定24～8℃保存可穩(wěn)定6-20穩(wěn)定6個月對尿液用蒸餾水作1:49稀釋后檢測，結(jié)果乘50后報告。標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下運(yùn)輸標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的標(biāo)本不能作測定。實驗材料北京英科新創(chuàng)肌酐檢測試劑盒（1：245ml2：215ml。試劑混合后含有下列物質(zhì)：緩沖液：100mmol/L抗壞血酸氧化酶＞2KU/L肌氨酸氧化酶＞8KU/L肌酸脒基水解酶＞40KU/L肌酐胺基水解酶＞450KU/L6.POD ＞55KU/L7.ESPAS 1.5mmol/L8.4-AA 2.5mmol/L試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～25℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。注意事項：校準(zhǔn)品：使用英科新創(chuàng)公司提供的RANDOX校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟：參見生化檢驗TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本定值血清質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以RANDOX復(fù)合校準(zhǔn)品肌酐校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠檢測結(jié)果，以mmol/L報告。參考值范圍血清/1女性 44～80mmol/L男性 53～97mmol/L臨床意義：肌酐是通過腎臟經(jīng)由腎小球濾過作用排泄的廢物。健康人血漿中肌酐的濃度相當(dāng)穩(wěn)定，與每天水的攝取量、活動和生成尿量無關(guān)。因此血漿肌酐水平升高常指示排泄量的降低，即腎功能受損。肌酐清除率能較好地評估腎小球濾過率（GFR，通過它能較好地檢出腎病和監(jiān)視腎功能。為此，在規(guī)定的時間內(nèi)同時收集血清和尿液，進(jìn)行肌酐檢測。肌酐經(jīng)腎小球濾過后不被腎小管重吸收,通過腎小管排泄。在腎臟疾病初期,血清肌酐值通常不升高,直至腎臟實質(zhì)性損害,血清肌酐值才增高。在正常腎血流條件下，肌酐值如升高至176～353μmol/L,提示為中度至嚴(yán)重的腎損害。所以,血肌酐測定對晚期腎臟病臨床意義較大。操作性能線性范圍：10～8000μmol/L精密度：批內(nèi)變異系數(shù)：＜5%10%靈敏度：本試劑的檢測限為4mol/L。病人結(jié)果可報告范圍：10～8000mol/L超出范圍結(jié)果處理：本法對肌酐的檢測范圍為10～8000mol/L。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L的氯化鈉溶液作1+1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2病危報警值的處理：當(dāng)肌酐測定值>352mol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。方法局限性本法對肌酐的檢測范圍為10～8000mol/L。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L的氯化鈉溶液作1+1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。膽紅素濃度68.8mol/L起有干擾補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)NewmanDJ,PriceCP.Renalfunctionandnitrogenmetabolites.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.1204-.Thomas L.Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: THVerlagsgesellschaft;1998.p.366-74.20.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第PAGE2669頁血清總膽固醇酶試劑法測定法主題內(nèi)容血清總膽固醇酶試劑法測定法實驗原理膽固醇酯酶(CHE)、膽固醇氧化酶(CHO)、過氧化物酶(POD)、Trinder 反應(yīng)偶聯(lián)比終點法。反應(yīng)式如下：CHE膽固醇酯+H2O 膽固醇＋脂肪酸CHO膽固醇＋O2 Δ4-膽甾烯酮＋H2O2POD2H2O2+4-氨基安替比林+苯酚 醌亞胺(顯色)+4H2O標(biāo)本：病人準(zhǔn)備：12小時禁食。類型：血清，肝素或EDTA抗凝血漿。標(biāo)本存放：血清穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定14～8℃保存可穩(wěn)定1-20存可穩(wěn)定3個月。標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的標(biāo)本。實驗材料試劑英科新創(chuàng)總膽固醇試劑盒（試劑440ml）試劑組成Good’s緩沖液 pH6.7 100mmol/L酚 5mmol/L4-氨基安替比林 0.3mmol/L膽固醇酯酶(CHE) ≥200U/L膽固醇氧化酶(CHO) ≥50U/L過氧化物酶(POD) ≥3000U/L試劑準(zhǔn)備 試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。注意事項：試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑，可以與金屬反應(yīng)，處理時大量清水沖洗。校準(zhǔn)品：使用英科新創(chuàng)公司提供的RANDOX校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟：參見TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每周定期定值血清質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以RANDOX復(fù)合校準(zhǔn)品總膽固醇校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠檢測結(jié)果。參考值范圍（mmol/L）合適范圍： ＜5.16mmol/L高度危險臨界值： 5.16～6.2mmol/L高度危險范圍： ＞6.2mmol/L臨床意義：膽固醇由體細(xì)胞合成和來自對食物的吸收1，是細(xì)胞膜的組分和類固醇激素、膽汁酸的前體。血液中的脂蛋白是脂肪和載脂蛋白的復(fù)合物，由它轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇。脂蛋白有四種形式：高密度脂蛋白（HDL，低密度脂蛋白（LDL，極低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒。LDL參與將膽固醇運(yùn)送至外周細(xì)胞，而HDL負(fù)責(zé)從細(xì)胞中吸收膽固醇。四種形式的脂蛋白與冠狀動脈粥樣硬化有著明確的關(guān)系。低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）作用于動脈內(nèi)膜形成動脈粥樣硬化斑塊，與冠心病(CHD)以及相關(guān)的死亡率有著非常密切的關(guān)系。即使總膽固醇在正常范圍內(nèi)，LDL-C濃度的升高也預(yù)示了高度危險。HDL-C具有抵御斑塊形成的作用，它與冠心病的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)。事實上，低HDL-C值是獨立的危險因子。進(jìn)行個體總膽固醇的檢測只是起過篩作用，如果要對危險作較好的評估，必須另外進(jìn)行HDL-C和LDL-C檢測。近年來，通過控制飲食、改變生活方式的治療、和/或使用各種藥物治療(特別他汀類藥物[HMGCoA還原酶抑制劑])臨床試驗，說明了降低總膽固醇和LDL-C水平可極大地減少CHD的危險。操作性能線性范圍：1～13mmol/L。精密度：批內(nèi)變異系數(shù)：＜5%10%靈敏度：本試劑的檢測限為0.03mmol/L。病人結(jié)果可報告范圍：1～13mmol/L。超出范圍結(jié)果處理：本法對膽固醇的檢測范圍為1～13mmol/L。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+4稀釋，重新測定，結(jié)果乘以5病危報警值的處理：高度危險范圍>6.2mmol/L。方法局限性本法對膽固醇的檢測范圍為1～13mmol/L。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+4稀釋，重新測定，結(jié)果乘以5干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度≤2840mol/L，膽紅素濃度≤342mol/L，血紅蛋白濃度≤2.00g/L，甘油三酯濃度≤22.6mmol/L 時沒有觀察到干擾。補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)RifaiN,BachorikPS,AlbersJJ.Lipids,lipoproteinsandapolipoproteins.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3 rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.809-61.RecommendationoftheSecondJointTaskForceofEuropeanandotherSocietiesonCoronaryPrevention.Preventionofcoronaryheartdiseaseinclinicalpractice.EurHeartJ1998;19:1434-503.ArtissJD,ZakB.Measurementofcholesterolconcentration.In:RifaiN,WarnickGR,DominiczakMH,eds.Handbookoflipoproteintesting.Washington:AACCPress,1997:99-114.DeegR,ZiegenhornJ.Kineticenzymaticmethodforautomatedoftotalcholesterolinserum.ClinChem1983;29:1798-802.SchaeferEJ,McNamaraJ.Overviewofthediagnosisandtreatmentoflipiddisorder.InRifaiN,WarnickGR,DominiczakMH,eds.Handbookoflipopr testing.Washington:AACCPress,1997:25-4820.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第PAGE2969頁血清甘油三酯酶試劑法測定法主題內(nèi)容血清甘油三酯酶試劑法測定法實驗原理脂蛋白酯酶（LPL、甘油激酶（GK、甘油-3-磷酸氧化酶（GPO、過氧化物酶(POD)、Trinder反應(yīng)偶聯(lián)比色終點法。反應(yīng)式如下：LPL甘油三酯+HO 甘油+脂肪酸2GK甘油+ ATP 甘油-3-磷酸+ GPO甘油-3-磷酸+O 二羥丙酮磷酸+HO2 2 2POD2HO+4-氨基安替比林+4-氯酚 醌亞胺+HCl+4H O2 2 2標(biāo)本：病人準(zhǔn)備：12小時禁食。類型：血清，肝素或EDTA抗凝血漿。標(biāo)本存放：血清穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定24～8℃保存可穩(wěn)定1-20存至少可穩(wěn)定1年。標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的標(biāo)本。實驗材料試劑英科新創(chuàng)甘油三脂試劑盒（試劑440ml）試劑組成Good’s緩沖液pH7.2100mmol/L4-氯酚0.5mmol/LATP 2mmol/L鎂離子 15mmol/L4-氨基安替比林 0.5mmol/L甘油激酶（GK） ≥0.5KU過氧化物酶（POD） ≥30KU脂蛋白酯酶（LPL） ≥10KU甘油-3-磷酸氧化酶（GPO） ≥1KU試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。注意事項：試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑?？梢耘c金屬反應(yīng)，處理時大量清水沖洗。校準(zhǔn)品：使用英科新創(chuàng)公司提供的RANDOX校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟：參見TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每周定期定值血清質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以RANDOX復(fù)合校準(zhǔn)品甘油三脂校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果。參考值范圍（mmol/L）合適范圍： 0.4-1.86mmol/L高度危險臨界值： 2.3～4.5mmol/L高度危險范圍： >4.5mmol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。臨床意義：甘油三酯是甘油與3個脂肪酸形成的酯，是天然脂肪中含量最多的。在血液中，甘油三酯和載脂蛋白結(jié)合形成極低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒，運(yùn)送到全身。甘油三酯的檢測用于對脂肪狀態(tài)的過篩，以檢出致動脈粥樣硬化的危險；監(jiān)視降脂治療的效果。近期的研究說明，甘油三酯的增高同時伴有低密度脂蛋白（LDL）的升高，特別對發(fā)生冠心?。–HD）具有高度危險。甘油三酯的升高也和肝、腎以及胰腺疾病有關(guān)。>2mmol/L（HDL-C）<1.0mmol/L（CHD）（>2.3mmol/L）的臨床應(yīng)用需結(jié)合CHD的其他危險因子。操作性能線性范圍：≤11.7mmol/L精密度：批內(nèi)變異系數(shù)：＜5%10%靈敏度：本試劑的檢測限為0.03mol/L。病人結(jié)果可報告范圍：0.01～11.7mol/L。超出范圍結(jié)果處理：本法對甘油三酯的檢測范圍為0.01～11.7mmol/L 樣品測定值過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+4稀釋，重新測定，結(jié)果乘以5。病危報警值的處理：當(dāng)甘油三脂測定值>4.5mmol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。方法局限性本法對甘油三酯的檢測范圍為0.01～11.7mmol/L樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+4稀釋，重新測定，結(jié)果乘以5干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中膽紅素濃度684mol/L時沒有觀察到干擾。當(dāng)抗壞血酸濃度341mol/L、血紅蛋白濃度2.50g/L時有干擾。補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)RifaiN,BachorikPS,AlbersJJ.Lipids,lipoproteinsandapolipoproteins.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rdPhiladelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.809-61.ColeTG,KlotzschSG,McNamaraJ.Measurementof triglycerideconcentration.In:RifaiN,Warnick GR,Dominiczak MH,eds.Handbook oflipoprotein Washington:AACCPress,1997.p.115-26.RecommendationoftheSecondJointTaskForceofEuropeanandotherSocietiesonCoronaryPrevention.Preventionofcoronaryheartdiseaseinclinicalpractice.EurHeartJ1998;19:1434-503.20.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第33頁共69頁血清高密度脂蛋白膽固醇測定法主題內(nèi)容血清高密度脂蛋白膽固醇免疫抑制酶試劑測定法實驗原理以往高密度脂蛋白膽固醇的測定采用沉淀法3。本試劑盒采用第三代均相法，不必離心步驟即可檢測高密度脂蛋白膽固醇。使用抗人脂蛋白抗體與低密度脂蛋白(LDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒形成抗原抗體復(fù)合物，只有剩下的高密度脂蛋白膽固醇可以被膽固醇酶法試劑檢測4。LDL,VLDL,乳糜微粒

抗原抗體復(fù)合物+HDL抗人-脂蛋白抗體HDL-C+H

O+O2 2

Δ4-膽甾烯酮+脂肪酸+HOCHECHO 2 2HO+F-DAOS+4-氨基安替比林2 2

藍(lán)色復(fù)合物+HOPOD 2注：F-DAOS為N-乙基-N-(2-羥基-3-丙磺基)-3,5-二甲氧基-4-氟苯胺標(biāo)本：病人準(zhǔn)備：12小時禁食。類型：血清，肝素抗凝血漿。標(biāo)本存放：穩(wěn)定性：4～6℃保存可穩(wěn)定4-20℃保存至少可穩(wěn)定2周。標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的標(biāo)本。實驗材料試劑英科新創(chuàng)HDL-C測定試劑盒（貨號：141352171701 試劑1 6×64ml＋試劑2 6×16ml）試劑組成試劑1（R1：Good’s緩沖液 pH7.0 26mmol/L4-氨基安替比林 0.60mmol/L過氧化物酶(POD) 1600U/L抗壞血酸氧化酶 1800U/L羊抗人b-脂蛋白抗體 適試劑2（R2：Good’s緩沖液pH7.026mmol/L膽固醇酯酶(CHE)800U/L膽固醇氧化酶(CHO)4000U/LF-DAOS 0.16mmol/L試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。開蓋后放于儀器的冰箱中可以穩(wěn)定30天。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。注意事項：不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。校準(zhǔn)品：使用英科新創(chuàng)公司提供的TruCalHDL/LDL 校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。TBA-40FR生化分析儀操作步驟項目基本參數(shù)：參見TBA-40FR生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟：參見TBA-40FR生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本定值血清質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。計算方法：以英科新創(chuàng)提供HDL/LDL校準(zhǔn)品HDL-C校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果。參考值范圍5：1.2-1.68mmol/L期望水平＞1.2mmol/L臨界水平0.9-1.2mmol/L治療最低水平＞0.9mmol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。臨床意義12膽固醇由體細(xì)胞合成和來自對食物的吸收1，是細(xì)胞膜的組分和類固醇激素、膽汁酸的前體。血液中的脂蛋白是脂肪和載脂蛋白的復(fù)合物，由它轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇。脂蛋白有四種形式：高密度脂蛋白（HDL，低密度脂蛋白（LDL，極低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒。LDL參與將膽固醇運(yùn)送至外周細(xì)胞，而HDL負(fù)責(zé)從細(xì)胞中吸收膽固醇。四種形式的脂蛋白與冠狀動脈粥樣硬化有著明確的關(guān)系。低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）于動脈內(nèi)膜形成動脈粥樣硬化斑塊，與冠心病(CHD)以及相關(guān)的死亡率有著非常密切的關(guān)系。即使總膽固醇在正常范圍內(nèi)，LDL-C濃度的升高也預(yù)示了高度危險。HDL-C具有抵御斑塊形成的作用，它與冠心病的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)。事實上，低HDL-C值是獨立的危險因子。進(jìn)行個體總膽固醇的檢測只是起過篩作用，如果要對危險作較好的評估，必須另外進(jìn)行HDL-C和LDL-C檢測。近年來，通過控制飲食、改變生活方式的治療、和/或使用各種藥物治療(特別他汀類藥物[HMGCoA還原酶抑制劑])臨床試驗，說明了降低總膽固醇和LDL-C水平可極大地減少CHD的危險。流行病學(xué)研究觀測到男性HDL-C濃度小于0.9mmol/L、女性小于1.0mmol/L，又出現(xiàn)空腹甘油三酯濃度大于2mmol/L時，預(yù)示冠心病的高度危險2。操作性能線性范圍：0.1～3.5mmol/L精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，批內(nèi)精密度小于5%總精密度小于10%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。靈敏度：本試劑的檢測限為0.04mmol/L。病人結(jié)果可報告范圍：0.1～3.5mmol/L。超出范圍結(jié)果處理：本試劑盒對高密度脂蛋白膽固醇檢測范圍為0.1～3.5mmol/L。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+23病危報警值的處理：無。方法局限性本試劑盒對高密度脂蛋白膽固醇檢測范圍限為3.5mmol/L。當(dāng)樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+2稀釋，重新測定，結(jié)果乘以3干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度2840mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度13.6mmol/L 時沒有觀察到干擾。補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。參考文獻(xiàn)RifaiN,BachorikPS,AlbersJJ.Lipids,lipoproteinsandapolipoproteins.In:BurtisCA,Ashwood ER,editors. TietzTextbook ofClinical Chemistry. 3rdPhiladelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.809-61.RecommendationoftheSecondJointTaskForceofEuropeanandotherSocietiesonCoronaryPrevention. Prevention ofcoronaryheartdiseaseinclinicalpractice.EurHeartJ1998;19:1434-503.WiebeDA,WarnickGR.Measurementofhigh -densitylipoproteincholesterol.In:Rifai N,Warnick GR,Dominiczak MH,eds.Handbook oflipoprotein Washington:AACCPress,1997:127-44.NauckM,MaerzW,WielandH.Newimmu noseparation-basehomogenousassayHDL-cholesterolcomparedwiththreehomogenousandtwoheterogeneousmethodsforHDL-cholesterol.ClinChem1998;44:1443-51.Schaefer EJ,McNamara J.Overview ofthediagnosis andtreatment ofdisorder. InRifaiN,Warnick GR,Dominiczak MH,eds.Handbook oflipoproteintesting.Washington:AACCPress,1997:25-4820.其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3北票計生站檢驗室生化室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：BPJSZ-3-SH版本修訂號：A/3第PAGE3769頁血清低密度脂蛋白膽固醇測定法主題內(nèi)容血清低密度脂蛋白膽固醇化學(xué)選擇性抑制酶測定法實驗原理以往LDL-C的測定通常用總膽固醇、HDL-C和甘油三酯的檢測結(jié)果進(jìn)行綜合，經(jīng)Friedwald公式計算而得3。本LDL-C試劑盒為均相方法，省卻離心步驟直接檢測LDL-C。在反應(yīng)第一步，LDL被選擇性保護(hù)，而非LDL脂蛋白被酶處理。第二步中，LDL被釋放，由膽固醇酶法顯色反應(yīng)選擇性地測定出LDL-CLDL＋試劑1 LDL被保護(hù)CHE&CHOHDL,VLDL,乳糜微粒 膽甾烯酮＋H2O2PODH2O2 H2O保護(hù)的LDL+試劑2 釋放CHE&CHO